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中华器官移植杂志 2012年第7期33卷 417-421页

作者：郭晖周洪敏昌盛程敦秀张伟杰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究心脏移植术后移植心中抗体介导的排斥反应（AMR）的发生情况及其组织病理学特征。方法2003年1月至2007年12月接受心脏移植的受者10例。术后受者移植心功能异常时，以及术后1个月、3个月、1年、2年和3年时进行移植心心内膜心肌... 详细信息

目的研究心脏移植术后移植心中抗体介导的排斥反应（AMR）的发生情况及其组织病理学特征。方法2003年1月至2007年12月接受心脏移植的受者10例。术后受者移植心功能异常时，以及术后1个月、3个月、1年、2年和3年时进行移植心心内膜心肌活检（EMB），共取得17份活检组织样本，进行常规病理学和CAd免疫组织化学染色。依据2004年国际心脏和肺移植学会（ISHLT）的病理学诊断体系以及移植心AMR诊断体系进行病理学诊断。CAd免疫组织化学染色结果以0至＋＋＋予以分级。结果10例17次EMB中，1次样本不合格，余16次EMB中，7例次诊断为C4d阳性AMR，3例4次诊断为急性细胞性排斥反应，2例次诊断为Quilty损伤。7例次AMR中，1例合并急性细胞性排斥反应，余6例次均为单独发生。10例受者中，1例移植后20个月死亡，尸体解剖检查诊断为慢性排斥反应合并AMR和急性细胞性排斥反应（ISHLT分级3级）。其移植心AMR组织学特征为局灶性至广泛性心肌间毛细血管内皮C4d阳性沉积。结论AMR是心脏移植术后主要的并发症之一，EMB及其C4d免疫组织化学染色是早期诊断AMR的有效方法。

关键词：心脏移植抗体介导性排斥反应补体C4d 病理学

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致敏患者肾移植的处理策略

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中华器官移植杂志 2010年第6期31卷 325-327页

作者：张伟杰华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

随着肾移植例数的增长,近年来国内外各大移植中心的移植物功能丧失及致敏受者也迅速增多.2007年美国器官获取及移植网络（OPTN）和器官移植受体科学登记处（SRTR）的年报显示,在等待肾移植的患者中高致敏患者（群体反应性抗体≥80%）占1... 详细信息

随着肾移植例数的增长,近年来国内外各大移植中心的移植物功能丧失及致敏受者也迅速增多.2007年美国器官获取及移植网络（OPTN）和器官移植受体科学登记处（SRTR）的年报显示,在等待肾移植的患者中高致敏患者（群体反应性抗体≥80%）占15.8%.体内预存的高水平的抗HLA抗体不仅可诱发各种类型的排斥反应、延缓移植物功能恢复,而且还与移植物功能丧失相关.目前,对致敏受者的临床处理尚缺乏公认的理想措施,本文就有关问题进行探讨,以期为致敏受者的肾移植提供借鉴.

关键词：致敏患者肾移植群体反应性抗体致敏受者抗HLA抗体器官获取功能丧失移植物

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肾移植前对致敏患者干预治疗的方案及疗效分析

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中华器官移植杂志 2013年第4期34卷 202-205页

作者：陈栋张伟杰陈刚周平昌盛朱兰陈松施辉波杜敦峰陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030 教育部/卫生部器官移植重点实验室

目的总结和探讨肾移植前致敏患者干预治疗的方案及疗效分析。方法选择2008年至2011年接受肾移植的致敏受者43例，根据术前群体反应性抗体（PRA）水平分为轻度致敏组和高度致敏组，术前经血浆置换、输注静脉用免疫球蛋白（IVIG）的干预... 详细信息

目的总结和探讨肾移植前致敏患者干预治疗的方案及疗效分析。方法选择2008年至2011年接受肾移植的致敏受者43例，根据术前群体反应性抗体（PRA）水平分为轻度致敏组和高度致敏组，术前经血浆置换、输注静脉用免疫球蛋白（IVIG）的干预治疗，经过HLA配型，联合应用抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）诱导治疗，应用他克莫司（Tac）、吗替麦考酚酯（MMF）和泼尼松的免疫抑制方案，术后定期检测PRA水平。所有受者随访12-36个月，观察受者／移植肾存活率，急性排斥反应的发生率，移植肾功能和PRA水平的变化，以及进行移植肾穿刺活检。结果经干预治疗后，轻度致敏组中14例PRA完全转阴，高度致敏组中5例PRA完全转阴，其余受者PRA水平均较干预治疗前明显下降（P〈O．05）。术后两组受者均出现PRA水平的爬升。轻度致敏组和高度致敏组的人存活率分别为95．6％和90％，移植肾存’活l率分别为82．6％和70％。轻度致敏组有3例活检证实发生急性细胞性排斥反应，高度致敏组有5例活检证实发生急性排斥反应，急性细胞性排斥反应均经甲泼尼龙冲击治疗3～5d后逆转。两组共10例受者出现血肌酐缓慢爬升，经移植肾穿刺活检发现慢性移植肾肾病的表现。结论血浆置换和输注IVIG的干预治疗，良好的HLA配型，ATG诱导治疗，以及应用Tac＋MMF＋泼尼松的免疫抑制方案是致敏受者肾移植成功的前提。

关键词：致敏肾移植治疗方案效果

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抑制Caspase-8基因表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用

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中华器官移植杂志 2009年第11期30卷 678-681页

作者：陈栋朱珉郭晖刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8（Caspase-8）基因的表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法构建针对大鼠Caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。将Lewis大鼠随机分为3组，每组8只。（1）假手术组：麻... 详细信息

目的观察抑制半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8（Caspase-8）基因的表达对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用。方法构建针对大鼠Caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。将Lewis大鼠随机分为3组，每组8只。（1）假手术组：麻醉后，取腹部正中切口，缝合关腹；（2）磷酸盐缓冲液（PBS液）组：阻断肝门血流前48h经门静脉注射PBS液1ml，然后行肝脏缺血再灌注；（3）shRNA组：阻断肝门血流前48h经门静脉注射Caspase-8 shRNA 50μg（总体积为1m1），然后行肝脏缺血再灌注。肝脏缺血再灌注的方法为阻断大鼠70％入肝血流40min。于再灌注6h、12h、24h、3d、5d、7d时检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；检测肝组织中Caspase-8 mRNA的表达、细胞凋亡情况、丙二醛（MDA）以及超氧化物岐化酶（SOD）的含量。结果与PBS液组比较，shRNA组再灌注6、12、24h，血清中A11、和AST水平显著降低（P〈0．05）；肝组织中Caspase-8mRNA水平、肝细胞凋亡指数（shRNA组和PBS液组分别为22．33％±4．28％和35．24％±2．33％）以及肝组织中MDA含量[shRNA组和PBS液组分别为（94．5±11．2）nmol／mg和（133．5±12．4）nmol／mg]均显著降低（P〈0．05），而肝组织中SOD活性显著升高[shRNA组和PBS液组分别为（21．6±3．7）U／mg和（12．2±3．1）U／mg，P〈0．05]。结论通过RNA干扰Caspase-8基因的表达可以抑制肝细胞凋亡的发生，减轻肝脏缺血再灌注损伤。

关键词：肝脏再灌注损伤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8 RNA干扰

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循环肿瘤细胞与甲胎蛋白联合检测诊断原发性肝癌

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中华肝胆外科杂志 2016年第7期22卷 450-453页

作者：冯锦城杨博代辰张波谭如梦王媒西魏来陈栋陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨循环肿瘤细胞（CTC）、甲胎蛋白（AFP）单独及联合检测诊断原发性肝癌的临床价值。方法纳入2013年11月至2015年9月在华中科技大学同济医学院附属同济医院行同种异体肝移植术的患者69例。所有患者术前抽血检测AFP，采用Cell Sear... 详细信息

目的探讨循环肿瘤细胞（CTC）、甲胎蛋白（AFP）单独及联合检测诊断原发性肝癌的临床价值。方法纳入2013年11月至2015年9月在华中科技大学同济医学院附属同济医院行同种异体肝移植术的患者69例。所有患者术前抽血检测AFP，采用Cell Search System设备检测外周血CTC，并进行统计学分析。结果肝癌组患者（n=42）血液CTC和AFP水平明显高于良性肝病组（n=27），差异均有统计学意义（P〈0．05）。就单个肿瘤标志物而言，CTC的敏感度、特异度和准确度分别为69．0％、92．6％和78．3％，均高于AFP。AFP和CTC的受试者工作特征（ROC）曲线下面积分别为0．780和0．814。CTC和AFP联合检测其敏感度为83．3％，准确度为82．6％，均显著高于单项检测（P〈0．05）。此外，在AFP〈400μg／L的肝癌患者中，CTC阳性率为61．3％。结论CTC对肝癌的诊断效能优于AFP，联合检测CTC和AFP可提高肝癌的诊断敏感性。CTC对AFP〈400μg/L的肝癌患者有一定的诊断价值，CTC检测可提高AFP阴性肝癌患者的诊断率。

关键词：循环肿瘤细胞甲胎蛋白原发性肝癌

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小鼠胰岛的分离与纯化

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中华实验外科杂志 2011年第2期28卷 206-208,I0002页

作者：李明陈栋李永海张伟杰华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法.方法采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶（分别为0.5、1.0、1.5 g/L）消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛.双硫腙（DTZ）对胰岛进行特异性染色... 详细信息

目的探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法.方法采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶（分别为0.5、1.0、1.5 g/L）消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛.双硫腙（DTZ）对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,葡萄糖刺激释放试验体外测胰岛功能.结果不同浓度的胶原酶在不同时间内消化胰腺后收获的胰岛数量有较大的差异,其中采用0.5 g/L胶原酶V、38 ℃水浴消化20 min组收获量最大为（230±20）个胰岛细胞团,纯度约为90%.DTZ染色后胰岛呈腥红色,形态完整.葡萄糖刺激释放实验示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的2.3倍.结论胶原酶浓度、消化时间和温度是影响小鼠胰岛分离结果的重要因素,当胶原酶浓度为0.5 g/L,消化时间20 min时可获得数量较多,纯度较好的胰岛细胞.

关键词：胰岛分离纯化

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低分子质量硫酸葡聚糖对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用

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中华器官移植杂志 2007年第9期28卷 522-524页

作者：徐婧谢林陈刚陈松黄亚冰尹注增陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究相对分子质量为5000的硫酸葡聚糖(DXS)对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用及其可能机制。方法切取Balb/c小鼠的心脏,采用改良Langendorff灌注装置,以含人血清的灌注液进行心脏灌注,实验组1和实验组2的灌注液中加入DXS(终浓... 详细信息

目的研究相对分子质量为5000的硫酸葡聚糖(DXS)对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用及其可能机制。方法切取Balb/c小鼠的心脏,采用改良Langendorff灌注装置,以含人血清的灌注液进行心脏灌注,实验组1和实验组2的灌注液中加入DXS(终浓度分别为0.1 mg/ml和2.0mg/ml),以不含DXS的人血清灌注液为对照组,记录心脏搏动时间,对照组心脏停搏时,同时切取3个组的心脏组织,HE染色,观察组织学变化,免疫组化方法观察心脏组织中补体C3c、C5b-9和IgM、IgG的沉积情况。结果实验组1心脏搏动时间为(49±15)min,实验组2为(123±19)min,对照组为(17±11)min,两个实验组的心脏搏动时间均显著长于对照组(P<0.05)。HE染色见对照组心肌组织水肿明显,组织间隙变宽,而在灌注相同时间的实验组心脏中此改变不明显。免疫组化染色显示实验组2的心脏组织内C3c和C5b-9沉积较对照组明显减少。结论低分子质量的DXS对人血清灌注下的小鼠离体心脏具有保护作用,这可能与DXS抑制补体激活,从而抑制补体介导的异种超急性排斥反应有关。

关键词：硫酸葡聚糖血清血液灌注小鼠人类心室功能,左

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亲属活体肾移植101例分析

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中华器官移植杂志 2006年第5期27卷 265-267页

作者：曾凡军刘斌蒋继贫张伟杰林正斌陈知水明长生朱兰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的总结16年亲属活体肾移植的经验。方法101例亲属活体肾移植,除3例为夫妻间供肾外,其余为血缘亲属供肾。供、受者为同卵孪生2例,HLA全配24例,HLA单倍体相同69例,HLA有5个抗原错配者4例,HLA完全错配者2例。73例取供者右肾,28例取左肾;... 详细信息

目的总结16年亲属活体肾移植的经验。方法101例亲属活体肾移植,除3例为夫妻间供肾外,其余为血缘亲属供肾。供、受者为同卵孪生2例,HLA全配24例,HLA单倍体相同69例,HLA有5个抗原错配者4例,HLA完全错配者2例。73例取供者右肾,28例取左肾;100例经开放手术取肾,1例经腹腔镜取肾。术后采用环孢素A(或他克莫司)、硫唑嘌呤(或霉酚酸酯)及泼尼松预防排斥反应。结果所有供者术后1周内出院,随访6个月,血肌酐正常。术后96例受者存活,存活时间最长者达15年,其中4例移植肾功能丧失,其原因分别为超急性排斥反应(1例,术中切除肾脏)、慢性移植肾肾病与肾病复发(3例);5例死亡,除1例术后发生移植肾功能恢复延迟,透析期间因肺出血死亡外,另4例死亡与移植肾无关。术后5例发生急性排斥反应,4例Banff分级为Ⅰ级,经甲泼尼龙冲击治疗,4例逆转,1例无效,恢复透析治疗。术后2例发生尿瘘,5例发生移植肾输尿管慢性梗阻,经手术治疗痊愈。结论术前对供、受者进行全面综合评估是亲属活体肾移植成功的保证;亲属活体肾移植的组织配型好,供肾缺血时间短,排斥反应发生少,免疫抑制剂用量小,移植肾长期存活率高。

关键词：肾移植活体供者

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猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学特点

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中华器官移植杂志 2009年第9期30卷 515-518页

作者：陈松李俊华向莹钟山郭晖王虹吴瑛朱建国陈实陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反... 详细信息

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反应时对移植肾进行免疫组织化学（测定补体、抗体的沉积及各类型淋巴细胞浸润情况）及病理学分析。结果3只受者均发生了加速性排斥反应。其中2只受者在预致敏后血清中供者特异性抗体明显增加，对供者的淋巴毒反应明显升高；肾移植后受者血清中供者特异性抗体及针对供者的淋巴毒进一步升高。苏木精－伊红染色显示排斥反应的移植肾内有明显的动脉坏死、血栓形成、间质出血、中性粒细胞浸润；免疫组织化学及荧光染色显示移植肾内有大量的补体、抗体沉积（主要为IgG），而各种类型的淋巴细胞浸润少见。另1只受者体内的供者特异性抗体及对供者淋巴毒反应的升高程度不如前2只明显，病理学变化以肾小管损伤为主。结论皮肤移植预致敏可以诱导受者产生程度不等的预存抗体，导致大多数移植肾在术后早期发生主要由抗体和补体介导的严重的急性体液性排斥反应。

关键词：猴肾移植皮肤移植抗体

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临床胰腺和胰、肾联合移植的现状

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中华器官移植杂志 2006年第11期27卷 699-701页

作者：明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430014

由于胰腺外分泌处理和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性，胰腺移植在移植总数和移植效果上曾远远落后于肾、心和肝等器官移植。直至近10余年，随着新型强效免疫抑制剂的临床应用、器官保存技术的改进和移植手术方式的日趋成熟，胰腺移... 详细信息

由于胰腺外分泌处理和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性，胰腺移植在移植总数和移植效果上曾远远落后于肾、心和肝等器官移植。直至近10余年，随着新型强效免疫抑制剂的临床应用、器官保存技术的改进和移植手术方式的日趋成熟，胰腺移植受者和移植胰腺的存活率均显著提高。胰、肾联合移植已成为治疗1型糖尿病、部分2型糖尿病合并尿毒症的有效方法。本文概述临床胰腺与胰、肾联合移植的现状与进展。

关键词：胰腺排斥反应肾联合移植临床应用器官保存技术胰腺外分泌免疫抑制剂 1型糖尿病 2型糖尿病

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