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钩藤碱对human ether-a-go-go相关基因通道的抑制作用(英文)

生理学报 2005年第5期57卷 648-652页

作者：桂乐李之望杜戎袁国会李伟任法鑫李婧杨钧国南通大学附属医院心内科华中科技大学同济医学院神经生物学教研室华中科技大学同济医学院协和医院心血管病研究所

将human ether-a-go-go相关基因(HERG)cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,采用双电极电压钳技术,观察钩藤碱对表达电流的影响。结果显示:(1)钩藤碱抑制HERG通道的表达是浓度依赖性的,IC50为(773．4±42．5)μmol／L。(2)钩藤碱抑制HERG... 详细信息

将human ether-a-go-go相关基因(HERG)cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,采用双电极电压钳技术,观察钩藤碱对表达电流的影响。结果显示:(1)钩藤碱抑制HERG通道的表达是浓度依赖性的,IC50为(773．4±42．5)μmol／L。(2)钩藤碱抑制HERG通道的表达是电压依赖性的,最大抑制率在-20 mV,为15％。上述结果提示,钩藤碱抑制HERG编码的钾通道, 导致心室复极时间延长,揭示了与钩藤碱相关的心肌钾通道的分子生物学基础。

关键词： human ether-a-go-go相关基因钩藤碱卵母细胞双电极电压钳

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大鼠心肌梗死后非梗死区心肌基质金属蛋白酶基因表达及其活性与辛伐他汀的干预效应

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中国临床康复 2005年第31期9卷 49-51页

作者：张金盈程翔廖玉华逯保军华中科技大学同济医学院心血管病研究所协和医院心血管内科湖北省武汉市430022

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶2,9基因表达及其活性的变化以及辛伐他汀对其表达的影响。方法:①实验于2003-09/2004-07在华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科实验室完成。选用健康清洁级雌性Wistar大鼠34只,其中24... 详细信息

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶2,9基因表达及其活性的变化以及辛伐他汀对其表达的影响。方法:①实验于2003-09/2004-07在华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科实验室完成。选用健康清洁级雌性Wistar大鼠34只,其中24只大鼠结扎冠状动脉前降支制成心肌梗死模型,随机分为2组:辛伐他汀干预组和心肌梗死对照组,每组12只;其余10只为假手术组(不结扎冠状动脉前降支)。②辛伐他汀组术前1h给予药物辛伐他汀(40mg/kg)灌胃,以后每天按上述剂量灌胃持续4周,假手术组和心肌梗死对照组给以等量清水灌胃。③实验4周后,各组大鼠称质量后经尾静脉抽血,采用全自动生化分析仪检测血脂。左心室非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9mRNA表达和心肌基质金属蛋白酶2和9活性分别采用反转录聚合酶链反应法和明胶酶法测定。④各组均数间比较方差齐性检验、方差分析。结果:大鼠34只均进入结果分析。①大鼠非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9mRNA表达:心肌梗死对照组和辛伐他汀干预组明显高于假手术组(基质金属蛋白酶2mRNA表达:1.21±0.22,0.82±0.16,0.51±0.13,P<0.05;基质金属蛋白酶9mRNA表达:0.98±0.20,0.65±0.14,0.43±0.13,P<0.05);辛伐他汀干预组明显低于心肌梗死对照组(P<0.05)。②大鼠非梗死区心肌基质金属蛋白酶2和9活性:心肌梗死对照组和辛伐他汀干预组明显高于假手术组(基质金属蛋白酶2活性:310±31,180±24,100,P<0.05;基质金属蛋白酶9活性:280±29,160±22,100,P<0.05);辛伐他汀干预组明显低于心肌梗死对照组(P<0.05)。③血脂测定结果:3组差别不明显(P>0.05)。结论:①大鼠急性心肌梗死4周后左心室心肌基质金属蛋白酶2,9活性及mRNA表达均较假手术组明显升高。②辛伐他汀可减少大鼠心肌梗死后4周左心室心肌基质金属蛋白酶2,9的mRNA表达及其活性,此改变不依赖其降脂作用。

关键词：心肌梗塞斯伐他汀/药理学基质金属蛋白酶逆转录聚合酶链反应

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急性心肌梗死后心脏TGF-Β_1的表达和心室重塑(英文)

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中国病理生理杂志 2005年第12期21卷 2305-2309页

作者：刘英廖玉华程翔李彬葛洪霞张玲郭张强华中科技大学同济医学院心血管病研究所协和医院心内科湖北武汉430022

目的:探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌纤维化和TGF-Β1表达及炎症反应的分子机制。方法: 建立大鼠AMI模型及假手术组,于术后第1、4和8周末测血流动力学后取心脏。RT-PCR和免疫组化SABC法检测 FGF-Β1岛基因和蛋白的表达。用氯胺T法测... 详细信息

目的:探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌纤维化和TGF-Β1表达及炎症反应的分子机制。方法: 建立大鼠AMI模型及假手术组,于术后第1、4和8周末测血流动力学后取心脏。RT-PCR和免疫组化SABC法检测 FGF-Β1岛基因和蛋白的表达。用氯胺T法测心肌组织羟脯氨酸的含量。心肌病检观察心肌组织炎症细胞浸润情况。结果:与假手术组相比,AMI后第1、4和8周末血流动力学有明显改变(P<0．01)。在梗死区、交界区和非梗死区羟脯氨酸和TGF-Β1基因和蛋白表达均增高(P<0．05),第1周的表达高于第4和8周。羟脯氨酸和TGF-Β1蛋白表达呈现明显正相关(R=0．75-0．99,P<0．05)。AMI后第1周梗死区和交界区炎症细胞浸润明显,第4和8周心肌炎症细胞减少。TGF-Β1在梗死后1’周时主要见于心肌细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和部分淋巴细胞的胞浆内表达,在4 周和8周见于成纤维母细胞及间质。结论:AMI后心肌细胞、炎症细胞、成纤维母细胞胞浆及基质中TGF-Β1表达增高,与羟脯氨酸的变化及炎症过程存在联系,可能在AMI后心室重塑和心肌炎性修复过程中起重要作用。

关键词：心肌梗死心室复建炎症羟脯氨酸转化生长因子β

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AT_1受体短肽主动免疫自发性高血压大鼠对血压和心血管重塑的影响

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中国免疫学杂志 2005年第5期21卷 372-376页

作者：李留东廖玉华周子华魏芬王敏王彬魏宇淼华中科技大学同济医学院协和医院心血管疾病研究所心血管病免疫实验室武汉430022

目的:观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外的不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压、心脏及血管的影响。方法:2月龄SHR ,随机分成5组,以合成的AT1受体胞外3个多肽片段分别免疫,其余2组为氯沙坦灌胃组( 10mg/ (kg·d) ,... 详细信息

目的:观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外的不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压、心脏及血管的影响。方法:2月龄SHR ,随机分成5组,以合成的AT1受体胞外3个多肽片段分别免疫,其余2组为氯沙坦灌胃组( 10mg/ (kg·d) ,标记为SHR L)和对照组(SHR C)。同龄Wistar大鼠免疫干预同SHR ,对照组用免疫佐剂。ELISA法检测抗体滴度,大鼠尾动脉血压计测量血压。试验结束检测心脏及左心室重量、肠系膜三级动脉中层及内径和组织病理变化、心肌超微病理变化。结果:SHR 2月龄血压开始升高,所有免疫组动物均产生针对特定短肽的抗体。ATR12 181免疫组SHR收缩压于免疫后一个月降低,并持续至实验结束( 14 5 4 2±8 4 6mmHg ,n =7) ,与SHR C( 197 0 0±7 70mmHg ,n =7,P <0 0 5 )相比明显降低,与SHR L( 139 2 8±17 19mmHg ,n =7,P >0 0 5 )相比无显著性差异;而ATR12 185和ATR10 0 14免疫组SHR收缩压无明显变化。与SHR C相比,ATR12 181免疫组心脏/体重比( 4 6 6±0 5 0mg/gvs 5 16±0 11mg/g ,P <0 0 5 )和左心室/体重比( 3 6 4±0 4 5mg/gvs 4 19±0 0 7mg/g ,P <0 0 5 )均显著降低;而ATR12 181免疫组与SHR L心脏/体重比( 4 4 1±0 6 0mg/g)及左心室/体重比( 3 5 0±0 31mg/g)相比无显著性差异。

关键词：自发性高血压大鼠血压主动免疫血管紧张素Ⅱ 氯沙坦

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抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道亚单位抗体的制备与验证

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中国免疫学杂志 2005年第10期21卷 724-727页

作者：涂丹娜廖玉华田苗王敏华中科技大学同济医学院心血管病研究所附属协和医院心内科武汉430022

目的:用人工合成的大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的抗原表位短肽免疫家兔,产生可识别该通道不同亚单位的特异性抗体,并进行验证.方法:从大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的氨基酸序列中筛选出三段短肽,进行人工合成.用化学合成... 详细信息

目的:用人工合成的大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的抗原表位短肽免疫家兔,产生可识别该通道不同亚单位的特异性抗体,并进行验证.方法:从大鼠心室肌细胞L-型钙通道4个亚单位的氨基酸序列中筛选出三段短肽,进行人工合成.用化学合成的多肽与破伤风类毒素(TT)以戊二醛法连接,并以此作为抗原免疫家兔制备抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道的免疫血清,经分离纯化获得抗体.抗体的验证通过ELISA,Western blot,免疫荧光组织化学技术进行检测.结果:所制备的抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道α1c、β2和α2/δ亚单位的抗体滴度分别为1:51 200～1:102 400、1:1 280和1:1 280,3个抗体结合到大鼠心肌细胞膜蛋白的分子量分别为235、89和162 kD.免疫荧光组织化学实验显示,抗体均能特异性的结合在培养大鼠心室肌细胞膜上.结论:所制备的抗大鼠心室肌细胞L-型钙通道亚单位抗体能特异性识别大鼠心室肌细胞膜上L-型钙通道的不同亚单位.

关键词：心室肌细胞 L-型钙通道肽抗体

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乙型肝炎病毒诱导小鼠抗β_1-肾上腺素能受体抗体的致心律失常作用机制

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中国病理生理杂志 2005年第6期21卷 1046-1050页

作者：刘坤廖玉华王朝晖李淑莉王敏曾令兰唐明华中科技大学同济医学院心血管病研究所协和医院心内科湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院心血管病研究所协和医院感染科湖北武汉430022 同济医学院生理学系湖北武汉430030

目的:探索乙型肝炎病毒诱导的抗β1-肾上腺素能受体抗体致病作用及机制。方法:乙型肝炎病毒4次接种小鼠(n=30),并记录心电图。ELISA法检测抗体,光镜下观察心肌和肝脏的病变。免疫荧光显示该抗体与豚鼠心肌细胞能否结合。辛酸提取法提纯... 详细信息

目的:探索乙型肝炎病毒诱导的抗β1-肾上腺素能受体抗体致病作用及机制。方法:乙型肝炎病毒4次接种小鼠(n=30),并记录心电图。ELISA法检测抗体,光镜下观察心肌和肝脏的病变。免疫荧光显示该抗体与豚鼠心肌细胞能否结合。辛酸提取法提纯小鼠IgG。膜片钳技术观察抗体对豚鼠心肌细胞电生理特性的影响。结果:小鼠该抗体的产生与乙型肝炎病毒接种有关。实验小鼠心脏和肝脏未出现明显的组织病理改变,但6只小鼠可出现束枝传导阻滞、窦性停博、室性早搏等心律失常,其抗体均阳性。免疫荧光显示抗体能与豚鼠心肌细胞结合。该抗体使APD20、APD50、APD90分别延长36.46%、29.63%和12.40%,且使L型钙电流峰值增加(49.67±16.01)%。结论:乙型肝炎病毒诱导小鼠产生的抗β1-肾上腺素能受体抗体可导致多种心律失常的发生,该抗体介导心肌细胞L型钙电流增加可能是其致心律失常的机制之一。

关键词：抗体受体,肾上腺素能β 肝炎病毒,乙型心律失常动作电位 L型钙电流

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氟伐他汀对心肌梗死大鼠左室重塑和功能的影响

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临床心血管病杂志 2005年第4期21卷 233-236页

作者：刘宇宏曾秋棠袁国会陈斌华中科技大学协和医院心内科华中科技大学同济医学院心血管病研究所武汉430022 华中科技大学同济医院超声影像科

目的探讨羟甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂氟伐他汀对急性心肌梗死(AMI)大鼠左室结构和功能的影响。方法雌性SD大鼠AMI后6h随机分为AMI组和氟伐他汀组;另设假手术组。三组大鼠直接灌胃给药或自来水8周后行高频多普勒超声、血流动... 详细信息

目的探讨羟甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂氟伐他汀对急性心肌梗死(AMI)大鼠左室结构和功能的影响。方法雌性SD大鼠AMI后6h随机分为AMI组和氟伐他汀组;另设假手术组。三组大鼠直接灌胃给药或自来水8周后行高频多普勒超声、血流动力学、心脏重塑指标及左心室心肌α、β肌球蛋白重链(α、βMHC)mRNA表达的测定。结果与假手术组相比,AMI组左室舒张末期内径(LVEDD)、左室舒张末期容积(LVEDV)、E峰、E峰减速度、E/A、左室舒张末压(LVEDP)、左、右心室心肌肥厚指数、非梗死区胶原容积分数(CVF)和βMHCmRNA均明显增加(P<0.01),左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)和αMHCmRNA显著降低(P<0.01)。与AMI组相比,氟伐他汀组的LVEDD、LVEDV、E峰、E峰减速度、E/A、LVEDP、左、右心室心肌肥厚指数、CVF和βMHCmRNA均显著降低或减少(P<0.01),FS、EF和αMHCmRNA显著升高(P<0.01)。结论氟伐他汀能抑制大鼠AMI后左室重塑,改善血流动力学异常和左室功能。

关键词：心肌梗死氟伐他汀心室重塑左心室功能

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叶酸降低高同型半胱氨酸大鼠主动脉内皮黏附分子VCAM-1表达

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第四军医大学学报 2005年第19期26卷 1748-1750页

作者：黎明陈健冯义柏李裕舒谷翔史春志华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管病研究所湖北武汉430022

目的:探讨叶酸治疗对高蛋氨酸(MET)喂养所致的高同型半胱氨酸(HHCY)血症大鼠主动脉内皮黏附分子VCAM-1表达的影响.方法:SD大鼠30只随机分3组:正常对照组(Control组),高蛋氨酸组(MET组)和蛋氨酸+叶酸组(MET+Folate组),每组10只,分别给予... 详细信息

目的:探讨叶酸治疗对高蛋氨酸(MET)喂养所致的高同型半胱氨酸(HHCY)血症大鼠主动脉内皮黏附分子VCAM-1表达的影响.方法:SD大鼠30只随机分3组:正常对照组(Control组),高蛋氨酸组(MET组)和蛋氨酸+叶酸组(MET+Folate组),每组10只,分别给予普通饲料,普通饲料加17 g/kg蛋氨酸,普通饲料加17 g/kg蛋氨酸和0.06 g/kg的叶酸,饲养45 d,测定血浆总同型半胱氨酸浓度(HCY),分别采用免疫组织化学染色法及RT-PCR法检测大鼠的主动脉VCAM-1蛋白及mRNA表达.结果:高MET组血浆HCY浓度明显高于Control组[(140.7±36.9)μmol/Lvs(6.5±1.1)μmol/L,P<0.05],MET+Folate组血浆HCY浓度明显低于高MET组[(50.6±21.8)μmol/Lvs(140.7±36.9)μmol/L,P<0.05];在高MET组中,主动脉内皮表达的细胞黏附分VCAM-1在蛋白及mRNA水平均较Control组明显增加,而MET+Folate组减少蛋氨酸饮食诱导的HHCY血症所致的主动脉内皮表达的细胞黏附分子VCAM-1表达.结论:补充叶酸显著降低血浆HCY水平,也降低HHCY大鼠主动脉内皮细胞黏附分子VCAM-1的表达.

关键词：高同型半胱氨酸黏附分子VCAM-1 叶酸

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氧化苦参碱对心肌缺血再灌注损伤MDA变化及超微结构的影响

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山东医药 2005年第19期45卷 22-23页

作者：余志华冯义柏华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管病研究所湖北武汉430022

近年来研究发现,氧化苦参碱(OMT)能够清除体外模拟 Fenton反应产生的羟自由基,并且能够抑制肿瘤坏死因子(TNF)的释放.2000～2004年,我们通过测定间接反映脂质氧化及部分反映氧自由基的丙二醛(MDA)和分析心肌细胞的超微结构,重点探讨OMT... 详细信息

近年来研究发现,氧化苦参碱(OMT)能够清除体外模拟 Fenton反应产生的羟自由基,并且能够抑制肿瘤坏死因子(TNF)的释放.2000～2004年,我们通过测定间接反映脂质氧化及部分反映氧自由基的丙二醛(MDA)和分析心肌细胞的超微结构,重点探讨OMT在缺血再灌注过程中对心肌的保护作用.

关键词：心肌缺血再灌注损伤氧化苦参碱丙二醛

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扩张型心肌病小鼠Th1/Th2细胞亚群及其相关细胞因子的分析

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中国免疫学杂志 2005年第5期21卷 336-339页

作者：袁璟廖玉华汪朝晖刘仲平董继华王金平华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科心血管病研究所武汉430022 华中科技大学同济医学院血液病研究所武汉430022 华中科技大学同济医学院病毒学实验室武汉430022

目的:探讨体液免疫在扩张型心肌病发病机制中的重要性。方法:以线粒体腺苷酸转位酶(adeninenucleotidetranslocator,ANT)合成肽免疫液免疫小鼠建立扩张型心肌病动物模型(DCM组) ,运用三色荧光标记流式细胞术检测其脾淋巴细胞中Th细胞亚... 详细信息

目的:探讨体液免疫在扩张型心肌病发病机制中的重要性。方法:以线粒体腺苷酸转位酶(adeninenucleotidetranslocator,ANT)合成肽免疫液免疫小鼠建立扩张型心肌病动物模型(DCM组) ,运用三色荧光标记流式细胞术检测其脾淋巴细胞中Th细胞亚群分布,ELISA法检测其血清细胞因子IFN γ、IL 4、IL 2、IL 6、TNF α的表达及其抗ANT自身抗体的产生。以不含肽的免疫液免疫小鼠为对照组。结果:DCM组小鼠Th1及Th2细胞亚群较对照组均有增多,以Th2更为显著,且Th1/Th2比值明显低于对照组(P均<0 0 1) ;IL 4、IL 6和TNF α表达明显增高,而IFN γ和IL 2却较对照组明显降低(P均<0 0 1) ;抗ANT自身抗体均为阳性,对照组为阴性。结论:ANT合成肽诱导扩张型心肌病时Th细胞均被激活,Th2细胞介导的体液免疫应答在该病发病机理中起着优势作用。

关键词：扩张型心肌病 Th1细胞亚群流式细胞术细胞因子自身抗体

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