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免疫学杂志 2006年第1期22卷 20-22页

作者：陈必成唐莉昌盛张鑫郭晖陈忠华华中科技大学同济医学院同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室/国家卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，... 详细信息

目的探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3，FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin，加抗γ公共链抗体后，不能检测到survivin的表达，而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加，M期细胞数下降，凋亡细胞（前G1期）增加；但在MLR后第1～2天，抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡，间接抑制活化的T细胞的survivin表达。

关键词： γ公共链凋亡 Survivin T细胞

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抗白细胞介素6单克隆抗体抑制小鼠心脏移植急性排斥反应及其机制

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第3期43卷 275-280页

作者：雷钧陈知水方路刘天德袁荣发王军邵江华南昌大学第二附属医院普通外科南昌330006 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模... 详细信息

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模型组、移植对照组(注射rat-IgG)和移植治疗组(注射anti-IL-17mAb或anti-IL-6mAb)。观察各组移植心脏存活时间并检测病理组织学改变;Real-time PCR检测各组移植心脏中细胞因子IL-17、干扰素-γ(IFN-γ)及Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测各组受鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞中IL-17、IFN-γ的表达水平。结果①anti-IL-6mAb、anti-IL-17mAb输注均可显著抑制小鼠急性排斥反应的发生,移植心脏存活时间分别延长至(22.0±2.3)d、(13.0±1.8)d,anti-IL-6mAb组抑制排斥反应发生的效果更加显著。组织病理学结果显示anti-IL-6mAb组排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);②anti-IL-6mAb组移植心脏中IL-17、IFN-γ和RORγt mRNA的转录水平较rat-IgG对照组及移植模型组显著下降,anti-IL-17mAb输注可部分下调IFN-γmRNA的转录水平;③anti-IL-6mAb组受鼠脾脏CD4+及CD8+T细胞中IFN-γ+的比例均有不同程度的下降,且CD4+IFN-γ+T细胞较CD8+IFN-γ+T细胞下降更为明显,同时CD4+IL-17+T(Th17)细胞的比例在anti-IL-6mAb组中亦明显下降。结论 anti-IL-6mAb可有效抑制急性排斥反应小鼠体内Th17和Th1细胞的活化,并延长同种异体心脏移植物的存活时间。

关键词：急性排斥反应心脏移植抗白细胞介素6单克隆抗体白细胞介素-17 RORyt 干扰素-γ

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超声造影在供肾质量评估中的应用

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器官移植 2022年第5期13卷 678-682页

作者：董尚鑫施辉波赵圆圆李开艳罗鸿昌张波陈知水蒋继贫华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院超声影像科

近年来,我国公民逝世后器官捐献数量不断增加,但每年仍有大量的终末期肾病患者等待肾移植,供需不平衡仍是目前影响临床肾移植工作开展的主要问题之一。因此,准确评估供肾质量,充分利用扩大标准供肾具有十分重要的临床意义。超声造影因... 详细信息

近年来,我国公民逝世后器官捐献数量不断增加,但每年仍有大量的终末期肾病患者等待肾移植,供需不平衡仍是目前影响临床肾移植工作开展的主要问题之一。因此,准确评估供肾质量,充分利用扩大标准供肾具有十分重要的临床意义。超声造影因其安全、便携、实时、可量化等特点,已逐步应用于各类实体器官的检测,其在供肾质量评估方面也具有良好的应用前景。本文将从当前供肾评估方法的优势与局限性及超声造影应用于供肾评估的现状及优势进行综述,探讨超声造影在供肾质量评估中的应用前景,增加供肾评估的方法和准确性,为合理利用扩大标准供肾提供参考。

关键词：超声造影肾移植供肾评估扩大标准供者边缘供肾供肾评分系统活组织检查低温机械灌注

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大鼠供心转染CTLA4-Ig基因抑制心脏移植后排斥反应

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中华器官移植杂志 2005年第8期26卷 477-480页

作者：陈栋沈世乾李锦文曹荣华郭晖张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究大鼠供心转染CTLA4-Ig基因抑制心脏移植术后排斥反应的可行性。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立心脏移植模型。将实验分为2组。对照组:供心获取过程中不给予任何干预处理;实验组:在供心获取的过程中,以质粒载体携带CTL... 详细信息

目的研究大鼠供心转染CTLA4-Ig基因抑制心脏移植术后排斥反应的可行性。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立心脏移植模型。将实验分为2组。对照组:供心获取过程中不给予任何干预处理;实验组:在供心获取的过程中,以质粒载体携带CTLA4-Ig(pUF1-CTLA4-Ig)经过冠状动脉灌注供心。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测供心组织中CTLA4-IgmRNA的表达,观察移植心存活时间;酶联免疫法(ELISA)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平;观察移植心的组织学改变;用免疫组织化学SABC法检测移植心组织中CD4+和CD8+T细胞的浸润。结果实验组移植心存活时间较对照组明显延长[(11.70±1.24)dvs(5.62±0.74)d,P<0.05]。移植后5d,实验组移植心组织中可见CTLA4-IgmRNA的表达;对照组病理学检查可见心肌间质出现弥漫性的炎性细胞浸润,伴有局部的心肌坏死,组织间质水肿,实验组仅有局灶性血管外周及心肌间质内炎性细胞浸润,未见坏死;对照组移植心组织中浸润的CD4+和CD8+T细胞数量明显高于实验组(P<0.01);实验组血清IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.01),但血清IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论经冠状动脉灌注转染CTLA4-Ig基因,可以抑制心脏移植后排斥反应。

关键词：大鼠供心转染 CTLA4-Ig 基因心脏移植排斥反应

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小鼠CD4^+CD25^+T细胞的分离、鉴定和体外功能的检测

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免疫学杂志 2005年第2期21卷 92-95,99页

作者：周洁袁劲周鸿敏杜敦峰陈必成昌盛陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院同济器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室武汉430030

目的　建立CD4 + CD2 5 + T细胞的免疫磁性分离(MACS)方法,并检测其体外免疫抑制功能。方法　分离C5 7BL 6小鼠和Balb c小鼠脾脏细胞后运用MACS法分离CD4 + CD2 5 + T淋巴细胞,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测选出细胞的活性和纯度,用... 详细信息

目的　建立CD4 + CD2 5 + T细胞的免疫磁性分离(MACS)方法,并检测其体外免疫抑制功能。方法　分离C5 7BL 6小鼠和Balb c小鼠脾脏细胞后运用MACS法分离CD4 + CD2 5 + T淋巴细胞,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测选出细胞的活性和纯度,用淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能。结果　MACS分选法分选出的CD4 + CD2 5 + T细胞活性>97% ,纯度>95 % ;此方法获得的CD4 + CD2 5 + T细胞在体外不增殖,经丝裂原活化后可以抑制同品系小鼠和异品系小鼠的CD4 + CD2 5 -T细胞增殖,这种抑制作用具有剂量依赖性。结论　MACS法可简单迅速分选出高纯度无菌CD4 + CD2 5 + T细胞,且不影响细胞活力。CD4 + CD2 5 + T调节性细胞在体外具有免疫无能和免疫抑制作用;丝裂原活化的该细胞免疫抑制功能具有剂量依赖性,但不具有抗原特异性。

关键词： CD4^+CD25^+T细胞免疫磁性分离 AlamarBlue 免疫无能免疫抑制

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核糖核酸干扰技术在移植免疫中的应用前景

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中华器官移植杂志 2006年第4期27卷 253-254页

作者：朱珉陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA诱发的基因沉默现象.自从2001年在哺乳动物培养细胞中通过小型干扰RNA(siRNA)成功诱导了特异性靶基因表达沉默后,又有学者报道[1]用病毒载体系统在原代哺乳动物细胞、干细胞和转基... 详细信息

核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA诱发的基因沉默现象.自从2001年在哺乳动物培养细胞中通过小型干扰RNA(siRNA)成功诱导了特异性靶基因表达沉默后,又有学者报道[1]用病毒载体系统在原代哺乳动物细胞、干细胞和转基因小鼠上都成功实现了RNAi,更拓宽了这项技术的应用范围.虽然目前RNAi在移植学领域中的相关研究几乎处于空白阶段,但我们可以通过从相关学科RNAi的研究进展中触类旁通,探讨其在移植领域中的应用前景。

关键词：核糖核酸干扰技术移植免疫基因沉默现象哺乳动物细胞病毒载体系统 RNAi 双链RNA 靶基因表达转基因小鼠培养细胞

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建立同种大鼠心脏移植超急性排斥反应动物模型

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中华器官移植杂志 2006年第4期27卷 235-236页

作者：李荣郭晖王大卫谢林曾梦华王树森王璐陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的建立大鼠心脏移植超急性排斥反应的实验动物模型。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。供、受者间连续进行3次皮肤移植,使受者预致敏。再进行颈部异位心脏移植。采用微量淋巴毒试验监测受者体内抗供者抗体滴度的变化。结果预致敏... 详细信息

目的建立大鼠心脏移植超急性排斥反应的实验动物模型。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。供、受者间连续进行3次皮肤移植,使受者预致敏。再进行颈部异位心脏移植。采用微量淋巴毒试验监测受者体内抗供者抗体滴度的变化。结果预致敏后的受者体内抗供者抗体滴度明显升高。7只受者心脏移植后有6只移植心在24h内被排斥,病理学证实为超急性排斥反应。结论供、受者间连续3次皮肤移植预致敏后,再行心脏移植可以建立稳定的同种移植超急性排斥反应模型。

关键词：心脏移植模型动物移植物排斥大鼠

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探讨抗γ公共链单抗诱导移植免疫耐受的作用机制

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中华器官移植杂志 2005年第8期26卷 470-473页

作者：昌盛沈世乾陈必成张鑫杜敦峰周洁陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨抗γ公共链单抗在诱导移植免疫耐受中的作用机制。方法将实验动物分为2组,每组20只。实验组:在Balb/c裸小鼠(H-2d)体内用CFSE标记的Balb/c小鼠(H-2d)T细胞(3×107个)重建其免疫系统,同时给予经丝裂霉素C处理的供者C57BL/6小... 详细信息

目的探讨抗γ公共链单抗在诱导移植免疫耐受中的作用机制。方法将实验动物分为2组,每组20只。实验组:在Balb/c裸小鼠(H-2d)体内用CFSE标记的Balb/c小鼠(H-2d)T细胞(3×107个)重建其免疫系统,同时给予经丝裂霉素C处理的供者C57BL/6小鼠(H-2b)脾细胞(5×106个)静脉输注,24h后实验组受鼠经腹腔注射抗γc单克隆抗体(4G3,3E12,TUGm2,各0.5mg)和抗白细胞介素2受体(IL-2R)β链单克隆抗体(TM-β1,0.5mg)混合液;对照组:以IgG2a2.0mg作为同型对照代替抗体腹腔注射,余处理与实验组相同。经上述处理后12h和48h后处死受鼠,取其脾细胞及外周血,利用流式细胞技术检测T细胞的增殖及凋亡。结果经抗体处理12h和48h后,实验组T细胞未发生明显增殖;而对照组两时间点均可观察到CFSE标记细胞荧光强度明显地减低,表明T细胞发生了分裂增殖。同时AnnexinV法可见,实验组标记有CD3-PE单抗的T细胞12h发生了明显的凋亡,但48h却几乎无明显的凋亡细胞;而对照组两时间点则均未检测到明显的细胞凋亡。两组间12h结果差异有统计学意义(P<0.01),但48h差异无统计学意义(P>0.05)。结论移植术前给予抗γ公共链单抗联合供者细胞特异性输注,通过有效抑制针对供者抗原发生效应的T细胞增殖,可进一步促使其发生凋亡而被有效清除,从而最终实现免疫耐受,且此种耐受具有抗原特异性。

关键词：抗γ公共链单抗移植免疫耐受作用机制丝裂霉素C

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雌激素对天然杀伤细胞的作用

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现代免疫学 2006年第3期26卷 247-250页

作者：闫冀焕周鸿敏王雪琼周绍棠陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室国家卫生部器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部器官移植重点实验室国家卫生部器官移植重点实验室武汉430030

为探讨雌激素对NK细胞的作用,在不同时间把不同剂量的雌激素加入培养体系中,分析雌激素对无和有外来刺激原刺激NK细胞的影响。结果显示培养开始加入生理剂量、低于生理剂量和超生理剂量的雌激素均可明显抑制NK细胞的增殖;培养48 h后加... 详细信息

为探讨雌激素对NK细胞的作用,在不同时间把不同剂量的雌激素加入培养体系中,分析雌激素对无和有外来刺激原刺激NK细胞的影响。结果显示培养开始加入生理剂量、低于生理剂量和超生理剂量的雌激素均可明显抑制NK细胞的增殖;培养48 h后加入相同剂量的雌激素,生理剂量和低于生理剂量雌激素仍可明显抑制NK细胞的增殖,超生理剂量雌激素非但不能抑制反而使NK细胞的数量增加。

关键词：雌激素天然杀伤细胞

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肝移植后急性体液性排斥反应的诊断和治疗两例

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中华器官移植杂志 2014年第8期35卷 451-454页

作者：陈栋魏来蒋继贫郭晖杨军王大为陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生计生委器官移植重点实验室武汉430030

目的回顾并总结肝移植术后急性体液性排斥反应的诊断和治疗经验。方法总结2例肝移植术后发生急性体液性排斥反应的病例资料。例1为重症乙型肝炎患者接受血型不相容的肝移植，供者ABO血型为AB型，受者为A型；例2为自身免疫性肝病患者接... 详细信息

目的回顾并总结肝移植术后急性体液性排斥反应的诊断和治疗经验。方法总结2例肝移植术后发生急性体液性排斥反应的病例资料。例1为重症乙型肝炎患者接受血型不相容的肝移植，供者ABO血型为AB型，受者为A型；例2为自身免疫性肝病患者接受血型相同的肝移植，供、受者血型均为O型。结果移植后两例患者均应用他克莫司＋吗替麦考酚酯＋泼尼松预防排斥反应，例1采用了兔抗人淋巴细胞球蛋白诱导治疗，两例患者术后1周内移植肝功能均恢复良好，血清转氨酶和胆红素总量持续性下降。术后7d开始两例均出现肝功能的持续恶化。例1抗B型血型抗体滴度持续性升高，移植肝穿刺组织病理学证实发生急性体液性排斥反应，予以血浆置换＋硼替佐米＋静脉注射免疫球蛋白（IVIG）治疗，治疗后体液性排斥反应逆转，移植肝功能逐渐恢复正常。例2经护肝、利胆治疗后移植肝功能无明显改善，反复进行移植肝穿刺组织病理学检查，未见急性排斥反应组织学表现，出现少数肝细胞坏死和局部毛细胆管内明显胆汁淤积，检测群体反应性抗体水平，发现HLA-I类抗体为3．4％，Ⅱ类抗体为95．9％，怀疑发生急性体液性排斥反应；予以血浆置换＋硼替佐米＋IVIG治疗，治疗后移植肝功能无明显改善，于第1次肝移植后2个月行再次肝移植；移植肝切除后病理检查证实为移植肝急性体液性排斥反应。结论对于血型不相容的肝移植以及自身免疫性肝病肝移植受者，应警惕其发生急性体液性排斥反应。移植肝穿刺病理学检查、群体反应性抗体水平的检测对于明确诊断有帮助。治疗应抓紧时机，采用综合治疗的方法，治疗无效时实施再次肝移植。

关键词：肝移植急性排斥反应体液性

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