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实用医学杂志 2010年第2期26卷 190-192页

作者：陈栋李明尹注增刘斌陈刚张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉市430030

目的:探讨CD3/Crry共刺激通路对小鼠CD4+T细胞的免疫调控及其机制。方法:分离C57BL/6小鼠的脾脏CD4+T细胞,体外检测CD3、CD28、Crry、CD3/CD28、CD3/Crry、CD3/CD28/Crry共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介... 详细信息

目的:探讨CD3/Crry共刺激通路对小鼠CD4+T细胞的免疫调控及其机制。方法:分离C57BL/6小鼠的脾脏CD4+T细胞,体外检测CD3、CD28、Crry、CD3/CD28、CD3/Crry、CD3/CD28/Crry共刺激对CD4+T细胞增殖的作用效果,并检测其细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:与CD3组相比,CD3/CD28、CD3/Crry和CD3/CD28/Crry共刺激后,CD4+T细胞均出现显著增殖反应(P<0.05),而且CD3/CD28/Crry共刺激组的增殖活性较CD3/CD28或CD3/Crry共刺激组显著增高(P<0.05)。CD3/CD28共刺激后,IL-2和IFN-γ水平较CD3、CD28、Crry组和CD3/Crry组显著升高(P<0.05),CD3/Crry共刺激后,IL-4水平较CD3、CD28、Crry组和CD3/CD28共刺激组显著升高(P<0.05),各组IL-10水平无显著差异(P>0.05)。结论:CD3/Crry共刺激通路诱导CD4+T细胞产生分泌IL-4,抑制IL-2和IFN-γ的产生,有可能诱导同种移植免疫低反应性。

关键词： T淋巴细胞 CD3/Crry 共刺激通路 CD4+T细胞

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重视移植免疫学基础研究转化为临床应用

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中华器官移植杂志 2014年第5期35卷 257-260页

作者：陈刚朱有华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 第二军医大学长征医院全军器官移植研究所

20世纪以来，随着器官移植外科技术、移植免疫基础研究以及各种免疫抑制剂研究的深入，器官移植已成为临床治疗器官功能衰竭的有效手段。虽然目前移植器官的短期存活率得到极大的提高，但长期存活率仍不理想，其主要原因仍然是移植免疫... 详细信息

20世纪以来，随着器官移植外科技术、移植免疫基础研究以及各种免疫抑制剂研究的深入，器官移植已成为临床治疗器官功能衰竭的有效手段。虽然目前移植器官的短期存活率得到极大的提高，但长期存活率仍不理想，其主要原因仍然是移植免疫反应。为进一步改善器官移植的效果，必须重视移植免疫学基础与临床研究。

关键词：器官移植免疫学基础临床应用长期存活率转化免疫基础研究器官功能衰竭移植免疫反应

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肾移植后早期抗体介导排斥反应的临床特点与治疗四例报道

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中华器官移植杂志 2016年第4期37卷 216-219页

作者：卢峡朱兰明长生陈知水陈忠华宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨肾移植术后早期抗体介导的排斥反应（AMR）的临床特点和治疗。方法回顾分析3例肾移植及1例肾移植术后胰腺移植后早期发生AMR受者的临床资料。（1）病例1诊断为早期重度急性AMR，术后第8天开始出现血肌酐水平持续上升，且尿量迅... 详细信息

目的探讨肾移植术后早期抗体介导的排斥反应（AMR）的临床特点和治疗。方法回顾分析3例肾移植及1例肾移植术后胰腺移植后早期发生AMR受者的临床资料。（1）病例1诊断为早期重度急性AMR，术后第8天开始出现血肌酐水平持续上升，且尿量迅速减少，移植肾血流减少；术后第12天群体反应性抗体（PRA）Ⅰ类为74．6％，11类为2．7％。术后第14天行移植肾穿刺活检显示移植肾广泛缺血和局部出血，同时检测DSA结果显示抗1362平均荧光强度（MFI）为6800。（2）病例2诊断为早期轻度急性AMR，术后第13天复查PRAI类为65．6％，Ⅱ类为78．9％，DSAI为阳性，抗A11MFI为3059，DSAⅡ为阴性，术后第21天时行移植肾穿刺活检显示轻度缺血再灌注损伤表现。（3）病例3诊断为早期重度慢性AMR，受者因Ⅰ型糖尿病、尿毒症先后接受肾移植和胰腺移植，胰腺移植后8个月时，检测针对胰腺供者DSA为阳性，抗A2MFI为7514，抗1346MFI为3159，抗DQ7MFI为1503。（4）病例4诊断为早期混合性排斥反应，术后第8天出现血肌酐升高，术后第14天检测PRAⅠ类为3％，Ⅱ类为70％，DSA为阳性，抗DR16MFI为15170；术后第16天行移植肾穿刺活检显示移植肾急性混合性排斥反应。结果病例1和病例3因AMR的诊断和治疗不及时导致移植物功能丧失；病例2和病例4在诊断AMR后，使用血浆置换、丙种球蛋白和硼替佐米等联合治疗后移植肾功能恢复正常。结论AMR的诊断需要结合移植物功能下降、DSA阳性以及移植物活检病理表现进行综合判断。早期诊断、早期治疗以及联合治疗可以提高AMR的治愈率。

关键词：移植体液性排斥反应供体特异性抗体群体反应抗体

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肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞数量与肝移植后肿瘤早期复发的相关性研究

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中华器官移植杂志 2016年第2期37卷 76-80页

作者：冯锦城杨博代辰张波谭如梦王媒西魏来陈栋陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞（CTC）数量与肝移植后肿瘤早期复发的相关性。方法以2013年10月至2014年11月因原发性肝癌行肝移植的42例受者为对象，肝移植前影像学检查均未见肿瘤肝外转移灶，移植后均经病理检查明确原发病的... 详细信息

目的探讨肝癌患者外周血中循环肿瘤细胞（CTC）数量与肝移植后肿瘤早期复发的相关性。方法以2013年10月至2014年11月因原发性肝癌行肝移植的42例受者为对象，肝移植前影像学检查均未见肿瘤肝外转移灶，移植后均经病理检查明确原发病的诊断。采用CellSearchSys-tern设备检测患者肝移植前外周血CTC，肝移植后对所有受者随访1年，随访期间记录肿瘤复发和转移情况，用x2检验和Cox风险比例模型分析受者肿瘤的复发时间、临床病理资料与CTC的关系。结果42例受者中肝移植前外周血CTC阴性者13例（31．0%，13／42），呈阳性者29例（69．0％，29／42）。单因素分析显示，CTC的数量与肿瘤分化程度（X2=10．403，P=0．006）和TNM分期（X2=7．119，P=0．005）有关。随访期间，42例受者中有20例复发（其中18例CTC阳性），单因素分析显示，TNM分期（X2=5．599，P=0．010）、CTC数量（X2=6．083，P=0．007）与肝癌早期复发有关。Cox风险比例模型显示，CTC数量可以作为肝癌患者肝移植后预测肿瘤复发时间的独立预后因素，CTC≥1个者的复发时间明显早于CTC阴性者（P〈0．05）。结论肝癌患者肝移植前外周血中检出CTC者，其肝移植后早期易肿瘤复发；CTC可以作为判断肝癌患者肝移植后肿瘤复发时间的独立指标。

关键词：肝癌肝移植循环肿瘤细胞复发

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供者特异性抗体对难治性移植肾功能恢复延迟的影响二例报道

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中华器官移植杂志 2016年第4期37卷 212-215页

作者：朱兰陈刚张伟杰郭晖林正斌杜敦峰陈松施辉波陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨肾移植术后新生供者特异性抗体（DSA）对难治性移植肾功能恢复延迟（EGF）的影响。方法病例1为42岁女性，接受丈夫供肾的活体供肾移植，受者术前群体反应性抗体（PRA）曾轻度升高，但术前DSA和淋巴细胞毒交叉配合试验（cDC）阴... 详细信息

目的探讨肾移植术后新生供者特异性抗体（DSA）对难治性移植肾功能恢复延迟（EGF）的影响。方法病例1为42岁女性，接受丈夫供肾的活体供肾移植，受者术前群体反应性抗体（PRA）曾轻度升高，但术前DSA和淋巴细胞毒交叉配合试验（cDC）阴性；病例2为49岁女性，接受公民逝世后器官捐献（D（、D）供者供肾移植，术前PRA和CDC均为阴性。2例受者术后均出现难治性DGF，且DGF超过1个月未逆转。病例1术后10dPRA轻度升高（PRAI类为28％），流式CDC（Flow-CDC）检测显示为低水平DSA（13．9%）；病例2在术后17d通过Luminex单抗原微珠法检测II类DSA阳性（抗DR9，平均荧光度MFI2500）。2例受者经移植肾穿刺活检均未发现急性抗体介导排斥反应的典型病理表现。结果病例1未经特殊处理，于术后6周恢复尿量，术后第62天血肌酐降至96μmol／L。病例2经血浆置换＋静脉注射用免疫球蛋白（WIG）处理后DSA转阴，术后7周恢复尿量，第56天血肌酐降至95μmol／L。结论早期新生DSA在水平较低和细胞毒作用较弱时可能不足以引起急性抗体介导的排斥反应，而主要表现为移植肾。肾小管损伤，导致DGF的恢复时间显著延长。及时发现和有效清除DSA能促进延期恢复的DGF早日逆转。

关键词：肾移植移植肾功能恢复延迟供者特异性抗体

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灵长类动物ABO血型不合肾移植后超急性排斥反应模型的建立

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中华器官移植杂志 2014年第7期35卷 421-425页

作者：王军祥钟山王筱啸陈松陈实陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生和计划生育委员会器官移植重点实验室武汉430030

目的建立灵长类动物ABO血型不合肾移植后超急性排斥反应模型.方法选择B型血食蟹猴为受者,A型血食蟹猴为供者,行ABO血型不合同种肾移植.根据是否接受致敏预处理,将受者猴分为2组：（1）未致敏对照组（n=1）,直接施行血型不合的同种肾... 详细信息

目的建立灵长类动物ABO血型不合肾移植后超急性排斥反应模型.方法选择B型血食蟹猴为受者,A型血食蟹猴为供者,行ABO血型不合同种肾移植.根据是否接受致敏预处理,将受者猴分为2组：（1）未致敏对照组（n=1）,直接施行血型不合的同种肾移植术;（2）KLH-A预致敏组（n=3）,预先皮下注射钥孔戚血蓝蛋白（KLH）偶联血型抗原A（KLH-A抗原）,致敏2周后施行血型不合的同种肾移植术.检测受者猴血清抗A血型抗体水平的变化,观察两组受者猴在移植术中开放血流1h内及术后移植肾存活情况,并对移植肾进行病理学检测及诊断.结果在术中未观察到未致敏对照组移植肾超急性排斥反应的发生,术后存活超过30 d（血肌酐为263 μmol/L）;KLH-A预致敏组3例受者猴在致敏后14 d,血清中抗A抗体水平显著升高,肾移植术中血流开放1h内移植物即转为紫黑色,HE染色及免疫荧光检测证实均发生超急性排斥反应.结论通过KLH偶联血型抗原预先致敏,以显著升高受者猴相应血型抗体水平的策略,能成功建立灵长类动物ABO血型不合肾移植超急性排斥反应模型.

关键词： ABO血型不合肾移植超急性排斥反应灵长类动物

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儿童供肾移植的免疫抑制方案探讨

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中华器官移植杂志 2015年第8期36卷 465-468页

作者：朱兰陈松林正斌张伟杰曾凡军刘斌杜敦峰卢峡蒋继贫陈知水陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨适合公民逝世后器官捐赠儿童供肾移植的免疫抑制方案。方法回顾总结单中心自2013年7月至2015年8月实施的46例儿童供肾移植的免疫抑制方案。46例中，双肾整块移植14例，供者年龄为（61．2±63．2）d，受者体质量为（39．0... 详细信息

目的探讨适合公民逝世后器官捐赠儿童供肾移植的免疫抑制方案。方法回顾总结单中心自2013年7月至2015年8月实施的46例儿童供肾移植的免疫抑制方案。46例中，双肾整块移植14例，供者年龄为（61．2±63．2）d，受者体质量为（39．0±9．9）kg，多数采用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（rATG）诱导治疗及环孢素A＋麦考酚钠肠溶片（MPA）的维持方案；单肾移植32例，供者年龄为（2．8±2．3）岁，受者体质量为（47．3±10．6）妇，经rATG或巴利昔单抗诱导治疗，多数采用他克莫司＋吗替麦考酚酯（MMF）或MPA的方案。结果双肾整块移植受者发生移植肾功能恢复延迟（DGF）2例（14．3％），急性排斥反应0例，肺部感染1例（7．1％）。单肾移植受者发生DGF4例（12．5％），急性排斥2例（6．3％），肺部感染6例（18．8％）。结论根据儿童供肾移植的特点选择合适的诱导治疗及维持免疫抑制治疗方案，能够取得满意的移植效果。

关键词：肾移植移植物儿童供者免疫抑制剂

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新型器官保存液抗脐静脉内皮细胞凋亡作用的研究

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中华器官移植杂志 2007年第5期28卷 312-313页

作者：曾宁徐逸胡涛左利群周鸿敏陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

由于供者器官在获取、保存和移植过程中难以避免的会遭遇冷缺血、热缺血及缺血再灌注损伤，这将影响供者血管内皮细胞的生存状态。缺血时间过长及器官保存液都会启动血管内皮细胞凋亡基因，引起血管内皮的损伤，从而导致移植物功能恢复... 详细信息

由于供者器官在获取、保存和移植过程中难以避免的会遭遇冷缺血、热缺血及缺血再灌注损伤，这将影响供者血管内皮细胞的生存状态。缺血时间过长及器官保存液都会启动血管内皮细胞凋亡基因，引起血管内皮的损伤，从而导致移植物功能恢复延迟，甚至原发性移植物无功能，并目可缩短移植物的存活时间，引起慢性移植物功能丧失。

关键词：器官保存液脐静脉内皮细胞原发性移植物无功能凋亡作用缺血再灌注损伤血管内皮细胞细胞凋亡基因慢性移植物

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西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较

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中华器官移植杂志 2009年第2期30卷 100-102页

作者：何凡陈知水蔡明徐胜元吴敏华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β... 详细信息

目的比较西罗莫司（SRL）和环孢素A（CsA）对体外诱导CD4^＋T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响。方法使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体（简称抗CD3单抗和抗CD28单抗）刺激CD4^＋T淋巴细胞，并在培养体系中分别加入转化生长因子β（TGF-β）；TGF-β＋白细胞介素6（IL-6）；TGF-β＋IL-6＋SRL；TGF-β＋IL-6＋CsA。72h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平，观察CD4^＋T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4^＋T淋巴细胞体外分化的影响。结果在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后，TGF-β可诱导Foxp3^＋细胞（调节性T淋巴细胞，Treg）的增殖与分化，而TGF-β＋IL6可诱导Th17细胞的增殖与分化。在培养体系中加入SRL和CsA，均可使Th17细胞的增殖与分化减少；SRL可促进Treg的增殖与分化，而CsA抑制Treg的增殖与分化。结论SRL可以促进CD4^＋T淋巴细胞向Treg增殖与分化，而抑制Th17细胞的增殖与分化；CsA既抑制Treg的增殖与分化，又抑制Th17细胞的增殖与分化。

关键词：西罗莫司环孢菌素 T淋巴细胞细胞分化

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短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡

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中国免疫学杂志 2010年第2期26卷 151-154页

作者：陈栋张艳李明尹注增陈刚张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉430030

目的:探讨短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果。方法:构建针对大鼠补体受体C5aR基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-C5aR shRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418... 详细信息

目的:探讨短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果。方法:构建针对大鼠补体受体C5aR基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-C5aR shRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系。实验分为3组,①正常对照组:未转染的RK3E细胞;②阴性对照组:转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;③实验组:转染C5aR shRNA的RK3E细胞系。经脂多糖(LPS)孵育12小时后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达,γ计数仪测定125I标记的C5a与RK3E的结合情况。结果:与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),C5aR mRNA水平显著降低(P<0.01),125I标记的C5a与RK3E结合活性显著下降。结论:针对C5aR的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的发生。

关键词： RNA干扰 C5aR 基因沉默凋亡

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