检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第2期30卷 144-149页

作者：何文涛袁劲徐逸周鸿敏蔡兰军郭晖李超左利群宫念樵陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科

目的构建小鼠galectin-9重组腺病毒pAd-gal-9,探讨galectin-9的真核表达定位以及galectin-9诱导T细胞凋亡与Tim-3表达的关系.方法常规分子克隆方法结合LR反应构建腺病毒重组质粒pAd/CMV/V5-DEST-gal-9,以Pac I线性化后,用脂质体2000... 详细信息

目的构建小鼠galectin-9重组腺病毒pAd-gal-9,探讨galectin-9的真核表达定位以及galectin-9诱导T细胞凋亡与Tim-3表达的关系.方法常规分子克隆方法结合LR反应构建腺病毒重组质粒pAd/CMV/V5-DEST-gal-9,以Pac I线性化后,用脂质体2000体外转染293A细胞,8 d后反复冻融细胞3次收集含病毒上清,并以此上清感染293A细胞大量扩增病毒***密度梯度离心法纯化病毒,96孔板法梯度感染293A细胞测定病毒滴度,然后感染CHO细胞,用免疫组化、Western blot和流式细胞仪分析galectin-9的表达水平和定位;以新鲜培养的上清或固相化的细胞分别与外周淋巴结细胞进行培养,AnnexinV/PI法检测T细胞凋亡情况,对比凋亡细胞比例与Tim-3^＋ T细胞的比例.结果重组腺病毒构建及表达成功,免疫组化表明galectin-9在CHO胞质表达;Westernblot证实galectin-9表达;流式分析表明胞内染色组galectin-9平均荧光强度显著高于表面染色组,病毒感染CHO表面染色组与空白对照组galectin-9平均荧光强度无明显区别;新鲜培养的上清可以明显诱导T细胞发生凋亡,显著高于Tim-3^＋ T细胞的比例.结论重组腺病毒pAd-gal-9构建成功,体外感染pad-gal-9的CHO分泌galectin-9诱导T细胞凋亡可以不依赖Tim-3的表达.

关键词：半乳糖凝集素-9 胞内染色凋亡 T细胞

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保留受者胰腺的肝胰十二指肠器官簇移植一例报告

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中华器官移植杂志 2007年第12期28卷 708-711页

作者：陈知水陈孝平刘敦贵蒋继贫杜敦峰孟凡迎张伟杰林正斌明长生曾凡军郑建伟何凡华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨保留受者胰腺的肝胰十二指肠器官簇移植术的方法和疗效。方法2006年9月28日为1例肝移植术后发生胆道并发症合并1型糖尿病的患者实施了肝胰十二指肠器官簇移植,术中采用保留受者胰腺的方法。结果术后1周时,受者肝脏功能基本恢复... 详细信息

目的探讨保留受者胰腺的肝胰十二指肠器官簇移植术的方法和疗效。方法2006年9月28日为1例肝移植术后发生胆道并发症合并1型糖尿病的患者实施了肝胰十二指肠器官簇移植,术中采用保留受者胰腺的方法。结果术后1周时,受者肝脏功能基本恢复正常;术后第2天即停用胰岛素静脉泵,移植胰腺功能恢复正常。术后第1天胰尾部出现胰瘘,但引流通畅,未予以其他特殊处理,术后第4天胰瘘自行愈合;术后第4天胃肠功能恢复正常;术后第5天,受者即可自行下床活动。受者现已存活12个月,肝脏和胰腺功能均正常。结论保留受者胰腺的方法不仅简化了器官簇移植术的操作,而且使术中和术后并发症明显减少,从而为需行肝胰十二指肠器官簇移植的良性病受者探索出了一种更为简捷安全的新手术方法。

关键词：器官移植糖尿病 1型胰腺

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胰腺移植后的慢性排斥反应

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中华器官移植杂志 2007年第11期28卷 701-702页

作者：陈文伟明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

由于外科技术的不断提高和新型免疫抑制剂的应用，胰腺移植的短期效果显著提高，移植胰腺的1年存活率在80％左右。随着移植物存活时间的延长，慢性排斥反应将成为移植物功能丧失的一个重要原因。据2004年美国器官共享网络（UNOS）与国... 详细信息

由于外科技术的不断提高和新型免疫抑制剂的应用，胰腺移植的短期效果显著提高，移植胰腺的1年存活率在80％左右。随着移植物存活时间的延长，慢性排斥反应将成为移植物功能丧失的一个重要原因。据2004年美国器官共享网络（UNOS）与国际胰腺移植登记处（IPTR）的统计，术后1年导致移植胰腺功能丧失的原因，

关键词：慢性排斥反应胰腺移植移植物存活时间移植后新型免疫抑制剂移植胰腺功能丧失外科技术

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小鼠胰岛的分离与纯化

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中华实验外科杂志 2011年第2期28卷 206-208,I0002页

作者：李明陈栋李永海张伟杰华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法.方法采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶（分别为0.5、1.0、1.5 g/L）消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛.双硫腙（DTZ）对胰岛进行特异性染色... 详细信息

目的探讨稳定、高效的小鼠胰岛细胞的分离纯化方法.方法采用胆总管内灌注不同浓度胶原酶（分别为0.5、1.0、1.5 g/L）消化胰腺的方法分离BALB/C小鼠胰岛,Ficoll-400不连续密度梯度离心法纯化胰岛.双硫腙（DTZ）对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,葡萄糖刺激释放试验体外测胰岛功能.结果不同浓度的胶原酶在不同时间内消化胰腺后收获的胰岛数量有较大的差异,其中采用0.5 g/L胶原酶V、38 ℃水浴消化20 min组收获量最大为（230±20）个胰岛细胞团,纯度约为90%.DTZ染色后胰岛呈腥红色,形态完整.葡萄糖刺激释放实验示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的2.3倍.结论胶原酶浓度、消化时间和温度是影响小鼠胰岛分离结果的重要因素,当胶原酶浓度为0.5 g/L,消化时间20 min时可获得数量较多,纯度较好的胰岛细胞.

关键词：胰岛分离纯化

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低分子质量硫酸葡聚糖对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用

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中华器官移植杂志 2007年第9期28卷 522-524页

作者：徐婧谢林陈刚陈松黄亚冰尹注增陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究相对分子质量为5000的硫酸葡聚糖(DXS)对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用及其可能机制。方法切取Balb/c小鼠的心脏,采用改良Langendorff灌注装置,以含人血清的灌注液进行心脏灌注,实验组1和实验组2的灌注液中加入DXS(终浓... 详细信息

目的研究相对分子质量为5000的硫酸葡聚糖(DXS)对人血清灌注下小鼠离体心脏的保护作用及其可能机制。方法切取Balb/c小鼠的心脏,采用改良Langendorff灌注装置,以含人血清的灌注液进行心脏灌注,实验组1和实验组2的灌注液中加入DXS(终浓度分别为0.1 mg/ml和2.0mg/ml),以不含DXS的人血清灌注液为对照组,记录心脏搏动时间,对照组心脏停搏时,同时切取3个组的心脏组织,HE染色,观察组织学变化,免疫组化方法观察心脏组织中补体C3c、C5b-9和IgM、IgG的沉积情况。结果实验组1心脏搏动时间为(49±15)min,实验组2为(123±19)min,对照组为(17±11)min,两个实验组的心脏搏动时间均显著长于对照组(P<0.05)。HE染色见对照组心肌组织水肿明显,组织间隙变宽,而在灌注相同时间的实验组心脏中此改变不明显。免疫组化染色显示实验组2的心脏组织内C3c和C5b-9沉积较对照组明显减少。结论低分子质量的DXS对人血清灌注下的小鼠离体心脏具有保护作用,这可能与DXS抑制补体激活,从而抑制补体介导的异种超急性排斥反应有关。

关键词：硫酸葡聚糖血清血液灌注小鼠人类心室功能,左

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猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学特点

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中华器官移植杂志 2009年第9期30卷 515-518页

作者：陈松李俊华向莹钟山郭晖王虹吴瑛朱建国陈实陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反... 详细信息

目的观察猕猴预致敏后肾移植加速性排斥反应的免疫学及病理学变化特点。方法建立猕猴皮肤预致敏后肾移植加速性排斥反应模型（供、受者各3只）。检测3只受者皮肤移植预致敏前、后及肾移植后血清内供者特异性抗体的变化，并在发生排斥反应时对移植肾进行免疫组织化学（测定补体、抗体的沉积及各类型淋巴细胞浸润情况）及病理学分析。结果3只受者均发生了加速性排斥反应。其中2只受者在预致敏后血清中供者特异性抗体明显增加，对供者的淋巴毒反应明显升高；肾移植后受者血清中供者特异性抗体及针对供者的淋巴毒进一步升高。苏木精－伊红染色显示排斥反应的移植肾内有明显的动脉坏死、血栓形成、间质出血、中性粒细胞浸润；免疫组织化学及荧光染色显示移植肾内有大量的补体、抗体沉积（主要为IgG），而各种类型的淋巴细胞浸润少见。另1只受者体内的供者特异性抗体及对供者淋巴毒反应的升高程度不如前2只明显，病理学变化以肾小管损伤为主。结论皮肤移植预致敏可以诱导受者产生程度不等的预存抗体，导致大多数移植肾在术后早期发生主要由抗体和补体介导的严重的急性体液性排斥反应。

关键词：猴肾移植皮肤移植抗体

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临床胰腺和胰、肾联合移植的现状

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中华器官移植杂志 2006年第11期27卷 699-701页

作者：明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430014

由于胰腺外分泌处理和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性，胰腺移植在移植总数和移植效果上曾远远落后于肾、心和肝等器官移植。直至近10余年，随着新型强效免疫抑制剂的临床应用、器官保存技术的改进和移植手术方式的日趋成熟，胰腺移... 详细信息

由于胰腺外分泌处理和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性，胰腺移植在移植总数和移植效果上曾远远落后于肾、心和肝等器官移植。直至近10余年，随着新型强效免疫抑制剂的临床应用、器官保存技术的改进和移植手术方式的日趋成熟，胰腺移植受者和移植胰腺的存活率均显著提高。胰、肾联合移植已成为治疗1型糖尿病、部分2型糖尿病合并尿毒症的有效方法。本文概述临床胰腺与胰、肾联合移植的现状与进展。

关键词：胰腺排斥反应肾联合移植临床应用器官保存技术胰腺外分泌免疫抑制剂 1型糖尿病 2型糖尿病

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循环肿瘤细胞与甲胎蛋白联合检测诊断原发性肝癌

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中华肝胆外科杂志 2016年第7期22卷 450-453页

作者：冯锦城杨博代辰张波谭如梦王媒西魏来陈栋陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨循环肿瘤细胞（CTC）、甲胎蛋白（AFP）单独及联合检测诊断原发性肝癌的临床价值。方法纳入2013年11月至2015年9月在华中科技大学同济医学院附属同济医院行同种异体肝移植术的患者69例。所有患者术前抽血检测AFP，采用Cell Sear... 详细信息

目的探讨循环肿瘤细胞（CTC）、甲胎蛋白（AFP）单独及联合检测诊断原发性肝癌的临床价值。方法纳入2013年11月至2015年9月在华中科技大学同济医学院附属同济医院行同种异体肝移植术的患者69例。所有患者术前抽血检测AFP，采用Cell Search System设备检测外周血CTC，并进行统计学分析。结果肝癌组患者（n=42）血液CTC和AFP水平明显高于良性肝病组（n=27），差异均有统计学意义（P〈0．05）。就单个肿瘤标志物而言，CTC的敏感度、特异度和准确度分别为69．0％、92．6％和78．3％，均高于AFP。AFP和CTC的受试者工作特征（ROC）曲线下面积分别为0．780和0．814。CTC和AFP联合检测其敏感度为83．3％，准确度为82．6％，均显著高于单项检测（P〈0．05）。此外，在AFP〈400μg／L的肝癌患者中，CTC阳性率为61．3％。结论CTC对肝癌的诊断效能优于AFP，联合检测CTC和AFP可提高肝癌的诊断敏感性。CTC对AFP〈400μg/L的肝癌患者有一定的诊断价值，CTC检测可提高AFP阴性肝癌患者的诊断率。

关键词：循环肿瘤细胞甲胎蛋白原发性肝癌

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Tim-3在小鼠心脏移植受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化

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中华器官移植杂志 2010年第3期31卷 141-143页

作者：方泽民何文涛王升蔡兰军雒真龙张维娜周鸿敏陈忠华明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的检测激活的TH1类淋巴细胞标记分子“T淋巴细胞免疫球蛋白域及粘蛋白域蛋白-3（Tim-3）”在受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化，探讨其与急性排斥反应的关系。方法建立小鼠同基因和异基因心脏移植模型（简称：同基因组和异基... 详细信息

目的检测激活的TH1类淋巴细胞标记分子“T淋巴细胞免疫球蛋白域及粘蛋白域蛋白-3（Tim-3）”在受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化，探讨其与急性排斥反应的关系。方法建立小鼠同基因和异基因心脏移植模型（简称：同基因组和异基因组）；移植术后第3和第6天，分离和制备两组受者外周血、脾脏、引流淋巴结和移植心内淋巴细胞悬液，采用流式细胞仪检测Tim-3阳性细胞在CD4＋和CD8＋T淋巴细胞中的比值。结果两组受者术后外周血和脾脏内Tim-3＋／CD4＋以及Tim-3＋／CD8＋的比值比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。与同基因组比较，异基因组引流淋巴结内Tim-3＋／CD4＋比值轻度升高（P〈0．05）；但异基因组术后第6天与第3天比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。与同基因组比较，移植心内Tim-3＋／CD4＋和Tim-3＋／CD8＋比值均显著升高（P〈0．01）；异基因组术后第6天与第3天比较，移植心内Tim-3＋／CD4＋和Tim-3＋／CD8＋比值也显著升高（P＜0．01）。结论小鼠异基因心脏移植受者引流淋巴结和移植心内T淋巴细胞上Tim-3的表达升高与急性排斥反应的进展动态相关。

关键词： Tim-3 心脏移植移植物排斥 T淋巴细胞

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实体器官移植术后新生恶性肿瘤23例的临床分析

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中华器官移植杂志 2009年第8期30卷 487-489页

作者：杜敦峰陈孝平陈知水曾凡军明长生林正斌魏来宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的提高对文体器官移植术后新生恶性肿瘤的认识、诊断和治疗水平。方法回顾性分析1977年至2009年5月期间21例肾移植和2例肝移植患者术后新生恶性肿瘤的随访资料。结果实体器官移植术后新生恶性肿瘤的23例患者中，男性16例，女性7例；... 详细信息

目的提高对文体器官移植术后新生恶性肿瘤的认识、诊断和治疗水平。方法回顾性分析1977年至2009年5月期间21例肾移植和2例肝移植患者术后新生恶性肿瘤的随访资料。结果实体器官移植术后新生恶性肿瘤的23例患者中，男性16例，女性7例；发病年龄21～72岁，平均51．26岁。从器官移植到发生肿瘤的时间为3～216个月不等，平均70．65个月。肿瘤组织学类型包括：膀胱癌和肾盂输尿管移行细胞癌5例；肾癌2例；肝癌6例（其中3例乙型肝炎病毒血清标志阳性，3例丙型肝炎病毒血清标志阳性）；乳腺癌2例；胃癌2例；直肠癌、结肠癌、肺癌、鼻咽癌、宫颈癌和移植后淋巴组织增生性疾病各1例。肿瘤确诊后，首先调整患者的免疫抑制方案；文体器官肿瘤首选根治性手术，切除肿瘤；辅以全身、介入或局部灌注化疗和放疗。共13例接受手术治疗，11例接受化疗或介入性化疗栓塞治疗，2例接受放疗。随访至2009年5月，仅有7例患者存活，其中长期存活5例。结论实体器官移植术后新生恶性肿瘤是严重影响移植患者远期存活的危险因素；早期诊断，早期治疗有助于改善预后；肿瘤发牛后，应调整免疫抑制方案，对于合并肝炎等病毒感染的患者，术后应常规行抗病毒治疗。

关键词：器官移植手术后并发症肿瘤

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