检索结果-内蒙古大学图书馆

中华器官移植杂志 2015年第8期36卷 465-468页

作者：朱兰陈松林正斌张伟杰曾凡军刘斌杜敦峰卢峡蒋继贫陈知水陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨适合公民逝世后器官捐赠儿童供肾移植的免疫抑制方案。方法回顾总结单中心自2013年7月至2015年8月实施的46例儿童供肾移植的免疫抑制方案。46例中，双肾整块移植14例，供者年龄为（61．2±63．2）d，受者体质量为（39．0... 详细信息

目的探讨适合公民逝世后器官捐赠儿童供肾移植的免疫抑制方案。方法回顾总结单中心自2013年7月至2015年8月实施的46例儿童供肾移植的免疫抑制方案。46例中，双肾整块移植14例，供者年龄为（61．2±63．2）d，受者体质量为（39．0±9．9）kg，多数采用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（rATG）诱导治疗及环孢素A＋麦考酚钠肠溶片（MPA）的维持方案；单肾移植32例，供者年龄为（2．8±2．3）岁，受者体质量为（47．3±10．6）妇，经rATG或巴利昔单抗诱导治疗，多数采用他克莫司＋吗替麦考酚酯（MMF）或MPA的方案。结果双肾整块移植受者发生移植肾功能恢复延迟（DGF）2例（14．3％），急性排斥反应0例，肺部感染1例（7．1％）。单肾移植受者发生DGF4例（12．5％），急性排斥2例（6．3％），肺部感染6例（18．8％）。结论根据儿童供肾移植的特点选择合适的诱导治疗及维持免疫抑制治疗方案，能够取得满意的移植效果。

关键词：肾移植移植物儿童供者免疫抑制剂

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寻找受体分子研究方法的进展

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医学综述 2015年第10期21卷 1745-1748页

作者：张勇张君雒真龙姜毅楠杨超杜潇潇陈忠华周鸿敏华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030 湖北省宜昌市夷陵医院普通外科湖北宜昌443100 华中科技大学同济医学院附属同济医院心胸外科武汉430030

配体与受体间的识别及相互作用是分子发挥其功能的重要途径,具有重要的生物学意义。但是,寻找某一分子的受体并不容易,往往成为研究的瓶颈所在。目前寻找及验证某一对配体/受体分子及其对应关系的方法有很多,包括免疫共沉淀、噬菌体展... 详细信息

配体与受体间的识别及相互作用是分子发挥其功能的重要途径,具有重要的生物学意义。但是,寻找某一分子的受体并不容易,往往成为研究的瓶颈所在。目前寻找及验证某一对配体/受体分子及其对应关系的方法有很多,包括免疫共沉淀、噬菌体展示、酵母双杂交、分子模拟、谷胱甘肽巯基转移酶pull-down、串联亲和纯化等。该文对这些方法的基本原理、简要步骤及优缺点进行综述,为相关研究提供依据。

关键词：免疫共沉淀噬菌体展示酵母双杂交分子模拟串联亲和纯化

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供心过表达微小RNA-499减轻心脏缺血再灌注损伤的研究

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中华实验外科杂志 2014年第10期31卷 2217-2219,F0004页

作者：张玄黄霞栾宙王平良陈知水杨军华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的观察供心过表达微小RNA-499 （miR-499）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用聚合酶链反应（PCR）行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠（WT）和同系（C57BL/6背景）miR-499转基因小鼠（Tg）来源的供心,均置于... 详细信息

目的观察供心过表达微小RNA-499 （miR-499）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用聚合酶链反应（PCR）行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠（WT）和同系（C57BL/6背景）miR-499转基因小鼠（Tg）来源的供心,均置于4℃生理盐水中保存16h,检测保存液中心肌酶谱：肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的释放量.实验分为WT供心组和Tg供心组,建立同系小鼠腹部异位心脏移植模型,通过视诊和触诊观察不同小鼠供心经过冷保存,移植给相同受体后心功能的恢复,并于移植后24h获取供心,行苏木素-伊红（HE）染色,观察移植心脏组织病理学改变.结果 PCR结果显示miR-499转基因小鼠能检测到miR-499基因及相关载体片段,在图中呈现阳性条带;WT小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（5 043.0±523.8） U/L和（1 068.0±150.0）U/L,Tg小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（3 667.0±194.7） U/L和（684.0±19.1） U/L,Tg小鼠心脏在冷缺血过程中,两种心肌酶谱的释放值均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.移植后相同时间点观测结果显示,WT小鼠来源心脏的临床功能评分明显低于Tg小鼠,15 min时的平均评分分别为0.9分和2.3分,24 h的平均评分分别为2.1分和3.4分（P＜0.05）.移植后24 h,WT小鼠来源供心有大量炎性细胞浸润并伴有心肌细胞坏死,而Tg小鼠供心的炎性细胞浸润和心肌细胞坏死较少（P＜0.05）.结论供心过表达miR-499能减轻心脏在冷缺血和热灌注过程中造成的炎性损伤和心肌细胞凋亡,有利于再灌注后心功能的恢复,在心脏移植过程中具有保护作用.

关键词：微小RNA-499 缺血再灌注损伤心脏移植

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食蟹猴皮质区肾小管上皮细胞检测ABO血型抗体水平的新方法

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中华器官移植杂志 2014年第5期35卷 300-305页

作者：王璐王军祥王筱啸陈松陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨以食蟹猴皮质区肾小管上皮细胞（RCTEC）为靶细胞检测ABO血型抗体滴度的可行性。方法分离培养食蟹猴原代RCTEC，蛋白质印迹法和流式细胞术鉴定细胞的表型与纯度。利用流式细胞术分别检测ABO组织-血型抗原在RCTEC上的表达、RCTE... 详细信息

目的探讨以食蟹猴皮质区肾小管上皮细胞（RCTEC）为靶细胞检测ABO血型抗体滴度的可行性。方法分离培养食蟹猴原代RCTEC，蛋白质印迹法和流式细胞术鉴定细胞的表型与纯度。利用流式细胞术分别检测ABO组织-血型抗原在RCTEC上的表达、RCTEC与人血清血型抗体的结合能力以及比较人红细胞与RCTEC测定血型抗体滴度的差异。结果分离得到的肾皮质细胞绝大部分是RCTEC。39．90％～73．80％的RCTEC表达ABO组织-血型抗原，且能与人血清中的血型抗体特异性结合。较长时间冻存对RCTEC的ABO组织-血型抗原表达水平无明显影响，冻存前表达B型抗原的阳性细胞比例为39．90％，冻存10个月后复苏再培养9d，阳性细胞的比例为39．．65％。利用钥孔戚血蓝蛋白偶联的血型抗原A（KLH—A）致敏前后的食蟹猴血清对比原代RCTEC与人红细胞检测血型抗体滴度的效果，结果显示，在RCTEC检测组，未出现凝集现象，与两种血清中抗体结合的几何平均荧光强度（MFI）均在最低血清稀释度（1：16）时最高，其后均随血清稀释度的增加而逐渐降低，未致敏血清的MFI值在稀释度为1：128时降至基线水平，致敏血清的MFI值在1：8192稀释度时降至基线水平，在1：16～1：8192稀释度之间，未致敏血清的MFI值均低于致敏血清；在人红细胞检测组，当抗体滴度高时凝集现象明显，未致敏血清MFI值的最高峰出现在1：64稀释度时，致敏血清MFI值的最高峰出现存1：32稀释度时，且随血清稀释度的增加呈现无明显规律的波动，在1：64～1：512稀释度之间，未致敏血清MFI值高于致敏血清。利用RCTEC检测血型抗体滴度的MFI值能较准确地反映抗体滴度自；变化。结论食蟹猴RCTEC高表达AN）组织-血型抗原，比人红细胞更适用于血清中血型抗体滴度的流式细胞术检测，具有良好的临床与科研应用潜力。

关键词：肾皮质上皮细胞 ABO血型系统肾移植流式细胞术

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Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞/辅助性T细胞17分化平衡的调节作用

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第6期43卷 626-630,635页

作者：陈莲一谢林湖北省医学会武汉430071 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察Sert... 详细信息

目的研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察Sertoli细胞形态,采用Western blot检测Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ、B7-H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子(TGF)-β1、IL-17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Sertoli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)在体外混合培养时,其表面的MHC-Ⅱ类分子和B7-H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Nave CD4+T细胞混合培养72h后,培养上清液中的TGF-β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[(823.10±59.07)pg/mL vs.(174.89±23.51)pg/mL,P<0.01];流式细胞术结果显示,与同种异体Sertoli细胞共同培养的体系内,Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)被诱导分化为CD25+Foxp3+Treg细胞的比例显著增加,从<1.0%增长至27.6%;用Sertoli细胞与Treg细胞混合培养上清液孵育DC细胞/Nave CD4+T细胞,可明显减少培养液中IL-17A的浓度,使其从(361.58±80.27)pg/mL降低至(137.54±52.19)pg/mL(P<0.05);同时IL-17A+T细胞亚群百分比也显著降低(27.2%降至17.9%)。结论Sertoli细胞体外培养产生的抗炎细胞因子和免疫抑制细胞因子能诱导Nave CD4+T细胞分化为CD25+Foxp3+Treg细胞,Sertoli细胞可能通过调节同种异体Treg/Th17分化平衡,诱导免疫耐受。

关键词： Sertoli细胞免疫耐受调节性T细胞辅助性T细胞17

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抗白细胞介素6单克隆抗体抑制小鼠心脏移植急性排斥反应及其机制

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第3期43卷 275-280页

作者：雷钧陈知水方路刘天德袁荣发王军邵江华南昌大学第二附属医院普通外科南昌330006 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模... 详细信息

目的观察抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6monoclonal antibody,anti-IL-6mAb)对同种异体小鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型。实验动物随机分为同系移植组、移植模型组、移植对照组(注射rat-IgG)和移植治疗组(注射anti-IL-17mAb或anti-IL-6mAb)。观察各组移植心脏存活时间并检测病理组织学改变;Real-time PCR检测各组移植心脏中细胞因子IL-17、干扰素-γ(IFN-γ)及Th17细胞特异性转录因子RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测各组受鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞中IL-17、IFN-γ的表达水平。结果①anti-IL-6mAb、anti-IL-17mAb输注均可显著抑制小鼠急性排斥反应的发生,移植心脏存活时间分别延长至(22.0±2.3)d、(13.0±1.8)d,anti-IL-6mAb组抑制排斥反应发生的效果更加显著。组织病理学结果显示anti-IL-6mAb组排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);②anti-IL-6mAb组移植心脏中IL-17、IFN-γ和RORγt mRNA的转录水平较rat-IgG对照组及移植模型组显著下降,anti-IL-17mAb输注可部分下调IFN-γmRNA的转录水平;③anti-IL-6mAb组受鼠脾脏CD4+及CD8+T细胞中IFN-γ+的比例均有不同程度的下降,且CD4+IFN-γ+T细胞较CD8+IFN-γ+T细胞下降更为明显,同时CD4+IL-17+T(Th17)细胞的比例在anti-IL-6mAb组中亦明显下降。结论 anti-IL-6mAb可有效抑制急性排斥反应小鼠体内Th17和Th1细胞的活化,并延长同种异体心脏移植物的存活时间。

关键词：急性排斥反应心脏移植抗白细胞介素6单克隆抗体白细胞介素-17 RORyt 干扰素-γ

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同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化及SUMO1表达

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第5期43卷 489-493页

作者：何莹马俊磊宫念樵赵波华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室器官移植教育部重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胸外科武汉430030

目的探讨同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化,并分析小泛素相关修饰物1 （SUMO1）在此过程中的表达特点.方法在小鼠背部异位气管移植模型中,分别建立同系移植组（C57 BL/6-C57 BL/6）和同种异体移植组（BALB/c-C57 BL/6）.在... 详细信息

目的探讨同种异体异位气管移植物排斥反应的动态变化,并分析小泛素相关修饰物1 （SUMO1）在此过程中的表达特点.方法在小鼠背部异位气管移植模型中,分别建立同系移植组（C57 BL/6-C57 BL/6）和同种异体移植组（BALB/c-C57 BL/6）.在术后第7、14、30天,每组取6只动物获取移植物,动态检测排斥反应病理学变化、移植气管管腔阻塞率、有核细胞计数和SUMO1阳性细胞表达及计数.结果同系移植组气管仅有轻微损伤并于术后14d修复;同种异体移植组术后7d气道上皮严重损伤伴大量的单核细胞浸润,术后14 d上皮坏死伴纤维增生,术后30 d,上皮细胞完全消失,管腔填塞.同系移植物术后管腔阻塞率为2.8％～4.3％,同种异体移植物在3个时间点分别为（3.5±0.4）％、（29.8±3.5）％和（92.5±3.1）％.同系移植组SUMO1主要在黏膜上皮细胞中表达;同种异体移植组SUMO1第7.天在黏膜下层浸润的淋巴细胞和巨噬细胞中表达,第14天在浸润的单核细胞和增生的纤维母细胞中高表达,第30天表达更为明显.术后第7天,同系移植组和同种异体移植组每组织切面有核细胞计数分别为（294.5±83.1）、（299.5±64.2）,差异无统计学意义,SUMO1阳性细胞数分别为（151.8±59.2）、（237.3±57.2）,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第14天,同系移植组和同种异体移植组有核细胞计数分别为（617.3±70.1）、（774.6±197.4）,差异无统计学意义,SUMO1阳性细胞数分别为（220.0±33.9）、（489.0±145.3）,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第30天,同系移植组和同种异体移植组有核细胞计数分别为（276.3±119.0）、（875.0±113.6）,差异有统计学意义（P＜0.05）,SU-MO1阳性细胞数分别为（105.6±92.1）、（781.0±73.5）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论小鼠同种异体异位气管移植物经历了典型的急排期、过渡期和慢排期的动态过程,是研究急性排斥和慢性排斥反应动态过程的优良模型.在此过程中,SUMO1在新生有核细胞中的高表达,可能与急性排斥反应和气管纤维化的形成有关.

关键词：气管移植物急性排斥纤维化小泛素相关修饰物1

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肾移植术后新生HLA-DQ抗体的临床意义

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中华医学杂志 2014年第42期94卷 3284-3288页

作者：朱兰陈刚谢林汪芯王大卫林正斌明长生陈孝平陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部重点实验室武汉430030

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在... 详细信息

目的探讨临床肾移植术后新生HLA-DQ抗体的产生规律及临床意义.方法入选2012年1月至2013年12月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院长期随访的175例初次肾移植受者,移植前微量淋巴毒和群体反应性抗体（PRA）均为阴性,入组时间在肾移植术后6～18年（平均10年）.根据入组时移植肾功能分为3组：（1）移植肾功能正常的对照组（n=94）：血肌酐＜120 μmol/L;（2）慢性移植肾功能减退组（n=54）：血肌酐持续＞150μmol/L达6个月以上,但尚未透析;（3）移植肾失功能组（n=27）：患者恢复血液透析.所有病例在入组时收集血清,采用流式PRA或Luminex方法进行HLA抗体初筛,抗体阳性者进一步行Luminex单抗原包被的微球法检测分别针对HLA-A、B、DR、DQ位点的抗体水平.结果（1） HLA抗体的出现与慢性移植肾功能不全密切相关.慢性移植肾功能减退组HLA抗体阳性的出现率为48％（26/54）,移植肾失功能组为52％（14/27）,而对照组的HLA抗体阳性率只有17％（16/94）（P＜0.01）.（2）在3组HLA抗体阳性的病例中,相比于HLA-DR、HLA-Ⅰ类抗体,HLA-DQ抗体的出现频率均最高,在对照组、慢性移植肾功能减退组、移植肾失功能组分别为14/16、24/26及14/14,此外,HLA-DQ抗体的平均荧光强度也最高.（3） HLA-DQ抗体在对照组的HLA抗体阳性病例中以单独出现为主（10/16）,而在慢性移植肾功能减退组和移植肾失功能组都多数伴随有HLA-DR抗体和Ⅰ类抗体（17/26、14/14）,显示单独出现的HLA-DQ抗体与慢性移植肾功能不全没有直接相关性,而DQ抗体合并DR和（或）Ⅰ类抗体同时出现与慢性移植肾功能减退和失功能有关（均P＜0.05）.结论从移植肾功能状态而言,HLA-DQ抗体往往先于其他位点的抗体出现.在临床移植肾功能尚稳定时,早期发现HLA-DQ抗体对预警免疫系统的特异性激活及后者所致的慢性移植肾功能减退或失功能具有重要意义.监测HLA-DQ抗体将为早期干预治疗和去除免疫危险因素提供第一时机.

关键词：肾移植移植物排斥 HLA-DQ抗体同种异体抗体慢性移植肾功能不全

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重视移植免疫学基础研究转化为临床应用

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中华器官移植杂志 2014年第5期35卷 257-260页

作者：陈刚朱有华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030 第二军医大学长征医院全军器官移植研究所

20世纪以来，随着器官移植外科技术、移植免疫基础研究以及各种免疫抑制剂研究的深入，器官移植已成为临床治疗器官功能衰竭的有效手段。虽然目前移植器官的短期存活率得到极大的提高，但长期存活率仍不理想，其主要原因仍然是移植免疫... 详细信息

20世纪以来，随着器官移植外科技术、移植免疫基础研究以及各种免疫抑制剂研究的深入，器官移植已成为临床治疗器官功能衰竭的有效手段。虽然目前移植器官的短期存活率得到极大的提高，但长期存活率仍不理想，其主要原因仍然是移植免疫反应。为进一步改善器官移植的效果，必须重视移植免疫学基础与临床研究。

关键词：器官移植免疫学基础临床应用长期存活率转化免疫基础研究器官功能衰竭移植免疫反应

来源：评论

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Sertoli细胞调节同种异体Treg/Th17分化平衡的作用

Sertoli细胞调节同种异体Treg/Th17分化平衡的作用

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2014中国器官移植大会

作者：谢林郭晖张利民邢帅张学刘键桦华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室卫生部器官移植重点实验室

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