检索结果-内蒙古大学图书馆

反义脱氧寡核苷酸静脉输注抑制小鼠MD-1表达延长皮肤移植物存活时间的研究

中华微生物学和免疫学杂志 2005年第9期25卷 733-736页

作者：张鑫陈必成昌盛周鸿敏杜敦峰袁劲陈忠华华中科技大学同济医学院同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室国家卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的静脉输注反义脱氧寡核苷酸(简称反义核酸,AS-ODN)抑制小鼠MD-1表达,并初步探讨MD-1用于排斥反应诊断的前景。方法实验组(组1和组2)和阳性对照组(组3)行C57BL/6-BALB/c同种皮肤移植,阴性对照组(组4)行BALB/c-BALB/c同基因皮肤移植后... 详细信息

目的静脉输注反义脱氧寡核苷酸(简称反义核酸,AS-ODN)抑制小鼠MD-1表达,并初步探讨MD-1用于排斥反应诊断的前景。方法实验组(组1和组2)和阳性对照组(组3)行C57BL/6-BALB/c同种皮肤移植,阴性对照组(组4)行BALB/c-BALB/c同基因皮肤移植后,分别静脉输注小鼠MD-1AS-ODN(组1)、随机序列脱氧寡核苷酸(组2)或生理盐水(组3和组4)。于术后第11天留样检测脾细胞MD-1表达水平(FACS)、脾细胞增殖反应强度(AlamarBlue还原率)、血清IL-2和IL-10水平(ELISA)以及皮肤移植物组织学改变(组织病理学检查),并记录移植物存活时间。结果静脉输注小鼠MD-1AS-ODN能明显减少BALB/c小鼠脾细胞中MD-1阳性细胞百分数,降低脾细胞对特异性和非特异性刺激的增殖反应强度,下调血清IL-2水平和上调IL-10水平,减少移植物局部淋巴细胞浸润,并显著延长同种皮肤移植物存活时间。结论静脉输注MD-1AS-ODN特异性抑制小鼠MD-1表达可显著延长皮肤移植物的存活时间。MD-1表达水平对排斥反应的发生具有一定的指示作用。

关键词： MD-1 反义脱氧寡核苷酸细胞因子增殖反应存活时间反义脱氧寡核苷酸移植物存活时间皮肤移植物小鼠脾细胞 MD-1 静脉输注显著延长非特异性刺激脾细胞增殖

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肝胆胰外科新理念与新技术

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科学通报 2017年第1期62卷 36-46页

作者：陈琳董为张必翔张志伟黄志勇陈义发罗鸿萍张万广梅斌肖震宇陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心湖北省肝脏外科医学临床研究中心教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些... 详细信息

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些新的理念:提出大肝癌和巨大肝癌手术切除的可行性理论并应用于临床,拓展了肝切除治疗肝癌的适应证;提出肝细胞癌新的分类方法,有利于针对大小不同的肿瘤选择不同的治疗方法和进行疗效评估;针对肝癌合并门静脉癌栓的不同类型,采取不同的手术方式,取得良好效果;肝切除联合脾切除治疗原发性肝细胞癌合并门静脉高压症.创立3种肝脏手术控制出血新技术:不解剖肝门经肝实质结扎入肝及出肝血流、第一肝门阻断联合肝下下腔静脉阻断、经肝裸区双悬吊法;小范围肝切除治疗肝门部胆管癌的新理念;不缝合胆管前壁的肝肠吻合术和插入式胆肠吻合术;新的"U"型胰肠套入式缝合法;世界首个原位辅助性部分肝移植手术方式,并成功应用于临床.

关键词：肝切除原发性肝癌肝门部胆管癌胆肠吻合胰十二指肠切除术胰肠吻合原位辅助性部分肝移植

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TGF—β1诱导的调节性T细胞体内输注延长小鼠皮肤移植物存活

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第8期28卷 680-684页

作者：袁劲吴轲何文涛汪峰陈忠华华中科技大学同济医学院同济医院肾病内科武汉430030 器官移植研究所器官移植教育部/卫生部重点实验室

目的利用TGF-β1体外诱导naiveT细胞分化为调节性T细胞（Treg），通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间，并研究其相关机制。方法根据诱导条件不同分为3组：对照组（加入IL-2培养的C57BL／6小鼠T细胞）、MLR组（即混合淋巴细胞反应... 详细信息

目的利用TGF-β1体外诱导naiveT细胞分化为调节性T细胞（Treg），通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间，并研究其相关机制。方法根据诱导条件不同分为3组：对照组（加入IL-2培养的C57BL／6小鼠T细胞）、MLR组（即混合淋巴细胞反应组，经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞）和TGF-β组（经同种抗原刺激活化的C57BL／6小鼠T细胞，同时加入5．0ng／ml TGF-β1诱导）。利用FACS检测CD4^＋CD25^＋T细胞比例，并用RT—PCR检测Foxp3的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型，并于第0、1、2和3天输注上述细胞，观察皮肤移植物存活时间。术后第9天，取部分受鼠行移植物病理检测，用FACS检测脾脏中TH1、TH2和CD4^＋CD25^＋Treg比例，并用AlamarBlue法检测淋巴细胞增殖能力。结果TGF-β组中CD4^＋CD25^＋T细胞比例高于对照组和MLR组（P〈0．05），且其高表达Foxp3。将培养的细胞输注给受鼠后发现，输注MLR组细胞的受鼠其移植物平均存活时间（mean survival time，MST）为（9．4±1．3）d，低于对照组（P〈0．05）；而输注TGF-β组细胞小鼠MST为（22．8±1．9）d，较对照组和MLR组明显延长（P〈0．05）。病理检测亦显示TGF-β组受鼠移植物结构完整，无明显淋巴细胞浸润。FACS结果显示TGF-β组小鼠体内TH1细胞（CD4^＋TIM-3^＋）比例低于对照组和MLR组（P〈0．05），而TH2细胞（CD4^＋TIM-1^＋）比例则与MLR组类似（P〉0．05），但低于对照组（P〈0．05）；而且TGF-β组中CD4^＋CD25^＋Treg比例明显高于对照组和MLR组（P〈0．05）。用AlamarBlue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示，TGF-β组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制，低于对照组（P〈0．05）。结论TGF-β，可诱导T细胞分化为具有抑制能力的Treg，将诱导后的细胞进行过继输注可使小鼠体内CD4^＋CD25^＋T。比例升高，同时抑制TH1和TH2细胞分化扩增，并使得外周淋巴细胞增殖能力减弱，从而延长小鼠皮肤移植物存活时间。

关键词： TGF—β1 调节性T细胞皮肤移植

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采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系

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中国修复重建外科杂志 2006年第11期20卷 1130-1133页

作者：曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室.卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学免疫学系武汉430030

目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。

关键词：可溶性人类白细胞抗原G1 核转染真核细胞系

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Galeetin-9（Tim-3L）显著减弱小鼠移植排斥

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 5-10页

作者：何文涛袁劲方泽民汪峰徐逸周鸿敏高英张维娜王璐陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探究Galectin-9（即Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3 lig-and，Tim-3L）的真核定位与功能，及其对同种异基因排斥反应的影响。方法PCR扩增Galectin-9片段，插入到pEGFP—N1质粒，转染中国仓鼠卵巢癌细胞系（CHO）行G418筛选，分选增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性细胞。免疫组化检测Galectin-9的表达，Alamar Blue法检测稳定转染Galectin-9的CHO细胞及其新鲜培养上清对脾细胞增殖的影响，ELISA检测IL-2水平。给予BALB／c→C57BL／6心脏移植受鼠Galectin-9蛋白100μg×7d。结果Galectin-9表达于细胞浆，稳定转染Galectin-9-EGFP的CHO细胞上清抑制淋巴细胞增殖和IL-2的产生。上述效应可被Tim-3-Fc融合蛋白逆转。Galectin-9干预的心脏移植物中位生存时间明显延长[（22．7±1．2）d，（7．2±0．4）d）]。结论真核细胞中Galectin．9可通过分泌形式负调节同种异基因免疫；Galectin-9有望成为新型的抗排斥药物。

关键词： Tim-3 Galectin-9 免疫抑制小鼠

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体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第6期29卷 559-563页

作者：廖爱华刘丽平黄伟陈栋王燕张玲华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/教育部器官移植重点实验室/卫生部器官移植重点实验室

目的体外诱导和采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测人类B细胞产生的抗HLA抗体。方法对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）并体外培养5d，以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原（PWM）、葡萄球菌A蛋白菌体（SAC... 详细信息

目的体外诱导和采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测人类B细胞产生的抗HLA抗体。方法对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）并体外培养5d，以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原（PWM）、葡萄球菌A蛋白菌体（SAC）体外刺激PBMC，采用ELISA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数，探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法。采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法，诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体。结果与PWM单刺激相比，PBMC在PWM和SAC联合刺激后，有更多细胞存活的趋势（P=0．052），且培养上清中IgM的水平明显增加（P=0．03），而IgG的水平无明显变化（P〉0．05）。6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体。其特异性与各自培养上清中检测到的抗HIA抗体一致。结论PWM和SAC体外刺激PBMC，结合HLA特异的ELISPOT方法，能诱导和检测到人类B细胞产生的HLA抗体。

关键词：酶联免疫斑点法 B淋巴细胞 HLA抗体美洲商陆丝裂原

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703例次移植肾穿刺活组织检查的病理诊断分析

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器官移植 2024年第5期15卷 799-804页

作者：涂宇豪郭志良萨如拉朱兰郭晖陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的总结移植肾穿刺活组织检查(活检)的并发症发生情况,分析穿刺指征及病理诊断类型。方法回顾性分析2017年1月1日至2022年12月31日644例肾移植受者的703例次超声引导下移植肾穿刺活检的资料,分析穿刺合格率、并发症、指征性活检的穿刺... 详细信息

目的总结移植肾穿刺活组织检查(活检)的并发症发生情况,分析穿刺指征及病理诊断类型。方法回顾性分析2017年1月1日至2022年12月31日644例肾移植受者的703例次超声引导下移植肾穿刺活检的资料,分析穿刺合格率、并发症、指征性活检的穿刺指征和病理诊断类型。分析监视性活检的应用和病理诊断。结果肾组织穿刺活检合格率为99.9%,穿刺出血并发症包括移植肾周血肿和血尿各1例次。血清肌酐升高(76.8%)和蛋白尿(13.8%)为主要穿刺指征,48例次(6.8%)为评估治疗效果的监视性活检。病理诊断排斥反应共399例次,其中细胞性排斥反应293例次、抗体性排斥反应60例次、混合性排斥反应46例次;原发病复发或新发肾病195例次,主要为IgA肾病144例次和局灶性节段性肾小球硬化42例次;感染相关肾病共57例次,其中BK病毒相关性肾病(BKVAN)56例次;钙调磷酸酶抑制剂(CNI)肾毒性损伤31例次,包括急性CNI肾毒性损伤15例次和慢性CNI肾毒性损伤16例次;其他诊断45例次。结论移植肾穿刺活检的成功率高及安全性好,现阶段细胞性排斥反应仍然是移植肾指征性活检的最主要病理诊断。

关键词：肾移植穿刺活组织检查排斥反应血清肌酐蛋白尿排斥反应感染

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下调XBP1s通过抑制ITPR介导的线粒体功能障碍改善肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第2期15卷 220-228页

作者：倪海强彭宣顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会、器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R... 详细信息

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组。检测各组细胞凋亡水平、线粒体活性氧活性、线粒体膜电位及线粒体钙离子水平。使用染色质免疫共沉淀测序(ChIP-seq)分析XBP1s调控肌醇1,4,5-三磷酸受体(ITPR)家族的结合位点。检测各组XBP1s和ITPR家族信使RNA(mRNA)和蛋白表达水平。结果与AdshNC组比较,Ad-shNC+H/R组细胞凋亡水平更高,线粒体活性氧水平升高,线粒体膜电位降低,线粒体钙离子水平升高;与Ad-shNC+H/R组比较,Ad-shXBP1s+H/R组细胞凋亡水平较低,线粒体活性氧水平下降,线粒体膜电位升高,线粒体钙离子水平降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组比较,Ad-shXBP1s组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3 mRNA和蛋白相对表达量降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组相比,Ad-shNC+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量升高;与Ad-shNC+H/R组相比,Ad-shXBP1s+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量下降(均为P<0.05)。ChIP-seq结果显示,XBP1s能够结合ITPR1的启动子和外显子、ITPR2外显子和ITPR3外显子。结论 XBP1s可能通过直接调控ITPR转录和翻译而影响线粒体相关的内质网膜结构功能,下调XBP1s能够抑制ITPR表达,改善线粒体损伤。

关键词：器官移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 肌醇1,4,5-三磷酸受体线粒体损伤内质网应激线粒体相关的内质网膜钙超载

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X盒结合蛋白1与肾移植相关损伤

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器官移植 2024年第6期15卷 876-882页

作者：倪海强宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室430030

缺血-再灌注损伤(IRI)和排斥反应是影响移植肾远期存活的主要因素。IRI或排斥反应引起内质网应激(ERS)可导致肾损伤,X盒结合蛋白1(XBP1)作为调控细胞稳态主要的ERS相关蛋白,通过肌醇需求酶1α(IRE1α)剪接内含子后生成剪接体XBP1,进而... 详细信息

缺血-再灌注损伤(IRI)和排斥反应是影响移植肾远期存活的主要因素。IRI或排斥反应引起内质网应激(ERS)可导致肾损伤,X盒结合蛋白1(XBP1)作为调控细胞稳态主要的ERS相关蛋白,通过肌醇需求酶1α(IRE1α)剪接内含子后生成剪接体XBP1,进而影响靶基因表达重塑细胞环境。适当的ERS可促进细胞存活,但超过阈值时XBP1表达过多会导致细胞失稳态或死亡,进而引起肾脏内环境失衡,这与肾移植相关损伤的发病机制和疾病进展相关。因此,XBP1的有效激活对应激损伤具有保护作用,有助于维持肾脏系统的活力和功能的完整性。本文评述了ERS通路IRE1α-XBP1、XBP1在肾实质细胞和免疫细胞中的作用、XBP1在肾缺血性损伤和排斥反应中的作用及靶向XBP1的临床检测和潜在疗法,探讨靶向XBP1对肾移植相关损伤的潜在价值,以期为改善肾移植预后提供新靶点和新方向。

关键词： X盒结合蛋白1 肾移植缺血-再灌注损伤排斥反应内质网应激肌醇需求酶1α 肾实质细胞免疫细胞

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核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

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武汉大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 20-23,F0002页

作者：刘勇李尧李超黄霞薛承彪胡昕鹏杨涛周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/卫生部器官移植重点实验室/器官移植教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维... 详细信息

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维素钠混悬。行BALB/c到B6的小鼠心脏移植。实验组使用10mg/(kg·d)、30mg/(kg·d)的熊果酸灌胃。对照组使用相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。观察术后7d时移植心CD4+、CD8+T细胞浸润情况,IFN-γ、IL-4mRNA水平和移植心存活时间。结果:熊果酸剂量依赖性抑制P65核转位。25μmol/L的熊果酸可将T细胞表面的CD25下调92.4%,CD69下调89.3%。10mg/(kg·d)熊果酸可将移植心平均存活时间(MST)延长至(23.8±1.3)d[P<0.05,与对照组(7.4±0.3)d相比]。而30mg/(kg·d)的熊果酸可将MST延长至(68.5±2.8)d。熊果酸组移植心内CD4+和CD8+T细胞浸润数量显著减少(P<0.05,与对照组比较),且IFN-γmRNA水平显著下调(P<0.05,与对照组比较),而IL-4mRNA水平无明显变化。结论:熊果酸可抑制T细胞NF-κB活化。体内应用熊果酸能显著延缓同种异体移植心排斥时间,这与熊果酸抑制T细胞活化,下调Th1反应相关。

关键词： NF-κB 心脏移植排斥反应 T细胞活化

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