检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第12期30卷 1128-1132页

作者：李舒媛薛承彪李超李尧陈知水周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究调节性T细胞（Tr）和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠（对照组）和IκBα△N-Tg小鼠（实验组）分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;... 详细信息

目的研究调节性T细胞（Tr）和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠（对照组）和IκBα△N-Tg小鼠（实验组）分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;流式细胞术分别检测两组受鼠脾脏内Tr在移植前以及移植术后7 d、30 d和100 d的变化规律,以及Th17细胞在移植术后5 d时的变化;Western blot检测两组心脏移植物内IL-17在移植后3 d和5 d的表达.结果实验组心脏移植物存活时间均大于100 d,HE染色未见心脏移植物内有明显淋巴细胞浸润;实验组Tr比例在移植后7 d和30 d时明显升高（21.23±3.95,23.17±4.11 vs 11.64±1.96,P〈O.05）,但是100 d时Tr细胞比例又下降到了移植前水平（10.79±2.48 vs 11.64±1.96,P〉0.05）,而对照组Tr在移植前后则无明显变化;与对照组相比,实验组Th17细胞及移植物内IL-17表达在移植术后5 d时均明显下降.结论特异性受体T细胞NF-κB功能缺陷可以打破受体内Tr/Th17细胞平衡,在移植术后早期促进T细胞向Tr分化而抑制向Th17细胞分化,从而阻止急性排斥反应发生,诱导耐受.

关键词： NF-κB 心脏移植小鼠 Th17 调节性T细胞

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构建永生化人源肝细胞的研究

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中华肝脏病杂志 2009年第5期17卷 395-397页

作者：孟凡迎周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、教育部器官移植重点实验室、卫生部器官移植重点实验室武汉430030

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给... 详细信息

近年来，人源肝细胞的需求日益增多。新药的开发与应用、病毒性肝炎的实验研究、肝细胞移植及生物人工肝的研究应用等等均需要大量的人源肝细胞。但人肝细胞来源困难，细胞分离、培养及储存的技术尚不完善，体外培养存活时间短，其供给无法满足日益增多的需求。近几年永生化的人肝细胞技术进展较快，尤其是构建成功的可逆性永生化人肝细胞，有望从根本上解决人肝细胞来源困难的难题。

关键词：肝细胞细胞培养技术永生化

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肾移植受者西罗莫司联合小剂量环孢素转换治疗的五年临床观察

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中华医学杂志 2016年第20期96卷 1556-1561页

作者：朱兰丁韬王筱啸林正斌陈刚华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的通过5年随访，探讨肾移植术后由传统的环孢素A（CsA）三联免疫抑制治疗转换为西罗莫司（SRL）联合小剂量CsA和泼尼松（Pred）的临床有效性和安全性。方法前瞻性、开放性非随机的临床研究，选取2007年1月至2011年5月在华中科技大学... 详细信息

目的通过5年随访，探讨肾移植术后由传统的环孢素A（CsA）三联免疫抑制治疗转换为西罗莫司（SRL）联合小剂量CsA和泼尼松（Pred）的临床有效性和安全性。方法前瞻性、开放性非随机的临床研究，选取2007年1月至2011年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所门诊规律随访的46例口服CsA＋霉酚酸酯（MMF）＋Pred的。肾移植受者，进行SRL＋小剂量CsA＋Pred的转换治疗。其中主动转换组27例（转换前血肌酐≤140μmoL／L，无或仅轻微蛋白尿），被动转换组19例（血肌酐〉140μmol／L，尿蛋白〈＋＋）。转换后目标谷浓度：SRL为5～7μg/L，CsA为20—60μg/L。观察转换后5年的血肌酐和尿蛋白变化，急性排斥反应发生率、移植肾存活率和SRL相关的不良反应。结果转换后所有受者CsA平均减药63％。主动转换组转换时平均血肌酐为（110±19）μmol／L；8例退组，原因为关节痛1例、蛋白尿加重2例、慢性腹泻2例、轻度或可疑急性排斥反应2例和反复发热1例；其余19例受者平均随访5年血肌酐保持平稳，为（103±12）μmol／L，转换后5年移植肾存活率为100％。被动转换组在转换时平均血肌酐为（205±45）μmol／L，4例受者退组，原因分别为蛋白尿加重2例和人为因素2例；10例受者在转换后1～50个月移植肾失功能，其余5例受者平均随访5年血肌酐保持稳定[转换前为（218±46）μmol／L，5年随访时为（205±73）μmol／L]，总体移植肾5年存活率为33．3％，显著低于主动转换组（P〈0．001）。急性排斥反应在主动转换组发生2例，在被动转换组无发生。所有受者在随访期间未出现白细胞减少或血小板减少，也未观察到口腔溃疡、肺部感染等不良反应发生。结论SRL联合小剂量CsA的免疫抑制方案是一种较为安全有效的免疫抑制维持治疗方案，但需把握合适的转换治疗时机，在移植肾功能尚正常或只有早期轻度受损时进行转换能取得较为满意的长期效果，可考虑作为临床肾移植个体化免疫抑制方案的选择之一。

关键词：肾移植西罗莫司环孢素转换治疗

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移植肝穿刺活检268例次病理学观察

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中华医学杂志 2011年第48期91卷 3401-3404页

作者：郭晖陈忠华陈知水曾凡军明长生张伟杰刘斌宫念樵蒋继贫魏来杜敦峰施辉波陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部／卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补... 详细信息

目的研究肝移植术后移植肝多种并发症的临床发生情况、病理学特征和活检诊断作用。方法收集1999年1月至2011年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所207例受者共268次经皮移植肝穿刺活检组织予以HE、Masson及PAS染色和补体CAd、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）、丙型肝炎病毒（HCV）、巨细胞病毒（CMV）、细胞角蛋白（CK）19免疫组化染色并予以病理学观察分析。结果268例次移植肝活检中，缺血／再灌注损伤26例次（9．7％）、急性T细胞介导性排斥反应83例次（31．0％）、急性抗体介导性排斥反应12例次（4．5％）、慢性排斥反应31例次（11．6％）、药物性肝损伤70例次（26．1％）、复发性肝病18例次（6．7％）。结论肝移植术后可发生多种并发症并可通过活检病理学观察予以明确诊断，肝移植临床中应常规开展移植肝穿刺活检病理学诊断。

关键词：肝移植活组织检查病理学

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移植肾活检1500例病理组织学分析

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中华医学杂志 2011年第8期91卷 520-523页

作者：郭晖林正斌张伟杰明长生陈知水曾凡军刘斌蒋继贫宫念樵魏来施辉波杜敦峰陈忠华陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对... 详细信息

目的观察肾移植术后移植肾多种并发症的发生情况、病理组织学特点和活检诊断意义。方法在超声引导下对1997年1月至2010年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所的1500例肾移植受者移植肾施行了1712次经皮肾穿刺活检并对活检组织标本予以相应染色和病理组织学观察。结果肾移植术后可发生多种并发症，1500例中急性T细胞介导性排斥反应的发生率为14．2％（213例）、急性抗体介导性排斥反应发生率为2．4％（36例）、慢性T细胞介导性排斥反应发生率为16．7％（251例）、慢性抗体介导性排斥反应的发生率为3．0％（45例）、急性钙调磷酸酶抑制剂（CNI）类药物肾毒性损伤发生率为7．1％（106例）、慢性CNI类药物。肾毒性损伤的发生率为16．7％（251例）；复发／新发性肾病的发生率为0．4％（6例）。排斥反应发生并不具有确定的时间界限。移植肾CNI类免疫抑制剂慢性毒性损伤是导致移植肾失功能的重要致病因素。结论移植肾活检病理学观察可以及时、准确地诊断肾移植术后的多种并发症，肾移植临床中应常规规范开展移植肾活检病理学诊断。

关键词：肾移植活组织检查针吸病理学

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核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间

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武汉大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 20-23,F0002页

作者：刘勇李尧李超黄霞薛承彪胡昕鹏杨涛周平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所/卫生部器官移植重点实验室/器官移植教育部重点实验室湖北武汉430030

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维... 详细信息

目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维素钠混悬。行BALB/c到B6的小鼠心脏移植。实验组使用10mg/(kg·d)、30mg/(kg·d)的熊果酸灌胃。对照组使用相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。观察术后7d时移植心CD4+、CD8+T细胞浸润情况,IFN-γ、IL-4mRNA水平和移植心存活时间。结果:熊果酸剂量依赖性抑制P65核转位。25μmol/L的熊果酸可将T细胞表面的CD25下调92.4%,CD69下调89.3%。10mg/(kg·d)熊果酸可将移植心平均存活时间(MST)延长至(23.8±1.3)d[P<0.05,与对照组(7.4±0.3)d相比]。而30mg/(kg·d)的熊果酸可将MST延长至(68.5±2.8)d。熊果酸组移植心内CD4+和CD8+T细胞浸润数量显著减少(P<0.05,与对照组比较),且IFN-γmRNA水平显著下调(P<0.05,与对照组比较),而IL-4mRNA水平无明显变化。结论:熊果酸可抑制T细胞NF-κB活化。体内应用熊果酸能显著延缓同种异体移植心排斥时间,这与熊果酸抑制T细胞活化,下调Th1反应相关。

关键词： NF-κB 心脏移植排斥反应 T细胞活化

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抗胸腺细胞球蛋白与巴利昔单抗在DCD肾移植中有效性和安全性的配对研究

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中华医学杂志 2017年第2期97卷 99-103页

作者：林凯临朱兰付程林正斌陈刚卫生部/教育部器官移植重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所武汉430030

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾... 详细信息

目的探讨抗胸腺细胞球蛋白（ATG）与巴利昔单抗在公民逝世后器官捐献（DCD）肾移植中的有效性和安全性。方法回顾性总结自2013年1月至2015年11月间在华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所实施的来自62例DCD供者的124例肾移植受者资料。根据免疫诱导方案的不同，筛选出来自同一供者的2例受者配对分为ATG组（n＝62）和巴利昔单抗组（n＝62），比较分析两组间移植疗效。结果ATG组发生移植物功能恢复延迟（DGF）11例（17.7%），显著低于巴利昔单抗组（21例，33.9%，P＝0.040）；且ATG组DGF的恢复时间较巴利昔单抗组显著缩短[（14.92±6.23）d比（20.26±7.89）d，P＝0.048]。以供者〉50周岁或具有高血压病史或冷缺血时间〉24 h筛选出DGF高危受者，则两组高危患者中DGF发生率差异更加明显（ATG组：5/18，巴利昔单抗组：10/15，P＝0.025）。两组在发生急性排斥反应、慢性移植物失功能和1年移植物存活率及1年移植受者存活率方面差异无统计学意义（均P〉0.05），在发生感染、白细胞减少、血小板减少或贫血等不良反应方面差异也无统计学意义（均P〉0.05）。结论与巴利昔单抗相比，ATG可以安全有效地减少DCD肾移植术后DGF发生率和缩短DGF持续时间，尤其对降低高危受者的DGF发生率具有显著作用。

关键词：肾移植移植物功能延迟恢复抗胸腺细胞球蛋白巴利昔单抗

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RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用

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中华医学杂志 2005年第16期85卷 1133-1136页

作者：朱珉夏振雄王树森曹荣华祁洪刚陈栋刘斌张伟杰陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部卫生部重点实验室武汉430030

目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi... 详细信息

目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响。结果　SiRNA 1/PED的α1,3 GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2,72%)(P<0 05),但SiRNA 2/PED的α1,3 GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0. 05),流式细胞学检查显示,SiRNA 1/PED的αGal平均荧光强度(52 9)明显小于错配组(493 9,P<0 01)及空转组(505 7,P<0. 01)。标准4h51Cr释放实验中SiRNA 1/PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0. 05)。结论　PED在转染SiRNA- 1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞。本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础。

关键词： RNA干扰补体介导流式细胞学检查猪半乳糖转移酶 RNAi 平均荧光强度 PED 细胞毒作用内皮细胞系 SiRNA 抗原表位 GT基因释放实验基因沉默异种移植表达量人血清转染小分子异构体统计学 Gal 溶解率靶细胞相比

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Blimp1-短发夹RNA基因转染对骨髓源性树突状细胞前体细胞分化的影响

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中华器官移植杂志 2013年第12期34卷 749-753页

作者：李幸戴晓敏姜汉英周平陈知水宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部器官移植重点实验室器官移植教育部重点实验室武汉430030

目的探讨以慢病毒为载体转染B淋巴细胞诱导蛋白-1（Blimp1）-短发夹RNA对小鼠骨髓原代细胞向树突状细胞（DcC）诱导分化的影响。方法构建Blimp1-短发夹RNA。在Balb／c小鼠骨髓原代细胞定向分化为DC的8d培养体系中，于培养第2天用慢病毒... 详细信息

目的探讨以慢病毒为载体转染B淋巴细胞诱导蛋白-1（Blimp1）-短发夹RNA对小鼠骨髓原代细胞向树突状细胞（DcC）诱导分化的影响。方法构建Blimp1-短发夹RNA。在Balb／c小鼠骨髓原代细胞定向分化为DC的8d培养体系中，于培养第2天用慢病毒载体将Blimp1-短发夹RNA转染入细胞中。实验分为3组：空白对照组培养体系中不加入任何慢病毒载体，空载体对照组培养体系中进行空载体慢病毒干预，实验组培养体系中进行lenti—Blimp1-短发夹RNA干预。转染1周内观察转染效率，观察细胞的形态变化，记录细胞的生长曲线；于培养第4、5天收集细胞，实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测各组Blimp1信使RNA和Blimp1的表达情况；检测培养第8天CD11c^＋、CD86^＋及主要组织相容性复合物Ⅱ（MHC-Ⅱ）＋细胞的百分率。结果病毒转染后第3天细胞出现荧光，其后荧光持续存在；培养过程中出现典型DC形态，接受病毒转染的细胞有形态受损表现。空白对照组细胞在培养的前3d内呈对数增长，第4天细胞数目达到峰值，为（2．45±0．26）×10^6／孔，第8天为（2．27±0．19）×10^6／孔；空载体对照组和实验组细胞在病毒侵染后细胞增殖停滞，细胞数目稳定在（1．69±0．39）×10^6／孔。空载体对照组和实验组细胞中Blimp1信使RNA及Blimp1蛋白的表达量分别为空白对照组的76％和1％以及105％和74％。在空白对照组、空载体对照组和实验组中CD11c^＋细胞分别占（69．2±5．0）％、（68．6±5．9）％和（72．8±5．5）％（P〉0．05）；CD86^＋细胞分别占（51．1±4．9）％、（49．5±4．3）％和（50．2±6．0）％（P〉0．05）；MHC-Ⅱ^＋细胞分别占（56．3±7．3）％、（69．4±4．5）％和（46．5±5．7）％，3组间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢病毒介导的短发夹RNA基因治疗是调控骨髓源性DC前体细胞Blimp1基因的有效手段；Blimp1基因的下调不影响DC前体细胞的定向分化，但能够抑制DC的成熟。

关键词：树突细胞慢病毒载体小鼠

来源：评论

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供心过表达微小RNA-499减轻心脏缺血再灌注损伤的研究

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中华实验外科杂志 2014年第10期31卷 2217-2219,F0004页

作者：张玄黄霞栾宙王平良陈知水杨军华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室器官移植卫生部重点实验室武汉430030

目的观察供心过表达微小RNA-499 （miR-499）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用聚合酶链反应（PCR）行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠（WT）和同系（C57BL/6背景）miR-499转基因小鼠（Tg）来源的供心,均置于... 详细信息

目的观察供心过表达微小RNA-499 （miR-499）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法采用聚合酶链反应（PCR）行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠（WT）和同系（C57BL/6背景）miR-499转基因小鼠（Tg）来源的供心,均置于4℃生理盐水中保存16h,检测保存液中心肌酶谱：肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的释放量.实验分为WT供心组和Tg供心组,建立同系小鼠腹部异位心脏移植模型,通过视诊和触诊观察不同小鼠供心经过冷保存,移植给相同受体后心功能的恢复,并于移植后24h获取供心,行苏木素-伊红（HE）染色,观察移植心脏组织病理学改变.结果 PCR结果显示miR-499转基因小鼠能检测到miR-499基因及相关载体片段,在图中呈现阳性条带;WT小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（5 043.0±523.8） U/L和（1 068.0±150.0）U/L,Tg小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（3 667.0±194.7） U/L和（684.0±19.1） U/L,Tg小鼠心脏在冷缺血过程中,两种心肌酶谱的释放值均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.移植后相同时间点观测结果显示,WT小鼠来源心脏的临床功能评分明显低于Tg小鼠,15 min时的平均评分分别为0.9分和2.3分,24 h的平均评分分别为2.1分和3.4分（P＜0.05）.移植后24 h,WT小鼠来源供心有大量炎性细胞浸润并伴有心肌细胞坏死,而Tg小鼠供心的炎性细胞浸润和心肌细胞坏死较少（P＜0.05）.结论供心过表达miR-499能减轻心脏在冷缺血和热灌注过程中造成的炎性损伤和心肌细胞凋亡,有利于再灌注后心功能的恢复,在心脏移植过程中具有保护作用.

关键词：微小RNA-499 缺血再灌注损伤心脏移植

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