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华中科技大学学报（医学版） 2009年第5期38卷 575-580页

作者：李林茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系武汉430030

目的比较观察大鼠肠道内乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、P物质(substance P,SP)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)4种阳性神经元的分布特征及其相互关系。方法应用酶组织化学和免疫组织化学技术,分别观察AChE、NOS、SP、VIP阳性神经元在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠和直肠的分布。结果4种阳性神经元(胞体和纤维)遍布肠壁各层,其分布状态有相随性和相似性规律,即从十二指肠、空肠到回肠逐渐增多,从结肠到直肠逐渐减少;AChE阳性神经元在肠壁各层都十分丰富,NOS和SP阳性神经元以肠肌丛较为丰富,VIP阳性神经元以黏膜下神经丛和黏膜层较为丰富;分布密度依次为AChE>NOS>VIP>SP。4种神经元彼此有共染(递质共存)现象,肠肌丛内神经元互相有突触样联系。结论AChE、SP、VIP和NOS阳性神经元胞体及神经纤维在不同肠段的分布密度有明显差异,而肠肌丛内各种神经元在形态学上有密切联系,由此推论在肠动力功能调节上它们可能起协调作用。

关键词：乙酰胆碱酯酶 P物质血管活性肠肽一氧化氮合酶大鼠肠道

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P物质、血管活性肠肽和乙酰胆碱能神经在大鼠肠道内的分布及其关系

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神经解剖学杂志 2009年第6期25卷 663-666页

作者：李林茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院神经生物学系武汉430030

应用乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学和PAP免疫组织化学方法,比较观察P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)和AChE三种阳性神经元在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠和直肠内的分布特征及其相互关系。结果显示:SP、VIP、AChE阳性神经神经元和纤维均... 详细信息

应用乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学和PAP免疫组织化学方法,比较观察P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)和AChE三种阳性神经元在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠和直肠内的分布特征及其相互关系。结果显示:SP、VIP、AChE阳性神经神经元和纤维均分布于肠壁各层,从十二指肠、空肠到回肠逐渐增多,但从结肠到直肠则逐渐减少;AChE阳性神经元或纤维在肠壁各层最丰富,其中VIP以粘膜层和粘膜下神经丛较丰富,SP以肠肌丛较丰富;三者的分布密度为AChE>VIP>SP。AChE、SP和VIP阳性神经元胞体及神经纤维在不同肠段的分布密度有明显差异(P<0.05),提示可能与不同肠段肠动力调节功能有关。

关键词： P物质血管活性肠肽乙酰胆碱酯酶肠道大鼠

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老年性痴呆模型大鼠学习记忆功能障碍的实验探讨

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江汉大学学报（自然科学版） 2009年第1期37卷 77-79,84页

作者：李林夏保芦茹立强江汉大学医学院组织学与胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院神经生物学系武汉430030

目的:探索D-半乳糖-Aβ复合模型大鼠学习记忆功能的改变,研究老年性痴呆(AD)的发病机制.方法:(1)采用1.25%D-半乳糖腹腔注射(50mg/kg·d,连续6周)致衰老,结合双侧海马齿状回背侧注射10g/1μL凝聚态β-淀粉样肽1-40(β-amyloid pepti... 详细信息

目的:探索D-半乳糖-Aβ复合模型大鼠学习记忆功能的改变,研究老年性痴呆(AD)的发病机制.方法:(1)采用1.25%D-半乳糖腹腔注射(50mg/kg·d,连续6周)致衰老,结合双侧海马齿状回背侧注射10g/1μL凝聚态β-淀粉样肽1-40(β-amyloid peptide,Aβ1-40)的复合造模方法,拟建立AD样学习记忆功能障碍的动物模型.实验动物随机分成3组:AD模型组、假造模对照组和正常对照组.(2)以单位时间逃避潜伏期(s/3min)及其逃生错误频率(次/3min)为观察指标,进行水迷宫行为学试验测定大鼠学习记忆功能的改变.结果:AD大鼠安全逃避潜伏期明显延长,逃生错误频率高,与两对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:D-半乳糖-A复合造模致AD大鼠模型具有较好的老年性痴呆的仿真特性.水迷宫行为学试验能准确反映动物学习记忆功能.

关键词：老年性痴呆 β-淀粉样肽蛋白动物模型水迷宫试验学习记忆

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D-半乳糖-Aβ复合造模致大鼠学习记忆功能障碍及丹参酮治疗作用的研究

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江西医学院学报 2009年第1期49卷 13-16页

作者：李林茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院神经生物学系武汉430030

目的研究拟老年痴呆症(alzheimer’s disease,AD)模型大鼠学习记忆功能的改变及丹参酮的治疗作用。方法(1)实验动物随机分成4组。AD模型组:采用D-半乳糖腹腔注射和大鼠双侧海马齿状回背侧微量注射凝聚态β-淀粉样肽1-40(amyloid beta-pe... 详细信息

目的研究拟老年痴呆症(alzheimer’s disease,AD)模型大鼠学习记忆功能的改变及丹参酮的治疗作用。方法(1)实验动物随机分成4组。AD模型组:采用D-半乳糖腹腔注射和大鼠双侧海马齿状回背侧微量注射凝聚态β-淀粉样肽1-40(amyloid beta-peptide,Aβ1-40)的复合造模方法,拟建立AD样学习记忆障碍动物模型;丹参酮治疗组:AD大鼠造模24 h后给予丹参酮[50 mg/(kg.d)],溶于5 mL玉米油中灌胃14 d;假造模对照组:与AD大鼠同法注射等量生理盐水;正常对照组:大鼠不做任何处理。(2)采用水迷宫行为学实验检测各组大鼠的学习记忆功能。结果(1)AD模型大鼠发生了空间学习记忆功能障碍,与两对照组比较有显著性差异(P<0.01)。(2)丹参酮治疗组治疗后较AD模型组潜伏期缩短、误入盲端次数也明显减少。结论(1)D-半乳糖-Aβ复合造模致AD样学习记忆功能障碍的动物模型具有较好的仿真AD的特点。水迷宫实验能较真实地反应动物学习记忆功能。(2)丹参酮对AD样大鼠的学习记忆功能障碍具有一定的改善作用。

关键词： D-半乳糖 β-淀粉样肽水迷宫实验老年痴呆症学习记忆丹参酮动物实验大鼠

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SP阳性神经在大鼠肠道内分布的比较研究

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中外健康文摘 2009年第8期6卷 32-34页

作者：李林茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室湖北武汉430056 华中科技大学同济医学院神经生物学系湖北武汉430030

目的比较观察P物质(substance P ,SP))阳性神经在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠的分布特征.方法应用免疫组织化学方法 ,分别观察SP阳性神经在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠的分布规律.结果 ①肠壁各层和肠肌丛内SP阳... 详细信息

目的比较观察P物质(substance P ,SP))阳性神经在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠的分布特征.方法应用免疫组织化学方法 ,分别观察SP阳性神经在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠的分布规律.结果 ①肠壁各层和肠肌丛内SP阳性神经纤维十分丰富,以肠肌丛最丰富,多为带膨体的末梢,肠道各段肠肌丛内SP阳神经纤维的分布密度有明显差异,即从十二指肠、空肠到回肠逐渐增多,从结肠到直肠逐渐减少;②肠肌丛中SP阳性神经元胞体较少,分布于节(丛)和节间束内.肠道各段肠肌丛内SP阳性神经元的分布密度有明显的差异,回肠＞空肠＞十二指肠＞结肠＞直肠,分别为7.4 %、5.9%、5.3%、3.6%、3.1%.结论 SP阳性神经在不同肠段的分布密度有明显差异,可能与不同肠段肠动力调节功能有关.

关键词： P物质大鼠肠道

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丹参酮对血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的改善作用

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东南大学学报（医学版） 2009年第5期28卷 388-391页

作者：李林陈姿亦茹立强江汉大学医学院组织学与胚胎学教研室湖北武汉430056 中国药科大学江苏南京210009 华中科技大学同济医学院神经生物学系湖北武汉430030

目的:研究丹参酮对拟人类血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法:采用改良的大脑中动脉栓塞(MCAO)致局灶性脑缺血(3 h)和再灌注(30 min)法,建立VD样学习记忆障碍的大鼠模型。实验动物随机分成VD模型组、丹参酮治疗组... 详细信息

目的:研究丹参酮对拟人类血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法:采用改良的大脑中动脉栓塞(MCAO)致局灶性脑缺血(3 h)和再灌注(30 min)法,建立VD样学习记忆障碍的大鼠模型。实验动物随机分成VD模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组等4组。采用定位航行和空间探索试验测定大鼠的空间学习记忆功能。结果:(1)VD大鼠定位航行试验的逃避潜伏期明显延长;空间探索试验的逃避潜伏期延长更明显,而逃避频率降低,与两对照组比较有显著性差异(P<0.01)。(2)丹参酮治疗后,VD大鼠定位航行试验的逃避潜伏期缩短;空间探索试验的逃避潜伏期缩短更明显,而其安全逃避频率有明显提高。结论:(1)本研究制成的VD样学习记忆障碍的动物模型具有较好仿真人类VD的特点;水迷宫试验能较真实地反映动物学习记忆功能。(2)丹参酮对VD样大鼠的学习记忆功能障碍具有一定的改善作用。

关键词：丹参酮血管性痴呆动物模型大脑中动脉栓塞水迷宫试验学习记忆大鼠

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丹参酮对两种学习记忆功能障碍模型大鼠治疗作用的实验研究

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华中科技大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 819-822,827页

作者：李林夏保芦茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系武汉430030

目的研究丹参酮对拟人类阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VD)2种模型大鼠学习、记忆功能障碍的改善作用。方法①实验动物随机分成5组:痴呆(AD/VD)模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组。VD模型组:应用改良的大脑中动脉线栓塞(M... 详细信息

目的研究丹参酮对拟人类阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VD)2种模型大鼠学习、记忆功能障碍的改善作用。方法①实验动物随机分成5组:痴呆(AD/VD)模型组、丹参酮治疗组、假造模对照组和正常对照组。VD模型组:应用改良的大脑中动脉线栓塞(MCAO)法建模;AD模型组:应用D-半乳糖腹腔注射和海马内注射β-淀粉样肽蛋白片段1-40(Aβ1-40)复合造模方法建模。丹参酮治疗组:VD大鼠造模完成后或AD大鼠造模24h后给予丹参酮[50mg/(kg·d)],溶于5ml玉米油中灌胃14d。假造模对照组:与VD大鼠同法,但不做插线、结扎;与AD大鼠同法注射等量溶媒。正常对照组:大鼠不做任何处理。②采用水迷宫行为学实验,以单位时间逃避潜伏期及其频率为指标,测定大鼠空间学习、记忆功能。结果①AD/VD大鼠逃避潜伏期明显延长,逃生错误频率高,与两个对照组比较差异均有显著性意义。②丹参酮治疗组大鼠较痴呆模型组逃避潜伏期明显缩短,逃生错误频率减低,差异有统计学意义。结论①2种痴呆大鼠模型具有较好仿真人类AD/VD的特点。②丹参酮对AD/VD具有一定的治疗作用。

关键词：丹参酮阿尔茨海默病血管性痴呆动物模型水迷宫实验学习记忆

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血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的实验研究

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江汉大学学报（自然科学版） 2008年第4期36卷 54-56页

作者：李林夏保芦茹立强江汉大学医学院组织胚胎学教研室武汉430056 华中科技大学同济医学院神经生物学系武汉430030

目的:研究拟人类血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠学习记忆功能的改变.方法:(1)采用改良的大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法,建立VD样学习记忆障碍的大鼠模型.实验动物随机分成3组:VD模型组、假造模... 详细信息

目的:研究拟人类血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠学习记忆功能的改变.方法:(1)采用改良的大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法,建立VD样学习记忆障碍的大鼠模型.实验动物随机分成3组:VD模型组、假造模实验对照组和正常对照组.(2)采用水迷宫行为学试验,观测各组大鼠的空间学习记忆功能.结果:VD模型大鼠发生了空间学习记忆功能障碍,与两对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论:(1)本研究制成的VD样学习记忆障碍的动物模型具有较好的仿真脑性痴呆的特点.(2)水迷宫试验能较真实地反映动物学习记忆功能.

关键词：血管性痴呆动物模型大脑中动脉栓塞水迷宫试验学习记忆

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人心肌肌钙蛋白I基因的原核表达及抗体制备

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现代检验医学杂志 2008年第5期23卷 15-17页

作者：刘红梅刘汉才屈伸咸宁学院医学院生物化学与分子生物学教研室华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系

目的进行人心肌肌钙蛋白I（cardiac troponinI，cTnI）基因原核表达载体的构建，获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体。方法利用RT—PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段，将其插入原核表达... 详细信息

目的进行人心肌肌钙蛋白I（cardiac troponinI，cTnI）基因原核表达载体的构建，获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体。方法利用RT—PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段，将其插入原核表达载体形成重组体并导入宿主菌BL21（DE3）中，经IPTG诱导，表达出带6个组氨酸标签的融合蛋白，Ni—NTA树脂纯化，纯化后的融合蛋白免疫小鼠，制备抗血清。通过ELISA，Western blot鉴定血清效价和特异性。结果成功构建了cTnI的原核表达载体，并在大肠埃希菌中荻得了高效表达。Western blot检测证实获得了抗cTnI抗体。结论成功表达了cTnI蛋白并制备了其特异性抗体。

关键词：人心肌肌钙蛋白I 表达多克隆抗体

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骨髓基质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的效果及免疫调节机制

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神经损伤与功能重建 2008年第1期3卷 12-16页

作者：李呼伦张苏明王丹丹王广友孔庆飞穆莉莉孙博哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科武汉430030

目的:探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:分离纯化培养BMSCs,建立EAE动物模型,随机分为CFA组、BMSCs回输CFA组、MBP组及BMSCs回输MBP组。BMSCs回输CFA组和BMSCs回输MBP组于... 详细信息

目的:探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:分离纯化培养BMSCs,建立EAE动物模型,随机分为CFA组、BMSCs回输CFA组、MBP组及BMSCs回输MBP组。BMSCs回输CFA组和BMSCs回输MBP组于免疫后第6天尾静脉回输BMSCs,发病高峰期取材,全部大鼠予临床评价,检测淋巴细胞和IL-17+细胞浸润及T淋巴细胞增殖情况。建立BMSCs与淋巴细胞的共培养体系,观察BMSCs在封闭IL-27后对T淋巴细胞中Th17的影响。用ELISA检测大鼠血清或细胞培养上清中相关细胞因子表达。结果:BMSCs回输MBP组与MBP组相比,发病率降低,发病时间延后,临床评分显著降低(P<0.05),炎性细胞浸润明显减轻(P<0.01),IL-17+T细胞表达显著减少(P<0.01),血清中IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-23表达水平降低(P<0.05),IL-4、TGF-β和IL-27表达水平升高(P<0.05)。IL-27中和的BMSCs与病理性T细胞共培养后,细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ和IL-23的分泌水平明显升高(P<0.05),IL-4的分泌水平降低(P<0.01),IL-17的分泌水平显著升高(P<0.01)。结论:BMSCs经静脉移植治疗可以降低EAE发病程度,其作用机制是通过降低T淋巴细胞的反应性,通过IL-27的信号传导通路抑制EAE的靶细胞Th17产生生物学效应的。

关键词： EAE 骨髓基质干细胞 IL-17 IL-27 免疫调节

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