检索结果-内蒙古大学图书馆

科学通报 2017年第1期62卷 36-46页

作者：陈琳董为张必翔张志伟黄志勇陈义发罗鸿萍张万广梅斌肖震宇陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心湖北省肝脏外科医学临床研究中心教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些... 详细信息

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些新的理念:提出大肝癌和巨大肝癌手术切除的可行性理论并应用于临床,拓展了肝切除治疗肝癌的适应证;提出肝细胞癌新的分类方法,有利于针对大小不同的肿瘤选择不同的治疗方法和进行疗效评估;针对肝癌合并门静脉癌栓的不同类型,采取不同的手术方式,取得良好效果;肝切除联合脾切除治疗原发性肝细胞癌合并门静脉高压症.创立3种肝脏手术控制出血新技术:不解剖肝门经肝实质结扎入肝及出肝血流、第一肝门阻断联合肝下下腔静脉阻断、经肝裸区双悬吊法;小范围肝切除治疗肝门部胆管癌的新理念;不缝合胆管前壁的肝肠吻合术和插入式胆肠吻合术;新的"U"型胰肠套入式缝合法;世界首个原位辅助性部分肝移植手术方式,并成功应用于临床.

关键词：肝切除原发性肝癌肝门部胆管癌胆肠吻合胰十二指肠切除术胰肠吻合原位辅助性部分肝移植

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下调GSK3β通过抑制ITPR1-GRP75-VDAC1复合体功能减轻衰老肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第3期15卷 406-414页

作者：倪海强顾世琦彭宣宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposid... 详细信息

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposide诱导衰老再转染腺病毒阴性对照(AdshNC)后进行H/R处理,Old+Ad-shGSK3β+H/R组即使用Etoposide诱导衰老后再转染靶向沉默GSK3β的短发夹RNA腺病毒(Ad-shGSK3β)后进行H/R处理。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平和线粒体活性氧水平,采用免疫荧光染色法检测各组钙离子水平,采用蛋白质印迹法检测各组GSK3β、线粒体相关的内质网膜(MAM)相关蛋白肌醇1,4,5-三磷酸受体1(ITPR1)、电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)表达及磷酸化水平,采用免疫共沉淀分析GSK3β与MAM相关蛋白的相互作用。结果与Young组比较,Old组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old组比较,Old+AdshNC+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old+Ad-shNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Young组比较,Old组ITPR1、GRP75和GSK3β总蛋白表达增多,ITPR1和GRP75磷酸化水平升高,而VDAC1总蛋白和磷酸化水平均下降;与Old组比较,Old+Ad-shNC+H/R组GSK3β蛋白表达不变,ITPR1和GRP75总蛋白和磷酸化水平升高,VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平增高;与Old+AdshNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组GSK3β蛋白表达减少,ITPR1、GRP75和VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平均下降。免疫共沉淀结果显示,GSK3β能够与ITPR1、GRP75和VDAC1蛋白发生相互作用。结论GSK3β在衰老RTEC中表达升高,抑制GSK3β表达能够降低ITPR1-GRP75-VDAC1复合体磷酸化水平,限制线粒体钙离子超负荷,保护线粒体功能,减少再灌注时细胞损伤。

关键词：糖原合成酶激酶3β 肾移植中老年供者缺血-再灌注损伤线粒体损伤衰老线粒体相关的内质网膜钙超载凋亡

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移植肝穿刺活检268例次病理学观察

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中华医学杂志 2011年第48期91卷 3401-3404页

作者：郭晖陈忠华陈知水曾凡军明长生张伟杰刘斌宫念樵蒋继贫魏来杜敦峰施辉波陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部／卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补... 详细信息

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补体CAd、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）、丙型肝炎病毒（HCV）、巨细胞病毒（CMV）、细胞角蛋白（CK）19免疫组化染色并予以病理学观察分析。结果268例次移植肝活检中，缺血／再灌注损伤26例次（9．7％）、急性T细胞介导性排斥反应83例次（31．0％）、急性抗体介导性排斥反应12例次（4．5％）、慢性排斥反应31例次（11．6％）、药物性肝损伤70例次（26．1％）、复发性肝病18例次（6．7％）。结论肝移植术后可发生多种并发症并可通过活检病理学观察予以明确诊断，肝移植临床中应常规开展移植肝穿刺活检病理学诊断。

关键词：肝移植活组织检查病理学

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移植肾活检1500例病理组织学分析

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中华医学杂志 2011年第8期91卷 520-523页

作者：郭晖林正斌张伟杰明长生陈知水曾凡军刘斌蒋继贫宫念樵魏来施辉波杜敦峰陈忠华陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对... 详细信息

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对活检组织标本予以相应染色和病理组织学观察。结果肾移植术后可发生多种并发症，1500例中急性T细胞介导性排斥反应的发生率为14．2％（213例）、急性抗体介导性排斥反应发生率为2．4％（36例）、慢性T细胞介导性排斥反应发生率为16．7％（251例）、慢性抗体介导性排斥反应的发生率为3．0％（45例）、急性钙调磷酸酶抑制剂（CNI）类药物肾毒性损伤发生率为7．1％（106例）、慢性CNI类药物。肾毒性损伤的发生率为16．7％（251例）；复发／新发性肾病的发生率为0．4％（6例）。排斥反应发生并不具有确定的时间界限。移植肾CNI类免疫抑制剂慢性毒性损伤是导致移植肾失功能的重要致病因素。结论移植肾活检病理学观察可以及时、准确地诊断肾移植术后的多种并发症，肾移植临床中应常规规范开展移植肾活检病理学诊断。

关键词：肾移植活组织检查针吸病理学

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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

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器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

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抗胸腺细胞球蛋白与巴利昔单抗在DCD肾移植中有效性和安全性的配对研究

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中华医学杂志 2017年第2期97卷 99-103页

作者：林凯临朱兰付程林正斌陈刚卫生部/教育部器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾... 详细信息

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾移植受者资料。根据免疫诱导方案的不同，筛选出来自同一供者的2例受者配对分为ATG组（n＝62）和巴利昔单抗组（n＝62），比较分析两组间移植疗效。结果ATG组发生移植物功能恢复延迟（DGF）11例（17.7%），显著低于巴利昔单抗组（21例，33.9%，P＝0.040）；且ATG组DGF的恢复时间较巴利昔单抗组显著缩短[（14.92±6.23）d比（20.26±7.89）d，P＝0.048]。以供者〉50周岁或具有高血压病史或冷缺血时间〉24 h筛选出DGF高危受者，则两组高危患者中DGF发生率差异更加明显（ATG组：5/18，巴利昔单抗组：10/15，P＝0.025）。两组在发生急性排斥反应、慢性移植物失功能和1年移植物存活率及1年移植受者存活率方面差异无统计学意义（均P〉0.05），在发生感染、白细胞减少、血小板减少或贫血等不良反应方面差异也无统计学意义（均P〉0.05）。结论与巴利昔单抗相比，ATG可以安全有效地减少DCD肾移植术后DGF发生率和缩短DGF持续时间，尤其对降低高危受者的DGF发生率具有显著作用。

关键词：肾移植移植物功能延迟恢复抗胸腺细胞球蛋白巴利昔单抗

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RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用

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中华医学杂志 2005年第16期85卷 1133-1136页

作者：朱珉夏振雄王树森曹荣华祁洪刚陈栋刘斌张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部卫生部重点实验室武汉430030

目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi... 详细信息

目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响。结果　SiRNA 1/PED的α1,3 GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2,72%)(P<0 05),但SiRNA 2/PED的α1,3 GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0. 05),流式细胞学检查显示,SiRNA 1/PED的αGal平均荧光强度(52 9)明显小于错配组(493 9,P<0 01)及空转组(505 7,P<0. 01)。标准4h51Cr释放实验中SiRNA 1/PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0. 05)。结论　PED在转染SiRNA- 1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞。本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础。

关键词： RNA干扰补体介导流式细胞学检查猪半乳糖转移酶 RNAi 平均荧光强度 PED 细胞毒作用内皮细胞系 SiRNA 抗原表位 GT基因释放实验基因沉默异种移植表达量人血清转染小分子异构体统计学 Gal 溶解率靶细胞相比

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采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系

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中国修复重建外科杂志 2006年第11期20卷 1130-1133页

作者：曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室.卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学免疫学系武汉430030

目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。

关键词：可溶性人类白细胞抗原G1 核转染真核细胞系

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甲基丁香酚对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制研究

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中国中药杂志 2021年第24期46卷 6502-6510页

作者：匡柏成侯帅恒张季王梦琴张佳思孙凯伦王志恒李晴雯宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室湖北武汉430030

探讨甲基丁香酚对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)致人肾小管上皮细胞HK-2损伤的影响及机制。通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度甲基丁香酚对正常培养的及经H/R处理后的HK-2细胞活力;倒置显微镜观察甲... 详细信息

探讨甲基丁香酚对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)致人肾小管上皮细胞HK-2损伤的影响及机制。通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度甲基丁香酚对正常培养的及经H/R处理后的HK-2细胞活力;倒置显微镜观察甲基丁香酚对HK-2细胞形态的影响;2′-7′-二氯荧光素乙酸盐(2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光染色法检测不同组细胞内活性氧含量;流式细胞术检测细胞凋亡;线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化;Western blot法检测核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,Nox4)蛋白的表达,共聚焦荧光染色检测Nrf2胞质及胞核浓度改变。结果显示,甲基丁香酚浓度为0~40μmol·L;时,对HK-2细胞活性无影响;与模型组相比,甲基丁香酚可增加HK-2细胞活性,细胞形态较正常。进一步实验表明,甲基丁香酚可抑制H/R损伤后HK-2细胞内活性氧的释放及线粒体膜电位的下降,促进Nrf2、HO-1表达及Nrf2向细胞核转位,抑制Nox4表达,进而显著降低细胞凋亡,特异性Nrf2抑制剂ML385可逆转甲基丁香酚的保护效果。初步证明甲基丁香酚对HK-2细胞H/R损伤具有明显的保护作用,机制可能与促进Nrf2/HO-1信号通路及抑制Nox4有关。该研究从抗氧化应激的角度探讨甲基丁香酚治疗肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)、保护器官功能的可能机制,对相关中药治疗急性肾损伤的研究提供参考。

关键词：甲基丁香酚缺氧/复氧 HK-2细胞 Nrf2 Nox4

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核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

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武汉大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 20-23,F0002页

作者：刘勇李尧李超黄霞薛承彪胡昕鹏杨涛周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/卫生部器官移植重点实验室/器官移植教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维... 详细信息

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维素钠混悬。行BALB/c到B6的小鼠心脏移植。实验组使用10mg/(kg·d)、30mg/(kg·d)的熊果酸灌胃。对照组使用相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。观察术后7d时移植心CD4+、CD8+T细胞浸润情况,IFN-γ、IL-4mRNA水平和移植心存活时间。结果:熊果酸剂量依赖性抑制P65核转位。25μmol/L的熊果酸可将T细胞表面的CD25下调92.4%,CD69下调89.3%。10mg/(kg·d)熊果酸可将移植心平均存活时间(MST)延长至(23.8±1.3)d[P<0.05,与对照组(7.4±0.3)d相比]。而30mg/(kg·d)的熊果酸可将MST延长至(68.5±2.8)d。熊果酸组移植心内CD4+和CD8+T细胞浸润数量显著减少(P<0.05,与对照组比较),且IFN-γmRNA水平显著下调(P<0.05,与对照组比较),而IL-4mRNA水平无明显变化。结论:熊果酸可抑制T细胞NF-κB活化。体内应用熊果酸能显著延缓同种异体移植心排斥时间,这与熊果酸抑制T细胞活化,下调Th1反应相关。

关键词： NF-κB 心脏移植排斥反应 T细胞活化

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