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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：田拥军覃莉张正茂杨东亮武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室

目的建立稳定表达G145R HBsAg的细胞系,并对细胞性质做初步鉴定。方法构建了可以在真核细胞表达G145R HBsAg的重组质粒PCI-HBs145。用此质粒转染Hela细胞,经克隆化培养以及G418 筛选,建立稳定表达G145R HBsAg的细胞系。对其中Hela 2A8... 详细信息

目的建立稳定表达G145R HBsAg的细胞系,并对细胞性质做初步鉴定。方法构建了可以在真核细胞表达G145R HBsAg的重组质粒PCI-HBs145。用此质粒转染Hela细胞,经克隆化培养以及G418 筛选,建立稳定表达G145R HBsAg的细胞系。对其中Hela 2A8细胞系表达的蛋白性质进行了鉴定,对

关键词：细胞系 HBsAg 乙型肝炎病毒稳定表达 G145R 初步鉴定

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武汉地区儿童乙肝患者HBV S基因“a”决定簇变异的研究

武汉地区儿童乙肝患者HBV S基因“a”决定簇变异的研究

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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：胡权杨东亮武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室

目的本课题旨在通过调查武汉市儿童中普遍存在的HBV流行株,初步研究本地区儿童乙肝患者中HBV S基因变异株的分子病毒学特征,探索HBV变异的原因及流行病学意义。方法本研究通过流行病学调查筛选出30例经乙型肝炎疫苗免疫的儿童乙肝患者... 详细信息

目的本课题旨在通过调查武汉市儿童中普遍存在的HBV流行株,初步研究本地区儿童乙肝患者中HBV S基因变异株的分子病毒学特征,探索HBV变异的原因及流行病学意义。方法本研究通过流行病学调查筛选出30例经乙型肝炎疫苗免疫的儿童乙肝患者作为实验组及30例未免疫儿童乙肝患者作为对照组,利用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV S基因片段,直接将PCR产物进行DNA序列测定,结

关键词：乙肝患者变异株 HBV S 乙型肝炎疫苗武汉地区

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中国旱獭WHV人工感染模型的建立

中国旱獭WHV人工感染模型的建立

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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

目的建立中国旱獭WHV人工感染模型,为进一步研究HBV发病机制、筛选抗病毒治疗药物和疫苗奠定基础。材料与方法采用静脉注射的方法,将含5×106Eq的WHV接种中国旱獭,隔周采血一次,监测WHV血清学指标,在病毒血症的高峰期取动物肝组织,... 详细信息

目的建立中国旱獭WHV人工感染模型,为进一步研究HBV发病机制、筛选抗病毒治疗药物和疫苗奠定基础。材料与方法采用静脉注射的方法,将含5×106Eq的WHV接种中国旱獭,隔周采血一次,监测WHV血清学指标,在病毒血症的高峰期取动物肝组织,检测WHV DNA复制中间体和转录子, 并检测病毒抗原的表达。结果 WHV人工感染旱獭后血清WHsAg和WHV DNA在4周开始检出,第8～

关键词：感染模型人工感染 WHV

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嗜肝DNA病毒感染的动物模型研究进展

嗜肝DNA病毒感染的动物模型研究进展

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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：杨东亮武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室传染病学教研室

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV,也包括其他哺乳动物的嗜肝病毒,如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和长毛... 详细信息

动物模型是人们了解病毒复制、病毒感染自然史、病毒持续感染和致病的分子机制,研制有效抗病毒药物和疫苗的不可或缺的工具。嗜肝DNA病毒不仅包括HBV,也包括其他哺乳动物的嗜肝病毒,如土拨鼠肝炎病毒(WHV)、地松鼠肝炎病毒(GSHV)和长毛猴肝炎病毒(WMHV),以及禽嗜肝病毒,

关键词：动物模型病毒感染 DNA

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商陆抗病毒蛋白体外抑制HBV的实验研究

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临床肝胆病杂志 2004年第2期20卷 80-82页

作者：潘延凤贺永文王萍郭劲松华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病教研室湖北武汉430022

探讨商陆抗病毒蛋白 (pokeweedativiralproteinPAP)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的作用。不同浓度的PAP-S(pokeweedantiviralproteinfromseeds)作用于HepG2 2 15 ,应用ELISA、荧光定量PCR ,分别检测药物作用后细胞上清液的HBsAg、HBeAg、HBVDNA水平的变化。PAP -S处理HepG2 2 15后 72h发现 ,PAP -S在 >1μg/ml时有明显的抗HBV效应 ,在所试验浓度范围 (1- 10 ) μg/ml内 ,倒置显微镜下未发现明显的细胞毒性 ,PAP -S为 5 0 μg/ml时 ,发现部分细胞脱壁。PAP -S对HBsAg、HBeAg、HBVDNA呈剂量时间依赖性。PAP

关键词：商陆抗病毒蛋白体外抑制 HBV 实验乙型肝炎病毒核糖体失活蛋白

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日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠保护力的观察

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中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 300-303页

作者：李文桂石佑恩重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所 400016 华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室

目的探讨日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用106和108CFU疫苗皮下接种免疫BALB/C鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察肝脏病理变化,测量虫卵... 详细信息

目的探讨日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用106和108CFU疫苗皮下接种免疫BALB/C鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察肝脏病理变化,测量虫卵肉芽肿周长和面积,测定血清中CAg、IgG及其亚类水平,同时设有PBS和BCG对照。结果疫苗接种组的减虫率为16.64%～46.20%,减卵率为55.75%～60.50%,肝组织病变明显减轻,虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积显著减少,血清IgG和IgG2a水平明显升高,108CFU组CAg升高。结论日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗是一种新型比较理想的疫苗,值得进一步深入研究。

关键词：日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫接种小鼠保护力

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商陆抗病毒蛋白体外对HepG2.2.15细胞HBV复制的影响

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实用肝脏病杂志 2004年第2期7卷 80-82页

作者：贺永文潘延凤王萍郭劲松华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病学教研室武汉市430022

目的　探讨商陆抗病毒蛋白 (pokeweedantiviralprotein ,PAP)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的活性。方法　以不同浓度的PAP S作用于培养的HepG2 .2 .15细胞 ,采用ELISA、荧光定量PCR法分别检测细胞上清液中的HBsAg、HBeAg及HBVDNA水平的变... 详细信息

目的　探讨商陆抗病毒蛋白 (pokeweedantiviralprotein ,PAP)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的活性。方法　以不同浓度的PAP S作用于培养的HepG2 .2 .15细胞 ,采用ELISA、荧光定量PCR法分别检测细胞上清液中的HBsAg、HBeAg及HBVDNA水平的变化 ,并用MTT比色法检测细胞成活率。结果　随着PAP S浓度的增加 ,对HBsAg、HBVDNA的抑制作用亦逐渐增强 ,不同药物剂量组之间差异十分显著 (P <0 .0 1)。PAP S处理后 96h ,PAP S对HBsAg和HBeAg的半数抑制浓度 (ID50 )分别为 6.9μg/ml和 3 .2 μg/ml ,半数中毒浓度 (CD50 )为 2 9.3 μg/ml,治疗指数 (TI) =ID50 /CD50 分别为 4.3和9.3。MTT试验结果显示 ,药物的细胞毒性也呈剂量依赖型 ,倒置显微镜下观察在 5 0 μg/ml～ 10 0 μg/ml剂量组出现部分细胞脱壁和死亡现象。结论　PAP S在体外有直接的抗HBV作用。。

关键词：商陆抗病毒蛋白核糖体失活蛋白乙型肝炎病毒 HepG2.2.15细胞

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建立快速诊断肾综合征出血热方法的研究

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中华临床医药杂志（北京） 2002年第8期3卷 16-18页

作者：蔡淑清崔永军等华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病教研室430022

目的：建立一种检测血清中抗汉坦病毒IgM抗体的快速、简便、敏感的方法。方法：将羊抗人IgM抗体点于硝酸纤维素膜上，干燥封闭待用。向已包被抗体的硝酸纤维素膜上滴加患者血清后，再先后滴加汉坦病毒抗原，鼠抗汉坦病毒抗体，最后滴加... 详细信息

目的：建立一种检测血清中抗汉坦病毒IgM抗体的快速、简便、敏感的方法。方法：将羊抗人IgM抗体点于硝酸纤维素膜上，干燥封闭待用。向已包被抗体的硝酸纤维素膜上滴加患者血清后，再先后滴加汉坦病毒抗原，鼠抗汉坦病毒抗体，最后滴加金标抗鼠抗体直接显色，阳性反应为红色。整个操作过程一般超过10分钟。结果：用该法与IgM抗体捕获法ELISA对比检测40份肾综合征出血热（HFRS）患者血清标本，两法均阳性者38份，均阴性者2份，总符合率为100％，敏感性为95％。结论：胶体金免疫渗滤法操作简便，反应迅速，敏感性较高，不需要特殊的医疗设备，尤其适用于基层医疗单位，是HFRS早期诊断的好方法。

关键词：肾综合征出血热免疫球蛋白M 免疫组织化学诊断胶体金免疫渗滤法抗汉坦病毒IgM抗体

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前列腺素E_1与日本血吸虫病肝纤维化关系的研究

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中国血吸虫病防治杂志 2002年第1期14卷 8-10,F002页

作者：刘凤超贺永文罗端德曾令兰李淑丽河南省驻马店解放军159医院神经内科驻马店463000 武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病教研室

目的　了解前列腺素 E1 (PGE1 )对日本血吸虫病肝纤维化形成的影响。方法　采用免疫组化 SABC技术 ,并用计算机彩色病理图文分析系统 ,检测分析感染日本血吸虫大鼠经 PGE1 治疗后肝内、型胶原及转化生长因子 β1 (TGF- β1 )的含量... 详细信息

目的　了解前列腺素 E1 (PGE1 )对日本血吸虫病肝纤维化形成的影响。方法　采用免疫组化 SABC技术 ,并用计算机彩色病理图文分析系统 ,检测分析感染日本血吸虫大鼠经 PGE1 治疗后肝内、型胶原及转化生长因子 β1 (TGF- β1 )的含量变化。结果　 PGE1 治疗组肝内、型胶原及转化生长因子 β1 (TGF- β1 )的含量分别低于感染对照组 (P<0 .0 5 ) ;PGE1 治疗组及感染对照组肝内、型胶原的含量均与 TGF- β1 呈显著正相关 (r=0 .96 36 ,P<0 .0 5 ;r=0 .86 6 7,P<0 .0 5 ;r=0 .96 36 ,P<0 .0 5 ;r=0 .92 72 ,P<0 .0 5 )。结论　 PGE1 对日本血吸虫病肝纤维化的形成有抑制作用 ,其机理可能与 PGE1 抑制 TGF- β1 的表达有关。

关键词：血吸虫病虫卵肉牙肿转化生长因子肝纤维化日本血吸虫前列腺素E1

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乙型肝炎病毒(HBV)反基因与HBV的结合及对HBV复制的影响

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中华内科杂志 2001年第4期40卷 243-246,T001页

作者：高勇罗端德蔡淑清曾令兰李淑莉华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病教研室武汉430022

目的　研究三螺旋形成寡核苷酸与ＨＢＶ基因的结合情况及其对ＨＢＶ复制的影响。方法　合成一段能与ＨＢＶ核心启动子位点（１７３４～１７５３ｎｔ）形成三螺旋的寡核苷酸（ＴＦＯ２０）并标记上生物素，分别用脂质体－ＴＦＯ２０及裸... 详细信息

目的　研究三螺旋形成寡核苷酸与ＨＢＶ基因的结合情况及其对ＨＢＶ复制的影响。方法　合成一段能与ＨＢＶ核心启动子位点（１７３４～１７５３ｎｔ）形成三螺旋的寡核苷酸（ＴＦＯ２０）并标记上生物素，分别用脂质体－ＴＦＯ２０及裸ＴＦＯ２０转染ＨｅｐＧ２．２．１５细胞，用链酶亲和素－生物素法（ＳＡＢＣ）检测其转染效率及其与ＨｅｐＧ２．２．１５细胞中ＨＢＶＤＮＡ的结合情况；并采用ＥＬＩＳＡ、半定量逆转录（ＲＴ）－ＰＣＲ及荧光定量ＰＣＲ法分别检测经寡核苷酸处理的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞及空白对照细胞上清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ及细胞中ＨＢＶＲＮＡ的水平。结果　脂质体－ＴＦＯ２０转染ＨｅｐＧ２．２．１５细胞的效率可达８０％，而裸ＴＦＯ２０转染率最高为４０％；ＴＦＯ２０主要定位于细胞核及胞浆中。ＴＦＯ２０处理组细胞上清中ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ含量分别较空白对照组降低３７．０％及７８．２％，ＨＢＶＤＮＡ水平较空白对照组明显降低；而细胞中２．４ｋｂ／２．１ｋｂＲＮＡ、３．５ｋｈ／３．４ｋｂＲＮＡ亦分别降低３１．６％及７０．２％。结论ＴＦＯ２０通过脂质体包裹后可以很好地进入细胞并与ＨＢＶ　ＤＮＡ结合；ＴＦＯ２０能?

关键词：乙型肝炎病毒三螺旋形成寡核苷酸 HBV 病毒复制反基因技术 TFO技术

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