检索结果-内蒙古大学图书馆

植物病理学报 2013年第6期43卷 590-595页

作者：施世明王彦芬王国平王利平徐文兴洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用已报道杆状DNA病毒属（Badnavirus）的通用检测引物BadnaFP／BadnaRP，从7份芋样品中扩增到Badnavirus病毒的RT／RNaseH基因保守区域，获得12个克隆序列，长度为576bp。序列分析结果显示，来自不同样品的克隆间核苷酸和氨基酸序列... 详细信息

采用已报道杆状DNA病毒属（Badnavirus）的通用检测引物BadnaFP／BadnaRP，从7份芋样品中扩增到Badnavirus病毒的RT／RNaseH基因保守区域，获得12个克隆序列，长度为576bp。序列分析结果显示，来自不同样品的克隆间核苷酸和氨基酸序列相似性分别为78．8％～99．5％和81．3％～99．5％；来自同一样品扩增产物的克隆间在序列上也存在较大差异，核苷酸和氨基酸序列相似性分别为89．6％～100％和92．7％～100％。在系统进化树中，本研究所获序列与Badnavirus病毒的亲缘关系相对较近，聚在同一簇，表明此病毒为Badnavirus属病毒，但与芋杆状病毒（Tarobacillifo硎virus，TaBV）序列相似性较低，核苷酸和氨基酸相似性分别为58．0％～62．2％和58．5％～64．1％，推测为杆状DNA病毒属的一个新种。根据所测定序列设计了用于该病毒检测的引物P197／P433，对51份芋样品检测结果表明，该引物可有效检测来源于我国芋的Badna—virus病毒。

关键词：芋杆状DNA病毒 PCR 序列分析

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芋花叶病毒的RT-PCR检测及外壳蛋白基因序列分析

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园艺学报 2012年第3期39卷 509-515页

作者：施世明王国平徐文兴王利平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用RT-PCR技术对采自中国湖北、浙江和山东的91份芋[Colocasia esculenta（L.）Schott]样品的芋花叶病毒（Dasheen mosaicvirus,DsMV）进行了检测,检出率为26.4%。对其中14个DsMV分离物的317bp扩增产物（为外壳蛋白基因的一部分）序列... 详细信息

采用RT-PCR技术对采自中国湖北、浙江和山东的91份芋[Colocasia esculenta（L.）Schott]样品的芋花叶病毒（Dasheen mosaicvirus,DsMV）进行了检测,检出率为26.4%。对其中14个DsMV分离物的317bp扩增产物（为外壳蛋白基因的一部分）序列分析的结果显示,各分离物内的核苷酸变异相对较低,而分离物间存在较大的分子变异,相似性为68.3%~97.8%。对来自湖北和浙江的2个DsMV分离物DsMV-SCS和DsMV-JH的外壳蛋白基因（coatproteingene,cp）进行了测序,全长分别为951bp和987bp,二者cp核苷酸和氨基酸序列相似性分别为79.0%和82.3%,与已报道DsMV的cp核苷酸和氨基酸序列相似性分别为73.0%~92.1%和74.8%~98.2%,在构建的系统发育树上聚在两个不同的簇,各DsMV分离物的系统进化关系与其寄主和地理来源无显著相关性。

关键词：芋芋花叶病毒 RT-PCR 外壳蛋白基因序列分析

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柑橘溃疡病菌抗铜相关基因copA和copB的克隆及原核表达

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植物病理学报 2011年第3期41卷 247-252页

作者：王君叶刚马燕侠王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp和1 095 bp的目标片段。构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表... 详细信息

以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp和1 095 bp的目标片段。构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表达。利用原核表达的融合蛋白免疫大耳白兔,制备了抗copA和copB原核表达蛋白的多克隆抗体。用间接ELISA法测定了所制备的多克隆抗体的效价均为1∶6 400。用所制备的抗体分别对copA和copB的原核表达产物进行Western blot分析的结果显示,在相应位置产生了较强的免疫反应条带,表明所制备抗体能特异性地与相应的抗原发生免疫反应。

关键词：抗铜基因 PCR 原核表达 Western blot 柑橘溃疡病菌

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来源于猕猴桃的柑橘叶斑驳病毒的RT-PCR检测及外壳蛋白基因序列分析

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植物病理学报 2016年第1期46卷 11-16页

作者：朱晨熹王国平郑亚洲杨作坤王利平徐文兴洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

柑橘叶斑驳病毒（Citrus leaf blotch virus，CLBV）为柑橘病毒属（Citrivirus）代表种。本研究采用RT-PCR技术从我国栽培猕猴桃上首次检测到CLBV．总检出率为13．3％。测定了5个CLBV分离物的外壳蛋白基因（coat protein gene，cp）序... 详细信息

柑橘叶斑驳病毒（Citrus leaf blotch virus，CLBV）为柑橘病毒属（Citrivirus）代表种。本研究采用RT-PCR技术从我国栽培猕猴桃上首次检测到CLBV．总检出率为13．3％。测定了5个CLBV分离物的外壳蛋白基因（coat protein gene，cp）序列，全长均为1092核苷酸（nt），分离物间印基因核苷酸和编码氨基酸序列相似性分别为83．2％～99．7％和91．9％～98．9％，这些分离物与新西兰报道的CLBV猕猴桃分离物M3．A核苷酸序列相似性仅为83％左右，与来源于柑橘及近缘种的CLBV分离物印基因核苷酸序列相似性为84％-86％。在基于该病毒印基因核苷酸序列的系统进化树中，本研究所测定的CLBV猕猴桃分离物与新西兰报道的除M3-A外的猕猴桃分离物聚在同一组群。研究结果为进一步明确CLBV在我国猕猴桃上的侵染和危害特点及建立该病毒的分子检测技术提供了重要信息。

关键词：猕猴桃柑橘叶斑驳病毒检测序列分析

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高通量测序鉴定柑橘黄化脉明病毒诱导柠檬差异表达microRNA

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植物病理学报 2018年第6期48卷 799-809页

作者：牛炳棵杨作坤王国平洪霓华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害检测与安全控制重点实验室武汉430070

柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)是我国新发生的危害柠檬的重要病毒。本研究对接种和未接种CYVCV的柠檬叶片样品进行了高通量小RNA测序,以甜橙基因组作为参考,采用生物信息学软件进行miRNA鉴定和靶基因预测... 详细信息

柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)是我国新发生的危害柠檬的重要病毒。本研究对接种和未接种CYVCV的柠檬叶片样品进行了高通量小RNA测序,以甜橙基因组作为参考,采用生物信息学软件进行miRNA鉴定和靶基因预测。结果显示CYVCV侵染对13个保守miRNA和12个新鉴定的非保守miRNA的表达具有调控作用,对这些差异表达miRNA的靶基因进行预测和功能分析的结果显示,保守miRNA的靶基因功能在植物逆境反应及光合作用和能量代谢相关通路中具有明显的富集现象,推测与CYVCV侵染柠檬植株及诱导病害症状表现有关,而多数新鉴定的非保守miRNA的靶基因功能未能注释到KEGG通路。采用实时荧光定量PCR对部分miRNA的表达水平进行了分析,结果表明miRNA的表达水平在接种CYVCV后30～90d呈时间动态变化。研究结果为进一步揭示CYVCV与柠檬互作机制提供了重要信息。

关键词：柑橘黄化脉明病毒柠檬深度测序 microRNA 表达

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梨泡状溃疡类病毒的RT-PCR检测及序列分析

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植物病理学报 2017年第4期47卷 558-562页

作者：朱慧王国平杨作坤文立红陈婕徐文兴洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

梨泡状溃疡类病毒（Pear blister canker viroid,PBCVd）为马铃薯纺锤块茎类病毒科（Pospiviroidae）苹果锈果类病毒属（Apscaviroid）成员）。该类病毒在自然条件下主要侵染野生和栽培的梨和苹果,梨和榅桲多数品种感染PBCVd后无明显症状,

关键词：泡状溃疡 RT-PCR检测类病毒序列分析分离物野生梨二级结构分子特性扩增产物克隆病毒属

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湖北地区烟草青枯菌系统发育分析

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中国烟草科学 2015年第2期36卷 81-86页

作者：刘海龙黎妍妍郑露李锡宏黄俊斌华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室武汉430070 湖北省烟草科学研究院武汉430030

本研究采用青枯菌演化型分类框架,对来源于湖北烟区的48个烟草青枯菌进行系统发育学分析并进行序列变种鉴定,以明确该地区烟草青枯菌的菌系分化。基于青枯菌内切葡聚糖酶基因(egl)和DNA蛋白修复基因(mut S)的系统发育学分析结果表明,48... 详细信息

本研究采用青枯菌演化型分类框架,对来源于湖北烟区的48个烟草青枯菌进行系统发育学分析并进行序列变种鉴定,以明确该地区烟草青枯菌的菌系分化。基于青枯菌内切葡聚糖酶基因(egl)和DNA蛋白修复基因(mut S)的系统发育学分析结果表明,48个供试菌株属于青枯菌亚洲分支(演化型Ⅰ)的3个序列变种,分别为序列变种15、17和44,未发现我国已报道的烟草青枯菌序列变种34。其中序列变种17和44为优势菌系,且均来源于恩施地区;序列变种15只包含来源于十堰地区的3个菌株。本研究表明湖北地区烟草上的青枯菌存在一定程度的遗传分化。

关键词：烟草青枯菌序列变种内切葡聚糖酶基因 DNA修复蛋白基因

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猕猴桃病毒A和B的RT-PCR检测及分子变异初步研究

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园艺学报 2015年第4期42卷 665-671页

作者：郑亚洲王国平周菊芳朱晨熹王利平徐文兴洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为明确猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,Ac VA)和猕猴桃病毒B(Actinidia virus B,Ac VB)在中国猕猴桃(Actinidia sp.)上的侵染状况和分子特性,采用RT-PCR技术对151份猕猴桃样品的Ac VA和Ac VB进行检测,检出率分别为15.2%和17.9%,所收集的... 详细信息

为明确猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,Ac VA)和猕猴桃病毒B(Actinidia virus B,Ac VB)在中国猕猴桃(Actinidia sp.)上的侵染状况和分子特性,采用RT-PCR技术对151份猕猴桃样品的Ac VA和Ac VB进行检测,检出率分别为15.2%和17.9%,所收集的6种猕猴桃样品中均检测到一种或两种病毒。发现Ac VA的ORF1、ORF4和ORF5扩增片段序列存在较大分子变异,不同分离物的269 bp片段(ORF1)核苷酸序列相似性为77.3%~99.3%。在基于各扩增片段核苷酸序列的系统进化树中,Ac VA分离物聚为2~3组。采用引物Ac VB5F/5R扩增获得20个Ac VB分离物的342 bp或338 bp的ORF5片段,核苷酸序列相似性为81%~100%,与新西兰Ac VB分离物TP7-93B相应片段的核苷酸序列相似性为83.9%~99.7%,在系统进化树中聚为3组。

关键词：猕猴桃猕猴桃病毒A 猕猴桃病毒B RT-PCR 序列分析

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十种杀菌剂对稻曲病菌无性孢子的毒力测定

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湖北农业科学 2007年第2期46卷 239-240,243页

作者：李阳黄俊斌罗汉钢张求东王盛桥华中农业大学植物科技学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 湖北省植物保护总站武汉430070

选用10种杀菌剂对稻曲病菌无性孢子进行室内毒力测定的结果表明,20.67%万兴乳油和40%福星乳油对稻曲病菌厚垣孢子和分生孢子的萌发均有较好的抑制效果,其EC50分别为2.217μg·mL-1、2.234μg·mL-1和3.633μg·mL-1、2.656... 详细信息

选用10种杀菌剂对稻曲病菌无性孢子进行室内毒力测定的结果表明,20.67%万兴乳油和40%福星乳油对稻曲病菌厚垣孢子和分生孢子的萌发均有较好的抑制效果,其EC50分别为2.217μg·mL-1、2.234μg·mL-1和3.633μg·mL-1、2.656μg·mL-1;10%世高和10%井冈霉素抑制效果相对较差。同一种杀菌剂对稻曲病菌厚垣孢子和分生孢子的抑制效果不同,10%世高对厚垣孢子的EC50为5.612μg·mL-1,对分生孢子的EC50为20.227μg·mL-1;而43%好力克对两种孢子的EC50分别为11.659μg·mL-1和7.185μg·mL-1。

关键词：稻曲病菌杀菌剂厚垣孢子分生孢子毒力测定

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桃溃疡病的鉴定

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西南农业学报 2011年第5期24卷 1748-1752页

作者：尹良芬马琼瑶陈育华中农业大学植物科技学院湖北武汉430070 湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室湖北武汉430070

本文对云南昆明地区由Phomopsis amygdali侵染引起的桃树溃疡病进行了鉴定。采集受害病枝到实验室分离培养,进行形态学鉴定。结果表明:分离菌在PDA培养基上菌落灰色、绒毛状,从菌落的背面可看到有淡褐色的色素形成;分生孢子无色、子弹... 详细信息

本文对云南昆明地区由Phomopsis amygdali侵染引起的桃树溃疡病进行了鉴定。采集受害病枝到实验室分离培养,进行形态学鉴定。结果表明:分离菌在PDA培养基上菌落灰色、绒毛状,从菌落的背面可看到有淡褐色的色素形成;分生孢子无色、子弹状、双细胞,大小为3.7μm×8.7μm。进行ITS系列分析:提取其基因组DNA,PCR扩增产物测序,对所测序列在NCBI中进行Blastn分析比对,结合在寄主植物上的症状,分离菌的生物学特性等,判断该分离病菌为桃溃疡病菌Phomopsis amygdali。最后进行回接实验,把分离到的病菌接种到健康的桃果实上,观察接种桃子发病情况及症状,比较从发病桃子上再分离到病菌的形态学特征,确证该分离菌就是引起桃溃疡病的病原菌。

关键词：桃树溃疡病鉴定

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