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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第2期29卷 137-141页

作者：尹注增王璐胡枫向莹谢林徐婧李俊华陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨新生猪睾丸Sertoli细胞抵御人血清中天然抗体介导的补体杀伤作用及其主要机制。方法分离培养10～15日龄的湖北白猪睾丸Sertoli细胞；以猪血管内皮细胞（PED）为对照，采用流式细胞仪（FACS）及免疫荧光检测并比较两种细胞天然... 详细信息

目的探讨新生猪睾丸Sertoli细胞抵御人血清中天然抗体介导的补体杀伤作用及其主要机制。方法分离培养10～15日龄的湖北白猪睾丸Sertoli细胞；以猪血管内皮细胞（PED）为对照，采用流式细胞仪（FACS）及免疫荧光检测并比较两种细胞天然抗原α-Gal的表达；FACS检测并比较两种细胞分别与正常人血清（NHS）中天然抗体IgM、IgG的结合情况；乳酸脱氢酶（LDH）检测20％NHS对Sertoli细胞及PED细胞的杀伤；MTT法检测两种细胞在20％NHS中培养的活性；细胞免疫荧光检测补体C3c、C4d在Sertoli细胞、PED细胞的沉积；细胞免疫组化及免疫荧光检测补体C5b-9在两种细胞上的沉积。结果猪睾丸Sertoli细胞表达仪-Gal，但明显弱于PED细胞，猪睾丸Sertoli细胞能与天然抗体（主要是IgM）结合；20％NHS对Sertoli细胞、PED细胞的杀伤率分别为24．38％±0．50％、53．13％±14．53％，P〈0．01；两种细胞在20％NHS中的活性分别为98．73％±18．84％、52．43％±8．08％，P〈0．01；免疫荧光及组化可见PED细胞上有补体C3c、CAd、C5b-9的沉积；但Sertoli细胞仅有C3c、CAd沉积，而未见C5b-9沉积。结论猪睾丸Sertoli细胞可以显著抵御人血清中天然抗体介导的杀伤作用，其机制可能与Sertoli细胞低表达仅．Gal并抑制补体攻膜复合物形成有关。

关键词： Sertoli细胞 α-Gal 补体

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抑制NF-κB活性诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1128-1132页

作者：李舒媛薛承彪李超李尧陈知水周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究调节性T细胞（Tr）和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠（对照组）和IκBα△N-Tg小鼠（实验组）分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;... 详细信息

目的研究调节性T细胞（Tr）和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠（对照组）和IκBα△N-Tg小鼠（实验组）分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;流式细胞术分别检测两组受鼠脾脏内Tr在移植前以及移植术后7 d、30 d和100 d的变化规律,以及Th17细胞在移植术后5 d时的变化;Western blot检测两组心脏移植物内IL-17在移植后3 d和5 d的表达.结果实验组心脏移植物存活时间均大于100 d,HE染色未见心脏移植物内有明显淋巴细胞浸润;实验组Tr比例在移植后7 d和30 d时明显升高（21.23±3.95,23.17±4.11 vs 11.64±1.96,P〈O.05）,但是100 d时Tr细胞比例又下降到了移植前水平（10.79±2.48 vs 11.64±1.96,P〉0.05）,而对照组Tr在移植前后则无明显变化;与对照组相比,实验组Th17细胞及移植物内IL-17表达在移植术后5 d时均明显下降.结论特异性受体T细胞NF-κB功能缺陷可以打破受体内Tr/Th17细胞平衡,在移植术后早期促进T细胞向Tr分化而抑制向Th17细胞分化,从而阻止急性排斥反应发生,诱导耐受.

关键词： NF-κB 心脏移植小鼠 Th17 调节性T细胞

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构建永生化人源肝细胞的研究

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中华肝脏病杂志 2009年第5期17卷 395-397页

作者：孟凡迎周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、教育部器官移植重点实验室、卫生部器官移植重点实验室武汉430030

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给... 详细信息

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给无法满足日益增多的需求。近几年永生化的人肝细胞技术进展较快，尤其是构建成功的可逆性永生化人肝细胞，有望从根本上解决人肝细胞来源困难的难题。

关键词：肝细胞细胞培养技术永生化

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肝胆胰外科新理念与新技术

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科学通报 2017年第1期62卷 36-46页

作者：陈琳董为张必翔张志伟黄志勇陈义发罗鸿萍张万广梅斌肖震宇陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心湖北省肝脏外科医学临床研究中心教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些... 详细信息

外科手术是治疗肝胆胰肿瘤最有效和首选的方法,减少手术出血量、提高手术安全性、简化手术操作、降低并发症和死亡率,一直是肝胆胰外科领域研究的焦点.作为国内最早施行肝胆胰手术的中心之一,从20世纪80年代至今本课题组先后提出了一些新的理念:提出大肝癌和巨大肝癌手术切除的可行性理论并应用于临床,拓展了肝切除治疗肝癌的适应证;提出肝细胞癌新的分类方法,有利于针对大小不同的肿瘤选择不同的治疗方法和进行疗效评估;针对肝癌合并门静脉癌栓的不同类型,采取不同的手术方式,取得良好效果;肝切除联合脾切除治疗原发性肝细胞癌合并门静脉高压症.创立3种肝脏手术控制出血新技术:不解剖肝门经肝实质结扎入肝及出肝血流、第一肝门阻断联合肝下下腔静脉阻断、经肝裸区双悬吊法;小范围肝切除治疗肝门部胆管癌的新理念;不缝合胆管前壁的肝肠吻合术和插入式胆肠吻合术;新的"U"型胰肠套入式缝合法;世界首个原位辅助性部分肝移植手术方式,并成功应用于临床.

关键词：肝切除原发性肝癌肝门部胆管癌胆肠吻合胰十二指肠切除术胰肠吻合原位辅助性部分肝移植

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肾移植受者西罗莫司联合小剂量环孢素转换治疗的五年临床观察

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1556-1561页

作者：朱兰丁韬王筱啸林正斌陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的通过5年随访，探讨肾移植术后由传统的环孢素A（CsA）三联免疫抑制治疗转换为西罗莫司（SRL）联合小剂量CsA和泼尼松（Pred）的临床有效性和安全性。方法前瞻性、开放性非随机的临床研究，选取2007年1月至2011年5月在华中科技大学... 详细信息

目的通过5年随访，探讨肾移植术后由传统的环孢素A（CsA）三联免疫抑制治疗转换为西罗莫司（SRL）联合小剂量CsA和泼尼松（Pred）的临床有效性和安全性。方法前瞻性、开放性非随机的临床研究，选取2007年1月至2011年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所门诊规律随访的46例口服CsA＋霉酚酸酯（MMF）＋Pred的。肾移植受者，进行SRL＋小剂量CsA＋Pred的转换治疗。其中主动转换组27例（转换前血肌酐≤140μmoL／L，无或仅轻微蛋白尿），被动转换组19例（血肌酐〉140μmol／L，尿蛋白〈＋＋）。转换后目标谷浓度：SRL为5～7μg/L，CsA为20—60μg/L。观察转换后5年的血肌酐和尿蛋白变化，急性排斥反应发生率、移植肾存活率和SRL相关的不良反应。结果转换后所有受者CsA平均减药63％。主动转换组转换时平均血肌酐为（110±19）μmol／L；8例退组，原因为关节痛1例、蛋白尿加重2例、慢性腹泻2例、轻度或可疑急性排斥反应2例和反复发热1例；其余19例受者平均随访5年血肌酐保持平稳，为（103±12）μmol／L，转换后5年移植肾存活率为100％。被动转换组在转换时平均血肌酐为（205±45）μmol／L，4例受者退组，原因分别为蛋白尿加重2例和人为因素2例；10例受者在转换后1～50个月移植肾失功能，其余5例受者平均随访5年血肌酐保持稳定[转换前为（218±46）μmol／L，5年随访时为（205±73）μmol／L]，总体移植肾5年存活率为33．3％，显著低于主动转换组（P〈0．001）。急性排斥反应在主动转换组发生2例，在被动转换组无发生。所有受者在随访期间未出现白细胞减少或血小板减少，也未观察到口腔溃疡、肺部感染等不良反应发生。结论SRL联合小剂量CsA的免疫抑制方案是一种较为安全有效的免疫抑制维持治疗方案，但需把握合适的转换治疗时机，在移植肾功能尚正常或只有早期轻度受损时进行转换能取得较为满意的长期效果，可考虑作为临床肾移植个体化免疫抑制方案的选择之一。

关键词：肾移植西罗莫司环孢素转换治疗

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采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系

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中国修复重建外科杂志 2006年第11期20卷 1130-1133页

作者：曾梦华房崇芸王树森朱珉谢林王璐李荣吴雄文陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部器官移植重点实验室.卫生部器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学免疫学系武汉430030

目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。

关键词：可溶性人类白细胞抗原G1 核转染真核细胞系

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移植肝穿刺活检268例次病理学观察

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中华医学杂志 2011年第48期91卷 3401-3404页

作者：郭晖陈忠华陈知水曾凡军明长生张伟杰刘斌宫念樵蒋继贫魏来杜敦峰施辉波陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部／卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补... 详细信息

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补体CAd、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）、丙型肝炎病毒（HCV）、巨细胞病毒（CMV）、细胞角蛋白（CK）19免疫组化染色并予以病理学观察分析。结果268例次移植肝活检中，缺血／再灌注损伤26例次（9．7％）、急性T细胞介导性排斥反应83例次（31．0％）、急性抗体介导性排斥反应12例次（4．5％）、慢性排斥反应31例次（11．6％）、药物性肝损伤70例次（26．1％）、复发性肝病18例次（6．7％）。结论肝移植术后可发生多种并发症并可通过活检病理学观察予以明确诊断，肝移植临床中应常规开展移植肝穿刺活检病理学诊断。

关键词：肝移植活组织检查病理学

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肝癌患者肝移植术后早期激素撤离对肿瘤复发的影响

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中华器官移植杂志 2006年第3期27卷 156-159页

作者：陈知水何凡曾凡军明长生蒋继贫杜敦峰刘斌张伟杰刘敦贵陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年... 详细信息

目的探讨肝癌患者肝移植术后激素撤离对肿瘤复发的影响。方法对54例中、晚期原发性肝癌患者施行了肝移植,术后根据3个月内是否撤离激素分为激素撤离组(28例)和激素维持组(26例)。比较两组间排斥反应发生率、半年及1年的肿瘤复发率、1年存活率、血他克莫司(FK506)浓度及生化指标的平均值,运用统计学方法分析两组间差异。结果激素撤离组和激素维持组排斥反应发生率、半年肿瘤复发率、1年存活率相比,差异无统计学意义;激素维持组1年肿瘤复发率明显高于激素撤离组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后半年,两组FK506浓度的差异无统计学意义。术后1周及术后半年,两组丙氨酸转氨酶、胆红素总量及肌酐分别相比,差异均无统计学意义。术后半年,两组胆固醇总量、中餐前血糖水平相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝癌患者肝移植术后3个月内撤离激素是安全的,并不增加排斥反应的发生率,也不需要增加其它免疫抑制剂的用量,可明显降低肿瘤复发率,提高患者的长期存活率。

关键词：肝移植肿瘤复发,局部激素肝肿瘤

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移植肾活检1500例病理组织学分析

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中华医学杂志 2011年第8期91卷 520-523页

作者：郭晖林正斌张伟杰明长生陈知水曾凡军刘斌蒋继贫宫念樵魏来施辉波杜敦峰陈忠华陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对... 详细信息

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对活检组织标本予以相应染色和病理组织学观察。结果肾移植术后可发生多种并发症，1500例中急性T细胞介导性排斥反应的发生率为14．2％（213例）、急性抗体介导性排斥反应发生率为2．4％（36例）、慢性T细胞介导性排斥反应发生率为16．7％（251例）、慢性抗体介导性排斥反应的发生率为3．0％（45例）、急性钙调磷酸酶抑制剂（CNI）类药物肾毒性损伤发生率为7．1％（106例）、慢性CNI类药物。肾毒性损伤的发生率为16．7％（251例）；复发／新发性肾病的发生率为0．4％（6例）。排斥反应发生并不具有确定的时间界限。移植肾CNI类免疫抑制剂慢性毒性损伤是导致移植肾失功能的重要致病因素。结论移植肾活检病理学观察可以及时、准确地诊断肾移植术后的多种并发症，肾移植临床中应常规规范开展移植肾活检病理学诊断。

关键词：肾移植活组织检查针吸病理学

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抗胸腺细胞球蛋白与巴利昔单抗在DCD肾移植中有效性和安全性的配对研究

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中华医学杂志 2017年第2期97卷 99-103页

作者：林凯临朱兰付程林正斌陈刚卫生部/教育部器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾... 详细信息

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾移植受者资料。根据免疫诱导方案的不同，筛选出来自同一供者的2例受者配对分为ATG组（n＝62）和巴利昔单抗组（n＝62），比较分析两组间移植疗效。结果ATG组发生移植物功能恢复延迟（DGF）11例（17.7%），显著低于巴利昔单抗组（21例，33.9%，P＝0.040）；且ATG组DGF的恢复时间较巴利昔单抗组显著缩短[（14.92±6.23）d比（20.26±7.89）d，P＝0.048]。以供者〉50周岁或具有高血压病史或冷缺血时间〉24 h筛选出DGF高危受者，则两组高危患者中DGF发生率差异更加明显（ATG组：5/18，巴利昔单抗组：10/15，P＝0.025）。两组在发生急性排斥反应、慢性移植物失功能和1年移植物存活率及1年移植受者存活率方面差异无统计学意义（均P〉0.05），在发生感染、白细胞减少、血小板减少或贫血等不良反应方面差异也无统计学意义（均P〉0.05）。结论与巴利昔单抗相比，ATG可以安全有效地减少DCD肾移植术后DGF发生率和缩短DGF持续时间，尤其对降低高危受者的DGF发生率具有显著作用。

关键词：肾移植移植物功能延迟恢复抗胸腺细胞球蛋白巴利昔单抗

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