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中华腔镜泌尿外科杂志（电子版） 2012年第2期6卷 55-57页

作者：程丹李洁池艳郭翠翠熊承良江兴华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉430030 武汉大学人民医院生殖医学中心武汉430060

目的探讨Attractin蛋白在不同生精功能状态的人睾丸组织中的表达情况。方法对31例无精子症患者进行睾丸组织病理检查诊断,根据病理形态的不同分为:唯支持细胞综合征型(n=4),生精功能低下型(n=12),生精阻滞型(n=5),生精功能基本正常型(n=... 详细信息

目的探讨Attractin蛋白在不同生精功能状态的人睾丸组织中的表达情况。方法对31例无精子症患者进行睾丸组织病理检查诊断,根据病理形态的不同分为:唯支持细胞综合征型(n=4),生精功能低下型(n=12),生精阻滞型(n=5),生精功能基本正常型(n=10)。选择上述各型结构完整的睾丸组织,分别应用免疫组化法(SP)观察Attractin蛋白在不同生精功能状态的睾丸组织中的表达。结果各组睾丸组织内均存在Attractin蛋白的表达,其分布特点为:睾丸生精小管和间质细胞、管周肌样细胞、支持细胞上均有Attractin蛋白的表达,主要表达于胞膜和胞质,胞膜表达强于胞质。Leydig细胞、Sertoli细胞、精原细胞、精母细胞及精子细胞均为阳性表达,呈棕黄色着染。Attractin的表达与生精功能有关,正常组表达明显高于其它组,唯支组表达明显低于其他组。结论 Attractin蛋白与男性生殖密切相关,但其具体作用环节尚有待进一步研究。

关键词：无精子症 Attractin蛋白睾丸组织免疫组织化学染色

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NOSTRIN在无精子症患者睾丸组织中的表达

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中华男科学杂志 2011年第1期17卷 38-42页

作者：相文佩温子娜胡廉李红钢熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心湖北武汉430030

目的:通过测定无精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,探讨其与无精子症发病的相关性。方法:采用免疫组化法检测17例特发性无精子症患者(病例组)和10例正常男性(正常组)睾丸组... 详细信息

目的:通过测定无精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,探讨其与无精子症发病的相关性。方法:采用免疫组化法检测17例特发性无精子症患者(病例组)和10例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN的定位和定量表达;RT-PCR检测睾丸组织中NOSTRINmRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物亚硝酸基/亚硝基(NO2-/NO3-)水平。结果:NOSTRIN在睾丸组织中表达于生精细胞、支持细胞以及血管内皮细胞,NOSTRIN在特发性无精子症患者睾丸中的表达水平显著低于正常男性;病例组患者睾丸组织中NOSTRINmRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.727±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增高(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为[(48.56±8.49)μmol/L],与正常组[(25.37±9.61)μmol/L]比较显著升高(P<0.01);病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01)。结论:无精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO-/NO-水平升高,这可能与无精子症的发生有着相关性。

关键词：内皮型一氧化氮合酶运输介导物一氧化氮合酶精子发生无精子症

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利用母血中胎儿有核红细胞结合血清筛查和三维超声无创性产前诊断唐氏综合征

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中国妇幼保健 2011年第7期26卷 1034-1037页

作者：相文佩温子娜水丽君徐晓燕陈汉平华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科

目的:利用母外周血中胎儿有核红细胞结合血清三联筛查及三维超声,建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式。方法:早、中期孕妇共670例,采取血清三联筛查结合三维超声和病史选取唐氏高危孕妇,抽取高危孕妇的外周血,流式细胞术富集... 详细信息

目的:利用母外周血中胎儿有核红细胞结合血清三联筛查及三维超声,建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式。方法:早、中期孕妇共670例,采取血清三联筛查结合三维超声和病史选取唐氏高危孕妇,抽取高危孕妇的外周血,流式细胞术富集母血中的胎儿有核红细胞(Fetal Nucleated Red Blood Cells,FNRBCs);次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号染色体与Y染色体。结果:通过血清三联筛查和三维超声结合病史筛选出高危孕妇24例,高危孕妇在两日内即可确诊,24例中诊断23例染色体正常胎儿,包括男胎12例、女胎11例;诊断1例男性唐氏综合征胎儿。24例标本检测结果和实际胎儿核型符合。结论:血清三联筛查、超声检查结合病史筛选出高危孕妇,然后利用母血中胎儿有核红细胞进行多重引物原位杂交检测细胞染色体,可作为快速、无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式,并可为其他胎儿染色体基因异常或者宫内感染的无创性产前诊断提供参考。

关键词：唐氏综合征胎儿有核红细胞多重引物原位杂交产前诊断

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ABO血型和肿瘤标记物与乳腺癌及其骨转移的关系

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中国输血杂志 2011年第5期24卷 425-427页

作者：刘燕婕曹奎杰周慧华中科技大学同济医学院协和医院检验科输血科湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心

目的了解ABO血型分布特征、抗原表达和血清肿瘤标志物水平在乳腺癌中的临床诊断价值。方法用微柱凝胶法进行ABO血型正反定型,应用吸收放散法检测患者红细胞表面的弱抗原,用血清学实验确定其亚型特征。应用化学发光免疫检测技术检测血清... 详细信息

目的了解ABO血型分布特征、抗原表达和血清肿瘤标志物水平在乳腺癌中的临床诊断价值。方法用微柱凝胶法进行ABO血型正反定型,应用吸收放散法检测患者红细胞表面的弱抗原,用血清学实验确定其亚型特征。应用化学发光免疫检测技术检测血清肿瘤标志物CA153、CEA含量和阳性率。用SPECT行全身骨扫描检查明确骨转移发生率。结果 1)乳腺癌的患病易感性以B血型为高,血型分布从高到低依次B型>O型>A型>AB型,在497名乳腺癌患者中发现13例ABO血型抗原表达异常(9例为骨转移),其中11例正向定型出现弱凝集,2例不凝集,反向定型正常,正反定型不一致,经吸收放散实验确定ABO血型抗原性减弱或消失,血清学实验确定无明显亚型特征,在乳腺纤维瘤患者和健康献血者中各发现2例ABO血型抗原减弱,但血清学实验呈现较明显亚型特征。2)乳腺癌患者血清CA153、CEA含量分别为87.43μg/L和13.13μg/L、阳性率分别为73.84%和35.01%,均显著高于乳腺纤维瘤患者和健康献血者(P<0.05);乳腺癌骨转移者血清CA153、CEA含量分别为159.48μg/L和24.23μg/L、阳性率分别为95.51%和56.74%,显著高于未转移患者(P<0.05)。3)乳腺癌ABO血型抗原表达与CA153、CEA水平相关。结论血清肿瘤标记物CA153、CEA水平与乳腺癌发生相关,乳腺癌患者可出现ABO血型抗原减弱,其ABO血型分布特点亦与乳腺癌相关联,是乳腺癌发生的危险因子;若联合检测ABO血型抗原和肿瘤标记物CA153、CEA水平,能提高诊断乳腺癌的准确率,尤其对乳腺癌骨转移判断有一定的临床应用价值。

关键词：乳腺癌 ABO血型抗原肿瘤标志物

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ICSI受精失败的原因与对策

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中华男科学杂志 2011年第12期17卷 1131-1134页

作者：程丹李洁郭翠翠熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所湖北武汉430030 武汉大学人民医院生殖医学中心湖北武汉430060

卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)是一种新型的体外受精技术,有很高的单精受精率,但ICSI技术不能解决所有的受精失败,可能的原因包括卵母细胞质量、受精激活障碍、精子异常以及ICSI技术等问题。IVF超促排卵可能引起卵母细胞内凋亡增加,从... 详细信息

卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)是一种新型的体外受精技术,有很高的单精受精率,但ICSI技术不能解决所有的受精失败,可能的原因包括卵母细胞质量、受精激活障碍、精子异常以及ICSI技术等问题。IVF超促排卵可能引起卵母细胞内凋亡增加,从而导致受精失败。卵母细胞激活障碍有多种人工辅助的激活方法。ICSI时精子引起的受精失败多是由于精子微小畸形,形态学选择性ICSI是常用的方法。但ICSI后的完全受精失败仍是助孕治疗面临的棘手问题,不能完全避免。

关键词： ICSI 受精失败卵母细胞激活精子

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无精子症和生精功能正常者睾丸组织中血红素加氧酶的表达与差异性研究

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中华男科学杂志 2011年第8期17卷 712-716页

作者：池艳毛向明张欣宗张峰彬顾宇春熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心专科医院湖北武汉430030 南方医科大学南方医院泌尿外科广东广州510515 浙江大学附属妇产科医院浙江杭州310023 英国伯明翰大学医学院

目的:对人类睾丸组织中表达血红素加氧酶(HO)的细胞进行定位;通过测定原发性无精子症及梗阻性无精子症患者睾丸组织中血红素加氧酶1(HO-1)的表达量与正常睾丸组织中HO-1表达量的差异性,来探讨其与无精子症发病的相关性。方法:应用免疫... 详细信息

目的:对人类睾丸组织中表达血红素加氧酶(HO)的细胞进行定位;通过测定原发性无精子症及梗阻性无精子症患者睾丸组织中血红素加氧酶1(HO-1)的表达量与正常睾丸组织中HO-1表达量的差异性,来探讨其与无精子症发病的相关性。方法:应用免疫组化方法对人类睾丸组织中表达HO的细胞进行定位;采用逆转录-荧光定量PCR(FQ-PCR)方法定量检测无精子症患者与正常人睾丸组织HO-1及HO-2基因水平的表达量;应用W est-ern印迹检测各组之间HO蛋白水平表达量。结果:在正常睾丸组织,HO-1主要表达在支持细胞上;而HO-2在支持细胞和各级生精细胞中均有表达;FQ-PCR结果显示非梗阻性无精子症患者睾丸组织HO-1、HO-2的表达量均显著低于正常组及梗阻性无精子症组(P<0.05),差异具有统计学意义。而梗阻性无精子症患者睾丸组织表达HO-1、HO-2的量与正常组相比无显著性差异。W estern印迹结果显示HO-1蛋白水平的表达量差异与基因水平一致。而HO-2的蛋白水平在各组之间表达没有显著性差异。结论:非梗阻性无精子症患者睾丸组织中HO的表达量显著性降低,且HO-1无论是蛋白水平还是基因水平的差异一致。HO-1可以通过抗炎、抗氧化、抗凋亡的机制保护睾丸组织免受各种应激的损伤,从而维护正常的生精功能。可见,HO-1的减少可能与生精功能低下相关,这可能是非梗阻性无精子症的发病机制之一。

关键词：血红素加氧酶无精子症睾丸

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PDTC可改变TNF-α诱导的eNOS基因表达下调

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中国优生与遗传杂志 2011年第10期19卷 22-24,4页

作者：徐晓燕庞文娟赵娜陈汉平相文佩华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科 430030 华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心 430030

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中内皮型一氧化氮合酶基因(eNOS)表达的作用以及PDTC对此作用的改变。方法将培养的内皮细胞分为3组:1组为无任何处理的HUVEC,2组为子痫前期(PE)患者血清作用的HUVEC,3组为用... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中内皮型一氧化氮合酶基因(eNOS)表达的作用以及PDTC对此作用的改变。方法将培养的内皮细胞分为3组:1组为无任何处理的HUVEC,2组为子痫前期(PE)患者血清作用的HUVEC,3组为用正常晚孕妇女血清作用的HUVEC。用逆转录-聚合酶链反应检测三组细胞中eNOS mRNA的表达。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测PE患者和正常孕妇血清中TNF-α含量。用1ng/ml、3ng/ml、5ng/ml 3种浓度的TNF-α分别作用三组细胞6h,以及用浓度为3ng/ml的TNF-α作用三组细胞分别长达6h、12h、24h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测eNOS mRNA的表达;将二硫代氨基甲酸吡硌烷(PDTC,5mmol/ml)与TNF-α(3ng/ml)同时作用以及TNF-α(3ng/ml)单独作用三组细胞6h,RT-PCR检测eNOS基因mRNA的表达。结果三组细胞中都有eNOS表达,2组表达量显著低于1组和3组(P<0.01)。ELISA结果显示,PE患者血清中TNF-α含量显著高于正常晚孕妇女(P<0.01)。TNF-α作用HUVEC细胞后eNOS表达显著低表达,并成时间和剂量依赖关系(P<0.01)。PDTC和TNF-α同时作用的HUVEC和TNF-α单独作用的HUVEC相比,其eNOS表达显著增高(P<0.01)。结论可下调eNOS在HUVEC中的表达,PDTC可改变TNF-α诱导的eNOSN表达的下调。

关键词： TNF-α 内皮型一氧化氮合酶二硫代氨基甲酸吡硌烷 HUVEC

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蛋白激酶B在人睾丸组织中的表达及意义

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中国男科学杂志 2011年第5期25卷 3-6,10页

作者：张玲池艳熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉430030

目的探讨蛋白激酶B（PKB）在人睾丸组织中的表达及意义。方法用免疫组织化学方法检测PKB蛋白在正常睾丸组织中的表达。用荧光定量PCR检测PKBα、PKBβ和PKBγ三种异构体mRNA在正常人、严重少弱精子症和非梗阻性无精子症患者的睾丸组织... 详细信息

目的探讨蛋白激酶B（PKB）在人睾丸组织中的表达及意义。方法用免疫组织化学方法检测PKB蛋白在正常睾丸组织中的表达。用荧光定量PCR检测PKBα、PKBβ和PKBγ三种异构体mRNA在正常人、严重少弱精子症和非梗阻性无精子症患者的睾丸组织中的表达水平，并用WesternBlot方法检测各组睾丸组织中PKB蛋白的表达情况。结果PKB在正常人睾丸组织的精原细胞、精母细胞、精子细胞的胞质中表达，而磷酸化的PKB主要在初级精母细胞核中表达，精原细胞和精子细胞核中也可见少量表达。PKBαmRNA在正常人和严重少弱精子症的睾丸组织中表达没有差异，均显著高于非梗阻性无精子症患者差异具统计学意义（P〈0．05）；PKBβ和PKBγmRNA的表达在三组间无差异。WesternBlot结果显示正常人和严重少弱精子症患者的睾丸组织中均可见PKB和磷酸化PKB的表达，且两者的表达在两组间无差异（P〉0．05）；非梗阻性无精子症患者的睾丸组织中PKB和磷酸化PKB未见明显表达。结论PKB的三种异构体mRNA、PKB及磷酸化的PKB蛋白在正常睾丸组织中均有表达，而非梗阻性无精子症患者的睾丸组织中PKB蛋白无明显表达，推测PKB与生精功能可能有密切联系。

关键词：蛋白激酶B 睾丸无精子症少精子症弱精子症

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干细胞向生殖细胞分化的研究进展

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国际生殖健康／计划生育杂志 2011年第6期30卷 462-466页

作者：王原媛黄勋彬华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉430030

胚胎干细胞(ESC)是一种多能干细胞,具有向生殖细胞分化的能力,由于具有致瘤性和伦理问题,限制了ESC向临床应用发展的前景。成体干细胞(ASC)也是一类多能干细胞,理论上也能分化为生殖细胞,但诱导分化过程往往受到阻滞。诱导性多能干细胞(... 详细信息

胚胎干细胞(ESC)是一种多能干细胞,具有向生殖细胞分化的能力,由于具有致瘤性和伦理问题,限制了ESC向临床应用发展的前景。成体干细胞(ASC)也是一类多能干细胞,理论上也能分化为生殖细胞,但诱导分化过程往往受到阻滞。诱导性多能干细胞(iPS)是一种具有多能性的重编程体细胞,一定程度上可替代ESC用于基础和临床研究。目前,全球不孕不育的发生率呈逐年递增的趋势,充分认识干细胞向生殖细胞分化的机制是解决该难题的重要理论前提。就各种干细胞向生殖细胞分化的研究进展作一综述。

关键词：干细胞胚胎干细胞成体干细胞多能干细胞生殖细胞分化

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272例非梗阻性无精子症不育患者的细胞和分子遗传学分析

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中国优生与遗传杂志 2011年第9期19卷 53-55页

作者：沈小力张元峰辜秀丽苏萍华中科技大学同济医学院计划生育研究所湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院生殖医学中心湖北武汉430030

目的本研究主要通过分析非梗阻性无精子症患者染色体核型分析结果和Y染色体微缺失特征探讨遗传学检查在非梗阻性无精子症男性不育中的辅助诊断及治疗方法的选择指导作用。方法选择272例非梗阻性无精子症患者,采集外周静脉血进行染色体... 详细信息

目的本研究主要通过分析非梗阻性无精子症患者染色体核型分析结果和Y染色体微缺失特征探讨遗传学检查在非梗阻性无精子症男性不育中的辅助诊断及治疗方法的选择指导作用。方法选择272例非梗阻性无精子症患者,采集外周静脉血进行染色体核型分析及Y染色体微缺失检测,评估非梗阻性无精子症患者染色体核型异常以及Y染色体微缺失的检出率及特征。结果 272例非梗阻性无精子症患者染色体核型分析正常者占69.85%,异常者占30.15%,其中,常染色体异常者占5.52%,性染色体异常者24.63%;Y染色体微缺失占7.35%,在染色体核型正常患者中Y染色体微缺失占10.53%。结论开展外周血染色体核型分析和AZF检测,可评价男性不育遗传缺陷,从而更好的解释非梗阻性无精子症发病原因,提供遗传咨询和指导临床诊疗。

关键词：无精子症细胞遗传学微缺失男性不育

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