检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2012年第9期28卷 769-774,778页

作者：王海灏仰霈雯雷家慧华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院武汉430030 华中科技大学同济医学院寄生虫学系武汉430030

目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionom... 详细信息

目的:研究人诱导性调节性T细胞(iTreg)细胞表型的多样性变化,并比较PMA/Ionomycin和PHA两种多克隆刺激对人iTreg的诱导的异同。方法:用Ficoll密度梯度离心分离出人PBMC,空白对照组直接检测,其余则在细胞培养液(非刺激对照组)、PMA/Ionomycin溶液(PMA/Ionomycin刺激组)或PHA溶液(PHA刺激组)中培养16小时,以流式细胞仪检测CD4+CD25+FoxP3+CD127-、CD4+CD25+FoxP3+IL-2-、CD4+CD25+FoxP3+IL-10+、CD4+CD25+FoxP3+TGF-β+和CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+的表达。结果:空白对照组显示,约4%的CD4+细胞表达CD4+CD25+FoxP3+CD127-,即nTreg。PBMC在细胞培养液培养16个小时,iTreg的表达无明显变化,但经多克隆刺激后,各不同细胞表型的iTreg的表达明显上升(均P<0.01),表明多克隆刺激可以明显诱导人iTreg的产生。PHA对IL-2-和TGF-β+iTreg的诱导比PMA/Ionomycin强(P<0.01),但仅PMA/Ionomycin可以诱导产生CD4+CD25+FoxP3+IFN-γ+iTreg,而PHA不能诱导。刺激后产生的CD4+FoxP3+IFN-γ+PBL表达与CD25水平呈逆相关。结论:多克隆刺激可以诱导产生人iTreg,PMA/Ionomycin和PHA对人iTreg诱导的机制和程度不一样。多克隆刺激后产生的不同细胞表型反映了人iTreg的多样性变化。

关键词：人诱导性调节性T细胞细胞表型多克隆刺激细胞因子

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提倡亲属活体肾移植力推“家庭内自救”方案

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中华器官移植杂志 2006年第5期27卷 260-261页

作者：陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

由于全球范围内的供移植器官短缺,亲属活体肾移植已成为治疗终末期肾病的主要手段之一.与其它器官来源相比,亲属活体供肾移植的供、受者基因相近,供肾缺血时间短,因而具有人/肾存活率高、排斥反应发生率低、术前透析时间短及手术可择期... 详细信息

由于全球范围内的供移植器官短缺,亲属活体肾移植已成为治疗终末期肾病的主要手段之一.与其它器官来源相比,亲属活体供肾移植的供、受者基因相近,供肾缺血时间短,因而具有人/肾存活率高、排斥反应发生率低、术前透析时间短及手术可择期安排等优点显而易见.Terasaki的研究表明,活体肾移植病例中,即使HLA配型不好,其长期效果也优于尸体肾移植中配型较好者,这也提示,活体供肾的热缺血时间、冷缺血时间及运输时间均较短,从而使供肾的缺血损伤减轻,这是活体肾移植的重要优势之一。

关键词：亲属活体肾移植亲属活体供肾移植家庭内热缺血时间 HLA配型自救终末期肾病尸体肾移植冷缺血时间器官短缺

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猪睾丸Sertoli细胞的分离、培养及其免疫豁免相关细胞因子的检测

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中华器官移植杂志 2008年第9期29卷 522-525页

作者：胡枫尹注增王璐谢林向莹徐婧陈松李俊华陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨猪睾丸Sermli细胞分离、培养的方法，并对其体外培养的状态及免疫豁免相关细胞因子的表达进行检测，为Sertoli细胞用于移植提供依据。方法无菌条件下取10～15日龄的湖北白猪睾丸，剥离睾丸白膜及表面血管，剪碎后用2．0g／LV型... 详细信息

目的探讨猪睾丸Sermli细胞分离、培养的方法，并对其体外培养的状态及免疫豁免相关细胞因子的表达进行检测，为Sertoli细胞用于移植提供依据。方法无菌条件下取10～15日龄的湖北白猪睾丸，剥离睾丸白膜及表面血管，剪碎后用2．0g／LV型胶原酶以及2．5g／L胰蛋白酶和0．5g／L DNaseI消化（两步法）分离Sertoli细胞，于37℃、含体积分数为5％CO2的培养箱中培养。采用倒置相差显微镜观察细胞形态，透射电镜进行超微结构鉴定，流式细胞仪检测细胞体外活率，逆转录聚合酶链反应检测Sertoli细胞sox9、FasL、转化生长因子B（TGF-β）及Clusterin的表达，四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞的活性。结果猪睾丸经分离、培养，所获得的Sertoli细胞纯度达90％以上。培养后的细胞凋亡率为（2．61±0．96）％，死亡率为（2．12±0．74）％；培养的Sertoli细胞稳定表达sox9、TGF-β、Clusterin，而FasL表达较弱。体外培养的Sertoli细胞可以保持良好活性达21d。结论采用V型胶原酶以及胰蛋白酶和DNaseI两步法消化分离可获得大量高纯度的Sertoli细胞，该细胞在培养过程中能够稳定表达FasL、TGF-β和Clusterin分子。

关键词：塞尔托利细胞细胞培养技术抗原 CD95 转化生长因子β 猪

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在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A的临床研究

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中华器官移植杂志 2008年第12期29卷 724-726页

作者：张伟杰陈栋王海灏明长生曾凡军陈知水林正斌刘斌宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A（CsA）对急性排斥反应发生率及肾功能的影响。方法选择35例肾功能稳定的肾移植受者，其中尸体肾移植23例，亲属活体肾移植12例。除2例为再次肾移植外，其余均为初次肾移植。分别在肾... 详细信息

目的研究在移植肾功能稳定的受者中主动撤除环孢素A（CsA）对急性排斥反应发生率及肾功能的影响。方法选择35例肾功能稳定的肾移植受者，其中尸体肾移植23例，亲属活体肾移植12例。除2例为再次肾移植外，其余均为初次肾移植。分别在肾移植术后6个月～6年时停用CsA，平均为术后（13．3±9．1）个月。撤除CsA后免疫抑制方案为：霉酚酸酯（MMF）＋西罗莫司（SRL）＋泼尼松（Pred）。撤除CsA前有9例做了移植肾穿刺活检，8例测定了抗HLA抗体。结果对35例受者随访6个月～4．5年，平均14．8个月。撤除CsA前、后血肌酐平均值分别为（88．1±15．5）μmol／L和（92．3±23．7）μmol／L（P〉0．05）。撤除CsA后，有2例经活检证实发生急性排斥反应，治疗后均逆转；CsA所致的毒副作用，如牙龈增生、糖耐量异常和多毛症等明显改善。9例移植肾活检中，有3例肾功能正常的受者已出现轻度慢性移植肾肾病表现。抗HLA抗体检测中，7例阴性者在撤除CsA前、后肾功能无明显变化，1例抗HLA抗体呈强阳性者在撤除CsA后进展为慢性移植肾肾病，恢复血液透析。结论对移植‘肾功能稳定的受者在移植6个月后撤除CsA，转换为“霉酚酸酯＋西罗莫司＋泼尼松”的免疫抑制方案是安全的，不增加急性排斥反应风险；撤除CsA有利于消除一些与其相关的毒副作用；对抗HLA抗体呈强阳性者，撤除CsA后很难改变肾功能的进展。

关键词：肾移植环孢菌素移植物排斥肾功能试验

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小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导扩增和鉴定

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第4期42卷 386-390页

作者：马东霞赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化... 详细信息

目的体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定。方法以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力。结果经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态。同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC。LPS刺激24h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖。结论体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源。

关键词：树突状细胞诱导鉴定

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肝移植术后早期神经系统并发症的相关因素分析

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中华器官移植杂志 2010年第7期31卷 418-421页

作者：魏来陈知水曾凡军明长生杜敦峰蒋继贫刘斌宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨肝移植术后早期发生神经系统并发症（NC）的相关因素及改善其预后的措施。方法回顾分析155例终末期肝病患者接受成人尸体肝移植的临床资料，其中男性131例，女性24例，平均年龄47．4岁（18-67岁）。受者原发病为：乙型肝炎导致... 详细信息

目的探讨肝移植术后早期发生神经系统并发症（NC）的相关因素及改善其预后的措施。方法回顾分析155例终末期肝病患者接受成人尸体肝移植的临床资料，其中男性131例，女性24例，平均年龄47．4岁（18-67岁）。受者原发病为：乙型肝炎导致的急、慢性肝功能衰竭60例，原发性肝癌（包括胆管癌）73例，丙型肝炎肝硬化12例，其他（包括原发性胆汁性肝硬化、肝豆状核变性及多囊肝等）10例。肝移植术后将发生NC的受者分为NC组，将未发生NC的受者设为对照组，观察和比较两组受者术前原发病和终末期肝病模型（MELD）评分、术后肝功能、住院期间感染发生率及死亡率。结果住院期间，共有36例受者发生NC，总发病率为23．2％（36／155）。原发性肝癌患者的NC发病率为12．3％（9／73），明显低于乙型肝炎导致的急、慢性肝功能衰竭的33．3％（20／60）和多囊肝、原发胆汁性肝硬化和肝豆状核变性等的40％（4／10）以及丙型肝炎肝硬化的25％（3／12）（P〈0．05）。NC组受者中非肝癌和肝癌患者分别为22．9±8．2和17．1±5．4，均明显高于对照组的8，3±8．5和13±3．4（P〈0．05）。术后2周内，两组患者在丙氨酸转氨酶、胆红素总量、凝血酶原时间、血浆白蛋白及血清钠离子和氯离子浓度水平的比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。住院期间，NC组感染发生率和死亡率分别为36．1％（13／36）和30．5％（11／36），对照组分别为17．6％（21／119）和5．9％（7／119），两组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论NC是肝移植术后早期常见的并发症，其发生与患者原发病和术前肝功能状态密切相关，严重影响患者的预后；术后积极的对症治疗和防治感染对降低患者死亡率尤为重要。

关键词：肝移植手术后并发症神经系统疾病

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加强全程管理,提高移植肾长期存活率

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中华医学杂志 2022年第26期102卷 1956-1958页

作者：朱兰张雷陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室武汉430030 海军军医大学附属长海医院器官移植科上海200433

新生供者特异性抗体(dnDSA)介导的慢性活动性抗体介导排斥反应(caAMR)是引起后期移植肾功能丢失的主要原因,因缺乏特效手段而治疗棘手。通过肾移植全程管理,从预防dnDSA的产生、计划性监测dnDSA变化、及时明确病理诊断和尽早启动综合治... 详细信息

新生供者特异性抗体(dnDSA)介导的慢性活动性抗体介导排斥反应(caAMR)是引起后期移植肾功能丢失的主要原因,因缺乏特效手段而治疗棘手。通过肾移植全程管理,从预防dnDSA的产生、计划性监测dnDSA变化、及时明确病理诊断和尽早启动综合治疗着手,将有利于caAMR的防治和最终提高移植肾的长期存活率。

关键词：肾移植供者特异性抗体抗体介导排斥反应长期存活

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心脏死亡器官捐献供者肾移植的近期效果评价

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第三军医大学学报 2015年第1期37卷 64-68页

作者：刘斌曾凡军陈知水蒋继贫明长生张伟杰陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的比较心脏死亡器官捐献（donor after cardiac death,DCD）供肾移植和司法途径标准供者（standard criteria donors,SCD）肾移植的近期存活效果。方法回顾性分析2013年1-9月施行的尸体供肾移植89例,其中DCD供肾移植（DCD组）56例,SC... 详细信息

目的比较心脏死亡器官捐献（donor after cardiac death,DCD）供肾移植和司法途径标准供者（standard criteria donors,SCD）肾移植的近期存活效果。方法回顾性分析2013年1-9月施行的尸体供肾移植89例,其中DCD供肾移植（DCD组）56例,SCD供肾移植（SCD组）33例。DCD组供肾采用低温机器灌注保存（HMP）25例,单纯低温保存31例;SCD组供肾全部采用单纯静态低温保存。DCD组采用抗体诱导＋他克莫司（TAC）＋麦考酚酯（MMF）＋泼尼松（Pred）四联免疫抑制方案,SCD组采用TAC＋MMF＋Pred三联用药。随访评价2组移植肾6个月、1年存活率与受者6个月、1年存活率;移植肾功能延迟恢复（delayed graft function,DGF）发生率以及肾功能状况。结果随访6~15个月。DCD组受者因肺部感染死亡1例,因假性肾动脉瘤和急性体液性排斥反应导致移植肾切除各1例,受者6个月存活率98.2%,1年存活率94.4%,移植肾6个月存活率94.6%,1年存活率83.3%;SCD组因肺部感染死亡1例,AMR导致移植肾切除1例,受者6个月存活率97.0%,1年存活率92.9%,移植肾6个月存活率93.9%,1年存活率85.7%。2组受者6个月与1年存活率及移植肾6个月与1年存活率差异均无统计学意义（P〉0.05）。DGF发生率DCD组为21.4%,SCD组18.2%,差异无统计学意义（P=0.20）。术后1、3、6、12个月血肌酐值,DCD组均显著高于SCD组（P〈0.05）,但是2组间估算肾小球滤过率在各时间点差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 DCD供肾移植近期存活效果良好,术后肾功能恢复和维持情况与司法途径SCD供肾移植相当,DCD可以成为扩大尸体肾移植供者池的重要来源,其远期存活效果需要继续随访观察。

关键词：心脏死亡供者肾移植存活率

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亲属活体肾移植的临床分析和移植肾组织病理分析

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中华器官移植杂志 2006年第5期27卷 274-276页

作者：刘斌曾凡军郭晖朱兰陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的总结亲属活体肾移植后移植肾组织活检资料，并结合临床进行回顾性分析。方法亲属活体肾移植55例，其中有血缘的亲属供肾移植53例，夫妻间供肾移植2例。供、受者间HLA配型，1条单倍型相同者45例，2条单倍型相同者6例，5个抗原错配者... 详细信息

目的总结亲属活体肾移植后移植肾组织活检资料，并结合临床进行回顾性分析。方法亲属活体肾移植55例，其中有血缘的亲属供肾移植53例，夫妻间供肾移植2例。供、受者间HLA配型，1条单倍型相同者45例，2条单倍型相同者6例，5个抗原错配者3例，完全错配者1例。除1例采用腹腔镜取肾外，其余均采取开放手术取肾。供肾热缺血时间1～8min，冷缺血时间1～2h。术后应用环孢素A（或他克莫司）、硫唑嘌呤（或霉酚酸酯）及泼尼松预防排斥反应。结果 55例中，有10例接受16次移植肾活检，结果 4例次为急性排斥反应（Banff分级均为Ⅰ级），3例次经甲泼尼龙冲击治疗逆转，1例合并慢性移植肾肾病，治疗无效，恢复透析；3例次为移植肾退行性病变（其中2例合并急性环孢素A肾毒性损伤），2例减少环孢素A用量，并加用西罗莫司，效果良好，1例将环孢素A转换为西罗莫司，效果不佳，恢复透析；4例次为急性肾小管坏死，采用他克莫司和霉酚酸酯联合用药，并辅以透析治疗，肾功能恢复正常。结论虽然亲属活体肾移植术后急性排斥反应和移植肾功能恢复延迟的发生率低，但仍应重视术后移植肾组织活检，将被动活检转为主动的计划性活检，以提高亚临床排斥反应的检出率。

关键词：肾移植活体供者活组织检查,针吸

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NF-κB启动子调控的pNF-κB-IRES2-EGFP-p27双顺反子真核表达载体的构建及表达分析

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华中科技大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 708-711,F0003页

作者：徐逸朱舟吴轲曾宁田学俾陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的构建并鉴定携带核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)特异性启动子的Flag-p27和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)双顺反子真核表达载体pNF-κB-IRES2-EGFP-p27,转染经H2O2干预的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),观察其表达。方法采用基因工程技术,经过多步亚克隆后完成能同时表达p27和EGFP基因的NF-κB特异性启动子双转基因真核表达载体。转染体外培养的经H2O2干预的HUVEs,观察EGFP的表达,并通过免疫荧光细胞化学技术观察p27基因的表达。结果经酶切鉴定和测序鉴定,成功地构建真核表达载体pNF-κB-IRES2-EGFP-p27,转染经H2O2干预的HUVEs后,可见部分细胞有EG-FP的表达,并且在EGFP阳性的细胞中p27基因的表达水平明显增高,而未经H2O2处理的对照组转染pNF-κB-IRES2-EGFP-p27后无EGFP的表达。结论NF-κB启动子能够特异性地激活p27基因的表达。EGFP基因可以指示p27基因的表达情况。由NF-κB特异性启动子启动的p27和EGFP双顺反子真核表达载体的构建为进一步研究细胞周期调控与慢性移植物失功(chronic graft dysfunction,CGD)之间的关系,并为进一步寻找慢性移植物失功的基因治疗途径奠定基础。

关键词：核转录因子κB启动子双顺反子 p27基因真核表达载体细胞周期

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