检索结果-内蒙古大学图书馆

体外分化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可减轻小鼠皮肤移植急性排斥反应

华中科技大学学报（医学版） 2010年第6期39卷 733-737页

作者：袁劲吴轲陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部/卫生部重点实验室(华中科技大学)武汉430030

目的利用转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制。方法分选获取CD4+CD25-T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β1刺激组和T... 详细信息

目的利用转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制。方法分选获取CD4+CD25-T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β1刺激组和TGF-β1组。检测CD4+CD25+T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型,于0、1、2、3 d输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间,并检测移植物的病理改变和受鼠外周淋巴细胞的增殖能力。结果 TGF-β1组中CD4+CD25+T细胞比例与无TGF-β1刺激组相近,但高表达Foxp3 mRNA(P<0.05)。将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注无TGF-β1刺激组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(7.3±1.6)d,低于对照组(P<0.05);而输注TGF-β1组细胞小鼠MST为(24.1±2.5)d,较对照组和无TGF-β1刺激组明显延长(P<0.05)。病理检测亦显示TGF-β1组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润。用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β1组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组。进一步检测外周血中IL-4和IFN-γ的表达水平,结果显示TGF-β1组小鼠体内IL-4和IFN-γ均明显低于对照组和无TGF-β1刺激组。结论 TGF-β1可诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,将诱导后的调节性T细胞进行过继输注可延长小鼠皮肤移植物存活时间。

关键词：转化生长因子-β1 调节性T细胞皮肤移植

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半乳糖苷凝集素-7免疫增强功能的体外研究

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医药导报 2010年第10期29卷 1261-1265页

作者：高英张维娜何文涛汪理周鸿敏林星光陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部、卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺外科武汉430022

目的了解半乳糖苷凝集素-7(galectin-7)对不同T细胞亚群增殖的影响,并进一步探讨其免疫治疗方面的应用前景。方法利用不同浓度的重组Galectin-7蛋白在有或无抗CD3和CD28抗体存在时与纯化的T细胞共同培养5 d,流式细胞仪检测T细胞及各亚... 详细信息

目的了解半乳糖苷凝集素-7(galectin-7)对不同T细胞亚群增殖的影响,并进一步探讨其免疫治疗方面的应用前景。方法利用不同浓度的重组Galectin-7蛋白在有或无抗CD3和CD28抗体存在时与纯化的T细胞共同培养5 d,流式细胞仪检测T细胞及各亚群的增殖情况。结果 galectin-7能明显诱导T细胞的增殖,在与抗CD3和抗CD28抗体联用时能协同促进T细胞增殖反应,增殖的细胞主要为CD8+T细胞。结论 galectin-7能诱导并促进T细胞的增殖,在体外发挥免疫增强作用,深入探索其作用机制,有望研发新的靶点药物用于肿瘤的临床免疫治疗。

关键词：半乳糖苷凝集素-7 增殖 T细胞亚群

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孕早期水平雌孕激素对小鼠体内调节性T细胞的影响

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医药导报 2010年第7期29卷 839-843页

作者：林星光汪理高英张维娜雒真龙陈忠华昌盛华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨孕早期的雌、孕激素对小鼠调节性T细胞在体内的影响及其相关性。方法建立去势C57BL/6小鼠模型,2周后分别皮下注射雌激素、孕激素及雌孕激素联合重建小鼠性激素水平,模拟妊娠早期小鼠激素水平。维持2周后,用流式细胞术和免疫组... 详细信息

目的探讨孕早期的雌、孕激素对小鼠调节性T细胞在体内的影响及其相关性。方法建立去势C57BL/6小鼠模型,2周后分别皮下注射雌激素、孕激素及雌孕激素联合重建小鼠性激素水平,模拟妊娠早期小鼠激素水平。维持2周后,用流式细胞术和免疫组化检测给药后小鼠外周血、脾脏、髂窝淋巴结、胸腺中调节性T细胞比例变化情况。结果实验结果显示,雌鼠去势后,单独的雌激素干预可明显提高脾脏、髂窝淋巴结、外周血CD+4CD+25Foxp3+调节性T细胞在CD+4T细胞中的比例,分别为(8.56±1.85)%,(7.63±1.68)%,(6.13±1.32)%;与溶剂组比较差异有显著性(P<0.05)。但胸腺中调节性T细胞比例与溶剂组差异无显著性(P>0.05)。单独妊娠早期水平的孕激素与溶剂组比较,调节性T细胞比例有所升高,但差异无显著性(P>0.05)。而联合应用雌、孕激素对调节性T细胞的影响与单独应用雌激素的结果类似,两者差异无显著性。不同性别组给予相同干预药物,调节性T细胞的变化比例,雌雄两组差异无显著性(P>0.05)。免疫组化也得到了类似的结果。结论单独应用相当于孕早期水平的雌激素可明显提高小鼠外周血,脾脏,髂窝淋巴结CD+4CD+25Foxp3+调节性T细胞比例,而孕激素对外周调节性T细胞没有影响,两种激素对中枢淋巴器官的调节性T细胞均没有影响。小鼠T淋巴细胞中雌孕激素的受体分布及其功能与性别遗传没有相关性。

关键词：雌激素孕激素 T细胞,调节性妊娠小鼠

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猪睾丸Sertoli细胞抵御人血清中天然抗体介导的补体杀伤作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第2期29卷 137-141页

作者：尹注增王璐胡枫向莹谢林徐婧李俊华陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨新生猪睾丸Sertoli细胞抵御人血清中天然抗体介导的补体杀伤作用及其主要机制。方法分离培养10～15日龄的湖北白猪睾丸Sertoli细胞；以猪血管内皮细胞（PED）为对照，采用流式细胞仪（FACS）及免疫荧光检测并比较两种细胞天然... 详细信息

目的探讨新生猪睾丸Sertoli细胞抵御人血清中天然抗体介导的补体杀伤作用及其主要机制。方法分离培养10～15日龄的湖北白猪睾丸Sertoli细胞；以猪血管内皮细胞（PED）为对照，采用流式细胞仪（FACS）及免疫荧光检测并比较两种细胞天然抗原α-Gal的表达；FACS检测并比较两种细胞分别与正常人血清（NHS）中天然抗体IgM、IgG的结合情况；乳酸脱氢酶（LDH）检测20％NHS对Sertoli细胞及PED细胞的杀伤；MTT法检测两种细胞在20％NHS中培养的活性；细胞免疫荧光检测补体C3c、C4d在Sertoli细胞、PED细胞的沉积；细胞免疫组化及免疫荧光检测补体C5b-9在两种细胞上的沉积。结果猪睾丸Sertoli细胞表达仪-Gal，但明显弱于PED细胞，猪睾丸Sertoli细胞能与天然抗体（主要是IgM）结合；20％NHS对Sertoli细胞、PED细胞的杀伤率分别为24．38％±0．50％、53．13％±14．53％，P〈0．01；两种细胞在20％NHS中的活性分别为98．73％±18．84％、52．43％±8．08％，P〈0．01；免疫荧光及组化可见PED细胞上有补体C3c、CAd、C5b-9的沉积；但Sertoli细胞仅有C3c、CAd沉积，而未见C5b-9沉积。结论猪睾丸Sertoli细胞可以显著抵御人血清中天然抗体介导的杀伤作用，其机制可能与Sertoli细胞低表达仅．Gal并抑制补体攻膜复合物形成有关。

关键词： Sertoli细胞 α-Gal 补体

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构建永生化人源肝细胞的研究

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中华肝脏病杂志 2009年第5期17卷 395-397页

作者：孟凡迎周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、教育部器官移植重点实验室、卫生部器官移植重点实验室武汉430030

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给... 详细信息

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给无法满足日益增多的需求。近几年永生化的人肝细胞技术进展较快，尤其是构建成功的可逆性永生化人肝细胞，有望从根本上解决人肝细胞来源困难的难题。

关键词：肝细胞细胞培养技术永生化

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IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第5期38卷 581-584,589页

作者：雷钧何凡吴敏郑翔李舒媛陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组。观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体... 详细信息

目的研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组。观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平。免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况。结果RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达。免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌。结论Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标。

关键词：移植排斥反应 Th17细胞白细胞介素17 核孤独受体γt 干扰素-γ

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体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第6期29卷 559-563页

作者：廖爱华刘丽平黄伟陈栋王燕张玲华中科技大学同济医学院计划生育研究所/生殖医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/教育部器官移植重点实验室/卫生部器官移植重点实验室

目的体外诱导和采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测人类B细胞产生的抗HLA抗体。方法对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）并体外培养5d，以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原（PWM）、葡萄球菌A蛋白菌体（SAC... 详细信息

目的体外诱导和采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测人类B细胞产生的抗HLA抗体。方法对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）并体外培养5d，以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原（PWM）、葡萄球菌A蛋白菌体（SAC）体外刺激PBMC，采用ELISA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数，探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法。采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法，诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体。结果与PWM单刺激相比，PBMC在PWM和SAC联合刺激后，有更多细胞存活的趋势（P=0．052），且培养上清中IgM的水平明显增加（P=0．03），而IgG的水平无明显变化（P〉0．05）。6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体。其特异性与各自培养上清中检测到的抗HIA抗体一致。结论PWM和SAC体外刺激PBMC，结合HLA特异的ELISPOT方法，能诱导和检测到人类B细胞产生的HLA抗体。

关键词：酶联免疫斑点法 B淋巴细胞 HLA抗体美洲商陆丝裂原

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Galeetin-9（Tim-3L）显著减弱小鼠移植排斥

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 5-10页

作者：何文涛袁劲方泽民汪峰徐逸周鸿敏高英张维娜王璐陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探究Galectin-9（即Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3 lig-and，Tim-3L）的真核定位与功能，及其对同种异基因排斥反应的影响。方法PCR扩增Galectin-9片段，插入到pEGFP—N1质粒，转染中国仓鼠卵巢癌细胞系（CHO）行G418筛选，分选增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性细胞。免疫组化检测Galectin-9的表达，Alamar Blue法检测稳定转染Galectin-9的CHO细胞及其新鲜培养上清对脾细胞增殖的影响，ELISA检测IL-2水平。给予BALB／c→C57BL／6心脏移植受鼠Galectin-9蛋白100μg×7d。结果Galectin-9表达于细胞浆，稳定转染Galectin-9-EGFP的CHO细胞上清抑制淋巴细胞增殖和IL-2的产生。上述效应可被Tim-3-Fc融合蛋白逆转。Galectin-9干预的心脏移植物中位生存时间明显延长[（22．7±1．2）d，（7．2±0．4）d）]。结论真核细胞中Galectin．9可通过分泌形式负调节同种异基因免疫；Galectin-9有望成为新型的抗排斥药物。

关键词： Tim-3 Galectin-9 免疫抑制小鼠

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老龄亲属活体供肾移植疗效观察

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肾脏病与透析肾移植杂志 2009年第4期18卷 338-342页

作者：孟凡迎陈知水陈孝平吴敏杜敦峰魏来蒋继贫曾凡军张伟杰林正斌周平明长生宫念樵刘敦贵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的：探讨老龄亲属活体供肾移植的疗效。方法：我院自2006年1月至2006年12月共施行亲属活体肾移植74例,收集该74例活体供肾移植的临床资料,按供者年龄大小分为2组：老龄组（≥55岁）11例,低龄组（〈55岁）63例。分别对两组受体术后不... 详细信息

目的：探讨老龄亲属活体供肾移植的疗效。方法：我院自2006年1月至2006年12月共施行亲属活体肾移植74例,收集该74例活体供肾移植的临床资料,按供者年龄大小分为2组：老龄组（≥55岁）11例,低龄组（〈55岁）63例。分别对两组受体术后不同时间点临床资料和两组供体术前术后的临床资料进行分析比较,探讨老龄活体供肾移植的疗效。结果：（1）受者情况：老龄组有1例术后发生移植肾功能延迟恢复,低龄组有7例,组间比较无差别（P〉0.05）,两组受者移植术后肾功能恢复情况比较无差异,1年人/肾存活率均为100%。供者情况：两组供者术后一周血肌酐均明显升高,老龄组术前血肌酐（85.6±13.7）μmol/L,术后1周升高至（106.4±15.6）μmol/L,而低龄供者术前血肌酐（73.7±6.8）μmol/L,术后1周升高至（101.8±13.1）μmol/L。但术后1年随访,两组供者血肌酐恢复术前水平。结论：在严格供体筛查的前提下,老龄供肾（5565岁）对供者是安全的;而对受者,接受老龄供肾术后近期肾功能恢复情况良好,远期效果有待进一步观察。

关键词：肾移植老龄供肾疗效

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肝窦内皮细胞在肝脏免疫耐受中的作用

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现代免疫学 2009年第1期29卷 85-88页

作者：徐胜元何凡陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室教育部器官移植实验室武汉430030

LSEC是一群独一无二的器官常驻抗原提呈细胞。它们位于一个理想的解剖位置,能够高效而迅速地摄取外源性抗原,并通过其表面的MHC II和I类分子将处理后的抗原肽分别提呈给CD4+T细胞和CD8+T细胞,使CD4+T细胞不能向Th1表型分化,甚至变为调节... 详细信息

LSEC是一群独一无二的器官常驻抗原提呈细胞。它们位于一个理想的解剖位置,能够高效而迅速地摄取外源性抗原,并通过其表面的MHC II和I类分子将处理后的抗原肽分别提呈给CD4+T细胞和CD8+T细胞,使CD4+T细胞不能向Th1表型分化,甚至变为调节性T细胞;使CD8+T细胞缺乏特异性的细胞毒作用,不能大量分泌IFN-γ和IL-2。同时,LSEC还可以通过多条途径诱导活化的T细胞发生凋亡和影响DC的功能。LSEC的这些功能最终使机体达到对某一抗原的特异性免疫耐受。

关键词：肝窦内皮细胞免疫耐受肝脏

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