检索结果-内蒙古大学图书馆

第九届全国免疫学学术大会

作者：赵越贾钰王璐陈松黄霞陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、教育部/卫生部重点实验室

目的:研究钴原卟啉(CoPP)诱导HO-1高表达对小鼠骨髓来源imDC致耐受性的影响及其体外免疫学机制。方法:采用流式细胞术、Western-blot、激光共聚焦技术等检测经CoPP、SnPP及LPS预处理的小鼠骨髓源性imDC表型及HO-1表达水平,并检测其在体... 详细信息

目的:研究钴原卟啉(CoPP)诱导HO-1高表达对小鼠骨髓来源imDC致耐受性的影响及其体外免疫学机制。方法:采用流式细胞术、Western-blot、激光共聚焦技术等检测经CoPP、SnPP及LPS预处理的小鼠骨髓源性imDC表型及HO-1表达水平,并检测其在体外抑制CD3/CD28刺激的naive T细胞增殖水平等指标的变化;C57BL/6小鼠经尾静脉过继输注不同处理的BALB/c小鼠来源的imDC(5x106)

关键词：体外诱导高表达小鼠骨髓

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两种不同免疫抑制方案对肾移植受者免疫状态的影响

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实用器官移植电子杂志 2014年第6期2卷 344-349页

作者：房爱芳张淦李永海向莹明长生张伟杰华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生和计划生育委员会器官移植重点实验室湖北武汉100039

目的通过比较两种不同免疫抑制方案对肾移植术后受者免疫状态的影响,以寻找有利于移植物长期存活的免疫抑制方案。方法研究纳入亲属活体肾移植受者18例,肾功能稳定。根据应用免疫抑制方案的不同分为两组:西罗莫司(SRL)组8例,方案为SRL+... 详细信息

目的通过比较两种不同免疫抑制方案对肾移植术后受者免疫状态的影响,以寻找有利于移植物长期存活的免疫抑制方案。方法研究纳入亲属活体肾移植受者18例,肾功能稳定。根据应用免疫抑制方案的不同分为两组:西罗莫司(SRL)组8例,方案为SRL+吗替麦考酚酯(MMF)+泼尼松(Pred);他克莫司(TAC)组10例,方案为TAC+MMF+Pred;两组用药时间均超过1年。相应的亲属活体肾移植供者作为空白对照。采用流式细胞技术检测3组外周血调节性T细胞(Treg)(CD4+CD25+Foxp3+)、调节性B细胞(Breg)(CD19+CD5+CD1d+)占外周血淋巴细胞的比例,采用酶联斑点免疫试验(ELISPOT)检测SRL组、TAC组肾移植受者外周血淋巴细胞经其相应供者外周血淋巴细胞特异刺激后,分泌特异性细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)的单个细胞频数。结果 SRL组肾移植受者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占总CD4+T细胞的比例为(6.68±0.42)%,TAC组为(3.59±0.47)%,空白对照组为(6.59±0.36)%,SRL组和空白对照组显著高于TAC组(均P<0.05),SRL组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。SRL组外周血Breg(CD19+CD5+CD1d+)占CD19+B细胞的比例为(16.43±3.56)%,TAC组为(13.09±1.64)%,空白对照组为(16.58±1.31)%,3组之间两两比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。ELISPOT检测SRL组分泌IFN-γ的细胞频数为(117.00±21.54)/500 000,TAC组为(126.00±24.08)/500 000;分泌IL-10的细胞频数SRL组为(347.00±55.29)/500 000,TAC组为(249.00±58.97)/500 000,两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论长期应用以SRL为基础的免疫抑制方案并不影响Treg占外周血淋巴细胞的比例,而应用以TAC为基础的免疫抑制方案会降低外周血Treg的数量;两种方案都不影响Breg占外周血CD19+B细胞的比例,而且也不影响受者对供者的特异性反应性。

关键词：西罗莫司他克莫司调节性T细胞调节性B细胞酶联斑点免疫试验免疫状态

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原位肝胰十二指肠联合移植:附2例报告

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实用器官移植电子杂志 2014年第6期2卷 356-359页

作者：陈栋魏来蒋继贫杨军曹志新陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生和计划生育委员会/教育部器官移植重点实验室湖北武汉430030

目的探讨肝胰十二指肠联合移植的适应证和治疗效果。方法总结分析本中心近两年实施的肝胰十二指肠联合移植2例,1例为酒精性肝硬化伴2型糖尿病,1例为乙肝肝硬化伴2型糖尿病肾病。2例患者均采用原位整块的肝脏、十二指肠、胰腺联合移植。... 详细信息

目的探讨肝胰十二指肠联合移植的适应证和治疗效果。方法总结分析本中心近两年实施的肝胰十二指肠联合移植2例,1例为酒精性肝硬化伴2型糖尿病,1例为乙肝肝硬化伴2型糖尿病肾病。2例患者均采用原位整块的肝脏、十二指肠、胰腺联合移植。供者器官切取和修整简单,移植时依次吻合肝上、肝下下腔静脉;供者肠系膜上静脉与受者肠系膜上静脉吻合;供者腹腔干动脉与受者肝总动脉吻合。术后采用巴利昔单抗诱导治疗;采用他克莫司(FK506)+霉酚酸酯(MMF)+泼尼松(Pred)三联免疫抑制治疗。结果患者1实施肝胰十二指肠联合移植,术后出现肠瘘,未发生弥漫性腹膜炎和严重感染,经充分引流后,肠瘘逐渐愈合。患者2实施肝胰十二指肠移植联合肾移植,术后出现胰腺周围积液和切口愈合不良,予以充分引流和换药处理后痊愈;2例患者术后移植肝和移植胰腺功能恢复正常,完全脱离胰岛素治疗。患者1由于术后1年7个月发生急性排斥反应,应用甲泼尼龙冲击治疗,出现胃肠穿孔继发腹膜炎而死亡;患者2术后6个月出现血丙氨酸转氨酶(ALT)升至150 U/L,转换为低剂量他克莫司联合西罗莫司治疗,患者肝功能改善,ALT维持在80 U/L。患者存活至今,移植物功能良好。结论对于终末期肝病伴有血糖难以控制的糖尿病患者实施肝胰十二指肠联合移植治疗,可以取得良好的治疗效果。

关键词：肝胰十二指肠联合移植疗效

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Blimp1-短发夹RNA基因转染对骨髓源性树突状细胞前体细胞分化的影响

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中华器官移植杂志 2013年第12期34卷 749-753页

作者：李幸戴晓敏姜汉英周平陈知水宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室器官移植教育部重点实验室武汉430030

目的探讨以慢病毒为载体转染B淋巴细胞诱导蛋白-1（Blimp1）-短发夹RNA对小鼠骨髓原代细胞向树突状细胞（DcC）诱导分化的影响。方法构建Blimp1-短发夹RNA。在Balb／c小鼠骨髓原代细胞定向分化为DC的8d培养体系中，于培养第2天用慢病毒... 详细信息

目的探讨以慢病毒为载体转染B淋巴细胞诱导蛋白-1（Blimp1）-短发夹RNA对小鼠骨髓原代细胞向树突状细胞（DcC）诱导分化的影响。方法构建Blimp1-短发夹RNA。在Balb／c小鼠骨髓原代细胞定向分化为DC的8d培养体系中，于培养第2天用慢病毒载体将Blimp1-短发夹RNA转染入细胞中。实验分为3组：空白对照组培养体系中不加入任何慢病毒载体，空载体对照组培养体系中进行空载体慢病毒干预，实验组培养体系中进行lenti—Blimp1-短发夹RNA干预。转染1周内观察转染效率，观察细胞的形态变化，记录细胞的生长曲线；于培养第4、5天收集细胞，实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测各组Blimp1信使RNA和Blimp1的表达情况；检测培养第8天CD11c^＋、CD86^＋及主要组织相容性复合物Ⅱ（MHC-Ⅱ）＋细胞的百分率。结果病毒转染后第3天细胞出现荧光，其后荧光持续存在；培养过程中出现典型DC形态，接受病毒转染的细胞有形态受损表现。空白对照组细胞在培养的前3d内呈对数增长，第4天细胞数目达到峰值，为（2．45±0．26）×10^6／孔，第8天为（2．27±0．19）×10^6／孔；空载体对照组和实验组细胞在病毒侵染后细胞增殖停滞，细胞数目稳定在（1．69±0．39）×10^6／孔。空载体对照组和实验组细胞中Blimp1信使RNA及Blimp1蛋白的表达量分别为空白对照组的76％和1％以及105％和74％。在空白对照组、空载体对照组和实验组中CD11c^＋细胞分别占（69．2±5．0）％、（68．6±5．9）％和（72．8±5．5）％（P〉0．05）；CD86^＋细胞分别占（51．1±4．9）％、（49．5±4．3）％和（50．2±6．0）％（P〉0．05）；MHC-Ⅱ^＋细胞分别占（56．3±7．3）％、（69．4±4．5）％和（46．5±5．7）％，3组间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢病毒介导的短发夹RNA基因治疗是调控骨髓源性DC前体细胞Blimp1基因的有效手段；Blimp1基因的下调不影响DC前体细胞的定向分化，但能够抑制DC的成熟。

关键词：树突细胞慢病毒载体小鼠

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小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导扩增和鉴定

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第4期42卷 386-390页

作者：马东霞赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化... 详细信息

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力。结果经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态。同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC。LPS刺激24h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖。结论体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源。

关键词：树突状细胞诱导鉴定

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胰肾联合移植术后外科并发症的临床分析

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中华器官移植杂志 2013年第6期34卷 341-344页

作者：罗鲜樟明长生宫念樵王心强曾凡军张伟杰陈知水陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的分析胰肾联合移植术后外科并发症发生情况、手术治疗及结果。方法统计2000年1月至2（111年12月施行的胰。肾联合移植术60例，根据术后是否发生外科并发症将受者分为并发症组及无并发症组，分析手术治疗的原因，评估再次手术对受者... 详细信息

目的分析胰肾联合移植术后外科并发症发生情况、手术治疗及结果。方法统计2000年1月至2（111年12月施行的胰。肾联合移植术60例，根据术后是否发生外科并发症将受者分为并发症组及无并发症组，分析手术治疗的原因，评估再次手术对受者及移植物存活率的影响。结果术后1年内，受者死亡原因主要为肺部感染（3例）、心脑血管意外（2例）、消化道出血（1例）。感染及心脑血管意外是导致受者术后早期死亡的主要原因（5／6）。56例胰腺手术成功，术后（14±8）d完全停用胰岛素，外科并发症导致移植胰腺切除4例。15例移植肾功能恢复延迟，术后接受透析的时间为（33±12）d，其余受者肾功能均在术后2～7d恢复正常，带移植物功能死亡是移植肾丢失的主要原因（3／6）。外科并发症发生率为25％（15／60）。外科并发症主要包括：出血、切口感染、移植胰腺血管栓塞及移植胰胰腺炎，外科并发症降低了术后1年受者及移植胰腺的存活率，而对肾脏的存活率无明显影响。结论胰肾联合移植术后外科并发症发生率高，明显降低了受者和移植胰存活率，是影响术后早期受者和移植胰存活的主要因素。

关键词：胰腺移植肾移植手术后并发症

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一氧化碳释放分子2减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

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中华器官移植杂志 2013年第11期34卷 685-689页

作者：阮永乐王璐赵越王军祥陈松明长生陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨一氧化碳释放分子2（CORM-2）对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及其效应。方法制备Balb／c小鼠原位肾脏缺血再灌注模型：在32℃下完全阻断小鼠左肾血流40min，然后恢复血流灌注，同时切除小鼠对侧肾脏。小鼠分别于术前1h经尾静... 详细信息

目的探讨一氧化碳释放分子2（CORM-2）对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及其效应。方法制备Balb／c小鼠原位肾脏缺血再灌注模型：在32℃下完全阻断小鼠左肾血流40min，然后恢复血流灌注，同时切除小鼠对侧肾脏。小鼠分别于术前1h经尾静脉注射CORM-2溶液（CoRM-2组）或失活CORM-2溶液（iCORM-2组），另设假手术组作为对照。再灌注24h后，检测各组小鼠肾功能，取肾脏组织行HE和原位末端转移酶标记染色检查，评价其肾脏组织损伤程度。再灌注1、3、7d后，取小鼠肾脏组织进行免疫组织化学和免疫荧光检测，观察小鼠肾缺血再灌注损伤过程中炎症反应的情况。结果IRI组出现明显肾功能损害，其小鼠血肌酐和尿素氮水平与假手术组相比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；CORM-2组肾功能损害程度减轻，其小鼠血肌酐和尿素氮水平低于IRI组和iCORM-2组（P〈0．05）。常规病理学检查发现，IRI小鼠肾脏组织中肾小管上皮细胞发生凋亡坏死；CORM-2组肾小管上皮细胞的凋亡减轻。IRI组小鼠缺血再灌注损伤早期（再灌注1d和3d），肾脏组织中出现大量MPO阳性中心粒细胞和肿瘤坏死因子α，介导急性炎症反应。CORM-2组MPO阳性中性粒细胞浸润和肿瘤坏死因子α产生明显减少。结论CORM-2可以减轻小鼠肾缺血再灌注中的炎症反应，发挥保护作用。

关键词：缺血再灌注损伤一氧化碳肾

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肾移植前对致敏患者干预治疗的方案及疗效分析

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中华器官移植杂志 2013年第4期34卷 202-205页

作者：陈栋张伟杰陈刚周平昌盛朱兰陈松施辉波杜敦峰陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030 教育部/卫生部器官移植重点实验室

目的总结和探讨肾移植前致敏患者干预治疗的方案及疗效分析。方法选择2008年至2011年接受肾移植的致敏受者43例，根据术前群体反应性抗体（PRA）水平分为轻度致敏组和高度致敏组，术前经血浆置换、输注静脉用免疫球蛋白（IVIG）的干预... 详细信息

目的总结和探讨肾移植前致敏患者干预治疗的方案及疗效分析。方法选择2008年至2011年接受肾移植的致敏受者43例，根据术前群体反应性抗体（PRA）水平分为轻度致敏组和高度致敏组，术前经血浆置换、输注静脉用免疫球蛋白（IVIG）的干预治疗，经过HLA配型，联合应用抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）诱导治疗，应用他克莫司（Tac）、吗替麦考酚酯（MMF）和泼尼松的免疫抑制方案，术后定期检测PRA水平。所有受者随访12-36个月，观察受者／移植肾存活率，急性排斥反应的发生率，移植肾功能和PRA水平的变化，以及进行移植肾穿刺活检。结果经干预治疗后，轻度致敏组中14例PRA完全转阴，高度致敏组中5例PRA完全转阴，其余受者PRA水平均较干预治疗前明显下降（P〈O．05）。术后两组受者均出现PRA水平的爬升。轻度致敏组和高度致敏组的人存活率分别为95．6％和90％，移植肾存’活l率分别为82．6％和70％。轻度致敏组有3例活检证实发生急性细胞性排斥反应，高度致敏组有5例活检证实发生急性排斥反应，急性细胞性排斥反应均经甲泼尼龙冲击治疗3～5d后逆转。两组共10例受者出现血肌酐缓慢爬升，经移植肾穿刺活检发现慢性移植肾肾病的表现。结论血浆置换和输注IVIG的干预治疗，良好的HLA配型，ATG诱导治疗，以及应用Tac＋MMF＋泼尼松的免疫抑制方案是致敏受者肾移植成功的前提。

关键词：致敏肾移植治疗方案效果

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OX40信号调节抑制小鼠CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞Foxp3的表达

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中华器官移植杂志 2013年第7期34卷 424-427页

作者：马东霞王璐赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体... 详细信息

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体、转化生长因子B1、白细胞介素2共孵育，诱导产生Foxp3＋iTreg。在此基础上，于培养体系中加入OX40激动型抗体及其对照抗体，利用流式细胞仪分析研究OX40信号刺激对iTregFoxp3表达的影响。结果C57BL／6小鼠淋巴结中CD4＋CD25＋天然调节性T淋巴细胞（Treg）比例为（5．0±0．4）％，体外诱导培养的CD4＋CD25＋Treg比例为（71．8±13．4）％，其中Foxp3阳性表达占（74．9±1．9）％。OX40激动型抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（80．0±1．6）%，其中Foxp3表达水平为（59．2±0．7）％；OX40激动型抗体对照抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（86．0±1．4）％，其中Foxp3表达水平为（70．0±0．8）％，两组问差异有统计学意义（P〈0．05）。结论静息T淋巴细胞可以在体外诱导培养获得高纯度iTreg；OX40信号刺激可以显著抑制CD25＋iTreg细胞Foxp3的表达。

关键词： T淋巴细胞调节 CD4 共刺激移植

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补体调节蛋白Crry对树突状细胞的调控及诱导同种移植免疫低反应

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中国免疫学杂志 2013年第1期29卷 25-28页

作者：张艳陈栋李明李永海刘斌陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的:探讨补体调节蛋白Crry对树突状细胞(DC)的调节作用及诱导同种移植免疫低反应性的机制。方法:分离BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞,试验分为2组:①脂多糖(LPS)刺激组,即培养结束前加入外源性脂多糖(1 mg/L)刺激24小时;②Crry处理组... 详细信息

目的:探讨补体调节蛋白Crry对树突状细胞(DC)的调节作用及诱导同种移植免疫低反应性的机制。方法:分离BALB/c小鼠的骨髓来源树突状细胞,试验分为2组:①脂多糖(LPS)刺激组,即培养结束前加入外源性脂多糖(1 mg/L)刺激24小时;②Crry处理组,加入抗小鼠Crry抗体5μg/ml,结束前加入外源性脂多糖(1 mg/L)刺激24小时,流式细胞仪检测树突状细胞表面分子CD86、CD40、MHCⅡ的表达,ELISA法检测其细胞上清液中IFN-γ、IL-10和IL-12的水平,ELISA法检测细胞上清液中C3、C5、C3a和C5a的含量,并以BALB/c小鼠的DC作为刺激细胞,以C57BL/6小鼠的淋巴细胞作为反应细胞进行同种混合淋巴细胞培养,MTT法检测淋巴细胞增殖活性。结果:经LPS刺激后,培养的DC表面共刺激分子CD40、CD86和MHCⅡ分子的表达显著增加(P<0.05);Crry处理组DC表面共刺激分子CD86和MHCⅡ分子的表达较LPS刺激组显著降低(P<0.05),而CD40的表达无显著性差异;Crry处理组培养上清液中C3和C5的含量无明显变化,但C3a、C5a的含量较LPS刺激组显著减少(P<0.05);培养DC上清液中IFN-γ和IL-12的含量较LPS刺激组显著降低(P<0.05),IL-10的含量较LPS刺激组显著增加(P<0.05);培养的DC加入Crry抗体后,其淋巴细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。结论:补体调节蛋白Crry可以对DC具有重要的调控作用,可以影响其共刺激分子的表达、补体的生成以及细胞因子的合成等,从而诱导同种移植免疫低反应性,丰富先天免疫对获得性免疫的调节作用。

关键词：补体调节蛋白 Crry 树突状细胞同种移植

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