检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：圣平张宏宇华中农业大学植科院城市与园艺昆虫学研究所农业微生物学国家重点实验室430070

纤维素酶及半纤维素酶在多种工业领域具有重要的应用价值.暗黑鳃金龟幼虫主要取食纤维素及半纤维素含量高的植物根,是研究纤维素酶及半纤维素酶的理想平台.本研究采用简并引物同源克隆的方法,以暗黑鳃金龟幼虫肠道细菌基因组DNA为模板,...

纤维素酶及半纤维素酶在多种工业领域具有重要的应用价值.暗黑鳃金龟幼虫主要取食纤维素及半纤维素含量高的植物根,是研究纤维素酶及半纤维素酶的理想平台.本研究采用简并引物同源克隆的方法,以暗黑鳃金龟幼虫肠道细菌基因组DNA为模板,分别成功扩增了170条GH8(β-1,4-内切糖苷酶),157条GH2(β-半乳糖苷酶),164条GH10(木聚糖酶),160条GH11(木聚糖酶)以及170条GH36(α-半乳糖苷酶)家族基因序列.基因多样性和丰度分析表明这五大家族的酶基因序列分别归类为27个,24个,19个,14个以及17个操作分类单位(OTU).不同家族基因多样性间存在很大的差异,其中GH8家族基因多样性及丰度均最高(chao1指数为96).此外,GH11家族木聚糖酶基因的多样性要远低于GH10家族的基因多样性,这种多样性的不同暗示这两个糖苷水解酶家族在木聚糖的降解过程中可能发挥着不同的作用.基因进化分析表明,这五大家族的酶基因序列来源于不同的微生物,GH8家族基因序列主要来源于变形菌门(Proteobacteria),GH2,GH10,GH11以及GH36家族基因序列则主要来源于拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes).进一步的序列比对分析表明10.61％的GH2家族基因序列,3.33％的GH8家族基因序列以及18.42％的GH11家族基因序列与已知酶序列的相似性在60％以下.该实验结果说明暗黑鳃金龟幼虫后肠细菌基因组中含有丰富多样的纤维素酶以及半纤维素酶基因,且部分基因序列与已知酶序列的相似性低,可能是新的酶基因.这些酶在幼虫肠道环境内纤维素,半纤维素食物降解过程中发挥着重要的作用.

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蛴螬肠道微生物分子多态性及纤维素分解

蛴螬肠道微生物分子多态性及纤维素分解

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第二届食用昆虫与微生物转化废弃物及资源化利用研讨会

作者：张宏宇黄胜威圣平武汉华中农业大学植科院城市与园艺昆虫学研究所农业微生物学国家重点实验室 430070

蛴螬是一类重要的土壤害虫,取食植物的根或腐食质,后肠膨大成发酵腔,富含细菌。本研究研究了蛴螬后肠超微结构及肠道微生物群落组成。结果表明不同发育阶段发酵腔超微结构,特别是由肠壁细菌形成的菌膜复合体存在明显变化：1龄幼虫发酵...

蛴螬是一类重要的土壤害虫,取食植物的根或腐食质,后肠膨大成发酵腔,富含细菌。本研究研究了蛴螬后肠超微结构及肠道微生物群落组成。结果表明不同发育阶段发酵腔超微结构,特别是由肠壁细菌形成的菌膜复合体存在明显变化：1龄幼虫发酵腔结构缺少内膜层,细菌数量很少,直接附着在上皮细胞细胞膜上;2龄幼虫开始出现内膜层,细菌数量增多,附着在膜上;3龄幼虫发酵腔内膜与细菌形成一种复杂的结构一菌膜复合体或发酵腔壁瘤。在透射电镜下可观察到复合体或壁瘤内有共生许多杆状细菌。后肠存在种类丰富的微生物,包括厚壁菌门Firmicutes,变形菌门细菌Proteobacteria,拟杆菌门Bacteroidetes,放线菌门Actinobacteria和梭杆菌门Fusobacteria细菌,其中厚壁菌门细菌为肠道优势菌群,特别梭菌纲Clostridia,在蛴螬肠道内稳定存在,是后肠肠道细菌的绝对优势菌群,该类群细菌与蛴螬建立了一种稳定而又紧密的联系。蛴螬后肠肠道内存在着丰富多样的有纤维素降解活性的微生物,是分离新的纤维素降解菌的理想平台。其后肠肠道纤维素降解细菌中,以假单胞菌属(Pseudomonas),根瘤菌属(Rhizobium),苍白杆菌属(Ochrobactrum),微杆菌属(Microbacterium)等类群的细菌为主。

关键词：

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同位素标记相对和绝对定量蛋白组技术研究进展

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生物技术通讯 2014年第2期25卷 295-300页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物医学院湖北武汉430070

近年来定量蛋白组学技术迅速发展,目前常用的有双向荧光差异凝胶电泳、同位素亲和标记、15N同位素标记、同位素标记相对和绝对定量和细胞培养条件下稳定同位素标记技术等。同位素标记相对和绝对定量技术以其高通量、高灵敏度、高重复性... 详细信息

近年来定量蛋白组学技术迅速发展,目前常用的有双向荧光差异凝胶电泳、同位素亲和标记、15N同位素标记、同位素标记相对和绝对定量和细胞培养条件下稳定同位素标记技术等。同位素标记相对和绝对定量技术以其高通量、高灵敏度、高重复性、高动态检测限和能对各种复杂样品进行相对和绝对定量研究等优势而备受研究者青睐,目前已发展到在同一实验中分析8组样品,增加了实验设计的灵活性。我们就同位素标记相对和绝对定量技术在定量蛋白组史中的地位作用、研究策略,以及在病毒致病机制研究和医药临床相关问题中的应用做简要综述。

关键词：定量蛋白质组学同位素标记相对和绝对定量病毒临床应用

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海洋细菌Bacillus mojavensis 1A00437 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及功能研究

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化学与生物工程 2014年第9期31卷 29-35页

作者：左怀雨王茂淋邵宗泽李光玉徐柳喻子牛张吉斌华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心湖北武汉430070 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

Bacillus mojavensis 1A00437是分离自太平洋的一株芽胞杆菌,成功克隆了该菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因并在原核系统获得高效表达。测序结果表明,该基因的ORF全长681bp,编码一条226个氨基酸的蛋白,蛋白大小25.3kDa。该酶的最适pH值及最... 详细信息

Bacillus mojavensis 1A00437是分离自太平洋的一株芽胞杆菌,成功克隆了该菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因并在原核系统获得高效表达。测序结果表明,该基因的ORF全长681bp,编码一条226个氨基酸的蛋白,蛋白大小25.3kDa。该酶的最适pH值及最适反应温度分别为6.5、60℃。研究表明,1mmol·L-1 Ca2+、Mn2+可显著抑制该重组酶活性,该重组酶对稻瘟病菌无抗性,但对小麦纹枯病菌及水稻纹枯病菌具有明显抑制作用。饲料体外消化实验表明,该重组酶对稻糠、玉米粉具有显著降解效果。为该酶用作抗真菌剂及饲料添加剂提供了理论基础。

关键词： Bacillus mojavensis 葡聚糖酶基因克隆表达功能饲料添加剂

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猪链球菌2型毒力因子gapdh基因的克隆·表达及与Hela细胞互作蛋白的筛选

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安徽农业科学 2014年第36期42卷 12821-12824页

作者：袁芳艳谭臣雷丽贝为成刘泽文郭锐段正赢杨克礼周丹娜田永祥湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北武汉430064 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白。[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒p ET28a-gapdh。[结果]在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约41 k Da的融合蛋... 详细信息

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白。[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒p ET28a-gapdh。[结果]在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约41 k Da的融合蛋白GAPDH。Western blot试验说明GAPDH具有良好的免疫学活性。利用新西兰大白兔制备抗GAPDH蛋白的多克隆抗体。运用配体重叠技术,在He La细胞中初步找到了一个与GAPDH蛋白作用的潜在受体蛋白。[结论]为进一步研究猪链球菌2型的分子致病机理奠定基础。

关键词： 2型猪链球菌原核表达多抗制备受体

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聚γ-谷氨酸对气相色谱-质谱检测地衣芽孢杆菌胞内代谢物的影响

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分析科学学报 2013年第2期29卷 187-190页

作者：龙丹李欣冀志霞李俊辉祁高富陈守文华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学浦城绿康生物工程研究所湖北武汉430070 绿康生化股份有限公司福建浦城353400

通过添加外源聚γ-谷氨酸(γ-PGA),利用气相色谱-质谱法(GC-MS)评估了γ-PGA对地衣芽孢杆菌胞内代谢物检测的影响。结果表明:终浓度为10g/L的γ-PGA会使除谷氨酸外的氨基酸、有机酸和糖类标准品的检测峰面积明显降低;另外,终浓度为10g/... 详细信息

通过添加外源聚γ-谷氨酸(γ-PGA),利用气相色谱-质谱法(GC-MS)评估了γ-PGA对地衣芽孢杆菌胞内代谢物检测的影响。结果表明:终浓度为10g/L的γ-PGA会使除谷氨酸外的氨基酸、有机酸和糖类标准品的检测峰面积明显降低;另外,终浓度为10g/L的γ-PGA对分析地衣芽孢杆菌胞内代谢物中的谷氨酸、葡萄糖和6-磷酸葡萄糖(G6P)的影响较为显著。因此,在利用GC-MS定量分析地衣芽孢杆菌的胞内代谢物前,应将γ-PGA和细胞分离。

关键词：聚γ-谷氨酸气相色谱-质谱地衣芽孢杆菌代谢物样品预处理

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亚细胞蛋白质组研究进展

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动物医学进展 2013年第6期34卷 167-171页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴... 详细信息

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴定、分析正常生理状态和病理状态下亚细胞蛋白质组的差异表达蛋白并研究其功能,成为寻找疾病特异生物标记,揭示致病机理的有效途径之一。论文就蛋白质组学在不同亚细胞水平的应用和研究现状、面临的挑战以及未来的发展方向做一综述。

关键词：蛋白质组学亚细胞功能

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禽流感新型疫苗研究进展

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动物医学进展 2013年第2期34卷 99-103页

作者：刘志刚刘立峰陈伦勇孙青松金梅林安庆师范学院生命科学院安徽安庆246011 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖南武汉430070 吉林大学人兽共患病研究所吉林长春130012

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的多种禽类及鸟类表现为轻度呼吸道症状或急性败血症为特征的传染病。该病不仅对我国禽类养殖业造成巨大的经济损失,而且还具有重要的公共卫生学意义。目前用于控制禽流感的最有效手段仍然是疫苗接种,论... 详细信息

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的多种禽类及鸟类表现为轻度呼吸道症状或急性败血症为特征的传染病。该病不仅对我国禽类养殖业造成巨大的经济损失,而且还具有重要的公共卫生学意义。目前用于控制禽流感的最有效手段仍然是疫苗接种,论文就有关禽流感预防的重组活载体疫苗、基因工程亚单位疫苗、DNA疫苗、禽流感表位疫苗等新型疫苗进行简要综述,旨在为禽流感的防控提供参考。

关键词：禽流感新型疫苗研究进展

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羊传染病脓疱研究展望

羊传染病脓疱研究展望

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第十届（2013）中国羊业发展大会

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

羊传染性脓疱是全球范围内影响绵羊和山羊产业最常见的病毒性疾病之一。该病病原是羊口疮病毒,由于其能导致人畜共患以及越来越多的新物种受到该病影响,近年来受到人们广泛关注。在病毒基因组中已发现与宿主细胞因子及其拮抗分子同源的... 详细信息

羊传染性脓疱是全球范围内影响绵羊和山羊产业最常见的病毒性疾病之一。该病病原是羊口疮病毒,由于其能导致人畜共患以及越来越多的新物种受到该病影响,近年来受到人们广泛关注。在病毒基因组中已发现与宿主细胞因子及其拮抗分子同源的基因,这些基因与病毒的毒力有关。该病临床发病特征明显,但也有一些感染病例与其他病原感染引起的临床表现相混淆。目前依靠电镜、组织学诊断和PCR技术联合诊断是确诊该病最准确的实验室方法。本文就病毒与宿主问作用,分子生物学、流行病学、人兽共患临床症状、诊断方法以及该病对经济环境的影响做一综述。

关键词：羊传染性脓疱致病机制诊断治疗

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绵羊肺腺瘤内、外源性env基因比较分析

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中国动物传染病学报 2013年第3期21卷 18-26页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

绵羊肺腺瘤(Ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是由绵羊肺腺瘤反转录病毒(Jaagsiekte retrovirus,JSRV)感染引起的成年绵羊的一种慢性、进行性、接触传染性肺脏疾病。env是JSRV的主要毒力基因之一,而在正常羊的基因组中也存在着JSRV... 详细信息

绵羊肺腺瘤(Ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是由绵羊肺腺瘤反转录病毒(Jaagsiekte retrovirus,JSRV)感染引起的成年绵羊的一种慢性、进行性、接触传染性肺脏疾病。env是JSRV的主要毒力基因之一,而在正常羊的基因组中也存在着JSRV的内源性基因片段。为比较分析JSRV内、外源性env的特征,本文扩增并测定了正常绵羊肺组织的内源性env基因(Enenv),运用生物信息学技术,比较分析了其与外源性绵羊肺腺瘤病毒JSRV21(AF105220)env基因(Exenv)的遗传进化关系,二、三级蛋白结构和抗原表位。结果表明Enenv和Exenv核苷酸同源性为88.1%,推导的氨基酸同源性为92.0%,两者的主要差异位于TM区和YXXM基序。本结果为进一步研究JSRVenv基因功能提供了新线索。

关键词：绵羊肺腺瘤 env基因序列分析结构预测

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