目的观察RNA干扰(RNAi)Caspase-3基因对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法构建针对大鼠Caspase-3基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体。肝脏IRI前48h经门静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)或Caspase-3shRNA,实验随机分为3组,假手术组、PBS组和shRNA组。阻断大鼠70%入肝血流40min,再灌注6,12,24h,3,5,7d检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平,肝组织Caspase-3mRNA的表达,细胞凋亡情况,丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果与PBS组比较,shRNA组再灌注6,12,24h血清ALT和AST水平显著降低(P〈O.05),shRNA组大鼠肝组织的Caspase-3mRNA水平、肝细胞凋亡指数(25.21%±3.18%VS35.24%±2.33%,P〈0.05)和肝组织中MDA含量[(96.3±12.8)nmol/mgvs(133.5±12.4)nmol/mg,(P〈O.05)]显著降低,SOD活性显著升高[(22.5±3.4)U/mg vs (12.2±3.1)U/mg,(P〈O.05)]。结论RNA干扰Caspase-3基因可以抑制细胞凋亡的发生,保护肝脏缺血再灌注损伤。
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