检索结果-内蒙古大学图书馆

中华器官移植杂志 2005年第3期26卷 186-188页

作者：明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合... 详细信息

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合移植的经验积累十分有限,手术方式尚无统一标准,多数中心仅仅实施单一术式.因此,本文结合我们的经验,对胰腺与胰、肾联合移植手术选择的有关问适题作一综述.

关键词：联合移植术式诊断治疗手术方式引流方式胰腺外分泌总数定型趋向

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肾移植术后新生HLA-DQ抗体的临床意义

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3284-3288页

作者：朱兰陈刚谢林汪芯王大卫林正斌明长生陈孝平陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在... 详细信息

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在肾移植术后6～18年（平均10年）.根据入组时移植肾功能分为3组：（1）移植肾功能正常的对照组（n=94）：血肌酐＜120 μmol/L;（2）慢性移植肾功能减退组（n=54）：血肌酐持续＞150μmol/L达6个月以上,但尚未透析;（3）移植肾失功能组（n=27）：患者恢复血液透析.所有病例在入组时收集血清,采用流式PRA或Luminex方法进行HLA抗体初筛,抗体阳性者进一步行Luminex单抗原包被的微球法检测分别针对HLA-A、B、DR、DQ位点的抗体水平.结果（1） HLA抗体的出现与慢性移植肾功能不全密切相关.慢性移植肾功能减退组HLA抗体阳性的出现率为48％（26/54）,移植肾失功能组为52％（14/27）,而对照组的HLA抗体阳性率只有17％（16/94）（P＜0.01）.（2）在3组HLA抗体阳性的病例中,相比于HLA-DR、HLA-Ⅰ类抗体,HLA-DQ抗体的出现频率均最高,在对照组、慢性移植肾功能减退组、移植肾失功能组分别为14/16、24/26及14/14,此外,HLA-DQ抗体的平均荧光强度也最高.（3） HLA-DQ抗体在对照组的HLA抗体阳性病例中以单独出现为主（10/16）,而在慢性移植肾功能减退组和移植肾失功能组都多数伴随有HLA-DR抗体和Ⅰ类抗体（17/26、14/14）,显示单独出现的HLA-DQ抗体与慢性移植肾功能不全没有直接相关性,而DQ抗体合并DR和（或）Ⅰ类抗体同时出现与慢性移植肾功能减退和失功能有关（均P＜0.05）.结论从移植肾功能状态而言,HLA-DQ抗体往往先于其他位点的抗体出现.在临床移植肾功能尚稳定时,早期发现HLA-DQ抗体对预警免疫系统的特异性激活及后者所致的慢性移植肾功能减退或失功能具有重要意义.监测HLA-DQ抗体将为早期干预治疗和去除免疫危险因素提供第一时机.

关键词：肾移植移植物排斥 HLA-DQ抗体同种异体抗体慢性移植肾功能不全

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两种多克隆刺激条件下人诱导性Treg表型的多样性变化

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中国免疫学杂志 2012年第9期28卷 769-774,778页

作者：王海灏仰霈雯雷家慧华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院武汉430030 华中科技大学同济医学院寄生虫学系武汉430030

目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionom... 详细信息

目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionomycin溶液(PMA/Ionomycin刺激组)或PHA溶液(PHA刺激组)中培养16小时,以流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+CD127-、CD4+CD25+FoxP3+IL-2-、CD4+CD25+FoxP3+IL-10+、CD4+CD25+FoxP3+TGF-β+和CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+的表达。结果:空白对照组显示,约4%的CD4+细胞表达CD4+CD25+FoxP3+CD127-,即nTreg。PBMC在细胞培养液培养16个小时,iTreg的表达无明显变化,但经多克隆刺激后,各不同细胞表型的iTreg的表达明显上升(均P<0.01),表明多克隆刺激可以明显诱导人iTreg的产生。PHA对IL-2-和TGF-β+iTreg的诱导比PMA/Ionomycin强(P<0.01),但仅PMA/Ionomycin可以诱导产生CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+iTreg,而PHA不能诱导。刺激后产生的CD4+FoxP3+IFN-γ+PBL表达与CD25水平呈逆相关。结论:多克隆刺激可以诱导产生人iTreg,PMA/Ionomycin和PHA对人iTreg诱导的机制和程度不一样。多克隆刺激后产生的不同细胞表型反映了人iTreg的多样性变化。

关键词：人诱导性调节性T细胞细胞表型多克隆刺激细胞因子

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Axl-siRNA核转染对髓源性DC前体细胞分化的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第5期42卷 511-514,546页

作者：李幸王浩戴晓敏马俊磊汪晶姜汉英宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、卫生部器官移植重点实验室、器官移植教育部重点实验室武汉430030 海军工程大学海工医院武汉430033

目的将Axl（Anexelekto）-siRNA（small interfering RNA）序列核转染于髓源性树突状细胞（dendritic cells,DC）前体细胞中,观察转染效率、细胞生长及分化情况.方法构建Axl-siRNA序列,用核转染法将此序列转染于小鼠骨髓原代细胞并诱... 详细信息

目的将Axl（Anexelekto）-siRNA（small interfering RNA）序列核转染于髓源性树突状细胞（dendritic cells,DC）前体细胞中,观察转染效率、细胞生长及分化情况.方法构建Axl-siRNA序列,用核转染法将此序列转染于小鼠骨髓原代细胞并诱导向DC分化;根据是否转染Axl-siRNA,将实验分为空白对照组和Axl-siRNA核转染组;转染后荧光显微镜观察细胞荧光水平以评估转染效率;通过锥虫蓝染色观察细胞的存活情况;观察细胞的形态变化,记录细胞的生长情况,绘制生长曲线;转染后第8天流式细胞术检测DC的表面标志CD11c＋.结果转染后1～3 d荧光表达率分别为（70.5±6.3）%、（72.6±7.3）%、（68.8±6.5）%,而后荧光逐渐减弱并淬灭;核转染后细胞的死亡率为（21.2±5.4）%;空白对照组细胞在培养的前3d内的生长曲线呈对数增长,第4至6天,细胞数稳定在（2.38～2.47）×10^6/孔,培养后第7、8天细胞数略有下降,为（2.23～2.31）×10^6/孔;Axl-siRNA核转染组细胞生长曲线也呈现相同的趋势,但与空白对照组相比每阶段的细胞计数略有减少;细胞培养8 d后,空白对照组和Axl-siRNA核转染组CD11c＋的细胞百分比分别为（70.28±6.13）%和（67.53±7.45）%.结论 Axl-siRNA核转染法对髓源性DC前体细胞具有较高的转染效率,不影响DC的生长和分化;Axl-siRNA核转染法是研究DC功能的一种有效手段.

关键词：核转染 Axl-siRNA 树突状细胞树突状细胞前体细胞

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马蹄肾供肾肾移植2例报告

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中华器官移植杂志 2016年第7期37卷 401-405页

作者：张学丁左川杨敏苗妍郭晖蒋继贫张伟杰周平昌盛华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨马蹄肾作为供肾的临床肾移植效果及手术经验总结。方法回顾分析2015年8月1例心脏死亡供者捐献的马蹄肾作为供肾，成功为2例尿毒症患者施行肾移植术的临床资料。供者因自发性脑出血发生心脏死亡，符合中国二类标准进行器官捐献... 详细信息

目的探讨马蹄肾作为供肾的临床肾移植效果及手术经验总结。方法回顾分析2015年8月1例心脏死亡供者捐献的马蹄肾作为供肾，成功为2例尿毒症患者施行肾移植术的临床资料。供者因自发性脑出血发生心脏死亡，符合中国二类标准进行器官捐献。捐献前供者尿量及血肌酐正常，未发现肾脏先天畸形以及相关病史。受者1为男性，年龄49岁，慢性肾炎，肾功能衰竭，透析治疗9个月余；受者2为男性，年龄42岁，IgA肾病，慢性肾炎肾功能衰竭，透析治疗1个月余。供肾获取时，采用低位髂血管插管灌注；供肾修整时仔细分离各动静脉分支，最后结扎峡部小分支动脉，分离峡部，并U形缝合峡部断端。左肾动脉双支，分别带主动脉袖片与受者1的髂外动脉行2个端侧吻合；单支肾静脉与受者髂外静脉行端侧吻合。右肾动脉3支，其中2支与受者2的髂外动脉端侧吻合，肾下极1支与远心端髂外动脉行端端吻合；静脉双支带下腔静脉行延长后，与受者2的髂外静脉行端侧吻合。双侧输尿管肾盂段均有轻度扩张，余无异常，均与受者膀胱行常规隧道包埋法吻合。2例受者术后均采用他克莫司＋吗替麦考酚酯＋泼尼松预防排斥反应。结果肾移植手术耗时3h左右。术后受者尿量均在2000ml／d以上，血肌酐逐渐下降至正常，恢复满意，均于2周左右出院。结论在供肾功能良好，充分评估及仔细操作的情况下，马蹄肾可以作为安全的供肾。

关键词：马蹄肾马蹄肾供肾肾移植

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他克莫司在胰、肾同期联合移植中的应用体会

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中华器官移植杂志 2007年第9期28卷 545-549页

作者：明长生曾凡军张伟杰陈知水陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植国家重点实验室武汉430030

目的回顾性总结他克莫司(FK506)在胰、肾同期联合移植(SPK)中的应用经验。方法37例SPK受者,术后早期采用抗淋巴细胞球蛋白(最初3例)或抗白细胞介素2受体单克隆抗体(34例)诱导治疗,采用FK506、霉酚酸酯(MMF)和皮质激素维持治疗。FK506于... 详细信息

目的回顾性总结他克莫司(FK506)在胰、肾同期联合移植(SPK)中的应用经验。方法37例SPK受者,术后早期采用抗淋巴细胞球蛋白(最初3例)或抗白细胞介素2受体单克隆抗体(34例)诱导治疗,采用FK506、霉酚酸酯(MMF)和皮质激素维持治疗。FK506于术后第3～4天开始口服,起始剂量为0.05～0.08 mg·kg^(-1)·d^(-1),3～5 d后根据血药浓度调整用量,血FK506的浓度谷值,术后1个月内维持在10～12μg/L,2～3个月为6～10μg/L,3个月后为4～8μg/L。结果37例术后均停用胰岛素,仅1例(2.7%,1/37)术后6个月死于急性心肌梗死,受者、移植胰和移植肾1年存活率均为97%。空腹血糖恢复正常的时间为(13.4±8.9)d。28例1型糖尿病患者术后空腹血糖恢复正常的时间为(9.7±3.2)d,9例2型糖尿病患者术后空腹血糖恢复正常的时间显著延长,为(23.0±11.7)d。1年内急性排斥反应发生率为13.5%(5/37),其中4例为单纯移植肾排斥反应,1例同时累及移植胰腺和肾脏;2例经激素冲击治疗后逆转,1例经激素和抗淋巴细胞球蛋白治疗逆转,另2例经激素冲击治疗后,血肌酐一度下降,但2～3个月后因再次发生排斥反应,血肌酐逐渐上升,恢复血液透析,但移植胰功能良好,其后行再次肾移植。结论以FK506为基础的免疫抑制能安全、有效地预防SPK后的排斥反应。

关键词：胰腺肾移植他克莫司移植物排斥

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胰肾联合移植53例术后长期存活的临床观察

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中华器官移植杂志 2012年第9期33卷 523-527页

作者：明长生罗鲜樟宫念樵曾凡军张伟杰陈知水陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植国家重点实验室武汉430030

目的分析53例胰肾联合移植长期存活情况及其影响因素。方法回顾性分析2000年1月至2009年6月间施行的53例胰肾联合移植受者和移植物长期存活情况，分析受者死亡原因和移植物功能丧失原因。结果3、5和8年受者存活率分别为90．1％、89．1％... 详细信息

目的分析53例胰肾联合移植长期存活情况及其影响因素。方法回顾性分析2000年1月至2009年6月间施行的53例胰肾联合移植受者和移植物长期存活情况，分析受者死亡原因和移植物功能丧失原因。结果3、5和8年受者存活率分别为90．1％、89．1％和80．0%，3、5和8年移植胰腺存活率分别为84．9％、84．S％o和60．0％，3、5和8年移植肾存活率分别为83．O％、82．6％和53．3％。受者死亡原因分别为感染（4例）、移植肾功能丧失（2例）、心血管急症（1例）和脑卒中（1例）。移植胰腺功能丧失的主要原因为带功能受者死亡、排斥反应和外科并发症。移植肾功能丧失的主要原因为排斥反应和带功能受者死亡。结论胰肾联合移植治疗终末期糖尿病肾病远期效果良好，感染、排斥反应和外科并发症是受者死亡和移植物功能丧失的主要原因。

关键词：糖尿病胰腺移植肾移植排斥反应长期存活

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小分子干扰RNA转染猪血管内皮细胞优化体系的建立

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中华器官移植杂志 2008年第2期29卷 69-72页

作者：朱珉曹荣华祁洪刚王璐胡枫陈栋刘斌陈刚张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部、卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探索建立高效、稳定的小分子干扰RNA（SiRNA）转染方案并建立优化的猪血管内皮细胞RNA干扰（RN～）转染体系。方法针对猪α1，3-半乳糖苷转移酶（α1，3-GT）基因合成数对SiRNA分子，运用不同转染体系（DOSPA、RiboJuice及Lipofecta... 详细信息

目的探索建立高效、稳定的小分子干扰RNA（SiRNA）转染方案并建立优化的猪血管内皮细胞RNA干扰（RN～）转染体系。方法针对猪α1，3-半乳糖苷转移酶（α1，3-GT）基因合成数对SiRNA分子，运用不同转染体系（DOSPA、RiboJuice及Lipofectamine 2000）转染永生化猪血管内皮细胞系（PED）。分别应用流式细胞术、台盼蓝拒染试验及乳酸脱氢酶释放试验评价干扰α1，3-GT作用下PED的α1，3一半乳糖残基（α-Gal）表达情况以及SiRNA-脂质体转染对PED生长的影响。结果PED能有效发生特异性RNA干扰现象，且呈明显的剂量依赖性特征。SiRNA-1与脂质体Ribo—Juice在12nmol／L：6μl时，干扰效果最佳（67．3％～89．5％），整体量效优于DOSPA及Lipo—fectamine 2000转染体系。靶细胞转染SiRNA-1后48h时的α-Gal相对表达水平为10．5％，而SiRNA-2转染组则未见明显干扰现象。脂质体转染体系在转染后6～12h对靶细胞生长稍有影响，24h后细胞活性逐渐恢复。结论猪血管内皮细胞存在RNA干扰机制，RiboJuice转染体系是一种高效、低毒的SiRNA转染方式，为研究RNAi在抑制异种排斥反应中的应用奠定了基础。

关键词： RNA干扰半乳糖苷酶类内皮细胞

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32例胰、肾同期联合移植的近期疗效

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中华器官移植杂志 2006年第1期27卷 36-39页

作者：明长生甑忠广曾凡军陈知水张伟杰林正斌魏来宫念樵刘斌蒋继贫徐逸陈文伟陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植国家重点实验室武汉430030

目的报告32例胰、肾同期联合移植(SPK)的近期结果及经验。方法为合并尿毒症的27例1型糖尿病和5例2型糖尿病患者施行SPK,其中胰液膀胱引流(BD)术式2例,改进的胰液空肠引流(ED)术式30例。术后早期采用他克莫司、霉酚酸酯及皮质激素预防排... 详细信息

目的报告32例胰、肾同期联合移植(SPK)的近期结果及经验。方法为合并尿毒症的27例1型糖尿病和5例2型糖尿病患者施行SPK,其中胰液膀胱引流(BD)术式2例,改进的胰液空肠引流(ED)术式30例。术后早期采用他克莫司、霉酚酸酯及皮质激素预防排斥反应,同时以抗淋巴细胞球蛋白或抗CD25单克隆抗体诱导治疗。结果32例手术均获得成功,术后随访2～12个月,1例术后9周死于肺部感染,死亡时肾功能正常,另1例术后6个月死于急性心肌梗死,死亡时移植胰、肾功能正常,其余患者目前仍存活;术后(12.7±8.1)d空腹血糖恢复正常,(8.3±4.5)d停用胰岛素,(8.4±7.8)d血肌酐恢复正常。术后发生手术相关并发症有出血、移植胰切口感染、上消化道出血、右股静脉血栓形成和淋巴漏;其它并发症有药物不良反应、肺部感染,采用BD术式者并发代谢性酸中毒和镜下血尿;4例发生移植肾急性排斥反应,均经活检证实。结论SPK治疗糖尿病并发尿毒症的近期疗效满意,ED术式更符合正常生理。

关键词：胰腺肾移植治疗结果

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Caspase-3和Caspase-8肝脏缺血再灌注损伤基因沉默保护大鼠

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中华实验外科杂志 2008年第5期25卷 594-596,682页

作者：陈栋张艳朱珉郭晖刘斌陈刚张伟杰陈知水陈实陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030 综合医疗科

目的观察caspase-3和caspase-8基因沉默对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（（IRI）的保护作用。方法分别构建针对大鼠caspase-3和caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。肝脏IRI前48h经门静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS）、空载体或cas... 详细信息

目的观察caspase-3和caspase-8基因沉默对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（（IRI）的保护作用。方法分别构建针对大鼠caspase-3和caspase-8基因的短发夹状RNA（shRNA）真核表达载体。肝脏IRI前48h经门静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS）、空载体或caspase-3和caspase．8shRNA。实验随机分为4组，假手术组、PBS组、空载体组和shRNA组。阻断大鼠70％人肝血流40min，再灌注6、12、24h、3、5、7d检测血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平，肝组织Caspase-3和caspase-8 mRNA的表达，caspase-3和caspase-8蛋白活性，细胞凋亡情况，丙二醛（MDA）以及超氧化物岐化酶（SOD）的含量。结果与PBS组和空载体组比较，shRNA组再灌注6、12、24h、3、5d血清ALT和AST水平显著降低（P〈0．05），caspase-3和caspase-8mRNA水平、caspase-3和caspase-8蛋白活性（caspase-3活性：0．18±0．03比0．36±0．03和0．38±0．02，P〈0．05；caspase-8活性：0．16±0．03比0．32±0．02和0．34±0．03，P〈0．05）、肝细胞凋亡指数[（22．46±3．25）％比（35．24±2．33）％和（37．36±2．51）％，P〈0．05]和肝组织中MDA含量[（76．2±15．3）比（123．5±12．4）、（136．7±13．6）nmoVmg，P〈0．05）显著降低，SOD活性显著升高[（24．1±3．2）比（12．2±3．1）、（11．4±2．9）U／mg，P〈0．05]。结论caspase．3和caspase．8基因沉默可以抑制细胞凋亡的发生，从而起到保护肝脏IRI的作用。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤 Caspase-3 Caspase-8 基因沉默

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