检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2007年第7期29卷 555-560,568页

作者：张桂荣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春谭亚娣华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉市蔬菜科学研究所湖北武汉430065

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种... 详细信息

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。

关键词：牛分枝杆菌 ELISA CFP10-ESAT-6 MPB83 MPB70 结核检疫

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人外周血CD4^+T细胞F-actin的超分辨SIM成像

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华中农业大学学报 2016年第1期35卷 120-125页

作者：任敏张先恩崔宗强张吉斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院武汉病毒研究所武汉430070

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续... 详细信息

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续观察。结果表明,CD4+T细胞F-actin分布在细胞膜周围,处于解聚和聚合的动态平衡状态,与普通荧光显微镜相比,超分辩SIM成像F-actin结构更加清晰,分辨率提高2~4倍。

关键词： CD4+T细胞人外周血 F-actin 超分辨 SIM成像

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基于质构量化分析的净水菌胶囊制备及其性能研究

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2015年第6期41卷 712-722页

作者：王青松柳永王新孙宏姚晓红吴逸飞汤江武葛向阳华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所杭州310021

为提高净水菌剂的应用性能,通过固定化包埋处理,以实心载菌胶囊为研究模型,以质构量化分析数据为主要筛选依据,通过不同辅料配方和制作工艺对胶囊的硬度、黏聚性和弹性恢复进行比较研究,以筛选出较佳的辅料配方和加工工艺,并对较佳配方... 详细信息

为提高净水菌剂的应用性能,通过固定化包埋处理,以实心载菌胶囊为研究模型,以质构量化分析数据为主要筛选依据,通过不同辅料配方和制作工艺对胶囊的硬度、黏聚性和弹性恢复进行比较研究,以筛选出较佳的辅料配方和加工工艺,并对较佳配方的载菌胶囊进行断面形貌观察、孔隙率测定、菌剂释放率测定和氨氮模拟污水净化实验.结果表明：较佳成囊壁材配方为V （4％海藻酸钠）∶V （10％聚乙烯醇）＝1∶9,固化液配方为4％H3 BO4和4％ CaCl2混合溶液,辅料硅藻土、沸石粉和竹炭的适宜添加量分别为20％～30％、20％～80％和20％～60％；胶囊为多孔结构,单独添加硅藻土、沸石粉、竹炭或三者混合添加下,胶囊微观结构存在差异,其中硅藻土、沸石粉和竹炭经包埋后比表面积和孔容均减小,孔径变化不大；24 h内胶囊中菌剂的水体释放率较低,为1％～14％；载菌胶囊在模拟污水净化实验中,20 h后各实验组氨氮质量浓度从1 h时的39.3～44.7 m g/L降低到0.1 mg/L 以下,其中未经包埋的菌株直接投放组降低最快,其次为混合1组[ V （4％海藻酸钠）∶V （10％聚乙烯醇）＝1∶9,海藻酸钠和聚乙烯醇总体积10mL＋硅藻土1.5g＋沸石粉0.5g＋竹炭0.5g＋菌悬液2 mL ]和竹炭组,同时,总氮也出现不同程度的降低.总之,该研究采用的质构量化分析方法为净水菌固定化载体研究提供了可靠的数据支撑,研究获得的优化胶囊体系在质构和净水能力方面均表现出良好的性能,在环境污染水体微生物净化治理方面具有较大的应用潜力.

关键词：载菌胶囊质构量化分析内部结构混合比例氨氮降解

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拟康宁木霉T-51菌株发酵液对灰葡萄孢的抑菌活性

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植物保护 2021年第1期47卷 74-78,83页

作者：尤佳琪李国庆上海市农业科学院园艺研究所上海201106 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

拟康宁木霉菌株T-51是从土壤中分离得到的一株优秀生防菌株,在前期的研究与应用中表现出对番茄灰霉病的良好防效。本文研究了T-51菌株的PDB发酵液对灰葡萄孢的抑菌活性,结果表明T-51发酵液在0.5%的低浓度下的抑菌率达到52.1%,与高浓度(1... 详细信息

拟康宁木霉菌株T-51是从土壤中分离得到的一株优秀生防菌株,在前期的研究与应用中表现出对番茄灰霉病的良好防效。本文研究了T-51菌株的PDB发酵液对灰葡萄孢的抑菌活性,结果表明T-51发酵液在0.5%的低浓度下的抑菌率达到52.1%,与高浓度(10%)发酵液的抑菌率(59.7%)没有显著差异。当发酵液浓度下降为0.05%时失去抑菌活性。T-51摇培至第5天时的发酵液的抑菌活性稳定。T-51发酵液中的抑菌物质对高温不敏感,沸水浴处理10 min后抑菌活性没有明显降低。T-51发酵液pH为3.3,呈酸性,当调节pH至7时,发酵液抑菌活性从57.89%下降到46.61%。T-51发酵液能够显著抑制灰葡萄孢侵染番茄叶片后产生的病斑大小,接种后叶片病斑直径比对照减小53.9%。

关键词：拟康宁木霉T-51 灰葡萄孢生物防治抗真菌活性

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纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备及表征

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分析科学学报 2008年第3期24卷 254-258页

作者：胡德红马玉琴董飞韩鹤友华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用还原法制备了尺寸大小分别为4、14、30、41 nm的纳米金,优化了不同尺寸的纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备条件.采用紫外-可见吸收光谱、透射电子显微镜和化学发光的方法对该探针进行了表征.结果表明纳米金兔抗猪IgG化学发光探针... 详细信息

采用还原法制备了尺寸大小分别为4、14、30、41 nm的纳米金,优化了不同尺寸的纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备条件.采用紫外-可见吸收光谱、透射电子显微镜和化学发光的方法对该探针进行了表征.结果表明纳米金兔抗猪IgG化学发光探针具有很好的单分散性和稳定性.本研究为纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的应用奠定了基础.

关键词：纳米金兔抗猪IgG 化学发光探针制备表征

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厦门近海海水中多环芳烃降解菌的原位富集与降解菌多样性

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微生物学报 2010年第10期50卷 1392-1398页

作者：陈亮董纯明何进邵宗泽华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005

【目的】为了分析厦门近海原位海水中多环芳烃降解菌的多样性。【方法】将涂有菲的聚氯乙烯(PVC)板悬挂在厦门国际邮轮码头的海水中,进行菲降解菌的原位富集。利用变性梯度凝胶电泳(Denaturinggradient gel electrophoresis,DGGE)和16S ... 详细信息

【目的】为了分析厦门近海原位海水中多环芳烃降解菌的多样性。【方法】将涂有菲的聚氯乙烯(PVC)板悬挂在厦门国际邮轮码头的海水中,进行菲降解菌的原位富集。利用变性梯度凝胶电泳(Denaturinggradient gel electrophoresis,DGGE)和16S rRNA基因文库两种方法分析了在PVC板表面富集微生物的菌群结构。之后,在实验室模拟原位条件下,对PVC板表面富集的菲降解菌群进行进一步富集、分离和初步鉴定。【结果】PVC板在海水中浸没6 d后,16S rRNA基因文库分析表明,在涂菲的PVC板表面富集的菌群中解环菌属(Cycloclasticus)对应的克隆子占文库总克隆子的50%;在未涂菲的PVC板表面吸附的菌群中红杆菌科(Rhodobacteraceae)为优势菌,其对应的克隆子占文库总克隆子的47%;而解环菌属的克隆子只占文库总克隆子的2%。DGGE的分析结果也证明解环菌是菲原位富集降解菌群中的优势菌。实验室进一步富集后,从该菌群中分离鉴定出14株细菌,其中一株新鞘氨醇杆菌B14(Novosphingobium sp.B14)具有菲降解能力。但是,解环菌未能获得纯培养。【结论】菲原位富集发现,厦门近海水体中解环菌是多环芳烃的主要降解菌。

关键词：厦门近海多环芳烃解环菌生物降解原位富集

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缓释碳源与净水菌胶囊组合脱氮净水性能研究

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浙江农业学报 2017年第4期29卷 651-659页

作者：闫秋月柳永王新孙宏姚晓红吴逸飞汤江武葛向阳华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021

在低碳氮比污水治理中,人工投加碳源和菌剂是必要手段,为此,特开展缓释碳源与净水菌胶囊的组合净水性能研究。试验用缓释碳源为乙酸钠包埋物,采用扫描电子显微镜观察释放前后形貌,并用高效液相色谱法进行检测。净水菌胶囊为包含施氏假... 详细信息

在低碳氮比污水治理中,人工投加碳源和菌剂是必要手段,为此,特开展缓释碳源与净水菌胶囊的组合净水性能研究。试验用缓释碳源为乙酸钠包埋物,采用扫描电子显微镜观察释放前后形貌,并用高效液相色谱法进行检测。净水菌胶囊为包含施氏假单胞菌ADH1、肠杆菌AOZ1与枯草芽孢杆菌BSK9包埋物的Wcapsule和B-capsule。试验水源为河道污水,在水桶中间歇曝气条件下开展试验。以无投加污水为对照,比较直投速溶碳源、直投未包埋菌剂、单独投加缓释碳源、单独投加净水菌胶囊以及组合投加缓释碳源和净水菌胶囊各试验组水体氨氮、总氮、COD等指标变化。结果表明,缓释碳源释放乙酸钠后内部结构变疏松,形成大量刨花样卷曲片层结构。净水试验中:投加缓释碳源组总氮的去除率达到60.2%,且试验过程中COD始终低于20 mg·L^(-1);投加固定化菌剂W-capsule组总氮去除率达39.1%;组合投加缓释碳源和净水菌胶囊组总氮去除率可达85.2%。可见,缓释碳源与净水菌胶囊组合在河道污水脱氮上表现出较高性能,应用潜力巨大。

关键词：乙酸钠生物脱氮反硝化菌氨氧化菌

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杆状病毒介导RNAi抑制棉铃虫细胞色素P450 CYP9A14基因的转录

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 450-456页

作者：陈爱华孙修炼赵秀云华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院武汉病毒研究所/农业与环境微生物学重点实验室武汉430071

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重... 详细信息

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重复片段以双链RNA干扰(double-stranded RNA interference,dsRNAi)的方法重组到棉铃虫核型多角体病毒(helicoverpa nuclear polyhedrosis virus,HaNPV)中,结果表明以该重组病毒注射氯氰菊酯抗性棉铃虫体内后,幼虫中肠CYP9A14基因的转录水平显著下降。

关键词：棉铃虫杆状病毒基因转录抗药性

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动物寄生线虫遗传多样性的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第5期33卷 387-392页

作者：殷方媛李法财赵俊龙胡敏华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物医学院武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

动物寄生线虫分子遗传标记的发展对兽医寄生虫学中的基础和应用研究领域有着重要意义。通过对线虫种群遗传多样性的研究,不仅能够为抗药性等位基因的扩散提供理论依据,而且对线虫病防治策略的制定具有指导作用。因此,本文就分子遗传标记... 详细信息

动物寄生线虫分子遗传标记的发展对兽医寄生虫学中的基础和应用研究领域有着重要意义。通过对线虫种群遗传多样性的研究,不仅能够为抗药性等位基因的扩散提供理论依据,而且对线虫病防治策略的制定具有指导作用。因此,本文就分子遗传标记(RFLP、RAPD、PCR-SSCP、AFLP、SSR和线粒体DNA)在寄生线虫遗传多样性研究中的应用进行综述。

关键词：动物寄生线虫遗传多样性分子遗传标记

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蚊虫乙酰胆碱酯酶的真核表达、纯化及活性测定

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 423-427页

作者：谭烽兰文升崔峰乔传令陈雯莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室北京100101

利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯... 详细信息

利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶。参照Ellman法对酶的活性进行测定,结果显示纯酶的活力为2.219×10-4 mol/(min.g)。

关键词：有机磷农药乙酰胆碱酯酶昆虫杆状病毒表达系统纯化酶生物传感器

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