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中华实验外科杂志 2011年第10期28卷 1756-1757,I0003页

作者：史嘉玮张米陈思董念国华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的探讨风湿性和退行性瓣膜钙化可能机制。方法分为风湿性病变、退行性病变（n=10）和对照组，行瓣膜钙化检测。结果苏木素．伊红（HE）染色观察病理变化，VonKossa染色显示病变瓣膜肉眼大致正常的组织内存在点状钙质沉积。免疫组织化... 详细信息

目的探讨风湿性和退行性瓣膜钙化可能机制。方法分为风湿性病变、退行性病变（n=10）和对照组，行瓣膜钙化检测。结果苏木素．伊红（HE）染色观察病理变化，VonKossa染色显示病变瓣膜肉眼大致正常的组织内存在点状钙质沉积。免疫组织化学显示两组病变瓣膜内层见骨钙素分布，瓣膜间质细胞内见Runx2分布。逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）显示病变瓣膜均有Runx2（灰度值0．297±0．154和0．287±0．172）和骨钙素（灰度值0．178±0．087和0．190±0．095）mRNA表达，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论风湿性和退行性钙化瓣膜都存在Runx2活化及其下游成骨信号蛋白骨钙素表达。肉眼观不能准确判断早期瓣膜钙化。

关键词：心脏瓣膜 Runx2 骨钙素钙化

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5kg以下婴儿一期矫治主动脉缩窄合并心内畸形的体外循环管理

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第2期42卷 234-236页

作者：胡琳周诚陈剑锋徐磊江萍李平王旸华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的总结5kg以下婴幼儿经胸骨正中切口一期矫治主动脉缩窄(CoA)合并心内畸形的体外循环(ECC)方法及临床经验。方法回顾性分析华中科技大学同济医学院附属协和医院2008年7月至2012年6月一期矫治CoA合并心内畸形35例患儿,男28例,女7例,年... 详细信息

目的总结5kg以下婴幼儿经胸骨正中切口一期矫治主动脉缩窄(CoA)合并心内畸形的体外循环(ECC)方法及临床经验。方法回顾性分析华中科技大学同济医学院附属协和医院2008年7月至2012年6月一期矫治CoA合并心内畸形35例患儿,男28例,女7例,年龄1～6(2.9±1.3)个月,其中小于3个月21例,体重2～5(4.1±0.9)kg,全部病例均经胸骨正中切口在深低温停循环(DHCA)结合选择性顺行脑灌注(SACP)下行主动脉弓重建。麻醉诱导后建立上、下肢动脉压监测,鼻咽温、肛温监测。体外循环开始后逐级降温至肛温25℃,鼻咽温22℃～23℃时停体外循环。通过将主动脉插管移至无名动脉进行SACP,流量25～35mL/(***)。主动脉弓重建完成后恢复主动脉插管,充分排气后全身灌注。全组病例均使用零平衡超滤+改良超滤技术。结果 ECC时间115～138(126.2±10.3)min,主动脉阻断36～68(44.1±4.5)min,SACP时间28～49(33.3±2.7)min。死亡1例,于术后9d死于严重的肺部感染。2例术后出现急性肾功能不全,经腹膜透析后恢复,全组患儿均无与ECC相关的中枢神经系统并发症。结论 5kg以下婴儿行一期矫治CoA合并心内畸形术中,使用DHCA结合SACP方法,采用"改良的"pH-稳态血气管理,合理血液稀释,零平衡超滤+改良超滤技术等综合保护策略有助于重要器官的保护,尤其是减少了术后中枢神经系统并发症的发生率。

关键词：婴儿主动脉缩窄体外循环

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腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞对调节活化正常T细胞表达和分泌因子趋化功能的影响

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中华实验外科杂志 2014年第8期31卷 1687-1689页

作者：孙永丰冯剑锷史嘉玮董念国华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs）对调节活化正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）趋化作用的影响.方法构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3 FLAG（Ad-S24F）腺病毒载体,将不含目的基因的病毒载体pAV-MCMV-GFP （Ad-Null... 详细信息

目的观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs）对调节活化正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）趋化作用的影响.方法构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3 FLAG（Ad-S24F）腺病毒载体,将不含目的基因的病毒载体pAV-MCMV-GFP （Ad-Null）为阴性对照组.分离培养HUVECs后分别转染Ad-S24F和Ad-Null,另设不含腺病毒培养基为空白对照.转染后采用荧光显微镜及Western blot检测重组蛋白表达.采用Transwell小室法分析S24F对RANTES趋化作用的影响.结果 Ad-S24F及Ad-Null构建成功,转染HUVECs后荧光显微镜及Western blot能检测到重组蛋白表达,Ad-S24F转染后能够抑制RANTES诱导的外周血单个核细胞（PBMCs）穿透内皮[Ad-S24F：（9.20 ±0.02）％;Ad-Null：（17.70±0.02）％;空白对照组（15.10±0.01）％]的趋化作用.结论腺病毒介导S24F基因转染HUVECs能够抑制RANTES的趋化作用.

关键词： S24F基因调节活化正常T细胞表达和分泌因子腺病毒载体基因转染

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先天性冠状动脉瘘的外科治疗

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华中科技大学学报（医学版） 2012年第4期41卷 470-471,480页

作者：周诚王国华肖诗亮杜心灵胡志伟张凯伦董念国华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的总结先天性冠状动脉瘘的外科治疗及相关经验。方法回顾分析武汉协和医院心血管外科2000年1月至2011年5月54例先天性冠状动脉瘘患者,其中男性35例,女性19例。平均年龄(23.0±21.4)岁。51例患者瘘口为单个,3例为多发瘘口。共计57... 详细信息

目的总结先天性冠状动脉瘘的外科治疗及相关经验。方法回顾分析武汉协和医院心血管外科2000年1月至2011年5月54例先天性冠状动脉瘘患者,其中男性35例,女性19例。平均年龄(23.0±21.4)岁。51例患者瘘口为单个,3例为多发瘘口。共计57个瘘口。其中11个汇入右心室(19.3%),16个汇入右心房(28.1%),23个汇入肺动脉(40.3%),2个汇入左心室(3.5%),5个汇入冠状静脉(8.8%)。有34个瘘口来源于右冠状动脉,23个瘘口来源于左冠状动脉,其中有1例多发瘘口,分别起源于左、右冠状动脉。有3例罕见病例为回旋支汇入右房。合并有其它畸形的患者22例(38.9%)。手术方式:34例在体外循环下行经心腔或肺动脉瘘口缝闭术,其中4例因瘘口较大,用补片予以修补,以避免张力过高;14例行冠状动脉切开瘘口修补;6例患者行单纯结扎。结果患者无死亡。术后随访(3.0±2.3)年,心功能均为Ⅰ～Ⅱ级。无残余漏发生。3例患者随访中发现瘘口残端血栓形成。结论有症状或有明显左向右分流的冠状动脉瘘患者,均应争取手术治疗。根据病变的病理特点、有无心内畸形决定手术方式。冠状动脉瘘手术效果优良。

关键词：冠状动脉瘘外科,手术

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双片法冠状静脉窦隔入右心房治疗完全性房室隔缺损

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中华外科杂志 2008年第13期46卷 1030-1031页

作者：邱雪峰董念国孙宗全苏伟吴龙华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

完全性房室隔缺损是一种复杂先天性心脏病。我院于2003年1月至2007年3月共手术治疗完全性房室隔缺损25例，现总结如下。

关键词：完全性房室隔缺损手术治疗冠状静脉窦隔右心房双片法复杂先天性心脏病

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Abelson非受体酪氨酸激酶及肌动蛋白动态细胞骨架结构在夹层主动脉组织中的变化

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中华实验外科杂志 2012年第3期29卷 488-490页

作者：孙图成杜心灵蒋雄刚张凯伦陈澍华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的探讨Abelson非受体酪氨酸激酶（c—Abl）及肌动蛋白骨架结构与主动脉夹层的关系。方法夹层主动脉标本获取自行A型主动脉夹层手术的患者，分为高血压组（／7,=9）和正常血压组（n=15），对照组来自移植心脏的主动脉标本（n=8）。bax... 详细信息

目的探讨Abelson非受体酪氨酸激酶（c—Abl）及肌动蛋白骨架结构与主动脉夹层的关系。方法夹层主动脉标本获取自行A型主动脉夹层手术的患者，分为高血压组（／7,=9）和正常血压组（n=15），对照组来自移植心脏的主动脉标本（n=8）。bax蛋白与bcl-2蛋白比值评估凋亡水平。纤维化肌动蛋白（***）和球状单体肌动蛋白（***）含量比值分析肌动蛋白细胞骨架动态结构。免疫印迹分析测量***和磷酸化***蛋白水平。结果bax蛋白与bcl-2蛋白比值在正常对照组，高血压夹层组和正常血压夹层组内分别为（0．97±0．02、2．45±0．06、2．30±0．12），夹层组中比值升高（P〈0．叭）。F—actin与G—actin含量比值分别为（1．53±0．03、3．00±0．03、2．72±0．04），夹层组中比值升高（P〈0．01）。***蛋白含量比值分别为（0．12±0．01、0．36±0．01、0．41±0．02），夹层组中含量增加（P〈0．01）；磷酸化c—Abl蛋白含量比值分别为（0．0047±0．0003、0．023±0．001、0．021±0．001），夹层组中含量增加（P〈0．01）。上述数据在高血压组与正常血压组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论c-Abl及其激活与主动脉夹层的相关性。C-Abl及其激活可能通过调节血管平滑肌细胞的凋亡和肌动蛋白细胞骨架结构来参与主动脉夹层的发生和发展。

关键词：主动脉夹层肌动蛋白 Abelson非受体酪氨酸激酶

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大鼠自体颈外静脉移植模型的建立及改进

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华中科技大学学报（医学版） 2010年第1期39卷 106-108页

作者：肖雅琼孙宗全张凯伦刘金平孟刘昆周元刘隽伟华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的建立自体颈外静脉移植于颈动脉的动物模型,以模拟冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄的病理过程。方法将一段大鼠颈外静脉分支游离,同侧颈总动脉切断,采用2点定位连续吻合法将颈外静脉分支两端分别与颈总动脉断端行端端吻合。术后超... 详细信息

目的建立自体颈外静脉移植于颈动脉的动物模型,以模拟冠状动脉旁路移植术后静脉桥再狭窄的病理过程。方法将一段大鼠颈外静脉分支游离,同侧颈总动脉切断,采用2点定位连续吻合法将颈外静脉分支两端分别与颈总动脉断端行端端吻合。术后超声检查血管通畅情况,于第3、7、14、28、42天取材,行苏木精-伊红染色,观察内膜增生情况。结果吻合完成时各吻合口均通畅,无出血、狭窄及血管扭曲等情况。超声检查示术后早期(3 d内)桥管通畅率94%。后期静脉桥管壁逐渐增厚,管腔逐渐狭窄,病理切片显示内膜不同程度增生。结论大鼠自体颈外静脉移植模型能真实反映冠脉旁路移植术后静脉桥狭窄的情况,是进一步研究移植静脉内膜增生的理想模型。连续吻合法建立大鼠颈外静脉移植模型,较以往常用的间断吻合法时间短,出血少,通畅率高。

关键词：模型,动物移植移植物闭塞,血管大鼠

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IL-10基因多态性与冠状动脉疾病相关性研究

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华中科技大学学报（医学版） 2007年第5期36卷 614-616页

作者：陈剑孙宗全夏家红徐磊华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区-1082位点多态性与冠状动脉疾病(CAD)相关性及其对血清IL-10水平的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)检测50例CAD患者、60例健康对照者基因组DNAIL-10基因启... 详细信息

目的探讨白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区-1082位点多态性与冠状动脉疾病(CAD)相关性及其对血清IL-10水平的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)检测50例CAD患者、60例健康对照者基因组DNAIL-10基因启动子区域-1082位点的基因多态性,并进行相关性分析。用双抗体夹心ELISA法测定血清IL-10水平。结果CAD组血清IL-10水平显著低于健康对照组(P<0.05)。CAD组和健康对照组IL-10-1082A/G基因型和等位基因频率比较,差异有显著性意义。等位基因频率的相对风险分析显示,A等位基因携带者患CAD的相对风险是G等位基因的2.827倍。携带A等位基因的CAD患者血清IL-10水平显著低于非携带者。结论IL-10基因启动子-1082位点多态性影响血清IL-10水平并可能与CAD的临床发展过程相关,其中A等位基因可能是CAD发病的遗传易感基因。

关键词：冠状动脉疾病白细胞介素-10 基因多态性

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携带质粒的PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及细胞相容性研究

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第4期42卷 377-381页

作者：程龙刘成珪张凯伦胡志伟李源华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉420022

目的构建携带tPA基因质粒的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒-超声微泡复合体,检测其理化性质、体外缓释方式、细胞相容性。方法应用双次乳化法制备携有tPA基因质粒的PLGA纳米粒;应用薄膜水化超声法制备阳离子超声微泡;两者通过静电... 详细信息

目的构建携带tPA基因质粒的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒-超声微泡复合体,检测其理化性质、体外缓释方式、细胞相容性。方法应用双次乳化法制备携有tPA基因质粒的PLGA纳米粒;应用薄膜水化超声法制备阳离子超声微泡;两者通过静电吸附作用,形成质粒-纳米粒-超声微泡复合体(plasmid encapsulated nanoparticle-mi-crobubble complex,PENMC)。检测PLGA纳米粒的质粒载量,该复合体PENMC的质粒载量;检测PLGA纳米粒及复合体体外缓释质粒的情况;CCK-8法检测纳米粒及复合体PENMC的细胞毒性。结果检测携带质粒的纳米粒粒径为(217.2±2.2)nm,zeta电位为(-15.24±0.83)mV。微泡平均大小为(3.2±1.5)μm,zeta电位为(13.66±2.05)mV。微泡浓度为(4.3±1.1)×108/mL。PENMC平均直径为(4.6±1.7)μm,zeta电位为(2.23±1.45)mV。浓度为(3.0±1.3)×108/mL。1mg PLGA纳米粒载有质粒(42.3±2.1)μg。1mL PENMC中带有质粒(20.5±2.7)μg。PLGA纳米粒及复合体PENMC前7d累计释放量均为(57±3)%。起始段短时间内快速释放,后呈现稳定、缓慢释放。体外细胞毒实验证实PLGA纳米粒及复合体PENMC均未见明显细胞毒性效应。结论所构建的纳米粒-超声微泡复合体显示出较好的缓释效果,较低的细胞毒性,为后续将其应用于基因治疗奠定了实验基础。

关键词：纳米粒超声微泡造影剂组织型纤溶酶原激活因子抗凝治疗非病毒载体

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NF-κB激活对缺血再灌注心肌TNF-α和IL-1β表达的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第6期38卷 752-755,759页

作者：孙图成蒋雄刚张凯伦孙宗全华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的探讨心肌缺血再灌注损伤时NF-κB激活对TNF-α和IL-1β表达的影响。方法65只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=5);对照组(心肌缺血30 min后再分别灌注0、15、30、60、120、240 min,每个时间点n=5);PDTC干预组,术前给予PDTC 15 mg/kg,... 详细信息

目的探讨心肌缺血再灌注损伤时NF-κB激活对TNF-α和IL-1β表达的影响。方法65只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=5);对照组(心肌缺血30 min后再分别灌注0、15、30、60、120、240 min,每个时间点n=5);PDTC干预组,术前给予PDTC 15 mg/kg,其它与对照组相同。RT-PCR检测TNF-α和IL-1βmRNA表达,电泳迁移率实验(EMSA)检测NF-κB活性,硫代巴比妥酸法测定心肌MDA含量。结果TNF-α和IL-1β表达在再灌注开始之前即有升高,分别在再灌注30和60 min达到高峰,再灌注120 min仍维持较高水平;NF-κB在再灌注15 min开始激活,至再灌注60 min达到高峰。PDTC干预组的NF-κB激活被阻断,与对照组各时间点相比,TNF-α和IL-1βmRNA表达均不同程度下降,MDA含量减少。结论NF-κB激活对缺血再灌注心肌细胞因子表达具有重要作用,抑制NF-κB信号通路可能对于再灌注损伤具有潜在的治疗价值。

关键词：心肌再灌注损伤核因子kappaB 细胞因子

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