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中华肝脏病杂志 2007年第8期15卷 605-608页

作者：张振华王蓉田拥军李磊夏剑波龚劲松陆蒙吉龚非力杨东亮华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院微生物教研室华中科技大学同济医学院免疫学研究所

目的寻找并证实土拨鼠肝炎病毒核心抗原（WHcAg）和HBcAg存在共同的B淋巴细胞表位。方法用变性重组WHcAg和HBcAg免疫Balb/c小鼠以制备单克隆抗体；用单克隆抗体对WHcAg和HBcAg进行ELISA、Western blot及免疫组织化学对比分析,同时用该... 详细信息

目的寻找并证实土拨鼠肝炎病毒核心抗原（WHcAg）和HBcAg存在共同的B淋巴细胞表位。方法用变性重组WHcAg和HBcAg免疫Balb/c小鼠以制备单克隆抗体；用单克隆抗体对WHcAg和HBcAg进行ELISA、Western blot及免疫组织化学对比分析,同时用该抗体对WHcAg和HBcAg进行表位分析,并在氨基酸水平进行比对。结果经过ELISA、Western blot、免疫组织化学对比分析,制备的单克隆抗体中有2株与HBcAg和WHcAg有交叉反应,而且灵敏度和特异性相似；针对的抗原表位分别位于HBcAg和WHcAg的1～8位氨基酸和125～140位氨基酸。结论WHcAg和HBcAg存在2个共同的线性B淋巴细胞表位,分别位于1～8位和125～140位氨基酸。

关键词：肝炎核心抗原乙型肝炎病毒 B淋巴细胞表位土拨鼠

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鞘内移植人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株对大鼠慢性神经痛的镇痛作用

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中华医学杂志 2005年第38期85卷 2711-2714页

作者：安珂田玉科杨辉王贤裕金小高高峰徐颖田学愎王鹏华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室

目的探讨鞘内移植人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE)对大鼠慢性神经痛的镇痛作用。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为四组:未处理组、SNI组、SNI+IAST组和SNI+IAST/hPPE组;除未处理组外,建立右侧下肢保留性神... 详细信息

目的探讨鞘内移植人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE)对大鼠慢性神经痛的镇痛作用。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为四组:未处理组、SNI组、SNI+IAST组和SNI+IAST/hPPE组;除未处理组外,建立右侧下肢保留性神经损伤模型(SNI);1周后于脊髓L4-6水平鞘内移植与5′溴-2-脱氧尿苷(B rdU)共培养的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)或IAST/hPPE细胞株;每周测定各组大鼠左右两侧50%缩足阈值(PWT)的差值及腹腔注射纳洛酮对其镇痛效应的影响;免疫组织化学和放射免疫法检测脊髓组织中亮氨酸脑啡肽(L-EK)的含量变化以及移植细胞B rdU的表达。结果SNI后1周大鼠右足即出现痛觉异常现象,与未处理组相比,其余三组的左右侧50%PWT的差值明显增大(均P<0.01);SNI+IAST/hPPE组痛觉异常症状明显减轻,而SNI组和SNI+IAST组未见明显变化;SNI+IAST/hPPE组左右侧50%PWT差值与SNI组和SNI+IAST组相比明显减小,P<0.01;SNI+IAST/hPPE组的镇痛效应可被纳洛酮拮抗;与未处理组相比,其余3组每毫克脊髓L-EK的含量明显升高(均P<0.01),SNI+IAST/hPPE组(108.1 pg/mg±12.5 pg/mg)明显高于SNI组和SNI+IAST组(均P<0.01),而SNI组和SNI+IAST组相比差异无统计学意义;移植6周后,脊髓背角移植细胞的B rdU免疫染色阳性,表明细胞仍然存活。结论鞘内移植IAST/hPPE细胞可以抑制慢性神经痛大鼠的痛觉异常行为,该效应与移植细胞持续分泌的脑啡肽作用于阿片受体有关。

关键词：脑啡肽类星形细胞移植神经痛多瘤病毒转化慢性神经痛前脑啡肽原 SD大鼠移植细胞星形胶质

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β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用

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中国应用生理学杂志 2007年第1期23卷 111-115页

作者：马立群胡还忠田琴汪长东王晓敏余承高华中科技大学同济医学院基础医学部生理教研室湖北武汉430030

目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)供体左旋精氨酸(L-argnine,L-Arg)对小鼠回肠自主收缩幅度的影响,探讨β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用。方法:应用张力换能器记录标本自主收缩的方法,以回肠肌条自主收缩幅度变... 详细信息

目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)供体左旋精氨酸(L-argnine,L-Arg)对小鼠回肠自主收缩幅度的影响,探讨β-肾上腺素能受体在NO抑制小鼠回肠自主收缩中的作用。方法:应用张力换能器记录标本自主收缩的方法,以回肠肌条自主收缩幅度变化为指标,观察一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂L-NNA,可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylyl cyclase,sGC)抑制剂ODQ(1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-α]quinoxalin-1-one),β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素(Isoprenaline,ISO)和拮抗剂普萘洛尔(Propranolol)对NO作用的影响。结果:①L-Arg抑制小鼠回肠自主收缩幅度,呈浓度依赖性。②L-NNA(3×10-4mol/L),ODQ(3×10-4mol/L)均减弱L-Arg的抑制效应。③Propranolol(3×10-6mol/L)明显减弱L-Arg的抑制效应。④ISO(1×10-7mol/L)明显增强L-Arg的抑制效应。而Propranolol(3×10-6mol/L)和ISO(1×10-7mol/L)孵育组,L-Arg的抑制作用无明显变化。结论:L-Arg经NOS催化生成NO后经cGMP途径发挥对小鼠回肠自主收缩的抑制作用,β-受体途径也部分参与了NO的作用过程。

关键词：一氧化氮(NO) 自主收缩 β-肾上腺素能受体

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PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强中的作用

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中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 161-165页

作者：胡晓玲肖鸿美胡新武李艾张亮品张兰秋华中科技大学同济医学院基础医学部生理教研室湖北武汉430030

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB... 详细信息

目的 :观察PAF受体在铝抑制海马CA3区长时程增强 (longtermpotentiation ,LTP)中的作用。方法 :应用细胞外电生理记录方法 ,通过向海马CA3区分别微量注射血小板活化因子 (PlateletactivatingfactorPAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GinkgolideB)和激动剂mc PAF ,以群体锋电位 (populationspikesPS)幅度为指标 ,观察PP CA3通路的LTP变化。结果 :① 0 .2 μmol/L的银杏内酯B对CA3区的诱发电位无影响 ,但可抑制CA3区的LTP。② 0 .2 5mol/L的三氯化铝不影响CA3区LTP ,但可加强银杏内酯B的抑制作用。③ 4 0 μmol/Lmc PAF对强直刺激引起的LTP无影响 ,却可减轻 0 .5mol/L三氯化铝的对LTP的抑制作用。结论 :PAF受体在刺激PP诱发的CA3区LTP中起作用 ,而金属铝对CA3区LTP的抑制作用至少部分与PAF受体有关。

关键词： PAF受体铝血小板活化因子长时程增强 LTP 诱发电位银杏内酯B

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以咪哒唑仑为探针药测定大鼠肠CYP3A活性及其孵育条件优化

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中国药学杂志 2010年第9期45卷 654-658页

作者：任秀华斯陆勤曹磊薛柯雯裘军李高华中科技大学同济医学院药学院药剂教研室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部武汉430030

目的测定大鼠肠微粒体中细胞色素P4503A(CYP3A)的活性,并对其体外孵育条件进行优化。方法采用1′-羟基咪哒唑仑的生成量表示肠中CYP3A的活性,反相高效液相色谱法测定肠微粒体中1′-羟基咪哒唑仑的浓度,用单因素实验法对其体外孵育条件... 详细信息

目的测定大鼠肠微粒体中细胞色素P4503A(CYP3A)的活性,并对其体外孵育条件进行优化。方法采用1′-羟基咪哒唑仑的生成量表示肠中CYP3A的活性,反相高效液相色谱法测定肠微粒体中1′-羟基咪哒唑仑的浓度,用单因素实验法对其体外孵育条件进行优化,用线性Lineweaver-Burk双倒数作图法研究肠CYP3A酶促动力学。结果1′-羟基咪哒唑仑在9.10～***-1内线性关系良好;体外优化的孵育条件为10μmol.L-1咪哒唑仑、4μg肠微粒体、孵育20min;肠CYP3A酶促动力学参数Km为7.61μmol.L-1,Vmax为***-1。结论HPLC操作简便、灵敏、快速,适用于肠微粒体中1′-羟基咪哒唑仑的浓度测定,肠CYP3A孵育条件及其酶促动力学研究为研究经CYP3A代谢的药物相互作用及其他物质对CYP3A酶的影响提供理论依据。

关键词：细胞色素P4503A 肠微粒体高效液相色谱法 1′-羟基咪哒唑仑优化酶促动力学

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日本血吸虫卵抗TNBS诱导的小鼠结肠炎的观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第5期25卷 381-384页

作者：莫红梅刘文琪雷家慧程喻力王成祖李雍龙华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室

目的探讨日本血吸虫卵对2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎的抑制作用。方法50只6～8周龄BALB/c雌性小鼠随机分为正常对照组、乙醇对照组、虫卵对照组、结肠炎组和虫卵免疫结肠炎组,10只/组。虫卵免疫结肠炎组以日本血吸虫卵经... 详细信息

目的探讨日本血吸虫卵对2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎的抑制作用。方法50只6～8周龄BALB/c雌性小鼠随机分为正常对照组、乙醇对照组、虫卵对照组、结肠炎组和虫卵免疫结肠炎组,10只/组。虫卵免疫结肠炎组以日本血吸虫卵经腹腔注射免疫小鼠4次,10000个卵/鼠,每次间隔1周,末次免疫后6d用TNBS诱导结肠炎模型。观察对照组和实验组小鼠的体重、结肠病理改变及细胞因子水平的变化。结果结肠炎组小鼠经TNBS诱导后,出现明显的粘液血便、体重下降、结肠充血水肿,肠黏膜呈现严重炎性浸润伴溃疡,IFN-γ水平为(3.47±0.87)ng/ml,IL-4水平为(146.06±45.76)pg/ml。虫卵免疫结肠炎组小鼠症状较轻,体重恢复较快,IFN-γ表达被明显抑制,其水平为(1.53±0.51)ng/ml,IL-4水平显著升高至(598.50±135.90)pg/ml。结论日本血吸虫卵对TNBS诱导的BALB/c小鼠结肠炎具有抑制作用。

关键词：日本血吸虫虫卵 2,4,6三硝基苯磺酸小鼠结肠炎

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大鼠睾丸支持细胞的分离、纯化和鉴定

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解剖学报 2007年第2期38卷 246-249页

作者：黄东晖赵虎田永红熊承良王玲华中科技大学同济医学院计划生育研究所华中科技大学同济医学院解剖学教研室武汉430030

目的培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞，并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定。方法选用18～22d龄SD雄性大鼠睾丸，采用0．25％胰蛋白酶、0．1％透明质酸酶、0．1％胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞，置于32℃5％CO2的培养箱培养，... 详细信息

目的培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞，并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定。方法选用18～22d龄SD雄性大鼠睾丸，采用0．25％胰蛋白酶、0．1％透明质酸酶、0．1％胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞，置于32℃5％CO2的培养箱培养，48h后用20mmol／L Tris—HCl低渗处理培养细胞。培养1周后应用伊红染色、吖啶橙荧光染色、Feulgen染色对所培养的支持细胞进行鉴定，同时应用原位杂交检测ABP mRNA方法鉴定分离培养的支持细胞。结果培养1周后所获培养的支持细胞纯度达95％以上。分离培养的支持细胞ABP mRNA表达阳性，其形态结构特征与用其他方法鉴定为支持细胞的形态结构特征一致。结论采用三酶连续消化及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高，而且应用原位杂交方法检测ABP mRNA是一种新的、特异、有效的鉴定支持细朐及萁功能的方法．

关键词：分离鉴定支持细胞原位杂交大鼠

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香烟烟雾提取物对猪气道上皮细胞β-连环素及酪氨酸磷酸化的影响

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中华医学杂志 2001年第7期81卷 406-410页

作者：陈芳吴人亮王曦郝天玲华中科技大学同济医学院病理学教研室武汉430030

目的　观察香烟烟雾提取物 (CSE)和酪氨酸激酶抑制剂 (tyrophostin 2 5 )对气道上皮细胞(AEC)酪氨酸磷酸化程度、细胞Src蛋白 (c Src)及 β 连环素 (β cat)表达的影响 ,探讨细胞酪氨酸磷酸化程度及β cat在吸烟致AEC损伤和修复中的作... 详细信息

目的　观察香烟烟雾提取物 (CSE)和酪氨酸激酶抑制剂 (tyrophostin 2 5 )对气道上皮细胞(AEC)酪氨酸磷酸化程度、细胞Src蛋白 (c Src)及 β 连环素 (β cat)表达的影响 ,探讨细胞酪氨酸磷酸化程度及β cat在吸烟致AEC损伤和修复中的作用及调控机制。方法　体外培养猪AEC ,将培养细胞分成 3组 :N组 :加无血清培养基 ;C组 :在无血清培养基上分别加CSE ;CT组 :加tyrophostin 2 5及CSE。每组随机检测 30 0个AEC中 β cat免疫细胞化学染色的分布规律 ;利用图像分析技术 ,每组随机检测30个AEC的酪氨酸磷酸化程度、c Src、β catmRNA的变化。结果　C组加入 2 0 %的CSE作用 4h和 2 4h后 ,AEC蛋白质酪氨酸磷酸化程度分别是N组的 1 5 1倍和 3 44倍 (P <0 0 0 0 1) ,胞膜上 β cat阳性表达率分别为 2 6 7%和 38 7% ,较N组 (分别为 83 3%和 81 3 % )明显下降 (P <0 0 0 10 )。与N组比较C组胞质中c Src的浓度分别降低了 47 9%和 5 1 4% (P <0 0 0 0 1) ;CT组酪氨酸磷酸化程度及胞膜上 β cat表达的变化接近N组。而C组和CT组 β catmRNA含量均较N组有明显下降 (P <0 0 0 0 1)。结论　上皮细胞的蛋白质酪氨酸磷酸化程度的变化可能介导了香烟对气道上皮细胞的损伤 ,而 β

关键词：香烟烟雾提取物气道上皮细胞 β-连环素酪氨酸磷酸化吸入性损伤

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Ⅱ类人白细胞抗原等位基因与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第1期23卷 6-9页

作者：章俊华刘文琪李雍龙龙小纯华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室

目的　探讨Ⅱ类人白细胞抗原 (HLA Ⅱ )基因多态性与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性。　方法　用聚合酶链反应序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 46例晚期肝脾型日本血吸虫病患者 (实验组 )和 43例慢性日本血吸虫病患者 (对照组 )HLA D... 详细信息

目的　探讨Ⅱ类人白细胞抗原 (HLA Ⅱ )基因多态性与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性。　方法　用聚合酶链反应序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 46例晚期肝脾型日本血吸虫病患者 (实验组 )和 43例慢性日本血吸虫病患者 (对照组 )HLA DRB1、DPA1、DQA1和DQB14个基因位点的等位基因进行分型。对两组间等位基因频率的差异进行 χ2 检验。　结果　实验组HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因频率明显高于对照组 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因频率明显低于对照组。　结论　HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因 ,因其与晚期肝脾型日本血吸虫病呈显著的正相关 (P <0 0 5 )而可能是该病的遗传易感基因 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因与对该病存在抵抗性有关。

关键词： DQB1 DQA1 肝脾日本血吸虫病晚期等位基因频率人白细胞抗原果实基因位点抵抗性

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乙二胺四乙酸联合正丁醇在大鼠胫骨癌痛标本石蜡切片制作中的应用

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解剖学报 2012年第3期43卷 430-432页

作者：杨世明刘希江曹菲刘向前华中科技大学同济医学院解剖学系组织胚胎学教研室华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室武汉430030

目的探索一种简便有效的制作大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片的方法。方法取大鼠胫骨癌痛模型组和正常组胫骨标本,使用乙二胺四乙酸(EDTA)加温脱钙联合正丁醇取代传统强酸脱钙、纯酒精脱水和二甲苯透明,制作石蜡切片后HE染色观察。结果两... 详细信息

目的探索一种简便有效的制作大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片的方法。方法取大鼠胫骨癌痛模型组和正常组胫骨标本,使用乙二胺四乙酸(EDTA)加温脱钙联合正丁醇取代传统强酸脱钙、纯酒精脱水和二甲苯透明,制作石蜡切片后HE染色观察。结果两组大鼠胫骨癌痛标本形态结构均保存完整。与传统方法相比,制片步骤简单,脱水和透明时间较为灵活,蜡块切割性能较好。结论 EDTA与正丁醇的联合应用,是大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片制作适宜和可靠的方法。

关键词：胫骨癌痛乙二胺四乙酸正丁醇石蜡切片 HE染色大鼠

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