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同济医科大学学报 2001年第1期30卷 9-12页

作者：杨丽敏刘长金黄承钧华中科技大学同济医学院基础医学院生理学教研室武汉430030

实验在 6 3只乌拉坦麻醉、琥珀酰胆碱制动、人工呼吸的大鼠上进行。结果如下 :臂旁核 (NPB)内微量注射 NO前体 L -精氨酸 (L - Arg) ,引起平均动脉压 (MAP)显著下降 ,但对心率无明显影响。 NPB内微量注射 NO合酶抑制剂 N-硝基 - L -精氨... 详细信息

实验在 6 3只乌拉坦麻醉、琥珀酰胆碱制动、人工呼吸的大鼠上进行。结果如下 :臂旁核 (NPB)内微量注射 NO前体 L -精氨酸 (L - Arg) ,引起平均动脉压 (MAP)显著下降 ,但对心率无明显影响。 NPB内微量注射 NO合酶抑制剂 N-硝基 - L -精氨酸 (L - NNA) ,引起 MAP显著升高。 L - Arg在 NPB的降压效应可被 NPB内预注射 L - NNA或鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝所阻断。 NPB内预注射γ-氨基丁酸 (GABA )受体阻断剂荷包牡丹碱 ,可使 L - Arg在 NPB的降压效应显著减弱或消失。结果表明 :1NO在 NPB具有降压作用 ,此作用是通过激活鸟苷酸环化酶而实现的 ;2 NPB的内源性 NO具有紧张性降压作用 ,并参与正常血压水平的维持 ;3NO在 NPB的降压作用至少部分是由该局部的

关键词：一氧化氮臂旁核平均动脉压亚甲蓝荷包牡丹碱

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抗同型磺基丙氨酸单克隆抗体的制备和定性

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同济医科大学学报 2001年第5期30卷 410-412页

作者：刘长金李爱胡新武张亮品华中科技大学同济医学院基础医学院生理学教研室武汉430030

用戊二醛将 L-同型磺基丙氨酸 ( L- HCA)连接到牛血清白蛋白 ( BSA) ,形成 L- HCA- BSA连接物。用 L- HCA-BSA免疫小鼠后 ,收集脾淋巴细胞 ,并与骨髓瘤细胞融合。用含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核甙 ( HAT)培养基保留杂交细胞。用 EL... 详细信息

用戊二醛将 L-同型磺基丙氨酸 ( L- HCA)连接到牛血清白蛋白 ( BSA) ,形成 L- HCA- BSA连接物。用 L- HCA-BSA免疫小鼠后 ,收集脾淋巴细胞 ,并与骨髓瘤细胞融合。用含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核甙 ( HAT)培养基保留杂交细胞。用 EL ISA法筛选能够分泌与 L- HCA- BSA产生免疫反应的杂交细胞。通过 EL ISA抗体系列稀释试验和抗体吸收试验 ,确定抗体特异性。结果表明 ,抗 L- HCA单克隆抗体 ( Mc Ab) 2 D4能特异地与 L- HCA- BSA产生免疫反应。用 L- HCA- BSA吸收 L- HCA Mc Ab,可明显降低或取消 L- HCA抗体与 L- HCA- BSA的免疫反应。结果提示 :L- HCAMc Ab对 L- HCA- BSA具有特异性 ,可用于免疫组织和细胞化学研究 L- HCA在神经系统中的分布和定位。

关键词： L-同型磺基丙氨酸单克隆抗体酶联免疫吸附测定制备

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不同年龄大鼠神经系统tau蛋白的表达特性

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同济医科大学学报 2001年第3期30卷 193-196页

作者：卢峡李娜江宇张苏琳魏泽兰王建枝华中科技大学同济医学院基础医学院病理生理学教研室

通过研究不同年龄组大鼠脑组织中微管相关蛋白tau的表达特性和磷酸化位点的差异，为阿尔茨海默病（AD）脑组织中tau蛋白的研究提供资料。将大鼠分为胎鼠、新生鼠、成年鼠和老年鼠4组，取各组大鼠的脑组织制成匀浆，用免疫印迹法检测各组... 详细信息

通过研究不同年龄组大鼠脑组织中微管相关蛋白tau的表达特性和磷酸化位点的差异，为阿尔茨海默病（AD）脑组织中tau蛋白的研究提供资料。将大鼠分为胎鼠、新生鼠、成年鼠和老年鼠4组，取各组大鼠的脑组织制成匀浆，用免疫印迹法检测各组tau蛋白的分子量范围及磷酸化状态。结果发现非磷酸化依赖性抗tau抗体R134d的免疫显色结果显示：胎鼠和新生鼠主要含低分子量（14.2～28.8 ku）tau蛋白；成年鼠除在脊索中显示高分子量tau（67.5～96.6 ku）外，大脑灰质和白质中的tau蛋白主要集中在中分子量（28.8～42.7 ku）范围；老年鼠的灰质、白质和脊索中均含高分子量tau蛋白，且在灰质和白质组分中中分子量tau的含量比成年组显著增高。Tau-1的显色性质与R134 d相似。PHF-1和M4只在胎鼠和新生鼠显带。认为大鼠神经系统tau蛋白的表达性质及其磷酸化状态随年龄增长而显著不同。

关键词：阿尔茨海默病 tau蛋白磷酸化

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Anisomycin过度激活丝裂原活化蛋白激酶使tau发生过度磷酸化(英文)

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生理学报 2008年第4期60卷 485-491页

作者：王群张家玉刘世杰李宏莲华中科技大学同济医学院病理生理学教研室武汉430030 华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室武汉430030

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的病理特征之一是神经元内存在神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs),后者是由过度磷酸化的微管相关蛋白tau形成的双股螺旋细丝(pairedhelical filaments,PHFs)构成。为了探讨丝裂原活... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的病理特征之一是神经元内存在神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs),后者是由过度磷酸化的微管相关蛋白tau形成的双股螺旋细丝(pairedhelical filaments,PHFs)构成。为了探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在微管相关蛋白tau磷酸化中的作用及机制,本实验用0.1μg/mL、0.2μg/mL和0.4μg/mL三种不同浓度的MAPK激动剂anisomycin处理小鼠成神经瘤细胞株(mouse neuroblastoma cells,N2a),检测MAPK活性的变化及其与tau蛋白多个AD相关位点过度磷酸化的关系,并检测糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的活性变化。结果显示,anisomycin以剂量依赖的方式激活MAPK活性,但免疫印迹结果显示tau蛋白的Ser-198/199/202位点和Ser-396/404位点的过度磷酸化只在anisomycin浓度为0.4μg/mL时出现,三种浓度的anisomycin均未引起tau蛋白Ser-214位点磷酸化的改变;同时,GSK-3活性在anisomycin为0.1μg/mL时没有明显变化,当anisomycin浓度升高到0.2μg/mL和0.4μg/mL时出现明显增高,而PKA的活性没有明显的改变。使用GSK-3的特异性抑制剂氯化锂(LiCl)则完全阻断MAPK被过度激活导致的tau蛋白磷酸化水平的增高,而同时MAPK活性不受影响。以上结果提示:过度激活MAPK可以导致tau蛋白Ser-198/199/202和Ser-396/404位点过度磷酸化,其机制可能涉及MAPK激活GSK-3的间接作用。

关键词：阿尔茨海默病丝裂原活化蛋白激酶 tau蛋白磷酸化糖原合酶激酶-3 蛋白激酶A

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中药单体对迟发性性腺功能减退模型大鼠的疗效与作用机制研究

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中国性科学 2025年第1期34卷 129-133页

作者：贾波尹漾阳姚俊波刘加元张浩宋来新程汉波陈朝晖武汉市东西湖区人民医院泌尿外科武汉430040 湖北中医药大学基础医学院病理学教研室武汉430065 武汉市东西湖区人民医院中医科武汉430040 武汉市东西湖区人民医院药剂科武汉430040 华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科武汉430022

目的探讨中药单体对迟发性性腺功能减退(LOH)模型大鼠的疗效与作用机制。方法对老年雄性SD大鼠腹腔注射环磷酰胺复制LOH模型,分别采用不同中药单体(淫羊藿苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Rg1)灌胃,60 d后称量大鼠体重和生殖系统器官重量,采用... 详细信息

目的探讨中药单体对迟发性性腺功能减退(LOH)模型大鼠的疗效与作用机制。方法对老年雄性SD大鼠腹腔注射环磷酰胺复制LOH模型,分别采用不同中药单体(淫羊藿苷、毛蕊花糖苷、人参皂苷Rg1)灌胃,60 d后称量大鼠体重和生殖系统器官重量,采用苏木精-伊红(HE)染色法检测各组睾丸形态学变化,采用酶联免疫吸附试验法检测各组血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮水平,采用Western blot法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组雄激素受体(AR)蛋白质和信使RNA表达水平。结果人参皂苷组可增加LOH模型大鼠体重、精囊、附睾、睾丸重量且效果最显著(P<0.01);淫羊藿苷组可增加精囊、附睾、睾丸重量(P<0.01);毛蕊花糖苷组可增加精囊重量(P<0.05)。三种中药单体均可改善LOH模型大鼠睾丸生精小管病变,睾丸组织形态接近正常,各级生精细胞和精子数量均增加。三种中药单体均可降低LOH模型大鼠血清LH和FSH水平,提高血清睾酮水平,淫羊藿苷组效果最显著(P<0.01)。三种中药单体均可增加LOH模型大鼠睾丸中AR蛋白质和信使RNA水平,淫羊藿苷组效果最显著,高于丙酸睾酮组(P<0.01)。结论人参皂苷Rg1增加LOH模型大鼠体重和生殖系统器官重量效果最显著,淫羊藿苷对LOH模型大鼠血清生殖激素和AR蛋白质表达效果最显著,三种中药单体均可改善LOH模型大鼠睾丸退行性改变。

关键词：迟发性性腺功能减退淫羊藿苷毛蕊花糖苷人参皂苷

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谷氨酸及其受体拮抗剂对大鼠海马CA3区诱发电位的影响

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中国药理学通报 2004年第4期20卷 414-417页

作者：孙铁胡还忠徐旭林余上斌欧阳昌汉曲玲吕青郭莲军华中科技大学同济医学院药理学教研室武汉430030 华中科技大学同济医学院机能学中心实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院生理学教研室武汉430030

目的探讨谷氨酸及其受体拮抗剂对正常和脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位 (populationspike,PS) ;结扎大鼠双侧颈总动脉 ,造成急性不完全性全脑缺血 ,观察PS幅度的变化 ;... 详细信息

目的探讨谷氨酸及其受体拮抗剂对正常和脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位 (populationspike,PS) ;结扎大鼠双侧颈总动脉 ,造成急性不完全性全脑缺血 ,观察PS幅度的变化 ;采用局部微量给药 ,观察药物对PS幅度的影响。结果 ①Glu 5、1 0、2 0nmol注入后 ,PS的幅度均升高 ;当给予Glu 5 0nmol时PS的幅度则显著降低。②急性不完全性全脑缺血 (结扎双侧颈总动脉 )后 ,PS的幅度亦显著降低。③谷氨酸受体拮抗剂MK 80 1 5 0nmol能降低正常大鼠的PS幅度 ,能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低 ,并能减弱 1 0nmolGlu升高PS幅度的作用和 5 0nmolGlu降低PS幅度的作用。结论谷氨酸在一定浓度范围内可增强大鼠海马CA3区的突触传递功能 ,其受体拮抗剂MK 80 1对高浓度谷氨酸和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。

关键词：脑缺血群峰电位海马CA3区谷氨酸 MK-801

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抑制磷酸酶和tau过度磷酸化诱导神经细胞凋亡

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中华神经科杂志 2001年第4期34卷 207-209页

作者：夏若寒刘声远王建枝华中科技大学同济医学院病理生理学教研室武汉430030

目的　探讨磷酸酶活性抑制、tau蛋白异常磷酸化与神经细胞变性死亡的关系。方法　磷酸酶 (PP) 2A/PP 1抑制剂岗田酸 (okadaicacid ,OA) 10nmol/L与成神经细胞瘤细胞 (SH SY5Y)共培养 ,DNA 梯带和末端转移酶标记技术。结果　用 10nmol/... 详细信息

目的　探讨磷酸酶活性抑制、tau蛋白异常磷酸化与神经细胞变性死亡的关系。方法　磷酸酶 (PP) 2A/PP 1抑制剂岗田酸 (okadaicacid ,OA) 10nmol/L与成神经细胞瘤细胞 (SH SY5Y)共培养 ,DNA 梯带和末端转移酶标记技术。结果　用 10nmol/LOA与SY5Y细胞共培养 2 4h和 4 8h均可引起DNA 梯带出现 ,此时末端转移酶标记显示阳性细胞数由 2 16%± 0 94 %分别增多至 18 0 5 %±3 5 7% (P <0 0 1)和 2 2 5 2 %± 4 78% (P <0 0 1)。结论　由于上述检测指标均与细胞凋亡有关 ,提示抑制PP 2A和部分抑制PP 1引起tau蛋白异常磷酸化可能通过神经细胞凋亡而引起AD患者神经细胞丢失。

关键词：阿尔茨海默病 tau蛋白类磷酰化神经元脱噬作用

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β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用

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中国应用生理学杂志 2007年第1期23卷 111-115页

作者：马立群胡还忠田琴汪长东王晓敏余承高华中科技大学同济医学院基础医学部生理教研室湖北武汉430030

目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)供体左旋精氨酸(L-argnine,L-Arg)对小鼠回肠自主收缩幅度的影响,探讨β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用。方法:应用张力换能器记录标本自主收缩的方法,以回肠肌条自主收缩幅度变... 详细信息

目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)供体左旋精氨酸(L-argnine,L-Arg)对小鼠回肠自主收缩幅度的影响,探讨β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用。方法:应用张力换能器记录标本自主收缩的方法,以回肠肌条自主收缩幅度变化为指标,观察一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂L-NNA,可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylyl cyclase,sGC)抑制剂ODQ(1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-α]quinoxalin-1-one),β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素(Isoprenaline,ISO)和拮抗剂普萘洛尔(Propranolol)对NO作用的影响。结果:①L-Arg抑制小鼠回肠自主收缩幅度,呈浓度依赖性。②L-NNA(3×10-4mol/L),ODQ(3×10-4mol/L)均减弱L-Arg的抑制效应。③Propranolol(3×10-6mol/L)明显减弱L-Arg的抑制效应。④ISO(1×10-7mol/L)明显增强L-Arg的抑制效应。而Propranolol(3×10-6mol/L)和ISO(1×10-7mol/L)孵育组,L-Arg的抑制作用无明显变化。结论:L-Arg经NOS催化生成NO后经cGMP途径发挥对小鼠回肠自主收缩的抑制作用,β-受体途径也部分参与了NO的作用过程。

关键词：一氧化氮(NO) 自主收缩 β-肾上腺素能受体

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PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强中的作用

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中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 161-165页

作者：胡晓玲肖鸿美胡新武李艾张亮品张兰秋华中科技大学同济医学院基础医学部生理教研室湖北武汉430030

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB... 详细信息

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB)和激动剂mc PAF ,以群体锋电位 (populationspikesPS)幅度为指标 ,观察PP CA3通路的LTP变化。结果 :① 0 .2 μmol/L的银杏内酯B对CA3区的诱发电位无影响 ,但可抑制CA3区的LTP。② 0 .2 5mol/L的三氯化铝不影响CA3区LTP ,但可加强银杏内酯B的抑制作用。③ 4 0 μmol/Lmc PAF对强直刺激引起的LTP无影响 ,却可减轻 0 .5mol/L三氯化铝的对LTP的抑制作用。结论 :PAF受体在刺激PP诱发的CA3区LTP中起作用 ,而金属铝对CA3区LTP的抑制作用至少部分与PAF受体有关。

关键词： PAF受体铝血小板活化因子长时程增强 LTP 诱发电位银杏内酯B

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急性缺氧对肺动脉内皮细胞血栓素合酶基因表达及PGI_2、TXA_2代谢产物的影响

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同济医科大学学报 2001年第4期30卷 295-297页

作者：孔炜方华丰王迪浔孙秉庸华中科技大学同济医学院基础医学院病理生理学教研室武汉430030

为进一步研究 PGI2 和 TXA2 在慢性缺氧性肺动脉高压和机体对慢性缺氧习服过程中的作用 ,动态观察了慢性缺氧进程中肺动脉内皮细胞 (PAEC)血栓素合酶 (TXS)基因表达及 PGI2 、TXA2 代谢产物的变化。结果显示 :常氧培养的 PAEC,急性缺氧... 详细信息

为进一步研究 PGI2 和 TXA2 在慢性缺氧性肺动脉高压和机体对慢性缺氧习服过程中的作用 ,动态观察了慢性缺氧进程中肺动脉内皮细胞 (PAEC)血栓素合酶 (TXS)基因表达及 PGI2 、TXA2 代谢产物的变化。结果显示 :常氧培养的 PAEC,急性缺氧后 TXS、 6 -酮 - PGF1α、TXB2 均增加 ,以 6 -酮 - PGF1α增加更明显 ,TXA2 / PGI2 比值降低 ;慢性缺氧 [PO2 (5 .3± 0 .7) k Pa]培养的 PAEC TXS、 6 -酮 - PGF1α、TXB2 均高于同代常氧组 ,复氧再急性缺氧 ,6 -酮 - PGF1α在第 2、 4代减少 ,第 6代不变 ,TXS、TXB2 在第 4代增加 ,第 6代减少 ;TXA2 / PGI2 在第 2、 4代增加 ,第 6代减少。提示在慢性缺氧的不同阶段 ,由急性缺氧所致 TXS、 6 -酮 - PGF1α、 TXB2 及 TXA2 / PGI2

关键词：缺氧性肺动脉高压内皮细胞血栓素合酶基因表达 PGI2 TXA2 前列环素血栓素A2

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