检索结果-内蒙古大学图书馆

植物保护学报 2024年第3期51卷 672-683页

作者：杨静雅曾哲政肖媛玲蔡民政吴沛珊魏闻恺阴伟晓罗朝喜华中农业大学果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测及安全控制重点实验室武汉430070

为探究桃褐腐病菌实生链核盘菌Monilinia fructicola环磷酸腺苷依赖性转录因子(cyclic adenosine monophosphate dependent transcription factor,Cdtf)在侵染植物寄主过程中发挥的作用,以野生型菌株Bmpc7为研究对象,通过基因组学和侵... 详细信息

为探究桃褐腐病菌实生链核盘菌Monilinia fructicola环磷酸腺苷依赖性转录因子(cyclic adenosine monophosphate dependent transcription factor,Cdtf)在侵染植物寄主过程中发挥的作用,以野生型菌株Bmpc7为研究对象,通过基因组学和侵染早期转录组学分析预测Cdtf1基因的结构及功能,对该基因进行敲除并对敲除转化子和回补转化子进行表型和抗逆性测定。结果显示,MfCdtf1在桃褐腐病菌侵染早期上调表达明显,接种后1 h和24 h时MfCdtf1的表达量显著上升,表明MfCdtf1参与调控桃褐腐病菌的侵染和致病。对3个纯合MfCdtf1敲除转化子和3个杂合回补转化子的表型进行观察,发现MfCdtf1基因的缺失使桃褐腐病菌的菌丝生长速率和致病力显著降低,产孢能力和色素合成能力丧失。甘油、H_(2)O_(2)、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基苯磺酸钠、CaCl_(2)、KCl和NaCl等多种外源胁迫对敲除转化子ΔMfCdtf1的生长抑制率显著低于对野生型菌株Bmpc7的生长抑制率,表明MfCdtf1的缺失降低了桃褐腐病菌对外源胁迫的敏感性。

关键词：桃褐腐病实生链核盘菌 MfCdtf1基因致病机制外源胁迫抗逆性

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桃褐腐病菌MfHOX1基因生物学功能研究

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植物病理学报 2025年

作者：肖媛玲曾哲政蔡民政杨静雅覃英阴伟晓罗朝喜华中农业大学果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测及安全控制重点实验室

实生链核盘菌（Monilinia fructicola）引起的桃褐腐病常年威胁我国桃生产并造成巨大损失，解析桃褐腐病菌关键致病因子对于有针对性地防治桃褐腐病十分重要。本研究利用分割标记法构建桃褐腐病菌MfHOX1基因敲除突变体及回补菌株，解析... 详细信息

实生链核盘菌（Monilinia fructicola）引起的桃褐腐病常年威胁我国桃生产并造成巨大损失，解析桃褐腐病菌关键致病因子对于有针对性地防治桃褐腐病十分重要。本研究利用分割标记法构建桃褐腐病菌MfHOX1基因敲除突变体及回补菌株，解析了MfHOX1的生物学功能。研究表明，同野生型菌株相比，MfHOX1敲除突变体菌丝生长速率显著下降，产孢量增多，对外源胁迫诱导剂H2O2、SDS、CR、CaCl2、NaCl的敏感性降低，而对甘油、山梨醇、葡萄糖的敏感性升高；此外，MfHOX1敲除突变体的致病力显著降低，致病相关基因MfAP1、MfPG1、MfCUT1、MfPmk1、MfSSP和MfHsbA1的表达量显著升高。上述结果表明MfHOX1基因参与调控桃褐腐病菌生长、产孢、对外源胁迫的应答以及致病过程。

关键词：实生链核盘菌桃褐腐病 Homeobox转录因子基因功能

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ACLSV外壳蛋白与梨两种E3泛素连接酶互作及亚细胞定位

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园艺学报 2024年第8期51卷 1715-1727页

作者：邱辉朱德娟张永乐高玉洁李柳王国平洪霓果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室华中农业大学园艺林学学院武汉430070 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070

为深入了解苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)与寄主植物的互作特性,构建了表达该病毒外壳蛋白(coat protein,CP)的诱饵载体pGBKT7-CP,采用酵母双杂交技术,从‘红香酥’梨cDNA文库中筛选出与ACLSV CP潜在互作的3... 详细信息

为深入了解苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)与寄主植物的互作特性,构建了表达该病毒外壳蛋白(coat protein,CP)的诱饵载体pGBKT7-CP,采用酵母双杂交技术,从‘红香酥’梨cDNA文库中筛选出与ACLSV CP潜在互作的33种寄主因子。酵母双杂交和双分子荧光互补试验验证了CP与来自梨的两种RING型E3泛素连接酶(命名为MIEL和BOI)互作。亚细胞定位分析表明,CP与BOI具有相似的胞间连丝和细胞核分布特点,MIEL主要分布在内质网和细胞核。双分子荧光互补试验结果显示,CP与BOI互作不改变二者的亚细胞分布,而CP与MIEL互作信号分布与MIEL亚细胞定位相似。构建了这3种蛋白的截短突变体,发现含zf-CHY结构域(1~99aa)的MIEL截短突变体可以与CP互作,而仅全长BOI可以与CP互作,CP截短突变体不能与这两种寄主蛋白互作。

关键词：苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白酵母双杂交 E3泛素连接酶蛋白互作亚细胞定位

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桃褐腐病菌自噬相关基因MfATG1生物学功能研究

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植物病理学报 2025年第2期55卷 225-236页

作者：黄松曾哲政尹良芬阴伟晓罗朝喜华中农业大学果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测及安全控制重点实验室武汉430070

桃褐腐病是桃树主要病害之一,其大规模流行给果农带来巨大损失。目前,关于褐腐病的研究主要集中在病原菌的分离鉴定、抗药性、防治等方面,而对褐腐病菌致病机制的研究相对较少。本研究基于前期获得的桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)... 详细信息

桃褐腐病是桃树主要病害之一,其大规模流行给果农带来巨大损失。目前,关于褐腐病的研究主要集中在病原菌的分离鉴定、抗药性、防治等方面,而对褐腐病菌致病机制的研究相对较少。本研究基于前期获得的桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)侵染果实的早期转录组数据及基因组数据,通过PHI注释分析发现自噬相关基因MfATG1在***侵染过程中可能发挥重要作用。通过基因敲除技术,获得MfATG1基因的敲低阳性转化子,并比较其与野生型菌株生长发育、致病力和其他抗逆性的差异,以解析其生物学功能。研究结果表明:MfATG1基因敲低影响***菌丝形态和自噬过程,降低菌丝生长速率和致病力,但不影响孢子萌发。在NaCl胁迫条件下,MfATG1敲低提高了***对NaCl的敏感性,表明MfATG1基因参与***对盐胁迫的应答。在H_(2)O_(2)、SDS和刚果红胁迫条件下,敲低MfATG1降低了***对其敏感性,表明MfATG1基因参与调控***的细胞壁完整性以及氧化应激反应。

关键词：桃褐腐病菌 MfATG1基因致病力自噬逆境胁迫

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HMG-box家族基因MfHMG5和MfHMG6对桃褐腐病菌生长、产孢和致病的影响

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植物病理学报 2024年第5期54卷 961-973页

由链核盘菌引起的褐腐病严重危害核果和仁果类水果的生产,极大影响我国水果的远距离销售与出口。基于对实生链核盘菌(Monilinia fructicola)基因组学和侵染早期转录组学分析,筛选到MfHMG5和MfHMG6基因在桃褐腐病菌侵染早期各时间段的表... 详细信息

由链核盘菌引起的褐腐病严重危害核果和仁果类水果的生产,极大影响我国水果的远距离销售与出口。基于对实生链核盘菌(Monilinia fructicola)基因组学和侵染早期转录组学分析,筛选到MfHMG5和MfHMG6基因在桃褐腐病菌侵染早期各时间段的表达量变化趋势相同,都在侵染1 h后显著下降,而后逐渐上升。为阐明两者的生物学功能,对MfHMG5的敲除和过表达转化子,MfHMG6的敲除和回补转化子的表型进行观察,发现MfHMG5基因的缺失和过量表达都降低褐腐病菌的生长速率和产孢能力,但不影响其致病力。MfHMG6基因的缺失降低了褐腐病菌的生长速率、致病力和产孢能力,且导致MfHMG5基因的表达量升高。本研究结果说明MfHMG5和MfHMG6参与调控桃褐腐病菌的生长与致病。

关键词：桃褐腐病实生链核盘菌 HMG-box 产孢致病机制

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MfMel1基因参与调控桃褐腐病菌对桃果实的致病力

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植物保护学报 2023年第2期50卷 380-390页

作者：谷文倩阴伟晓罗朝喜华中农业大学果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室武汉430070 华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测及安全控制重点实验室武汉430070

为明确MfMel1基因在桃褐腐病菌Monilinia fructicola中的功能,利用生物信息学软件对该基因的结构、所编码蛋白的保守结构域以及进化关系进行分析;通过遗传转化方法对该基因进行敲除,并进行表型分析。结果显示,敲除转化子△MfMel1菌株的... 详细信息

为明确MfMel1基因在桃褐腐病菌Monilinia fructicola中的功能,利用生物信息学软件对该基因的结构、所编码蛋白的保守结构域以及进化关系进行分析;通过遗传转化方法对该基因进行敲除,并进行表型分析。结果显示,敲除转化子△MfMel1菌株的菌丝生长速率、孢子萌发率与野生型菌株Bmpc7均无显著差异,但产孢量显著降低。△MfMel1菌株在0.01%SDS、600μg/mL刚果红、150 g/L甘油、200 g/L蔗糖、6 mmol/L H_(2)O_(2)、4%NaCl和1.2 mmol/L山梨醇培养基上的生长速率、菌丝形态均无显著变化,但对200 g/L葡萄糖的渗透胁迫敏感性增强。敲除转化子△MfMel1菌株的α-半乳糖苷酶活性明显降低,对桃果实的致病力显著下降。表明MfMel1基因在桃褐腐病菌中可能通过参与调控α-半乳糖苷酶酶活,从而参与病原菌的致病。

关键词：桃褐腐病菌 MfMel1基因糖苷水解酶侵染机制 α-半乳糖苷酶

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梨褪绿叶斑伴随病毒P5蛋白与NbWRKY1的互作研究

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西南农业学报 2025年

作者：高玉洁任秋婷张永乐张樾张红艺邓惠方王先洪洪霓王国平华中农业大学植物科技学院/湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学园艺林学学院/果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室

【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒（PCLSaV）P5蛋白是沉默抑制子和致病因子，探究NbWRKY1对PCLSaVP5生物学功能的作用，为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5... 详细信息

【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒（PCLSaV）P5蛋白是沉默抑制子和致病因子，探究NbWRKY1对PCLSaVP5生物学功能的作用，为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的互作关系，同时通过根癌农杆菌介导的表达分析和绿色荧光蛋白RNA沉默诱导研究NbWRKY1对P5的生物学影响。【结果】NbWKY1与P5互作且共定位于细胞核中，并在细胞核内形成均匀的核体颗粒，不包含核仁，与NbWRKY1在本氏烟细胞内的分布特点相似。同时P5还可诱导NbWRKY1基因上调表达，2d时NbWRKY1的表达水平显著上调4.2倍，至4d时表达量有所回落，但仍高于对照。病毒诱导的基因沉默发现NbWRKY1在野生型本氏烟植株中沉默效率呈现动态变化趋势，先上升后下降，在14d时沉默效率最高。且NbWRKY1沉默植株表型与野生型植株相似。NbWRKY1沉默植株叶片上P5引起的细胞坏死程度明显比野生型植株叶片坏死程度减轻，由此判定当该基因下调表达时，够有效缓解由PCLSaVP5所引发的细胞坏死现象。检测NbWRKY1和P5的RNA沉默抑制活性，发现NbWRKY1具备直接抑制RNA沉默的能力，且P5与NbWRKY1的RNA沉默抑制能力存在叠加效应，当两种蛋白的沉默抑制活性叠加后，表现出比P5蛋白更强的RNA沉默抑制活性。【结论】本研究发现NbWRKY1可与P5互作，且NbWRKY1既可直接抑制RNA沉默，其下调表达后也可减轻PCLSaVP5引起的细胞坏死反应，同时NbWRKY1与PCLSaVP5的RNA 沉默抑制活性存在叠加效应。研究结果为解析PCLSaV编码的P5蛋白的生物学功能提供了新的理论依据。

关键词：梨褪绿叶斑伴随病毒特异蛋白P5 NbWRKY1 蛋白互作 RNA沉默抑制

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稻曲病菌SIX效应蛋白参与调控植物免疫

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植物保护学报 2022年第4期49卷 1004-1012页

作者：刘月冉孙庚屈劲松王毓富阴伟晓罗朝喜华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测及安全控制重点实验室武汉430070

为明确稻曲病菌Ustilaginoidea virens的SIX(secreted in xylem)效应蛋白功能,利用生物信息学软件预测6个SIX1蛋白和1个SIX2蛋白的分泌特性,并通过酵母分泌系统对其分泌特性进行验证,在烟草上通过根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens... 详细信息

为明确稻曲病菌Ustilaginoidea virens的SIX(secreted in xylem)效应蛋白功能,利用生物信息学软件预测6个SIX1蛋白和1个SIX2蛋白的分泌特性,并通过酵母分泌系统对其分泌特性进行验证,在烟草上通过根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的瞬时表达系统检测SIX蛋白对小鼠促凋亡蛋白BAX、致病疫霉Phytophthora infestans激发子INF1、大豆疫霉Phytophthora sojae病原相关分子模式糖基水解酶XEG1引起烟草细胞坏死的作用,在烟草上表达SIX蛋白后接种辣椒疫霉Phytophthora capsici并观察其对辣椒疫霉侵染的作用。结果显示:所检测的SIX蛋白中有5个含有预测的信号肽,2个被预测为非经典分泌蛋白,但经酵母分泌系统验证均具有分泌功能;大部分SIX蛋白能够抑制BAX、INF1、XEG1引起的烟草细胞坏死,但抑制坏死的情况并不完全一致;大部分含信号肽的SIX蛋白能够促进辣椒疫霉侵染,UV8b_3638去信号肽突变体也能够促进辣椒疫霉侵染。表明大多数SIX蛋白参与调控植物免疫,且能促进病原物的侵染。

关键词：稻曲病菌 SIX效应蛋白植物免疫致病性

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贝莱斯芽孢杆菌F85拮抗烟草炭疽菌的转录组学分析

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中国烟草学报 2024年第1期30卷 72-82页

作者：刘涵斐李锡宏徐婷婷许汝冰郑露黄俊斌黎妍妍华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室湖北省武汉市430207 湖北省烟草科学研究院湖北省武汉市430030

【目的】为探索烟草炭疽菌响应贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)F85拮抗的分子机制。【方法】以引起烟草炭疽病的Colletotrichum fructicola为研究对象,设置经F85无菌发酵液处理后的C. fructicola菌株(T)和正常生长的C. fructicola... 详细信息

【目的】为探索烟草炭疽菌响应贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)F85拮抗的分子机制。【方法】以引起烟草炭疽病的Colletotrichum fructicola为研究对象,设置经F85无菌发酵液处理后的C. fructicola菌株(T)和正常生长的C. fructicola菌株(CK),利用转录组测序探究贝莱斯芽孢杆菌拮抗条件下烟草炭疽菌菌丝的差异表达基因(Differential Expressed Genes, DEGs)和代谢通路富集情况。【结果】B. velezensis无菌发酵液处理的C. fructicola菌株(T)与对照(CK)相比,共有2870个DEGs,其中1524个基因上调表达,1346个基因下调表达。KEGG富集分析结果表明,DEGs主要富集在苯丙氨酸代谢(Phenylalanine metabolism)、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸降解(Valine, leucine and isoleucine degradation)等通路上,编码过氧化物酶体(KatGs)、醛脱氢酶(ALDH)、甲基丙二酸半醛脱氢酶(MoMsdh)等的基因显著下调表达。【结论】在贝莱斯芽孢杆菌F85拮抗下,烟草炭疽菌菌丝转录组特征发生显著变化,F85主要影响C. fructicola菌丝过氧化物酶体调控以及菌丝能量形成过程等。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌烟草炭疽菌转录组分析生物防治

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梨褪绿叶斑伴随病毒的RT-PCR和巢式RT-PCR检测技术建立

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植物病理学报 2022年第4期52卷 691-698页

作者：张哲高晓雯王海潘吕玉琢朱宜庭王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070

梨褪绿叶斑伴随病毒(Pear chlorotic leaf spot-associated virus,PCLSaV)是新近发现的为害梨树的欧洲花楸环斑病毒属(Emaravirus)病毒,该病毒基因组由5条负义单链RNA组成。本研究比较分析了反转录引物pd(N)6、3C和5H及基于该病毒基因组... 详细信息

梨褪绿叶斑伴随病毒(Pear chlorotic leaf spot-associated virus,PCLSaV)是新近发现的为害梨树的欧洲花楸环斑病毒属(Emaravirus)病毒,该病毒基因组由5条负义单链RNA组成。本研究比较分析了反转录引物pd(N)6、3C和5H及基于该病毒基因组RNA3和RNA5链序列设计的4对引物用于RT-PCR检测梨样品中PCLSaV的效果,结果显示,采用与该病毒基因组RNA链3′末端互补的引物3C用于cDNA合成及基于该病毒RNA5链序列的引物5-F/R用于PCR扩增时,检测PCLSaV的灵敏度相较采用引物pd(N)6和5H合成cDNA为模板时高10-100倍;不同部位和不同发病状况的梨树组织中PCLSaV检测结果差异明显。进一步建立了具有高灵敏度的巢式RT-PCR技术,采用外侧引物5-F/R和内巢引物5-IF/IR结合可用于梨不同组织样品中PCLSaV的检测。本研究为系统分析PCLSaV在我国栽培梨树上的危害状况及无病毒梨种质培育奠定了技术基础。

关键词：梨梨褪绿叶斑伴随病毒 RT-PCR 检测

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