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华中科技大学学报（医学版） 2006年第4期35卷 479-482页

作者：潘桃唐莉习东魏来明长生陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室武汉430030

目的研究建立人肝细胞体外乙型肝炎病毒(HBV)感染模型和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)黏附模型,为后期研究小分子抗体Fab的作用打下基础。方法体外原代培养人肝细胞,对人原代肝细胞进行HBsAg黏附实验及HBV感染实验。采用正常人胎肝细胞系(L-... 详细信息

目的研究建立人肝细胞体外乙型肝炎病毒(HBV)感染模型和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)黏附模型,为后期研究小分子抗体Fab的作用打下基础。方法体外原代培养人肝细胞,对人原代肝细胞进行HBsAg黏附实验及HBV感染实验。采用正常人胎肝细胞系(L-02)及鼠原代肝细胞进行实验对照。倒置相差显微镜下观察细胞形态,生化法检测其白蛋白分泌功能。免疫组化法检测HBsAg黏附情况和HBV感染肝细胞内HBsAg的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝细胞感染HBV后HBsAg的持续表达。PCR检测肝细胞内HBV复制中间体-闭合环状双链DNA(cccDNA)。结果人原代肝细胞体外培养达2周以上。HBsAg黏附实验检测到HBsAg可黏附于人原代肝细胞、L-02、鼠原代肝细胞胞膜。HBV体外仅感染人原代肝细胞,从第2天起即可检测到细胞培养上清中存在HBsAg,并持续到观察结束第16天,免疫组化检测人原代肝细胞内HBsAg呈阳性;PCR检测到人原代肝细胞内存在HBV-cccDNA,而L-02及鼠原代肝细胞实验检测结果均为阴性。结论人原代肝细胞体外分离培养成功,HBsAg黏附和HBV感染模型初步建立于人原代肝细胞。

关键词：人原代肝细胞乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒感染

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凋亡抑制蛋白survivin在活化T细胞中的表达及其意义

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 147-150页

作者：陈必成唐莉张鑫郭晖昌盛杜敦峰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植国家重点实验室湖北武汉430030

目的: 探讨survivin在活化T细胞的表达及其意义.方法: 经丝裂原与同种抗原刺激激活T细胞, 免疫细胞化学染色后观察survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.用流式细胞术检测CD3、 CD25、 Survivin的表达及细胞凋亡.给BALB/c裸鼠输注C57B... 详细信息

目的: 探讨survivin在活化T细胞的表达及其意义.方法: 经丝裂原与同种抗原刺激激活T细胞, 免疫细胞化学染色后观察survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.用流式细胞术检测CD3、 CD25、 Survivin的表达及细胞凋亡.给BALB/c裸鼠输注C57BL/6小鼠脾细胞后第4～7天, 观察肝脏内T细胞浸润和survivin的表达.结果: ConA刺激后培养的脾细胞可表达survivin(表达不局限于G2/M期).survivin+细胞为T细胞, T淋巴母细胞可同时表达CD25和***+细胞中仅部分细胞表达***刺激淋巴细胞后第6天, 凋亡细胞的百分率明显增加(22.90% vs 5.23% P<0.001).于BALB/c裸鼠输注C57BL/6小鼠的脾细胞后, 于第4～7天,在BALB/c裸鼠肝脏中可观察到T细胞浸润并表达Survivin.结论: T细胞激活后可表达survivin, 故可作为活化T细胞的标志.T细胞持续表达survivin, 需要在体内与抗原持续接触.

关键词： T细胞 survivin CD25

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云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究

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中华医学杂志 2006年第21期86卷 1460-1463页

作者：李荣陈刚郭晖王大卫谢琳王树森王婉瑜熊郁良陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030 中国科学院昆明动物研究所毒素室

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给... 详细信息

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子（Y-CVF）对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组，实验组（n=8）于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg／kg；对照组（n=7）不用Y-CVF。观察移植心的生存时间，移植心停跳后病理学检查排斥类型，免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1：1028～1：2056。对照组移植心存活时间为12．71h±13．94h，实验组移植心存活时间为99．50h±38．72h，与对照组比较差异有统计学意义（t=5．599，P〈0．01）。病理检查结果证实，实验组均未发生急性体液排斥，仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性，C3染色对照组为阳性，而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。

关键词：眼镜蛇毒素心脏移植移植排斥

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肾移植患者发生移植肾功能延迟恢复的危险因素分析及预测

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中华器官移植杂志 2006年第8期27卷 456-459页

作者：陈杰曾凡军金昊明长生陈知水张伟杰林正斌刘敦贵陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究肾移植患者发生移植肾功能延迟恢复(DGF)的相关危险因素及预测方法。方法回顾性分析212例具有完整人类白细胞抗原(HLA)配型资料的尸体肾移植患者的临床资料,对患者的性别、年龄、血型、乙型肝炎病毒感染情况、心功能分级、是否... 详细信息

目的研究肾移植患者发生移植肾功能延迟恢复(DGF)的相关危险因素及预测方法。方法回顾性分析212例具有完整人类白细胞抗原(HLA)配型资料的尸体肾移植患者的临床资料,对患者的性别、年龄、血型、乙型肝炎病毒感染情况、心功能分级、是否再次移植、透析时间长短、HLA配型情况、供肾热缺血时间、供肾冷缺血时间以及血管开放后泌尿时间进行严格的记录和评估。用一元logistic回归方法初步找出与DGF发生相关的因素,再用多元逐步logistic回归方法找出导致DGF发生的各项高危险因素,建立移植肾功能延迟恢复的logistic回归模型。结果本组患者DGF发生率为16.51%。由一元logistic回归方法分析发现在α=0.05的水准上,DGF与心功能分级、透析时间、HLA-Ⅰ类错配、HLA总错配及移植肾冷缺血时间有关,但与是否再次移植、性别、年龄、血型、乙型肝炎病毒感染情况、肾脏热缺血时间、血管开放后泌尿时间等均无明显的相关性。用多元逐步lo-gistic回归分析方法发现患者心功能分级、HLA-Ⅰ类抗原错配和移植肾冷缺血时间是影响DGF的重要因素。结论DGF的发生不是移植肾冷保存时间过长或其它任何单一因素导致的,而是由供肾质量、免疫学因素和受者功能状况等多种因素决定的。应用DGF的多元回归预测模型,可以计算出患者发生DGF的概率,从而进行必要的临床干预,预防DGF的发生。

关键词：肾移植危险因素 Logistic模型

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肝胰十二指肠器官簇移植(附一例报道)

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中华器官移植杂志 2005年第6期26卷 325-328页

作者：陈知水魏来刘敦贵杜敦峰明长生曾凡军张伟杰林正斌蒋继贫陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院器官移植教育部卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨肝胰十二指肠联合移植术治疗1例原发性肝癌合并胰头转移的疗效。方法2004年9月,对1例原发性肝癌合并胰头转移的患者行病肝、全胰腺十二指肠、远端胃及脾脏切除后,进行肝胰十二指肠原位器官簇移植。结果移植术后胰腺功能恢复正常... 详细信息

目的探讨肝胰十二指肠联合移植术治疗1例原发性肝癌合并胰头转移的疗效。方法2004年9月,对1例原发性肝癌合并胰头转移的患者行病肝、全胰腺十二指肠、远端胃及脾脏切除后,进行肝胰十二指肠原位器官簇移植。结果移植术后胰腺功能恢复正常,未应用胰岛素维持;术后1周肝功能恢复正常。患者目前已存活5个月,肝脏和胰腺功能均正常,未发生排斥反应,未见肿瘤复发迹象,一般情况好。结论肝胰十二指肠器官簇移植为上腹部晚期恶性肿瘤患者提供了延长生命的机会,同时更为晚期肝病伴有胰腺功能不良患者的彻底治愈探索出新的手术术式。

关键词：胰十二指肠器官簇原发性肝癌胰腺十二指肠恶性肿瘤患者联合移植术 2004年肝功能恢复生排斥反应移植术后胰腺功能肿瘤复发手术术式功能不良晚期肝病切除后远端胃胰岛素上腹部转移胰头

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Neuropilin-1在CD4^+CD25^+T细胞上的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1067-1070页

作者：张利改周鸿敏童荔蔡兰军徐逸吴轲陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030 中国人民解放军总医院附属第二医院器官移植中心

目的探讨neuropilin-1(NRP1)在外周血中CD4^+CD25^+T细胞上的表达以及意义。方法收集肾移植术后长期存活、慢性移植物肾病和急性排斥患者以及健康成年人的外周血,分离外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞... 详细信息

目的探讨neuropilin-1(NRP1)在外周血中CD4^+CD25^+T细胞上的表达以及意义。方法收集肾移植术后长期存活、慢性移植物肾病和急性排斥患者以及健康成年人的外周血,分离外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞上NRP1和Foxp3的阳性细胞的百分比。结果各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1的表达率差异有统计学意义(P<0.05);各组CD4^+ CD25^+T细胞Foxp3的表达率差异亦有统计学意义(P<0.05)。长期存活组CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率分别为19.76%±3.84%、50.19%±3.90%,显著高于对照及慢性移植物肾病和急性排斥组(P<0.05);急性排斥组的CD4^+CD25^+T细胞NRP1和Foxp3表达率最低4.64%±1.26%、17.24%±5.29%。各组CD4^+CD25^+T细胞NRP1表达变化趋势与Foxp3变化趋势相同。结论NRP1在长期存活组的外周血淋巴细胞中CD4^+CD25^+T细胞的表达上调,在急性排斥组时表达下调,且其在各组的表达变化趋势与Foxp3的表达变化趋势是一致的,这就提示CD4^+CD25^+NRP1^+T细胞是一群调节性T细胞,即NRP1是CD4^+CD25^+T_(reg)的一个重要的表面标志。

关键词：肾移植移植耐受调节性T细胞 Neuropilin-1

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健康科普,促进全民健康

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大众医学 2025年第1期 5-5页

作者：陈孝平中国科学院《大众医学》编委会华中科技大学同济医学院附属同济医院外科学系华中科技大学肝胆胰外科研究所华中科技大学器官移植教育部重点实验室

《大众医学》是我的恩师裘法祖院士于1948年创办的中国第一本医学科普刊物。创刊77年来,《大众医学》铭记裘老教诲与期望,努力践行“让医学归于大众”的宗旨,始终坚持普及医学知识,帮助读者了解医学常识和保健方法,促使广大读者对健康... 详细信息

《大众医学》是我的恩师裘法祖院士于1948年创办的中国第一本医学科普刊物。创刊77年来,《大众医学》铭记裘老教诲与期望,努力践行“让医学归于大众”的宗旨,始终坚持普及医学知识,帮助读者了解医学常识和保健方法,促使广大读者对健康观念的思考和生活方式的转变,树立正确的健康观念,将科学的健康知识传递给更多人,在健康教育和医学科普方面发挥了重要作用,对提高我国几代人的健康素质和文化素质有着深远影响,也奠定了杂志在医学界和科普界的声誉和地位。

关键词：医学常识保健方法健康观念健康科普全民健康健康素质知识传递科普刊物

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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

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器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

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西罗莫司对移植动脉粥样硬化的预防作用

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中华实验外科杂志 2005年第5期22卷 620-621,i006页

作者：张伟杰徐崇松甄忠广张成德聂明朱学海华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究新型免疫抑制剂西罗莫司(Sirolimus)对大鼠移植动脉粥样硬化的预防作用。方法建立大鼠颈动脉移植模型,将受体鼠随机分为3组,即空白对照组、环孢素组及Sirolimus组,6周后对移植动脉行病理组织学检测观察移植动脉再狭窄程度、免... 详细信息

目的研究新型免疫抑制剂西罗莫司(Sirolimus)对大鼠移植动脉粥样硬化的预防作用。方法建立大鼠颈动脉移植模型,将受体鼠随机分为3组,即空白对照组、环孢素组及Sirolimus组,6周后对移植动脉行病理组织学检测观察移植动脉再狭窄程度、免疫组织化学检测转化生长因子(TGF)-β1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果Sirolimus组血管内膜增厚程度显著低于对照组和环孢素组,其移植动脉再狭窄程度为(15.00±1.21)%,而对照组和环孢素组分别为(40.00±5.91)%、(34.00±6.55)%,差异均有统计学意义(P<0.01);PCNA在Sirolimus组表达明显低于空白对照组和环孢素组,分别为(1.10±0.30)%、(14.20±2.56)%及(4.10±0.62)%,差异有统计学意义;TGF-β1在Sirolimus组表达低于对照组和环孢素组,分别为(5.00±1.39)%、(18.00±1.52)%及(16.00±2.35)%(P<0.01)。结论Sirolimus可预防大鼠移植动脉粥样硬化,TGF-β1和PCNA基因表达的下调可能是Sirolimus预防移植动脉粥样硬化机制中重要环节。

关键词：动脉粥样硬化预防作用西罗莫司 Sirolimus 增殖细胞核抗原(PCNA) 免疫组织化学检测 PCNA基因表达 TGF-β1 新型免疫抑制剂病理组织学检测移植动脉转化生长因子狭窄程度对照组环孢素移植模型方法建立内膜增厚

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核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

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武汉大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 20-23,F0002页

作者：刘勇李尧李超黄霞薛承彪胡昕鹏杨涛周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/卫生部器官移植重点实验室/器官移植教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维... 详细信息

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维素钠混悬。行BALB/c到B6的小鼠心脏移植。实验组使用10mg/(kg·d)、30mg/(kg·d)的熊果酸灌胃。对照组使用相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。观察术后7d时移植心CD4+、CD8+T细胞浸润情况,IFN-γ、IL-4mRNA水平和移植心存活时间。结果:熊果酸剂量依赖性抑制P65核转位。25μmol/L的熊果酸可将T细胞表面的CD25下调92.4%,CD69下调89.3%。10mg/(kg·d)熊果酸可将移植心平均存活时间(MST)延长至(23.8±1.3)d[P<0.05,与对照组(7.4±0.3)d相比]。而30mg/(kg·d)的熊果酸可将MST延长至(68.5±2.8)d。熊果酸组移植心内CD4+和CD8+T细胞浸润数量显著减少(P<0.05,与对照组比较),且IFN-γmRNA水平显著下调(P<0.05,与对照组比较),而IL-4mRNA水平无明显变化。结论:熊果酸可抑制T细胞NF-κB活化。体内应用熊果酸能显著延缓同种异体移植心排斥时间,这与熊果酸抑制T细胞活化,下调Th1反应相关。

关键词： NF-κB 心脏移植排斥反应 T细胞活化

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