检索结果-内蒙古大学图书馆

下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

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云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究

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中华医学杂志 2006年第21期86卷 1460-1463页

作者：李荣陈刚郭晖王大卫谢琳王树森王婉瑜熊郁良陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030 中国科学院昆明动物研究所毒素室

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给... 详细信息

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg／kg；对照组（n=7）不用Y-CVF。观察移植心的生存时间，移植心停跳后病理学检查排斥类型，免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1：1028～1：2056。对照组移植心存活时间为12．71h±13．94h，实验组移植心存活时间为99．50h±38．72h，与对照组比较差异有统计学意义（t=5．599，P〈0．01）。病理检查结果证实，实验组均未发生急性体液排斥，仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性，C3染色对照组为阳性，而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。

关键词：眼镜蛇毒素心脏移植移植排斥

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肝癌患者肝移植术后早期激素撤离对肿瘤复发的影响

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中华器官移植杂志 2006年第3期27卷 156-159页

作者：陈知水何凡曾凡军明长生蒋继贫杜敦峰刘斌张伟杰刘敦贵陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年... 详细信息

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年存活率、血他克莫司(FK506)浓度及生化指标的平均值,运用统计学方法分析两组间差异。结果激素撤离组和激素维持组排斥反应发生率、半年肿瘤复发率、1年存活率相比,差异无统计学意义;激素维持组1年肿瘤复发率明显高于激素撤离组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后半年,两组FK506浓度的差异无统计学意义。术后1周及术后半年,两组丙氨酸转氨酶、胆红素总量及肌酐分别相比,差异均无统计学意义。术后半年,两组胆固醇总量、中餐前血糖水平相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌患者肝移植术后3个月内撤离激素是安全的,并不增加排斥反应的发生率,也不需要增加其它免疫抑制剂的用量,可明显降低肿瘤复发率,提高患者的长期存活率。

关键词：肝移植肿瘤复发,局部激素肝肿瘤

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甲基丁香酚对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制研究

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中国中药杂志 2021年第24期46卷 6502-6510页

作者：匡柏成侯帅恒张季王梦琴张佳思孙凯伦王志恒李晴雯宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室湖北武汉430030

探讨甲基丁香酚对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)致人肾小管上皮细胞HK-2损伤的影响及机制。通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度甲基丁香酚对正常培养的及经H/R处理后的HK-2细胞活力;倒置显微镜观察甲... 详细信息

探讨甲基丁香酚对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)致人肾小管上皮细胞HK-2损伤的影响及机制。通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度甲基丁香酚对正常培养的及经H/R处理后的HK-2细胞活力;倒置显微镜观察甲基丁香酚对HK-2细胞形态的影响;2′-7′-二氯荧光素乙酸盐(2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光染色法检测不同组细胞内活性氧含量;流式细胞术检测细胞凋亡;线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化;Western blot法检测核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,Nox4)蛋白的表达,共聚焦荧光染色检测Nrf2胞质及胞核浓度改变。结果显示,甲基丁香酚浓度为0~40μmol·L;时,对HK-2细胞活性无影响;与模型组相比,甲基丁香酚可增加HK-2细胞活性,细胞形态较正常。进一步实验表明,甲基丁香酚可抑制H/R损伤后HK-2细胞内活性氧的释放及线粒体膜电位的下降,促进Nrf2、HO-1表达及Nrf2向细胞核转位,抑制Nox4表达,进而显著降低细胞凋亡,特异性Nrf2抑制剂ML385可逆转甲基丁香酚的保护效果。初步证明甲基丁香酚对HK-2细胞H/R损伤具有明显的保护作用,机制可能与促进Nrf2/HO-1信号通路及抑制Nox4有关。该研究从抗氧化应激的角度探讨甲基丁香酚治疗肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)、保护器官功能的可能机制,对相关中药治疗急性肾损伤的研究提供参考。

关键词：甲基丁香酚缺氧/复氧 HK-2细胞 Nrf2 Nox4

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肾移植术后新生HLA-DQ抗体的临床意义

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3284-3288页

作者：朱兰陈刚谢林汪芯王大卫林正斌明长生陈孝平陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在... 详细信息

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在肾移植术后6～18年（平均10年）.根据入组时移植肾功能分为3组：（1）移植肾功能正常的对照组（n=94）：血肌酐＜120 μmol/L;（2）慢性移植肾功能减退组（n=54）：血肌酐持续＞150μmol/L达6个月以上,但尚未透析;（3）移植肾失功能组（n=27）：患者恢复血液透析.所有病例在入组时收集血清,采用流式PRA或Luminex方法进行HLA抗体初筛,抗体阳性者进一步行Luminex单抗原包被的微球法检测分别针对HLA-A、B、DR、DQ位点的抗体水平.结果（1） HLA抗体的出现与慢性移植肾功能不全密切相关.慢性移植肾功能减退组HLA抗体阳性的出现率为48％（26/54）,移植肾失功能组为52％（14/27）,而对照组的HLA抗体阳性率只有17％（16/94）（P＜0.01）.（2）在3组HLA抗体阳性的病例中,相比于HLA-DR、HLA-Ⅰ类抗体,HLA-DQ抗体的出现频率均最高,在对照组、慢性移植肾功能减退组、移植肾失功能组分别为14/16、24/26及14/14,此外,HLA-DQ抗体的平均荧光强度也最高.（3） HLA-DQ抗体在对照组的HLA抗体阳性病例中以单独出现为主（10/16）,而在慢性移植肾功能减退组和移植肾失功能组都多数伴随有HLA-DR抗体和Ⅰ类抗体（17/26、14/14）,显示单独出现的HLA-DQ抗体与慢性移植肾功能不全没有直接相关性,而DQ抗体合并DR和（或）Ⅰ类抗体同时出现与慢性移植肾功能减退和失功能有关（均P＜0.05）.结论从移植肾功能状态而言,HLA-DQ抗体往往先于其他位点的抗体出现.在临床移植肾功能尚稳定时,早期发现HLA-DQ抗体对预警免疫系统的特异性激活及后者所致的慢性移植肾功能减退或失功能具有重要意义.监测HLA-DQ抗体将为早期干预治疗和去除免疫危险因素提供第一时机.

关键词：肾移植移植物排斥 HLA-DQ抗体同种异体抗体慢性移植肾功能不全

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老龄亲属活体供肾移植疗效观察

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肾脏病与透析肾移植杂志 2009年第4期18卷 338-342页

作者：孟凡迎陈知水陈孝平吴敏杜敦峰魏来蒋继贫曾凡军张伟杰林正斌周平明长生宫念樵刘敦贵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的：探讨老龄亲属活体供肾移植的疗效。方法：我院自2006年1月至2006年12月共施行亲属活体肾移植74例,收集该74例活体供肾移植的临床资料,按供者年龄大小分为2组：老龄组（≥55岁）11例,低龄组（〈55岁）63例。分别对两组受体术后不... 详细信息

目的：探讨老龄亲属活体供肾移植的疗效。方法：我院自2006年1月至2006年12月共施行亲属活体肾移植74例,收集该74例活体供肾移植的临床资料,按供者年龄大小分为2组：老龄组（≥55岁）11例,低龄组（〈55岁）63例。分别对两组受体术后不同时间点临床资料和两组供体术前术后的临床资料进行分析比较,探讨老龄活体供肾移植的疗效。结果：（1）受者情况：老龄组有1例术后发生移植肾功能延迟恢复,低龄组有7例,组间比较无差别（P〉0.05）,两组受者移植术后肾功能恢复情况比较无差异,1年人/肾存活率均为100%。供者情况：两组供者术后一周血肌酐均明显升高,老龄组术前血肌酐（85.6±13.7）μmol/L,术后1周升高至（106.4±15.6）μmol/L,而低龄供者术前血肌酐（73.7±6.8）μmol/L,术后1周升高至（101.8±13.1）μmol/L。但术后1年随访,两组供者血肌酐恢复术前水平。结论：在严格供体筛查的前提下,老龄供肾（5565岁）对供者是安全的;而对受者,接受老龄供肾术后近期肾功能恢复情况良好,远期效果有待进一步观察。

关键词：肾移植老龄供肾疗效

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猪睾丸Sertoli细胞的分离、培养及其免疫豁免相关细胞因子的检测

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中华器官移植杂志 2008年第9期29卷 522-525页

作者：胡枫尹注增王璐谢林向莹徐婧陈松李俊华陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨猪睾丸Sermli细胞分离、培养的方法，并对其体外培养的状态及免疫豁免相关细胞因子的表达进行检测，为Sertoli细胞用于移植提供依据。方法无菌条件下取10～15日龄的湖北白猪睾丸，剥离睾丸白膜及表面血管，剪碎后用2．0g／LV型... 详细信息

目的探讨猪睾丸Sermli细胞分离、培养的方法，并对其体外培养的状态及免疫豁免相关细胞因子的表达进行检测，为Sertoli细胞用于移植提供依据。方法无菌条件下取10～15日龄的湖北白猪睾丸，剥离睾丸白膜及表面血管，剪碎后用2．0g／LV型胶原酶以及2．5g／L胰蛋白酶和0．5g／L DNaseI消化（两步法）分离Sertoli细胞，于37℃、含体积分数为5％CO2的培养箱中培养。采用倒置相差显微镜观察细胞形态，透射电镜进行超微结构鉴定，流式细胞仪检测细胞体外活率，逆转录聚合酶链反应检测Sertoli细胞sox9、FasL、转化生长因子B（TGF-β）及Clusterin的表达，四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞的活性。结果猪睾丸经分离、培养，所获得的Sertoli细胞纯度达90％以上。培养后的细胞凋亡率为（2．61±0．96）％，死亡率为（2．12±0．74）％；培养的Sertoli细胞稳定表达sox9、TGF-β、Clusterin，而FasL表达较弱。体外培养的Sertoli细胞可以保持良好活性达21d。结论采用V型胶原酶以及胰蛋白酶和DNaseI两步法消化分离可获得大量高纯度的Sertoli细胞，该细胞在培养过程中能够稳定表达FasL、TGF-β和Clusterin分子。

关键词：塞尔托利细胞细胞培养技术抗原 CD95 转化生长因子β 猪

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提倡亲属活体肾移植力推“家庭内自救”方案

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中华器官移植杂志 2006年第5期27卷 260-261页

作者：陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

由于全球范围内的供移植器官短缺,亲属活体肾移植已成为治疗终末期肾病的主要手段之一.与其它器官来源相比,亲属活体供肾移植的供、受者基因相近,供肾缺血时间短,因而具有人/肾存活率高、排斥反应发生率低、术前透析时间短及手术可择期... 详细信息

由于全球范围内的供移植器官短缺,亲属活体肾移植已成为治疗终末期肾病的主要手段之一.与其它器官来源相比,亲属活体供肾移植的供、受者基因相近,供肾缺血时间短,因而具有人/肾存活率高、排斥反应发生率低、术前透析时间短及手术可择期安排等优点显而易见.Terasaki的研究表明,活体肾移植病例中,即使HLA配型不好,其长期效果也优于尸体肾移植中配型较好者,这也提示,活体供肾的热缺血时间、冷缺血时间及运输时间均较短,从而使供肾的缺血损伤减轻,这是活体肾移植的重要优势之一。

关键词：亲属活体肾移植亲属活体供肾移植家庭内热缺血时间 HLA配型自救终末期肾病尸体肾移植冷缺血时间器官短缺

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在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A的临床研究

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中华器官移植杂志 2008年第12期29卷 724-726页

作者：张伟杰陈栋王海灏明长生曾凡军陈知水林正斌刘斌宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A（CsA）对急性排斥反应发生率及肾功能的影响。方法选择35例肾功能稳定的肾移植受者，其中尸体肾移植23例，亲属活体肾移植12例。除2例为再次肾移植外，其余均为初次肾移植。分别在肾... 详细信息

目的研究在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A（CsA）对急性排斥反应发生率及肾功能的影响。方法选择35例肾功能稳定的肾移植受者，其中尸体肾移植23例，亲属活体肾移植12例。除2例为再次肾移植外，其余均为初次肾移植。分别在肾移植术后6个月～6年时停用CsA，平均为术后（13．3±9．1）个月。撤除CsA后免疫抑制方案为：霉酚酸酯（MMF）＋西罗莫司（SRL）＋泼尼松（Pred）。撤除CsA前有9例做了移植肾穿刺活检，8例测定了抗HLA抗体。结果对35例受者随访6个月～4．5年，平均14．8个月。撤除CsA前、后血肌酐平均值分别为（88．1±15．5）μmol／L和（92．3±23．7）μmol／L（P〉0．05）。撤除CsA后，有2例经活检证实发生急性排斥反应，治疗后均逆转；CsA所致的毒副作用，如牙龈增生、糖耐量异常和多毛症等明显改善。9例移植肾活检中，有3例肾功能正常的受者已出现轻度慢性移植肾肾病表现。抗HLA抗体检测中，7例阴性者在撤除CsA前、后肾功能无明显变化，1例抗HLA抗体呈强阳性者在撤除CsA后进展为慢性移植肾肾病，恢复血液透析。结论对移植‘肾功能稳定的受者在移植6个月后撤除CsA，转换为“霉酚酸酯＋西罗莫司＋泼尼松”的免疫抑制方案是安全的，不增加急性排斥反应风险；撤除CsA有利于消除一些与其相关的毒副作用；对抗HLA抗体呈强阳性者，撤除CsA后很难改变肾功能的进展。

关键词：肾移植环孢菌素移植物排斥肾功能试验

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小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导扩增和鉴定

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第4期42卷 386-390页

作者：马东霞赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化... 详细信息

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力。结果经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态。同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC。LPS刺激24h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖。结论体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源。

关键词：树突状细胞诱导鉴定

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