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中华器官移植杂志 2010年第1期31卷 60-62页

作者：雷钧陈知水华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

初始T淋巴细胞被树突状细胞活化后，在体内不同的微环境下可分化成为功能及表型不同的效应性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞（Treg细胞）。当有白细胞介素12（IL-12）存在时，初始T淋巴细胞分化为TH1型细胞，主要分泌IL-12、γ干扰素（IFN... 详细信息

初始T淋巴细胞被树突状细胞活化后，在体内不同的微环境下可分化成为功能及表型不同的效应性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞（Treg细胞）。当有白细胞介素12（IL-12）存在时，初始T淋巴细胞分化为TH1型细胞，主要分泌IL-12、γ干扰素（IFN-γ）及特异性表达转录因子T-bet；有IL-4存在时，初始T淋巴细胞分化为TH2型细胞，主要分泌IL-4、IL-10，特异性表达转录因子GATA-3；在转化生长因子β（TGF-β）单独存在时，初始T淋巴细胞分化为Treg细胞，

关键词：淋巴细胞分化树突状细胞活化自身免疫性疾病调节性排斥反应 Treg细胞 T淋巴细胞转化生长因子β

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亲属活体供肾移植后近期及中长期供者和受者的安全性分析

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中华器官移植杂志 2009年第10期30卷 616-619页

作者：宫念樵陈知水曾凡军明长生张伟杰林正斌周平陈孝平华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所卫生部/教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其... 详细信息

目的探讨亲属活体供肾移植术后近期及中长期供、受者的安全性。方法对106名亲属活体供肾者及其受者进行随访。随访日分别为肾移植后2个月至7年，其中32名供者随访时处于术后3个月内，44名处于术后3个月至1年，30名处于术后1年以上（其中术后1～3年者14名，3～5年者11名，5年以上者5名）。以GFR作为评估供、受者肾功能的主要指标，比较供、受者手术前后的肾功能以及血压和尿蛋白。GFR的计算采用同位素发射计算机辅助断层显像法（GFRECT法）、24h尿肌酐（Cr）清除率法（GFR-24h Urine法）及Cockcroft-Gault公式法（GFR-Cr法）。结果取肾前106名供者的GFR-ECT和GFR—Cr分别为（1．51±0．13）和（1．99±0．42）ml／s，GFR-ECT是GFR—Cr的75．8％；术后第5天，供者的GFR—Cr为（1．40±0．33）ml／s，为术前的70．5％；术后3个月内、3个月至1年和1年以上者的GFR-Cr分别为（1．47±0．28）、（1．36±0．24）和（1．37±0．23）ml／s，分别为取肾术前的73．7％、68．0％和68．6％；术后1～3年者、3～5年者及5年以上者的GFR-Cr与超过1年者整体的GFR-Cr比较，差异无统计学意义（P〉O．05）。4名供者术后尿蛋白为±，均为术后超过1年者；4名供者血压升高。术后3个月、1年及1年以上，受者的GFR-Cr分别为（1．09±0．26）、（1．20±0．31）和（1．07±0．29）ml／s。结论术后近期供者的GFR会下降，并小幅波动，术后中长期其GFR接近术前70％的水平，并趋于稳定。亲属活体供肾移植术后供、受者具有良好的安全性。

关键词：肾移植活体供者手术后期间肾功能试验

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EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

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中华器官移植杂志 2007年第6期28卷 349-351页

作者：陈杰郭晖金昊汪理陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的研究表绿茶活性成分没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法将12只Lewis大鼠随机分为2组:(1)实验组大鼠7只,于肾缺血后的再灌注期将10 mg/kg的EGCG置于2ml生理... 详细信息

目的研究表绿茶活性成分没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤是否具有保护作用。方法将12只Lewis大鼠随机分为2组:(1)实验组大鼠7只,于肾缺血后的再灌注期将10 mg/kg的EGCG置于2ml生理盐水中静脉注射;(2)对照组大鼠5只,于肾缺血后的再灌注期静脉注射2 ml生理盐水。2 h后处死动物,收集血液和肾脏标本,行血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量测定,并进行组织病理和超微病理检查。结果实验组大鼠血Cr和BUN水平明显低于对照组(P<0.05),肾组织中SOD活性较对照组明显升高(P<0.01),肾组织脂质过氧化产物MDA的含量较对照组明显降低(P<0.01)。病理学检测表明实验组大鼠肾小管周围毛细血管内未见淤血,肾小管上皮细胞变性及线粒体的损伤减轻。结论EGCG对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用。

关键词：没食子儿茶素-3-没食子酸酯再灌注损伤大鼠

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OX40信号调节抑制小鼠CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞Foxp3的表达

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中华器官移植杂志 2013年第7期34卷 424-427页

作者：马东霞王璐赵越向莹刘斌华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体... 详细信息

目的探讨共刺激信号OX40对体外诱导的小鼠CD4＋CD25＋适应性调节性T淋巴细胞（iTreg）的Foxp3表达的影响。方法制备C57BL／6小鼠淋巴细胞悬液，经免疫磁珠法分选，获得CD4＋CD25一静息T淋巴细胞，与抗CD3单克隆抗体、抗CD28单克隆抗体、转化生长因子B1、白细胞介素2共孵育，诱导产生Foxp3＋iTreg。在此基础上，于培养体系中加入OX40激动型抗体及其对照抗体，利用流式细胞仪分析研究OX40信号刺激对iTregFoxp3表达的影响。结果C57BL／6小鼠淋巴结中CD4＋CD25＋天然调节性T淋巴细胞（Treg）比例为（5．0±0．4）％，体外诱导培养的CD4＋CD25＋Treg比例为（71．8±13．4）％，其中Foxp3阳性表达占（74．9±1．9）％。OX40激动型抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（80．0±1．6）%，其中Foxp3表达水平为（59．2±0．7）％；OX40激动型抗体对照抗体组CD4＋CD25＋Treg细胞比例为（86．0±1．4）％，其中Foxp3表达水平为（70．0±0．8）％，两组问差异有统计学意义（P〈0．05）。结论静息T淋巴细胞可以在体外诱导培养获得高纯度iTreg；OX40信号刺激可以显著抑制CD25＋iTreg细胞Foxp3的表达。

关键词： T淋巴细胞调节 CD4 共刺激移植

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转录因子诱骗性寡核苷酸转染猪血管内皮细胞抑制人补体介导的异种细胞毒作用

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中华器官移植杂志 2008年第10期29卷 594-597页

作者：黄亚冰王璐尹注增李荣郭晖陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部/卫生部重点实验室武汉430030

目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—... 详细信息

目的探讨转录因子SP，诱骗性寡核苷酸（decoyODNs）转染的猪血管内皮细胞对人血清补体介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株SV40-PED分为3组。转染组：SV-40PED转染了SP，decoyODNs；错配组：S驴4D—PED转染了错配的decoyODNs；空转染组：SV-40PED仅用转染试剂oligofectamine作用。转染后26h，采用细胞爬片免疫荧光技术、蛋白印迹法、逆转录聚合酶链反应及乳酸脱氢酶释放试验进行检测，分别观察各组SV40-PED胞膜a半乳糖残基（regal）、蛋白质和α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）mRNA等表达的变化，以及转染了SP，decoyODNs的SV-40PED对人血清补体介导的细胞毒作用的影响。结果转染组SV-40-PED胞膜α—G1的荧光表达明显减弱，部分胞膜可见点状荧光缺损，而空转染组和错配组仍可见明亮的绿色荧光。转染组蛋白表达水平均有不同程度的下降，相对吸光度（A值）仅为未转染组的52．6％。转染组α1，3GT基因异构体1和2mRNA的相对表达量分别为0．42±0．20和0．27±0．12，空转染组分别为0．72±0．17和0．50±0．19，两组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）；错配组与空转染组相比，差异无统计学意义（P〉0.05）。体积分数为20％和40％的人血清对空转染组和错配组SV40-PED均有不同程度的杀伤，而对转染组SV-40-PED的杀伤明显减弱（P〈0.，05）。结论经SP，decoyODNs转染的猪血管内皮细胞可以抑制人血清补体介导的异种细胞毒作用。

关键词：转录因子 SP1 寡核苷酸类补体内皮细胞

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外周血淋巴细胞亚群绝对值和功能的动态监测在肾移植术后早期病毒感染风险预测中的价值

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器官移植 2022年第1期13卷 80-87页

作者：张倩倩谢亚龙汪峰罗颖陈松张伟杰昌盛华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科武汉430030

目的探讨不同淋巴细胞亚群的绝对值和功能对于评估肾移植受者术后早期发生病毒感染风险的预测和诊断价值。方法将95例肾移植受者纳入前瞻性观察队列研究,根据术后的免疫状态分为稳定组(77例)和感染组(18例)。分别于术前、术后2周、术后... 详细信息

目的探讨不同淋巴细胞亚群的绝对值和功能对于评估肾移植受者术后早期发生病毒感染风险的预测和诊断价值。方法将95例肾移植受者纳入前瞻性观察队列研究,根据术后的免疫状态分为稳定组(77例)和感染组(18例)。分别于术前、术后2周、术后1个月、术后2个月、术后6个月采集外周血样本进行流式细胞检测。比较两组CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、自然杀伤(NK)细胞绝对值的动态变化,通过检测干扰素(IFN)-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例分析两组受者淋巴细胞亚群功能,评估淋巴细胞亚群绝对值和功能在肾移植术后早期对病毒感染的预测和诊断价值。结果在病毒感染时,感染组的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞绝对值整体处于相对较低的水平;在术后2个月时,感染组的CD4^(+)T细胞、NK细胞绝对值均低于稳定组;在术后6个月时,感染组的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞绝对值均低于稳定组(均为P<0.05)。在病毒感染时,感染组的IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例均处于相对较低的水平,尤以IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞比例降低最为显著;在术后2个月,感染组的IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞、IFN-γ^(+)NK细胞比例显著高于稳定组;在术后6个月,感染组的IFN-γ^(+)CD4^(+)T细胞、IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞比例均高于稳定组(均为P<0.05)。logistic回归分析结果显示,术后2个月时,IFN-γ^(+)CD8^(+)T细胞和IFN-γ^(+)NK细胞比例的升高与病毒感染风险增加均相关(均为P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果表明,淋巴细胞亚群绝对值联合其IFN-γ分泌功能对于免疫状态低下的受者病毒感染的诊断价值显著高于单用淋巴细胞亚群绝对值(P<0.05)。结论动态监测淋巴细胞亚群绝对值和功能的变化对病毒感染的预测、诊断及指导用药具有重要参考价值。

关键词：肾移植免疫监测淋巴细胞亚群流式细胞术外周血单个核细胞干扰素-γ 个体化治疗 CD4~+T细胞 CD8~+T细胞自然杀伤细胞

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抗γc单克隆抗体联合供者特异性输注延长移植物存活

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免疫学杂志 2007年第2期23卷 199-201页

作者：向芙莉陈必成袁劲吴轲周洁陈忠华华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨抗γ公共链单克隆抗体(抗γc单抗)联合供者脾细胞特异性输注(DST)诱导移植物长期存活的可行性及相关机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,组Ⅰ为单纯实施心脏移植组,组Ⅱ于移植前给予DST,组Ⅲ术前予DST联合抗γc单克隆抗体... 详细信息

目的探讨抗γ公共链单克隆抗体(抗γc单抗)联合供者脾细胞特异性输注(DST)诱导移植物长期存活的可行性及相关机制。方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,组Ⅰ为单纯实施心脏移植组,组Ⅱ于移植前给予DST,组Ⅲ术前予DST联合抗γc单克隆抗体处理,术后观察移植物的存活时间及相关指标。结果组Ⅲ心脏移植物平均存活时间明显长于组Ⅰ及组Ⅱ(P<0.05)。FACS分析显示组Ⅲ受者脾细胞中Tr比例较组Ⅰ及组Ⅱ显著增高(P<0.05),同时脾细胞增殖活性明显减低(P<0.05)。结论抗γ公共链单克隆抗体联合DST通过增加供者体内Tr的比例,减低对同种抗原的应答能力,显著延长同种心脏移植模型中移植物存活时间。

关键词：供者特异性输注抗γ公共链单克隆抗体心脏移植

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胰、肾联合移植术式的选择

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中华器官移植杂志 2005年第3期26卷 186-188页

作者：明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部器官移植重点实验室武汉430030

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合... 详细信息

由于胰腺外分泌液的引流方式和移植胰腺排斥反应难以诊断的特殊性,胰、肾联合移植的总数和效果都远远落后于其它器官移植.直到最近十年,胰、肾联合移植的手术方式才趋向定型,成为治疗1型糖尿病合并尿毒症的最佳选择.在我国,胰、肾联合移植的经验积累十分有限,手术方式尚无统一标准,多数中心仅仅实施单一术式.因此,本文结合我们的经验,对胰腺与胰、肾联合移植手术选择的有关问适题作一综述.

关键词：联合移植术式诊断治疗手术方式引流方式胰腺外分泌总数定型趋向

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改进后的大鼠颈部心脏移植模型

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中华器官移植杂志 2005年第8期26卷 503-504页

作者：甄忠广明长生华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院教育部卫生部器官移植重点实验室武汉430030

成功的大鼠同种异位心脏移植模型要求操作简便、手术创伤小、受者长期存活率高.因此,我们对传统的Heron[1]大鼠颈部心脏移植模型进行改进,现将改进后的术式、操作体会及优点报告如下。

关键词：大鼠颈部心脏移植模型心肌结构炎性细胞浸润

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Axl-siRNA核转染对髓源性DC前体细胞分化的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第5期42卷 511-514,546页

作者：李幸王浩戴晓敏马俊磊汪晶姜汉英宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、卫生部器官移植重点实验室、器官移植教育部重点实验室武汉430030 海军工程大学海工医院武汉430033

目的将Axl（Anexelekto）-siRNA（small interfering RNA）序列核转染于髓源性树突状细胞（dendritic cells,DC）前体细胞中,观察转染效率、细胞生长及分化情况.方法构建Axl-siRNA序列,用核转染法将此序列转染于小鼠骨髓原代细胞并诱... 详细信息

目的将Axl（Anexelekto）-siRNA（small interfering RNA）序列核转染于髓源性树突状细胞（dendritic cells,DC）前体细胞中,观察转染效率、细胞生长及分化情况.方法构建Axl-siRNA序列,用核转染法将此序列转染于小鼠骨髓原代细胞并诱导向DC分化;根据是否转染Axl-siRNA,将实验分为空白对照组和Axl-siRNA核转染组;转染后荧光显微镜观察细胞荧光水平以评估转染效率;通过锥虫蓝染色观察细胞的存活情况;观察细胞的形态变化,记录细胞的生长情况,绘制生长曲线;转染后第8天流式细胞术检测DC的表面标志CD11c＋.结果转染后1～3 d荧光表达率分别为（70.5±6.3）%、（72.6±7.3）%、（68.8±6.5）%,而后荧光逐渐减弱并淬灭;核转染后细胞的死亡率为（21.2±5.4）%;空白对照组细胞在培养的前3d内的生长曲线呈对数增长,第4至6天,细胞数稳定在（2.38～2.47）×10^6/孔,培养后第7、8天细胞数略有下降,为（2.23～2.31）×10^6/孔;Axl-siRNA核转染组细胞生长曲线也呈现相同的趋势,但与空白对照组相比每阶段的细胞计数略有减少;细胞培养8 d后,空白对照组和Axl-siRNA核转染组CD11c＋的细胞百分比分别为（70.28±6.13）%和（67.53±7.45）%.结论 Axl-siRNA核转染法对髓源性DC前体细胞具有较高的转染效率,不影响DC的生长和分化;Axl-siRNA核转染法是研究DC功能的一种有效手段.

关键词：核转染 Axl-siRNA 树突状细胞树突状细胞前体细胞

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