检索结果-内蒙古大学图书馆

植物保护学报 2024年第2期51卷 302-313页

作者：刘勇张宇宇付艳苹谢甲涛姜道宏程家森华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070

为探究自噬在核盘菌Sclerotinia sclerotiorum致病过程中的作用,利用酵母Saccharomyces自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)编码的蛋白序列比对核盘菌基因组,获得核盘菌假定ATG,并以核盘菌1980菌株为出发菌株,基于同源重组的原理... 详细信息

为探究自噬在核盘菌Sclerotinia sclerotiorum致病过程中的作用,利用酵母Saccharomyces自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)编码的蛋白序列比对核盘菌基因组,获得核盘菌假定ATG,并以核盘菌1980菌株为出发菌株,基于同源重组的原理对假定ATG进行敲除和回补,并测定不同突变体的生长表型和致病能力。结果表明,从核盘菌基因组中比对到2个ATG,分别命名为SsATG5和SsATG8,两者在核盘菌致病过程中均上调表达。SsATG5和SsATG8敲除突变体在菌丝生长、产草酸和侵染垫形成方面与野生型菌株无明显差异,但SsATG5敲除突变体在离体拟南芥Arabidopsis thaliana叶片上的致病力显著下降了约40%,在活体拟南芥植株上的致病力显著下降了约80%,同时SsATG5回补突变体恢复了正常的致病力。表明SsATG5参与了核盘菌的致病过程,证实自噬在核盘菌致病过程中发挥着重要作用。

关键词：核盘菌 SsATG5 SsATG8 自噬致病力侵染垫

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盾壳霉对油菜长效专用配方肥料的敏感性评价

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中国生物防治学报 2020年第3期36卷 465-471页

作者：刘小凡谢甲涛付艳苹姜道宏程家森华中农业大学植物科学与技术学院/微生物学国家重点实验室/湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070

油菜菌核病是油菜生产中的重要病害,盾壳霉是核盘菌的重寄生真菌,在菌核病防治方面具有重要的生防潜力。为了明确盾壳霉与油菜长效专用配方肥料混合施用的可行性,本文研究了盾壳霉对油菜长效专用配方肥的敏感性。结果发现,低浓度的油菜... 详细信息

油菜菌核病是油菜生产中的重要病害,盾壳霉是核盘菌的重寄生真菌,在菌核病防治方面具有重要的生防潜力。为了明确盾壳霉与油菜长效专用配方肥料混合施用的可行性,本文研究了盾壳霉对油菜长效专用配方肥的敏感性。结果发现,低浓度的油菜长效专用配方肥(1.5和7.5 mg/mL)对盾壳霉菌丝生长、菌落及菌丝尖端形态和分生孢子萌发等无明显影响,高浓度的油菜长效专用配方肥对盾壳霉生长和孢子萌发有一定影响,在饱和浓度(560 mg/mL)条件下的油菜长效专用配方肥,24 h盾壳霉孢子的萌发率为0.83%,然而在96 h时萌发率可达到95%;油菜长效专用配方肥对盾壳霉产孢和寄生致腐菌核的能力无明显影响,寄生菌核30 d后,致腐指数均在50以上。研究结果表明,在田间生产中,盾壳霉可以与油菜长效专用配方肥料混合施用,达到轻简化栽培的目的。

关键词：盾壳霉核盘菌油菜菌核病油菜长效专用配方肥料敏感性

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柑橘衰退病毒CP与寄主互作蛋白的筛选及验证

柑橘衰退病毒CP与寄主互作蛋白的筛选及验证

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：张永乐杨作坤王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是长线性病毒科(Closteroviridae)长线性病毒属(Closterovirus)成员,所编码的外壳蛋白(coat protein,CP)在该病毒侵染中具有多重功能,参与病毒粒子组装且抑制细胞间RNA沉默效应。本研究以CTV侵... 详细信息

柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是长线性病毒科(Closteroviridae)长线性病毒属(Closterovirus)成员,所编码的外壳蛋白(coat protein,CP)在该病毒侵染中具有多重功能,参与病毒粒子组装且抑制细胞间RNA沉默效应。本研究以CTV侵染的墨西哥莱檬植株为材料,采用免疫共沉淀联合质谱分析(CoIP/MS)的方法,对与CTV的CP互作的柑橘蛋白进行了筛选,鉴定到与CP共沉淀的柑橘蛋白25个,同时鉴定出CTV自身编码的3个蛋白。KEGG通路分析发现,这些柑橘蛋白主要注释到代谢和光合作用相关通路,少数蛋白注释到蛋白质加工、三羧酸循环和植物一病原互作等通路。蛋白质互作网络分析发现,多数鉴定到的柑橘蛋白之间存在关联,互作网络的中心节点蛋白多与光合作用相关。从中选取了柑橘α-微管蛋白CsTUA进行下一步验证,从柑橘中克隆到该基因,经过双分子荧光互补和酵母双杂交试验确认CsTUA与CP之间存在互作。亚细胞定位分析发现,CP定位于细胞核、细胞质和胞间连丝,CsTUA与微管标记物MAP-mCherry共定位于细胞的微管丝;而当CP与CsTUA共注射表达时,CsTUA与CP在细胞质和微管丝存在共定位。进一步通过双分子荧光互补分析发现CP和CsTUA均可以与自噬途径核心蛋白CsATG6互作,亚细胞定位分析发现CsATG6定位于细胞质中,当CP与CsATG6共注射表达时,CP被CsATG6招募至其在细胞质中的点状结构中。qRT-PCR检测CTV侵染后的本氏烟叶片发现,在接种叶和上部叶片中自噬相关基因NbPI3K、NbATG5、NbATG6、NbATG8f和NbATG9均显著上调表达,推测CTV侵染会诱导植物自噬途径,但其具体机制和作用仍需进一步研究。另外,其他筛选到的潜在互作蛋白有待进一步验证,该研究可为了解CTV CP与寄主蛋白之间的互作机制打下一定基础。

关键词：柑橘衰退病毒细胞质互作蛋白

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苹果茎痘病毒编码的TGBp及CP蛋白互作和亚细胞定位分析

苹果茎痘病毒编码的TGBp及CP蛋白互作和亚细胞定位分析

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中国植物病理学会2019年学术年会

作者：李柳王国平洪霓华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是一种正义单链RNA病毒,其基因组包含5个开放阅读框(Open reading frame,ORF),其中ORF2、ORF3和ORF4构成的三基因盒编码病毒运动蛋白(Triple gene block protein,TGBp),共同介导病毒的胞间运动及长距离运输;ORF5编码病毒的外壳蛋白(Coat protein,CP)。在编码TGBp的植物病毒中,根据TGBp在初级结构和功能上的差异,可分为大麦病毒属型(hordei-like)和马铃薯X病毒属型(potexlike)。在病毒的运动中,这两种类型之间的区别是CP是否参与病毒的胞间移动。目前对ASPV的TGBp和CP生物学功能尚缺乏研究,根据ASPV的TGBp的二级结构及分类地位,将该病毒归为potex-like型。本研究对ASPV分离物HB-HN6的TGBp和CP的亚细胞定位特点及蛋白间互作特点进行了研究。采用酵母双杂交核系统对ASPV分离物HB-HN6的3个TGBp及CP蛋白间互作进行了分析,结果显示TGBp1和CP有较强的自身互作,CP可与3个TGBp蛋白发生互作,TGBp1与TGBp3存在互作。该结果表明CP可能通过与3个TGBp互作而形成复合体,并在病毒的运动中行使功能。进一步通过农杆菌浸润接种本氏烟(Nicotiana benthamiana),在激光共聚焦显微镜下观察这些蛋白的亚细胞定位特点,发现该病毒的TGBp1在细胞膜及类似内质网处有明显的定位信号,该亚细胞定位特点与已报道的potex-like型病毒竹花叶病毒(Bamboo mosaic virus,BaMV)和马铃薯X病毒(Potato rirus X,PVX)的TGBp1的定位不同,这两种病毒的TGBp1主要定位在胞质与胞核;TGBp2定位于内质网,而TGBp3主要定位于周质内质网,偶有定位于核膜,该定位特点与BaMV与PVX的TGBp2和TGBp3的亚细胞定位相似;CP定位于核质和细胞膜。研究结果为进一步阐明这些蛋白在ASPV侵染及移动中的功能提供了参考信息。

关键词：苹果茎痘病毒运动蛋白外壳蛋白蛋白互作亚细胞定位

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核盘菌致病机理研究进展

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生物技术通报 2018年第4期34卷 9-15页

作者：羊国根程家森安徽农业大学植物保护学院合肥230036 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070

菌核病(Sclerotinia stem rot,SSR)是我国油料作物生产中主要病害之一,严重制约长江中下游地区油菜主产区的产业发展。菌核病的病原是子囊菌门的核盘菌,是一种世界性分布的重要植物病原真菌。其寄主范围广泛,引起的菌核病对多种作物的... 详细信息

菌核病(Sclerotinia stem rot,SSR)是我国油料作物生产中主要病害之一,严重制约长江中下游地区油菜主产区的产业发展。菌核病的病原是子囊菌门的核盘菌,是一种世界性分布的重要植物病原真菌。其寄主范围广泛,引起的菌核病对多种作物的产量和品质造成重要影响。核盘菌作为典型的死体营养型病原真菌,侵染寄主植物时通过直接杀死细胞和破坏组织攫取生长所需的营养物质。核盘菌的致病机理相对复杂,前期研究主要集中在其分泌的水解酶类(角质酶、细胞壁降解酶和蛋白酶等)和草酸在核盘菌侵染寄主植物中的作用。近些年来,越来越多的研究证实了分泌蛋白在核盘菌的致病过程中同样发挥着重要作用。分泌蛋白(效应蛋白)主要通过诱导植物细胞死亡或抑制寄主细胞的免疫反应,促进核盘菌的侵染和定殖。综述了水解酶类、草酸和分泌蛋白等在核盘菌致病机制中的作用,并对核盘菌致病机理研究进行了展望,以期为菌核病的安全防控提供理论参考。

关键词：核盘菌致病机理分泌蛋白水解酶草酸

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的遗传多样性

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华中农业大学学报 2018年第5期37卷 32-39页

作者：张蕊于琳李国庆张静华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8%。多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47~0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.000 0、有效等位基因数(Ne)的均值为1.357 7、Nei’s基因多样性指数(H)的均值为0.227 5,Shannon信息指数(I)的均值为0.363 1。UPGMA聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55~1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群。分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关。

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrys ricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrysricini的遗传多样性

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华中师范大学学报（自然科学版） 2018年第5期37卷 32-39页

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8％.多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47～0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.0000、有效等位基因数(Ne)的均值为1.3577、Nei's基因多样性指数(H)的均值为0.2275,Shannon信息指数(I)的均值为***聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55～1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群.分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关.

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrysricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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猕猴桃枝枯病病原的初步鉴定

猕猴桃枝枯病病原的初步鉴定

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学...

作者：郭雅双杜亚敏宣佩雪洪霓王国平华中农业大学植物科技学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学/农业微生物学国家重点实验室

枝枯病是我国猕猴桃产区近年普遍发生的一种新的真菌性病害,主要危害枝干,前期在剪锯口和枝芽周围产生环形或不规则形的红褐色或黑色病斑,后期病斑延枝干扩展且深达木质部,造成枝条干枯,发病严重时整株枯死,对我国猕猴桃产业具潜在的严... 详细信息

枝枯病是我国猕猴桃产区近年普遍发生的一种新的真菌性病害,主要危害枝干,前期在剪锯口和枝芽周围产生环形或不规则形的红褐色或黑色病斑,后期病斑延枝干扩展且深达木质部,造成枝条干枯,发病严重时整株枯死,对我国猕猴桃产业具潜在的严重威胁。为明确我国猕猴桃产区枝枯病的病原菌种类及其发生规律,为防治该病提供理论依据,我们对湖北和安徽猕猴桃产区进行了枝枯病发生危害调查,采集枝干病样并进行病原菌分离鉴定,目前已获得74株间座壳属（Diaporthe）/拟茎点霉属（Phomopsis）真菌,对其进行形态学特征观察和rDNA-ITS序列分析,共鉴定到5个种,包括Diaporthe eres、Phomopsis fukushii、***、***和***,其中分离出的***菌株最多。菌落形态和致病力观测结果显示,5种间座壳菌的菌落生长初期形态相似,后期***则产生明显的褐色色素。在大麦粒培养基上***、***、***均可诱导产生两种类型的分生孢子,α型分生孢子纺锤形,具有2个油球,大小为（2.85～4.92）μm×（0.83～1.74）μm;β型分生孢子线状或一端呈弯钩状,大小为（6.94～14.52）μm×（0.61～1.29）μm。采用菌丝块在猕猴桃的离体枝条和果实进行接种的结果显示,在枝条上***和***的致病力较强,而在果实上仅***和***致病。进一步研究发现这5种间座壳菌在梨枝条上也可致病,其中***的致病力最强,***的致病力最弱。这些研究结果为进一步明确鉴定我国猕猴桃枝枯病的病原菌种类、分子特征及生物学特性、病原菌的致病性及寄主范围与寄主选择性,奠定了研究基础。

关键词：猕猴桃纹枯病病原菌分离鉴定

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3个梨品种的带病毒与无病毒梨离体植株的生根及移栽成活率比较

3个梨品种的带病毒与无病毒梨离体植株的生根及移栽成活率比较

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：高晓雯王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

苹果茎沟病毒(Apple stemgrooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是侵染我国栽培梨的两种重要病毒,主要通过带病毒繁殖材料调运和嫁接等方式传播。目前防治梨病毒病害的有效方式是培育和栽培无病毒梨苗,茎...

苹果茎沟病毒(Apple stemgrooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是侵染我国栽培梨的两种重要病毒,主要通过带病毒繁殖材料调运和嫁接等方式传播。目前防治梨病毒病害的有效方式是培育和栽培无病毒梨苗,茎尖培养是获得无毒梨种质资源的重要方法之一,而提高梨离体植株的生根效率以及移栽成活率是加快离体植株的应用和快速繁育无病毒种苗的一个重要环节。已有研究表明,不同遗传背景的梨离体植株茎尖培养及生根存在较大差异,同时病毒侵染影响梨离体植株的诱导生根。为明确病毒侵染对不同种质梨的生根影响,本研究分别以ASGV单一侵染及ASGV和ASPV两种病毒复合侵染的西洋梨(Pyrus communis L.)两个品种‘红茄梨’和‘巴梨’以及单一携带有ASGV的新疆(Pyrus sinkiangensis Yü.)‘色尔克甫’的离体植株为研究材料,以这3个梨品种的无病毒离体植株为对照,将带病毒与无病毒离体植株同时置于MS生根培养基培养,于培养5～40d每5d测量一次生根数量、根长及愈伤直径。研究结果表明,病毒对不同品种的梨离体植株生根效率的影响存在较大差异,其中新疆梨‘色尔克甫’的携带有ASGV植株与无病毒植株的生根率和根长有显著差异,生根诱导7d时,两者均形成愈伤组织;至15d时,66%无病毒植株形成幼根,而带病毒植株的生根率仅33%;生根诱导30d时,无病毒植株生根数量和根长均明显高于带病毒植株。ASGV单一侵染及ASGV和ASPV两种病毒复合侵染对西洋梨的两个品种‘巴梨’和‘红茄梨’的生根率、根数、根长和愈伤形成无明显影响。对健壮的梨生根离体植株进行移栽,并在移栽前对植株进行炼苗处理,至40d时统计这些离体植株的移栽成活率,发现‘红茄梨’的带病毒与无病毒离体植株移栽成活率并无显著差异,而新疆梨‘色尔克甫’的无病毒离体植株的移栽成活率为带病毒离体植株的近3倍。这些结果表明,病毒侵染对西洋梨红茄梨’和‘巴梨’及新疆梨‘色尔克甫’具有不同的影响,其中新疆梨‘色尔克甫’对ASGV侵染较敏感,ASGV不仅抑制‘色尔克甫’的诱导生根,而且影响根系发育,从而明显降低离体植株的移栽成活率。

关键词：

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链格孢菌株HBL-14中携带真菌病毒的研究

链格孢菌株HBL-14中携带真菌病毒的研究

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中国植物病理学会第十一届全国会员代表大会暨2018年学术年会

作者：杨萌萌武佳宁洪霓王国平华中农业大学植物科技学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学/农业微生物学国家重点实验室

链格孢属真菌(Alternaria spp.)以病原菌,腐生菌或者内生菌的形式存在自然界中,具有分布广泛、寄主多样等特点。本研究对来源于湖北省多个地区链格孢菌株进行了双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)的检测,发现41个菌株中仅有2个菌株(4.9%... 详细信息

链格孢属真菌(Alternaria spp.)以病原菌,腐生菌或者内生菌的形式存在自然界中,具有分布广泛、寄主多样等特点。本研究对来源于湖北省多个地区链格孢菌株进行了双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)的检测,发现41个菌株中仅有2个菌株(4.9%)携带有外源dsRNA。其中菌株HBL-14菌丝生长速率缓慢,菌落形态畸形,并且致病力减弱,为一株弱毒菌株。该菌株至少携带有7条外源dsRNA。其中大小在3.5～4.5 kbp的4条dsRNA属于一种产黄青霉病毒,该病毒为Alternaria alternate Chrysovirus 1(AaCV1)的一株新的分离物(AaCV1-HB)。将该病毒与其他相近病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的氨基酸序列进行多重比对发现存在有8个保守结构域(motif)。其中,motifⅥ是RdRp的特有保守motif。基于RdRp和CP氨基酸序列的系统发育树表明,该病毒与产黄青霉病毒科(Chrysoviridae)ClusterⅡ的成员聚在一起。AaCV1-HB可通过分生孢子进行垂直传播,后代带毒率为100%,但其不能水平传播到其他菌株。对菌株HBL-14提取病毒粒子进行电镜观测,发现有两种不同大小的球形病毒粒子。其中一种含量较多,直径约为44 nm。另一种含量较少,直径约为27 nm。将病毒粒子经过蔗糖密度梯度离心,发现病毒主要存在于45%～57.5%的蔗糖浓度中,并且这两种病毒粒子不能通过蔗糖密度梯度离心而分开。经SDS-PAGE电泳,从病毒粒子可检测到大小为40～130kDa共6个结构蛋白条带。其中P1可能是AaCV1-HB ORF1编码的RdRp,P4可能是其ORF2编码的衣壳蛋白(coat protein,CP)。

关键词：真菌病毒氨基酸序列链格孢 dsRNA HBL-14

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