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TGF-β1诱导CD4^+CD25^-T细胞分化为CD4^+CD25^+调节性T细胞

免疫学杂志 2007年第6期23卷 589-592,597页

作者：袁劲吴轲徐逸曾宁陈忠华华中科技大学同济医学院同济医院器官移植研究所教育部卫生部重点实验室武汉430030

目的研究TGF-β1诱导CD4+CD25+调节性T细胞分化的能力及其相关机理。方法①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度... 详细信息

目的研究TGF-β1诱导CD4+CD25+调节性T细胞分化的能力及其相关机理。方法①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组),共同培养5天后,用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞比例;同时用RT-PCR检测培养细胞中Foxp3的表达水平。②在第一部分实验基础上,通过MACS分离获取C57BL/6小鼠CD4+CD25-T细胞,用同种抗原刺激后,给予TGF-β1干预,培养5d后分离CD4+CD25+T细胞,利用混合淋巴细胞培养系统检测其抑制淋巴细胞增殖的能力。结果T细胞经同种抗原刺激后,在中、高浓度TGF-β1诱导下CD4+CD25+T细胞比例均明显升高,Foxp3的表达水平也相应增加,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。TGF-β1可直接诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+T细胞,转化后的CD4+CD25+T细胞可有效抑制淋巴细胞增殖。结论TGF-β1可诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg,促进其表达Foxp3,并能够抑制淋巴细胞增殖。

关键词： TGF-β1 Foxp3 调节性T细胞

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慢性移植肾肾病的临床病理学特点与免疫抑制剂转换治疗

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中华器官移植杂志 2007年第7期28卷 420-424页

作者：宫念樵明长生郭晖陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨慢性移植肾肾病(CAN)的病理学特点与临床应对策略。方法对20例临床诊断为慢性移植肾功能减退、病理诊断为CAN者的病理资料进行系统分析,依据Banff97标准对肾小球硬化、间质纤维化、肾小管萎缩及小动脉内膜炎等CAN特征性表现进... 详细信息

目的探讨慢性移植肾肾病(CAN)的病理学特点与临床应对策略。方法对20例临床诊断为慢性移植肾功能减退、病理诊断为CAN者的病理资料进行系统分析,依据Banff97标准对肾小球硬化、间质纤维化、肾小管萎缩及小动脉内膜炎等CAN特征性表现进行综合评分后,做出病理诊断和分层分析。20例肾移植后采用以环孢素A(CsA)为基础的免疫抑制方案,诊断为CAN后,3例转换为他克莫司(FK506)与霉酚酸酯(MMF)联用,17例转换为西罗莫司(Sir)与MMF联用,比较转换治疗前后肾功能的变化。结果9例(45%,9/20)合并发生亚临床排斥反应,激素冲击治疗有效;20例均存在间质纤维化、肾小管萎缩与肾小球硬化。慢性移植肾功能减退对转换治疗的反应与间质纤维化和肾小管萎缩的程度无明显相关性,但与肾小球硬化率密切相关,肾小球硬化率低于30%者预后良好,超过50%者移植肾功能丧失。结论肾小球硬化率有可能成为判断CAN病变程度和预后的指标;治疗慢性移植肾功能减退时应重视合并发生的亚临床排斥反应,撤除CsA、采用Sir与MMF联用方案值得推荐。

关键词：肾病移植物活组织检查针吸治疗结果肾移植

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仿生学在移植免疫研究中的应用

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医学与哲学（B） 2007年第8期28卷 59-60页

作者：朱珉王璐谢林陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植国家教育部卫生部重点实验室湖北武汉430030

世界正在进入仿生学时代。在生命科学领域中进行仿真学研究,将极大地促进人类对生命现象的认知,并揭示其普遍规律。运用仿生学原理在天然模型面前扬其利,避其害,将为科学工作者提供一个崭新的科研思维平台。从仿生角度洞悉并破解移植免... 详细信息

世界正在进入仿生学时代。在生命科学领域中进行仿真学研究,将极大地促进人类对生命现象的认知,并揭示其普遍规律。运用仿生学原理在天然模型面前扬其利,避其害,将为科学工作者提供一个崭新的科研思维平台。从仿生角度洞悉并破解移植免疫奥秘将是一个具有广阔前景的创新源泉。

关键词：仿生学移植耐受

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不成熟树突状细胞体外诱导T细胞表达转录因子Foxp3

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中华器官移植杂志 2007年第6期28卷 339-342页

作者：汤高枫张伟杰陈必成张翔华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 温州医学院附属第一医院移植中心福建医科大学附属第一医院

目的探讨不成熟树突状细胞(imDCs)能否在体外诱导T细胞高表达转录因子Foxp3。方法体外无菌培养BALB/c小鼠骨髓来源的不成熟树突状细胞,并通过脂多糖(LPS)刺激诱导其分化为成熟树突状细胞(miDCs)。在96孔细胞培养板中分别以不成熟树突状... 详细信息

目的探讨不成熟树突状细胞(imDCs)能否在体外诱导T细胞高表达转录因子Foxp3。方法体外无菌培养BALB/c小鼠骨髓来源的不成熟树突状细胞,并通过脂多糖(LPS)刺激诱导其分化为成熟树突状细胞(miDCs)。在96孔细胞培养板中分别以不成熟树突状细胞(imDCs)2×10~4/孔和成熟树突状细胞(mDCs)2×10~4/孔与C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞以1:5、1:10、1:50、1:100的比例共同培养6 d。流式细胞术检测混合培养6 d后的淋巴细胞CD4、CD25及转录因子Foxp3的表达。结果imDCs及mDCs和淋巴细胞混合培养6 d后,淋巴细胞表面CD25的表达水平较正常淋巴细胞明显升高(P<0.05);mDCs与淋巴细胞混和培养6 d后,淋巴细胞表达Foxp3的水平与正常淋巴细胞差异无统计学意义(P>0.05),而用imDCs诱导则可使淋巴细胞表达Foxp3显著升高(P<0.05)。结论imDCs可以在体外诱导T细胞上调转录因子Foxp3的表达。

关键词：树突细胞 T淋巴细胞,辅助诱导

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CD8^+CD28^-NRP-1^+T细胞在肾移植手术后患者外周血中的比例变化及意义

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现代免疫学 2007年第3期27卷 234-239页

作者：童荔张利改周鸿敏蔡兰军徐逸吴轲李俊华陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部/卫生部重点实验室武汉430030 解放军总医院器官移植中心北京100091

用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例... 详细信息

用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义。选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例,慢性移植物肾病者20例,急性排斥者15例,取受试者外周静脉血,分离单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞在CD8^+CD28^-T细胞群中的比例。结果表明组间比较得出,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞比例在四组之间均有统计学差异(P<0.05)。其中在长期存活组表达量最高,其CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞和CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts的比例分别为16.15%±1.49%和11.90%±2.73%,其次为正常健康人(13.83%±2.38%、9.44%±2.03%),然后为慢性移植物肾病组(8.03%±2.67%、5.26%±0.65%),而急排组最低(3.34%±1.73%、2.36%±1.14%),并且四组间这两种细胞呈同一变化趋势且前者的变化幅度大于后者。组内比较显示,CD8^+CD28^-NRP-1^+Ts细胞比例均高于CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞(P<0.05)。CD8^+CD28 NRP-1^+Ts细胞可以从整体水平上反映肾移植术后患者的免疫状态,它比CD8^+CD28^-Foxp3^+Ts细胞更能全面的反映术后患者的预后情况。

关键词： neuropilin-1 Foxp3 CD8^+ CD28^- Ts细胞肾移植

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转化生长因子β_1对同种反应性T细胞增殖能力及CD25表达的影响

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医学研究生学报 2007年第6期20卷 563-566页

作者：袁劲吴轲向芙莉曾宁周鸿敏陈忠华器官移植教育部/卫生部重点实验室华中科技大学同济医学院同济医院器官移植研究所湖北武汉430030

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对同种反应性T细胞增殖能力及CD25表达水平的影响。方法:以丝裂霉素处理的Balb/C(H-2d)小鼠脾细胞为刺激细胞,羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记的C57BL/6(H-2b)小鼠T细胞为反应细胞进行混合淋巴细胞培... 详细信息

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对同种反应性T细胞增殖能力及CD25表达水平的影响。方法:以丝裂霉素处理的Balb/C(H-2d)小鼠脾细胞为刺激细胞,羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记的C57BL/6(H-2b)小鼠T细胞为反应细胞进行混合淋巴细胞培养(MLC)。分别设立对照组(TGF-β10 ng/ml)、低浓度组(TGF-β11ng/ml)、中浓度组(TGF-β15 ng/ml)和高浓度组(TGF-β120 ng/ml)。MLC结束后利用Alamar Blue检测T细胞增殖活性,流式细胞仪检测CD3、CD25表达水平。同时设立白细胞介素-2(IL-2)组(TGF-β15ng/ml+IL-2 100U/ml),以观测其对TGF-β1生物学效应的影响。结果:TGF-β1可明显降低同种抗原活化T细胞的增殖反应强度,而且随着TGF-β1剂量加大,免疫抑制能力增强。TGF-β1在抑制T细胞增殖的同时,也可使CD25+T细胞比例上调,但并无明显的剂量依赖性。加入外源性IL-2后,T细胞增殖活性增强,同时CD25+T细胞比例降低。结论:TGF-β1可明显抑制同种抗原活化T细胞的增殖,并使CD25+T细胞比例增加,而外源性IL-2则可逆转TGF-β1的免疫抑制功能,下调CD25+T细胞比例,说明外源性IL-2可以影响TGF-β1的生物学效应。

关键词：转化生长因子β1 白细胞介素-2 CD25

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血红素氧化酶-1对高血糖和高血脂诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

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实用医学杂志 2007年第24期23卷 3825-3827页

作者：张艳陈栋贡福盛刘健刘晓晴华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉市430030 器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室

目的:探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在高血糖和高血脂诱导内皮细胞损伤中的保护作用。方法:体外培养人的脐静脉内皮细胞,在D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L的刺激下,分别用氯化血红素和锌原卟啉-9诱导和阻断HO-1的表达,应用逆转录-聚合... 详细信息

目的:探讨血红素氧化酶-1(HO-1)在高血糖和高血脂诱导内皮细胞损伤中的保护作用。方法:体外培养人的脐静脉内皮细胞,在D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L的刺激下,分别用氯化血红素和锌原卟啉-9诱导和阻断HO-1的表达,应用逆转录-聚合酶链式反应和免疫细胞化学法检测HO-1mRNA和蛋白的表达,酶联免疫法检测培养上清液中碳氧血红蛋白,并检测内皮细胞的存活率、乳酸脱氢酶释放率和脂质过氧化产物丙二醛的含量。结果:D-葡萄糖25mmol/L和软脂酸250μmol/L条件下,氯化血红素可以促使HO-1的表达,培养上清液中碳氧血红蛋白的含量显著增加(P<0.05),并且显著地提高内皮细胞的存活率(P<0.05),乳酸脱氢酶的释放率和细胞内丙二醛的含量显著减少(P<0.05)。而应用锌原卟啉-9后,HO-1的保护性作用消失。结论:在高血糖和高血脂条件下HO-1可以明显减轻血管内皮细胞的损伤,起到明显的保护性作用。

关键词：高脂血症高血糖血红素氧化酶-1 内皮细胞

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肾移植术后免疫抑制剂的选择

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临床外科杂志 2007年第2期15卷 88-89页

作者：陈知水王海灏华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室 430030

肾移植术后,为了预防可能发生的排斥反应,医生会选用各种免疫抑制剂以抑制人体的自身免疫力.在移植术后近期,免疫抑制剂方案的选择是否适当,在很大程度上将影响移植受者的人、肾存活.由于免疫抑制剂方案的选择完全遵循个体化治疗的原则... 详细信息

肾移植术后,为了预防可能发生的排斥反应,医生会选用各种免疫抑制剂以抑制人体的自身免疫力.在移植术后近期,免疫抑制剂方案的选择是否适当,在很大程度上将影响移植受者的人、肾存活.由于免疫抑制剂方案的选择完全遵循个体化治疗的原则,因此,如何选择合适的免疫抑制剂方案是每个移植医生必须面对的一大课题.各种免疫抑制剂方案的选择要基于以下两个大的方面:①疗效最佳、副作用最小,避免因免疫抑制过度导致感染、其他脏器功能损害等;②药物之间的相互作用.本文就临床常见免疫抑制剂的应用,浅谈一己之见,旨在抛砖引玉.

关键词：肾移植免疫抑制剂选择

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肾移植术后发生淋巴细胞增生性疾病一例

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中华器官移植杂志 2007年第12期28卷 758-758页

作者：吴轲宫念樵明长生郭晖昌盛陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

肾移植受者长期应用免疫抑制剂，可导致其恶性肿瘤的发生率增加。据统计，我国1977年至2003年共施行肾移植13969例，术后发生恶性肿瘤210例，发生率为1．5％，其中淋巴瘤12例，占5．7％。2006年4月，我院收治了1例肾移植术后经病理检查... 详细信息

肾移植受者长期应用免疫抑制剂，可导致其恶性肿瘤的发生率增加。据统计，我国1977年至2003年共施行肾移植13969例，术后发生恶性肿瘤210例，发生率为1．5％，其中淋巴瘤12例，占5．7％。2006年4月，我院收治了1例肾移植术后经病理检查确诊为淋巴细胞增生性疾病（PTLD）的受者，报道如下。

关键词：细胞增生性疾病肾移植术后淋巴瘤肾移植受者恶性肿瘤免疫抑制剂长期应用病理检查

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重组人抗HBsAg-Fab阻断肝移植后HBV再感染的体外研究

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中国普通外科杂志 2007年第8期16卷 758-762页

作者：潘桃唐莉陈知水王大为程敦秀郭晖华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部卫生部重点实验室湖北武汉430030

目的研究重组合成抗乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的小分子抗体Fab阻断肝移植后乙肝病毒再感染的作用效应。方法通过体外抗原黏附实验,补体毒实验和病毒感染实验,计算抗原黏附率、细胞死亡率和细胞感染率,进行统计分析,研究抗体Fab... 详细信息

目的研究重组合成抗乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)的小分子抗体Fab阻断肝移植后乙肝病毒再感染的作用效应。方法通过体外抗原黏附实验,补体毒实验和病毒感染实验,计算抗原黏附率、细胞死亡率和细胞感染率,进行统计分析,研究抗体Fab的功能效应。结果在有、无重组抗体存在时,组间的抗原黏附率、细胞死亡率及细胞感染率对比,差异均有显著性(均为P<0.05),实验数据在统计学上有显著差异。结论重组合成抗体Fab能阻断抗原对靶细胞的黏附,能介导补体毒杀伤靶细胞,降低HBV对人原代肝细胞的感染率。基因重组的小分子抗体Fab的体外效应实验为其在体内临床应用打下基础。

关键词： :肝移植肝炎病毒乙型/免疫学重组人抗HbsAG-Fab 手术后并发症/预防与控制

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