检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2025年第2期56卷 860-869页

作者：李枝卉罗金林谢虹李明坤林杨张宇姣徐引弟陈焕春蔡旭旺徐晓娟华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002

本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和... 详细信息

本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和Flp-FRT无抗突变系统构建副猪格拉瑟菌OppA过表达株,通过Western blot检测OppA的表达量,通过阿拉伯糖诱导和提高培养温度消除抗性基因和Flp表达质粒。进行小鼠免疫保护试验,通过检测血清中抗体水平及脾淋巴细胞增殖、观察小鼠死亡率。结果显示:构建了3株副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R),ΔnanH::oppA和ΔnanH::P qseB-oppA。由于ΔnanH::oppA^(R)株中OppA的表达量显著高于CF7066(P<0.001),所以选择该过表达株进行小鼠免疫保护试验。小鼠在免疫后进行rOppA-ELISA的抗体检测,结果表明,ΔnanH::oppA^(R)免疫组的OppA抗体水平比CF7066组、ΔnanH组和PBS组高,但低于灭活疫苗组。用rOppA蛋白刺激脾淋巴细胞,ΔnanH::oppA^(R)和CF7066组小鼠脾淋巴细胞的增殖量显著高于刺激前(P<0.05),而ΔnanH、灭活疫苗组和PBS对照组没有改变。用CF7066菌株进行攻毒,其中灭活疫苗组、ΔnanH::oppA^(R)组、CF7066组对小鼠的保护率均为100%,ΔnanH组为75%。当前研究构建的3株副猪格拉瑟菌重组菌株中,ΔnanH::oppA^(R)的OppA表达水平最高,用该菌株免疫小鼠后产生OppA特异性的体液免疫和细胞免疫,而且可对CF7066攻毒提供有效保护。基于此,副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R)有望作为副猪格拉瑟菌的减毒活疫苗。

关键词：副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶过表达基因工程弱毒疫苗

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牛结核病大罐奶抗体检测方法的评估

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 75-79页

作者：陈颖钰张琼文王杰陈洁郭爱珍华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070 华中农业大学国家动物结核病专业实验室(武汉) 湖北武汉430070 武汉市畜牧兽医科学研究所湖北武汉430065

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998... 详细信息

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998份个体奶样,分析大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间的相关性,建立基于大罐奶抗体检测的牛结核病的流行率预测模型;为确定不同效价阳性奶样在大罐奶中的检测能力,通过对不用阳性奶样进行稀释后混样检测,分析阳性奶样的效价和具有相近大罐奶S/P值的牛群中动物个体的抗体水平经验分布函数的差异性。结果显示,奶样和血样的牛结核病抗体检测结果之间具有高度一致性(Kappa=0.862)和相关性(Pearson相关系数r=0.976,P<0.01)。大罐奶抗体水平检测结果与牛结核病流行率之间具有中度相关性(Pearson相关系数r=0.681,P<0.01),流行率预测模型y=e4.7010+1.8784ln(x)-0.01(R2=0.8933)的预测能力为89.33%。分别稀释不同效价的阳性奶样,牛结核弱阳性奶样2倍稀释后阳性检出率为16.67%,中阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为50.00%,高阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为100%。结果表明,奶样可用于牛结核病的抗体检测,且大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间具有相关性,并可以通过模型预测牛结核病的流行率。大罐奶抗体检测可作为一项经济快捷的检测手段用于牛结核病的监测和预警,对于有着较高流行率或存在有强阳性个体的牛场,该检测方法敏感性更高,更为适用。

关键词：牛结核病大罐奶效价预测模型

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2024年度肉牛牦牛产业与技术发展报告

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中国畜牧杂志 2025年第3期61卷 399-402页

作者：曹建民吕文发郭爱珍王之盛张一敏陈昭辉曹兵海李俊雅吉林农业大学经济管理学院吉林长春130118 吉林农业大学动物科学/动物医学学院吉林长春130118 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 四川农业大学动物营养研究所四川雅安625014 山东农业大学食品科学与工程学院山东泰安271018 中国农业大学动物科学技术学院北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

本文基于对2024年肉牛牦牛产业特点及存在问题的分析,展望了2025年肉牛牦牛产业发展趋势,并提出了肉牛牦牛产业发展的相关建议。

关键词：肉牛牦牛产业展望建议

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表达绿色荧光蛋白突变体的重组伪狂犬病毒的构建及其增殖特性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第6期34卷 757-762页

作者：方六荣陈焕春肖少波张辉牛传双华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒研究室武汉430070 华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒研究室

将绿色荧光蛋白突变体M 1(EGFPS14 7/P)基因融合到伪狂犬病毒 (PRV)非必需糖蛋白 gG的第 8个氨基酸下游 ,通过同源重组、空斑纯化和PCR筛选获得能表达M 1并导致gG基因部分缺失的重组病毒 gG-/M1+ 。重组病毒经Southern杂交、Western印... 详细信息

将绿色荧光蛋白突变体M 1(EGFPS14 7/P)基因融合到伪狂犬病毒 (PRV)非必需糖蛋白 gG的第 8个氨基酸下游 ,通过同源重组、空斑纯化和PCR筛选获得能表达M 1并导致gG基因部分缺失的重组病毒 gG-/M1+ 。重组病毒经Southern杂交、Western印迹和荧光观察证实构建正确。纯化的重组病毒以低感染指数接种PK 15细胞 ,在感染早期 (6h)就能观察到荧光 ,随着病毒的增殖 ,荧光逐渐增强 (2 4～ 36h) ,直至完全病变 ,荧光淬灭。进一步对重组病毒gG-/M1+ 与亲本株gG-/LacZ+ 、野毒株的增殖特性进行比较 ,发现 3种毒株在增殖滴度上无显著差异。上述结果表明构建的PRVgG-/M1+ 突变株能作为活细胞示踪实时监测病毒感染的动态分析。

关键词：伪狂犬病毒绿色荧光蛋白突变体标记增殖特性

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猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因cDNA5′端的分子克隆

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Acta Genetica Sinica 2002年第1期29卷 7-11页

作者：林居强蒋思文郑嵘彭健熊远华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070

猪特异性脂肪细胞膜蛋白是近年来才被报道的一种可能与前脂肪细胞生长、发育和脂肪沉积调控有关的蛋白质。采用RT PCR和RACE技术 ,首次获得猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因cDNA 5′端的克隆和序列。

关键词：猪 PAMP基因分子克隆特异性脂肪细胞膜蛋白

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猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定

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畜牧兽医学报 1998年第2期29卷 156-161页

作者：陈焕春方六荣何启盖金梅林索绪峰吴美洲华中农业大学畜牧兽医学院

从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到多株病毒，并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传１５代均出现典型细胞病变，用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞、Ｈｅｌａ细胞、Ｖ... 详细信息

从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到多株病毒，并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传１５代均出现典型细胞病变，用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞、Ｈｅｌａ细胞、Ｖｅｒｏ细胞、犊牛睾丸原代细胞、猪肾传代细胞ＩＢＲＳ－２均出现典型细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。病毒对５－碘脱氧尿核苷、氯仿、胰蛋白酶、乙醚敏感，在ｐＨ５．０～９．０下稳定，５６℃３０ｍｉｎ灭活，病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和。病毒接种家兔和小白鼠均出现典型伪狂犬病症状。进而用所分离病毒的ＤＮＡ作为模板，应用特异性引物，通过聚合酶链式反应扩增出伪狂犬病病毒ｇｐ５０基因中４３３－６５１之间２１７ｂｐ长的特异性片段，用地高辛标记的伪狂犬病病毒ＤＮＡＢａｍＨＩ－７片段作探针与所分离病毒的ＤＮＡ进行斑点杂交，出现特异性杂交斑点。结果表明所分离病毒为伪狂犬病病毒，并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒鄂Ａ株。

关键词：猪伪狂犬病病毒分离鉴定

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透明质酸的制备及对奶牛急性浆液性关节炎治疗初探

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畜牧兽医学报 1997年第5期28卷 469-474页

作者：丁明星陈东仁华中农业大学畜牧兽医学院

以牛眼的玻璃体为材料，制备了高纯度透明质酸（ＨｙａｌｕｒｏｎｉｃＡｃｉｄ，ＨＡ）。其制剂用于治疗奶牛急性浆液性关节炎，获得了较好疗效。

关键词：透明质酸急性浆液性关节炎治疗乳牛牛病

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6种家禽孤束核的脊髓通路——HRP逆行追踪法研究

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华中农业大学学报 1997年第5期16卷 374-379页

作者：彭克美冯悦平张维民华中农业大学畜牧兽医学院

应用微电泳逆行追踪技术，分别向北京鸭、麻鸭、鹅、鸡、鸽和鹌鹑脊髓的颈、胸、腰段的一侧灰质中导入辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），系统地研究了其孤束核至脊髓传导通路和细胞构筑。结果如下：在颈髓不同节段单侧灰质导入ＨＲＰ后，６种... 详细信息

应用微电泳逆行追踪技术，分别向北京鸭、麻鸭、鹅、鸡、鸽和鹌鹑脊髓的颈、胸、腰段的一侧灰质中导入辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），系统地研究了其孤束核至脊髓传导通路和细胞构筑。结果如下：在颈髓不同节段单侧灰质导入ＨＲＰ后，６种家禽延髓的双侧孤束核内都出现了大量的标记细胞；在胸髓单侧灰质中引入ＨＲＰ者次之；在腰髓引入ＨＲＰ后标记细胞数量较少。各组的试验结果都是同侧的标记细胞数量多于对侧。研究结果说明：禽类孤束核脊髓传导通路可长距离地直接下行投射到腰部，这一传导通路呈双侧性投射而以向同侧脊髓投射占优势。

关键词：家禽孤束核脊髓投射辣根过氧化物酶 HRP

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鸡毒霉形体感染的PCR检测方法的建立及应用

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华中农业大学学报 1998年第5期17卷 478-483页

作者：屈小玲毕丁仁华中农业大学畜牧兽医学院

用多聚酶链反应检测了鸡毒霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ，ＭＧ）种内菌株的特异性ＤＮＡ片段，并用该法对人工感染鸡及野外鸡群进行了ＭＧ感染的分子流行病学调查。结果表明，通过基因扩增及电泳，仅ＭＧ出现... 详细信息

用多聚酶链反应检测了鸡毒霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ，ＭＧ）种内菌株的特异性ＤＮＡ片段，并用该法对人工感染鸡及野外鸡群进行了ＭＧ感染的分子流行病学调查。结果表明，通过基因扩增及电泳，仅ＭＧ出现特异性扩增条带，最低能检出１８ｐｇＭＧＤＮＡ，说明该方法具有很高的特异性和敏感性。人工感染６０只鸡，３ｄ后即可用ＰＣＲ查出ＭＧ阳性，６ｄ后１００％为阳性，对照鸡全部为阴性。与分离培养的结果完全一致。ＰＣＲ对野外鸡群的ＭＧ检出率为１０．５％～３５％，平均为２０％（１６／７９），与血清学检查结果基本一致；从ＰＣＲ阳性鸡中，有６１．５％（６／１３）能分离到ＭＧ。这说明ＰＣＲ在ＭＧ感染的分子流行病学调查中有重要的应用价值。

关键词：鸡毒霉形体多聚酶链反应基因扩增 PCR检测

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乳源外泌体的研究进展

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中国奶牛 2025年第4期 16-21页

作者：张越郑好董霞陈星史良玉余博周傲张淑君动物遗传繁育与精准养殖实验室/武汉轻工大学动物科学与营养工程学院武汉430023 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室/湖北省农业科学院畜牧兽医研究所武汉430064 华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070

乳源外泌体是由乳腺上皮细胞分泌的一种茶杯样纳米级功能性囊泡,其含有多种生物活性物质,具有多种生物学功能,其在靶向载体、药物递送等方面的应用具有天然优势。本文综述了乳源外泌体结构组成、分离鉴定与保存方法、生物学功能及其应用... 详细信息

乳源外泌体是由乳腺上皮细胞分泌的一种茶杯样纳米级功能性囊泡,其含有多种生物活性物质,具有多种生物学功能,其在靶向载体、药物递送等方面的应用具有天然优势。本文综述了乳源外泌体结构组成、分离鉴定与保存方法、生物学功能及其应用,为乳源外泌体的研究应用提供有价值的参考。

关键词：乳源外泌体分离与鉴定生物学功能应用保存

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