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2013中华医学会第九次全国计划生育学学术会议

作者：吴春林李红钢熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉同济生殖医学专科医院

游离DNA又称为胞外DNA,广泛分布于人血浆、尿液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液、羊水和精浆等体液中.目前,已被广泛研究并成为多种疾病无创诊断和研究的新分子标记物.近年来,游离DNA在其存在形式和生物学功能方面取得一定进展,精浆游离DNA...

游离DNA又称为胞外DNA,广泛分布于人血浆、尿液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液、羊水和精浆等体液中.目前,已被广泛研究并成为多种疾病无创诊断和研究的新分子标记物.近年来,游离DNA在其存在形式和生物学功能方面取得一定进展,精浆游离DNA在其浓度、分子量大小、来源及存在形式等一般特征和临床应用研究方面取得一定进展,并在男性特发性不育研究、诊断及睾丸生殖细胞肿瘤、前列腺癌的早期诊断、疗效检测和预后评估等方面展示出了良好应用前景.本文概述游离DN一般特征和生物学功能,并结合精浆游离DNA的研究现状和应用前景作一综述.

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小鼠支持细胞睾丸特异性热激调控的miRNA载体干扰uPA基因的表达情况

小鼠支持细胞睾丸特异性热激调控的miRNA载体干扰uPA基因的表达情...

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2013中华医学会第九次全国计划生育学学术会议

作者：刘燕熊承良武汉同济生殖医学专科医院华中科技大学同济医学院生殖医学中心华中科技大学同济医学院计划生育研究所

目的研究小鼠支持细胞(TM4)中睾丸组织特异性诱导型热休克蛋白Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA干扰载体以及干扰载体在43℃热激条件下启动表达干扰uPA基因的表达情况.方法设计合成MIR-30结构寡核苷酸序列,构建睾丸组织特异性...

目的研究小鼠支持细胞(TM4)中睾丸组织特异性诱导型热休克蛋白Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA干扰载体以及干扰载体在43℃热激条件下启动表达干扰uPA基因的表达情况.方法设计合成MIR-30结构寡核苷酸序列,构建睾丸组织特异性诱导型热休克蛋白Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA-uPA干扰载体.通过与空白组,阴性对照组分别在热激0min;1min;3min;5min;10min下比较Hsp70-B启动子控制的载体干扰uPA基因的mRNA和蛋白表达情况,同时通过透射电镜观察0min;1min;3min;5min;10min 43℃热激下支持细胞及细胞连接之间超微病理结构的变化情况.

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络合铜宫内节育器对大鼠子宫内膜相关因子表达的研究

络合铜宫内节育器对大鼠子宫内膜相关因子表达的研究

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2013中华医学会第九次全国计划生育学学术会议

作者：彭祥炽熊承良胡姗姗孟天庆武汉同济生殖医学专科医院华中科技大学同济医学院生殖医学中心华中科技大学同济医学院计划生育研究所

目的通过检测各组大鼠子宫内膜中与出血、疼痛等副作用相关的因子,以初步探讨新材料络合铜生物高分子复合材料宫内节育器(CuCl2/SiO2/PVA IUD)对大鼠子宫内膜内环境的影响和减少置器后副反应的可能机制.方法 40只性成熟SPF级雌性SD大鼠...

目的通过检测各组大鼠子宫内膜中与出血、疼痛等副作用相关的因子,以初步探讨新材料络合铜生物高分子复合材料宫内节育器(CuCl2/SiO2/PVA IUD)对大鼠子宫内膜内环境的影响和减少置器后副反应的可能机制.方法 40只性成熟SPF级雌性SD大鼠,10-12周龄,随机分为4组:金属裸铜组(Cu group)、低剂量络合铜组(CuCl2/SiO2/PVA group Ⅰ)、高剂量络合铜组(CuCl2/SiO2/PVA group Ⅱ)和空白对照组(NC group).

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络合铜宫内节育器对大鼠子宫内膜的形态学研究

络合铜宫内节育器对大鼠子宫内膜的形态学研究

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2013中华医学会第九次全国计划生育学学术会议

作者：彭祥炽熊承良胡姗姗孟天庆武汉同济生殖医学专科医院华中科技大学同济医学院生殖医学中心华中科技大学同济医学院计划生育研究所

目的研究络合铜生物高分子复合材料宫内节育器(CuCl2/SiO2/PVA IUD)对大鼠子宫内膜及重要脏器的形态学影响,以初步探讨络合铜宫内节育器的安全性.方法 60只性成熟SPF级雌性SD大鼠,10-12周龄,随机分为5组:金属裸铜组(Cu group)、生物基...

目的研究络合铜生物高分子复合材料宫内节育器(CuCl2/SiO2/PVA IUD)对大鼠子宫内膜及重要脏器的形态学影响,以初步探讨络合铜宫内节育器的安全性.方法 60只性成熟SPF级雌性SD大鼠,10-12周龄,随机分为5组:金属裸铜组(Cu group)、生物基体材料组(SiO2/PVA group)、络合铜低剂量组(CuCl2/SiO2/PVA group Ⅰ)、络合铜高剂量组(CuCl2/SiO2/PVA group Ⅱ)和空白对照组(NC group).在大鼠左侧子宫近阴道段作一切口,朝卵巢方向置入不同材料,分别于置器30d和60d后取置器侧子宫内膜、卵巢及心、肝、脾、肺、肾、脑组织,采用HE染色和透射电镜技术观察其组织病理和超微病理的形态学改变.

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靶向可控RNAi阻断uPA的表达及对雄性小鼠生育力的影响和可逆性研究

靶向可控RNAi阻断uPA的表达及对雄性小鼠生育力的影响和可逆性研究

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2013中华医学会第九次全国计划生育学学术会议

作者：刘燕熊承良华中科技大学同济医学院生殖医学中心华中科技大学同济医学院计划生育研究所武汉同济生殖医学专科医院

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研究小鼠支持细胞中睾丸特异性热激调控的miRNA载体干扰uPA基因的表达情况

研究小鼠支持细胞中睾丸特异性热激调控的miRNA载体干扰uPA基因的...

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第三届全国生殖医学论坛

作者：刘燕熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所华中科技大学同济医学院生殖医学中心 430030 武汉同济生殖医学专科医院

目的:研究小鼠支持细胞(TM4)中睾丸组织特异性诱导型热休克蛋Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA干扰载体以及干扰载体在43℃热激条件下启动表达miRNAs干扰uPA基因的表达情况. 方法:以Hsp/miR-HSP70-2载体为模板PCR方法扩增Hsp7... 详细信息

目的:研究小鼠支持细胞(TM4)中睾丸组织特异性诱导型热休克蛋Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA干扰载体以及干扰载体在43℃热激条件下启动表达miRNAs干扰uPA基因的表达情况. 方法:以Hsp/miR-HSP70-2载体为模板PCR方法扩增Hsp70-B启动子,并进行测序验证,将成功获取的Hsp70-B启动子取代pGL3-BasicCMV启动子,依据有效的uPA-siRNA序列,设计合成MIR-30结构寡核苷酸序列,构建睾丸组织特异性诱导型热休克蛋白Hsp70-1基因(Hsp70-B)启动子控制的miRNA-uPA干扰载体. 结果：成功构建睾丸组织特异性诱导型热休克蛋白Hsp70-1基因启动子控制的pGL3-Basic-Hsp70B-EGFP-MIR30-uPA干扰载体，实验组pGL3-Basic-Hsp70B-EGFP-MIR30-uPA干扰载体)、阴性对照(Hsp70-B)(靶向(pGL3-Basic-Hsp70B-EGFP-MIR30- NC)、空白载体(pGL3-Basic-CMV-EGFP)分别转染TM4细胞，Hsp70B在43℃热激3min即可启动同时并不影响支持细胞的增长。结论：除热激本身导致细胞超微病理结构的变化而影响uPA蛋白及mRNA表达量。将组织特异性、可逆性及时空表达调节相结合，为建立uPA沉默双向开启可控的动物模型打下基础，可望实现睾丸组织内uPA基因表达的有效调控，干扰精子发生等多种生理过程，达到男(雄)性避孕的目的，进而可能发展“基因避孕”药物。

关键词：睾丸组织尿激酶纤溶酶激活因子基因表达微小核糖核酸支持细胞特异性热激调控

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线粒体融合基因2在小鼠卵巢组织中的表达及意义

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现代妇产科进展 2013年第4期22卷 314-316页

作者：相文佩赵娜庞文娟陈文琦徐晓燕华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的:检测小鼠卵巢组织中线粒体融合基因2(Mfn2)的表达、ATP水平以及卵巢组织的超微结构,探讨Mfn2与卵巢功能的相关性。方法:采用Western blot和real-time PCR分别检测年轻组(8～10周龄,20例)和老龄组小鼠(52～54周龄,20例)卵巢组织中M... 详细信息

目的:检测小鼠卵巢组织中线粒体融合基因2(Mfn2)的表达、ATP水平以及卵巢组织的超微结构,探讨Mfn2与卵巢功能的相关性。方法:采用Western blot和real-time PCR分别检测年轻组(8～10周龄,20例)和老龄组小鼠(52～54周龄,20例)卵巢组织中Mfn2蛋白和Mfn2 mRNA的表达;磷钼酸比色法检测小鼠卵巢组织中ATP含量;透射电镜观察卵巢组织的超微结构。结果:老龄组小鼠卵巢组织中Mfn2蛋白的表达水平(0.234±0.120)显著低于年轻组(0.876±0.460),差异有统计学意义(P<0.01)。老龄组小鼠卵巢组织中Mfn2 mRNA相对表达量为(0.0063±0.0034)显著低于年轻组(0.0232±0.0045),差异有统计学意义(P<0.01)。老龄组小鼠卵巢组织中ATP含量[(20.6±7.2)μmol/g]显著低于年轻组[(33.8±11.5)μmol/g]。电镜显示,年轻组小鼠卵巢组织中的线粒体形态规则,轮廓光滑完整,线粒体嵴排列基本规则,老龄组小鼠卵巢组织中线粒体断裂增加,线粒体嵴肿胀,线粒体内出现空泡。结论:老龄组小鼠Mfn2表达水平下降,线粒体出现功能下降和结构损伤。Mfn2表达水平下降可能参与与年龄相关的卵巢功能维持。

关键词：线粒体融合蛋白2 卵巢线粒体三磷酸腺苷

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小RNA在精子发生中的研究进展

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中国计划生育学杂志 2012年第2期20卷 134-136页

作者：郭翠翠(综述) 李红钢熊承良(审校) 华中科技大学同济医学院计划生育研究所生殖医学中心专科医院武汉430030

近20年来人们在动物、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNA，包括miRNA、piRNA和siRNA。与其相关的Argonaut家族蛋白分为2个亚家族：Ago亚家族和Piwi亚家族。精子发生是指由精原细胞经初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞至... 详细信息

近20年来人们在动物、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNA，包括miRNA、piRNA和siRNA。与其相关的Argonaut家族蛋白分为2个亚家族：Ago亚家族和Piwi亚家族。精子发生是指由精原细胞经初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞至成熟精子形成的过程。整个过程分为3个阶段：精原细胞的增殖、精母细胞的减数分裂和精子细胞的变态过程，这一复杂的过程受多种因素的调控。

关键词：精子发生小RNA 初级精母细胞非编码RNA 精原细胞 miRNA siRNA 亚家族

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精浆游离microRNA的稳定性及作为男性不育新标志物的探索

精浆游离microRNA的稳定性及作为男性不育新标志物的探索

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中华医学会第八次全国计划生育学术会议

作者：郭翠翠李红钢官黄涛夏伟熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉同济生殖医学专科医院

目的游离miRNA非常稳定,在肿瘤、心血管疾病、组织损伤、妊娠等生理病理过程中表达失调,是一种非常有前景的新分子标志物。精浆中游离miRNA(cfs-miRNA)的稳定性及其与精子发生、精子成熟的相关性值得关注。本实验首先研究cfs-miRNA的稳... 详细信息

目的游离miRNA非常稳定,在肿瘤、心血管疾病、组织损伤、妊娠等生理病理过程中表达失调,是一种非常有前景的新分子标志物。精浆中游离miRNA(cfs-miRNA)的稳定性及其与精子发生、精子成熟的相关性值得关注。本实验首先研究cfs-miRNA的稳定性,然后以特发性严重少精子症为例,探讨cfs-miRNA作为男性不育标志物的可能性。方法为分析cfs-miRNA的稳定性,收集精液参数正常和输精管结扎的男性精液各5份,取精浆1ml

关键词： miRNA 男性不育严重少精子症标志物 microRNA

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淘洗离心机在生殖系统应用性研究的探讨

淘洗离心机在生殖系统应用性研究的探讨

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中华医学会第八次全国计划生育学术会议

作者：刘燕熊承良华中科技大学同济医学院计划生育研究所华中科技大学同济医学院生殖医学中心武汉同济生殖医学专科医院

不孕不育是全球性的医学问题,据世界卫生组织统计,全球约有15%-20%的夫妻存在不孕不育的问题。目前大约80%以上的男性不育是与精子密度低、精子活力低下及精子形态异常直接相关。由于男性精子发生及精子、精液的质量受众多因素的影响,... 详细信息

不孕不育是全球性的医学问题,据世界卫生组织统计,全球约有15%-20%的夫妻存在不孕不育的问题。目前大约80%以上的男性不育是与精子密度低、精子活力低下及精子形态异常直接相关。由于男性精子发生及精子、精液的质量受众多因素的影响,尤其是现在环境污染日趋严重,及某些未知的遗传因素,使男性不育比例逐渐升高。与之相应,辅助生殖技术也在迅速发展,但对男性不育病

关键词：男性不育生殖系统生殖细胞应用性研究离心机

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