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安徽医科大学学报 2024年第10期59卷 1794-1801页

作者：崔笑妍于笑涵周静王璐瑶张荣花王梅梅熊亚南刘志勇章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山063210 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000 华北理工大学医学部唐山063210

目的研究miR-199a-5p通过调节肠道菌群对胆总管结扎(BDL)诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法25只SD大鼠随机分为Sham组、BDL组、空载腺病毒(NC adv)组、miR-199a-5p adv组和miR-199a-5p sponge adv组,每组5只。HE、Masson和Sirius Red染色... 详细信息

目的研究miR-199a-5p通过调节肠道菌群对胆总管结扎(BDL)诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法25只SD大鼠随机分为Sham组、BDL组、空载腺病毒(NC adv)组、miR-199a-5p adv组和miR-199a-5p sponge adv组,每组5只。HE、Masson和Sirius Red染色观察大鼠肝组织病理变化及肝纤维化程度;全自动生化分析仪检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)含量;qRT-PCR检测大鼠肝组织中miR-199a-5p的表达水平;双重免疫荧光和Western blot实验检测大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原α1链(COL1A1)的蛋白表达水平;收集大鼠粪便进行16S rRNA高通量测序。结果miR-199a-5p在BDL大鼠肝组织中表达上调(P<0.01)。与NC adv组相比,miR-199a-5p adv组大鼠肝损伤及胶原沉积现象更为严重,血清中AST、ALT、TBIL和DBIL含量以及肝组织中α-SMA和COL1A1表达水平显著升高(均P<0.05)。然而,miR-199a-5p sponge adv干预的结果与之相反(均P<0.05)。16S rRNA测序结果显示,miR-199a-5p adv干预可增加BDL大鼠肠道菌群的多样性和丰富度,改变肠道菌群组成,而miR-199a-5p sponge adv干预后菌群的结果与之相反(均P<0.05)。结论miR-199a-5p促进BDL大鼠肝纤维化,其机制可能与调节肠道菌群多样性和丰度相关。

关键词： miR-199a-5p 肠道菌群胆总管结扎肝纤维化炎症

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miR-296-3p对胆总管结扎诱导的大鼠肝纤维化的影响

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安徽医科大学学报 2024年第9期59卷 1583-1590页

作者：张亚楠王璐瑶周静张荣花熊亚南王梅梅刘志勇章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山063210 华北理工大学医学部唐山063210 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000

目的探究微小RNA-296-3p(miR-296-3p)对胆总管结扎(BDL)诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法将25只SD大鼠随机分为假手术(sham)组、模型(BDL)组、NC adv组、miR-296-3p adv组和miR-296-3p sponge adv组,每组5只。通过苏木精-伊红(HE)、Masson染色和天狼星红(Sirius Red)染色观察大鼠肝组织病理变化;比较各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)含量;用qRT-PCR检测大鼠肝组织中miR-296-3p、白介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平以及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col1A1)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达水平;Western blot检测α-SMA、Col1A1、CTGF蛋白的表达水平;免疫组织化学染色(IHC)检测α-SMA的表达水平;生物信息学网站预测miR-296-3p的候选靶基因;检测锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)mRNA和蛋白的表达水平。结果病理学染色结果显示,与sham组相比,BDL组和NC adv组大鼠肝组织中大量炎症细胞浸润和胶原沉积,与NC adv组相比,miR-296-3p adv组肝组织中炎症细胞减少,胶原沉积减少,而miR-296-3p sponge adv组胶原聚积和炎症反应加重。与sham组相比,BDL组和NC adv组大鼠血清ALT、AST、TBIL含量升高,miR-296-3p的表达水平降低,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达水平及α-SMA、Col1A1、CTGF mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);与NC adv组相比,miR-296-3p adv组大鼠血清ALT、AST、TBIL含量降低,miR-296-3p表达水平升高,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA的表达水平降低且肝组织中α-SMA、Col1A1、CTGF mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),miR-296-3p sponge adv组结果与miR-296-3p adv组结果相反(P<0.05)。生物信息学网站预测到ZBTB20可能是miR-296-3p的候选靶基因。与sham组相比,BDL组和NC adv组大鼠肝组织中ZBTB20 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),与NC adv组相比,miR-296-3p adv组肝组织中ZBTB20表达降低(P<0.05),而miR-296-3p sponge adv组肝组织中ZBTB20表达升高(P<0.05)。结论miR-296-3p在BDL诱导的大鼠肝纤维化组织中表达水平降低,miR-296-3p可能通过靶定ZBTB20抑制BDL大鼠肝纤维化。

关键词： miR-296-3p ZBTB20 胆总管结扎大鼠肝纤维化炎症因子

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解脂耶氏酵母异源合成倍半萜的研究进展

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生物工程学报 2025年

作者：王柳欢邵语瑶崔啸林杨佳珂乔燕徐龙兴孙悦嘉刘鹏才袁丽杰刘顺成华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室华北理工大学护理与康复学院华北理工大学医学部河北省医工融合盐碱地综合利用重点实验室河北省中医药管理局耐盐碱中药质量控制重点研究室

倍半萜是一种含有15个碳原子的天然萜类化合物。因其具有显著的生物活性，被广泛应用于香料、医药和生物燃料工业领域。传统倍半萜生产依赖于化学合成或植物组织提取，存在产率低、资源浪费等缺点。通过合成生物学手段构建微生物细胞工... 详细信息

倍半萜是一种含有15个碳原子的天然萜类化合物。因其具有显著的生物活性，被广泛应用于香料、医药和生物燃料工业领域。传统倍半萜生产依赖于化学合成或植物组织提取，存在产率低、资源浪费等缺点。通过合成生物学手段构建微生物细胞工厂为高效合成倍半萜提供了新的选择。近年来，随着代谢工程和合成生物学的发展，通过代谢工程手段改造油脂酵母——解脂耶氏酵母成功实现了多种倍半萜类化合物的异源合成。本文综述了解脂耶氏酵母异源合成不同倍半萜的研究进展，并对该领域常用的合成生物学策略进行了讨论，展望了进一步提高该宿主中倍半萜产量的研究方向与工程方法。本文为合成生物学与代谢工程协同优化、强化前体等策略提供了借鉴，并为合成生物学在绿色化工与可持续生产中的应用开辟了新方向。

关键词：解脂耶氏酵母 α-法尼烯 β-法尼烯紫穗槐二烯 α-葎草烯 β-榄香烯合成生物学

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人乳头瘤病毒核酸检测方法及应用

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病毒学报 2025年第1期41卷 245-256页

作者：陈子玉李慧莹张晓光李淑英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

高危型人乳头瘤病毒(High-risk human papillomavirus,HR-HPV)持续感染可引起宫颈上皮内瘤样病变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌的发生。除细胞学检查外,HPV核酸检测是WHO推荐用于宫颈癌初筛的首选方法。HR-HPV核酸检测的引入可以提高CIN2+的检出率和宫颈癌筛查方案的效率。本文旨在对目前HPV核酸检测方法进行归纳总结,为宫颈癌筛查计划提供参考。

关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌分子检测

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新型白念珠菌生物被膜抑制剂IMB-H12的活性和作用机制研究

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药学学报 2024年第4期59卷 948-956页

作者：李丹朱小红卞聪魏元娟时文静李妍袁丽杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063210 中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所抗感染药物研究北京市重点实验室北京100050

白念珠菌是真菌感染疾病中的主要病原菌,生物被膜的形成是白念珠菌毒力特征,同时也是重要的耐药机制,开发具有生物被膜抑制活性的抗真菌药物具有重要的意义。本研究对前期获得的新型的具有生物被膜抑制活性的化合物1-(cyclopentylamino)... 详细信息

白念珠菌是真菌感染疾病中的主要病原菌,生物被膜的形成是白念珠菌毒力特征,同时也是重要的耐药机制,开发具有生物被膜抑制活性的抗真菌药物具有重要的意义。本研究对前期获得的新型的具有生物被膜抑制活性的化合物1-(cyclopentylamino)-3-(4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy)propan-2-ol(简称IMB-H12)进行了深入的研究。IMB-H12对生物被膜的形成具有良好的抑制活性,并且对成熟的生物被膜具有一定的清除作用;初步作用机制研究发现IMB-H12能够抑制酵母-菌丝相的转换、抑制菌丝体的形成,降低白念珠菌的黏附活性和疏水性;IMB-H12能够诱导生物被膜菌细胞壁成分含量的改变,下调多个与黏附和菌丝形成相关的基因的表达。因此,对该化合物的进一步研究,有望发现新型的具有抗真菌活性的先导化合物。

关键词：白念珠菌生物被膜 1-(cyclopentylamino)-3-(4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy)propan-2-ol 黏附菌丝

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刺五加内生链霉菌Streptomyces amritsarensis 13-85的次级代谢产物研究

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中国抗生素杂志 2025年第1期50卷 22-32页

作者：梁国栋苏冰洁陈渝川刘爱华王彬千晔司书毅陈明华袁丽杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室、唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063210 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050

目的研究刺五加内生链霉菌(Streptomyces amritsarensis)13-85的次级代谢产物。方法采用大孔吸附色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、半制备高效液相等方法分离纯化菌株13-85的次级代谢产物,结合质谱和核磁共振波谱等方法确定化合物的结构;最后采... 详细信息

目的研究刺五加内生链霉菌(Streptomyces amritsarensis)13-85的次级代谢产物。方法采用大孔吸附色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、半制备高效液相等方法分离纯化菌株13-85的次级代谢产物,结合质谱和核磁共振波谱等方法确定化合物的结构;最后采用倍比稀释法评价化合物抗菌活性。结果从链霉菌Streptomyces amritsarensis 13-85中分离得到2个新化合物和14个已知化合物,分别为:溶藻链霉苷A(1)、溶藻链霉苷B(2)、omicsynin A4(3)、环(L-脯-L-酪)(4)、环(D-脯-L-酪)(5)、环(L-酪-L-酪)(6)、环(L-酪-L-缬)(7)、N-乙酰色氨酸(8)、环(甘-L-色)(9)、环(L-色-L-丙)(10)、(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-咔啉-3-羧酸(11)、(1R,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-咔啉-3-羧酸(12)、环(L-异亮-L-脯)(13)、环(L-异亮-D-脯)(14)、环(L-亮-L-脯)(15)、环(L-亮-D-脯)(16)。其中化合物3对枯草芽孢杆菌的MIC为50μg/mL。结论从Streptomyces amritsarensis 13-85中发现了两个新的鼠李糖酯苷,该研究结果丰富了链霉菌次级代谢产物的结构类型。

关键词：鼠李糖苷溶藻链霉菌刺五加内生放线菌

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ACE2基因缺失对止血带休克后主动脉收缩反应性的影响

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中国病理生理杂志 2023年第5期39卷 802-810页

作者：方芳王丽君杨羚张文丽张晓伏杨秀红华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063210 北京中医药大学东直门医院病理科北京100007 华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210

目的:观察血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因缺失对止血带休克(tourniquet shock,TS)小鼠主动脉收缩反应性的影响。方法:8月龄C57BL/6雄性小鼠,分为野生型(WT)对照组、WT-TS组、基因敲除(knockout,KO)组、KO-TS组,每组10只小鼠,其中5只小鼠血管用于测定血管反应性,另外5只用于其他检测。WT-TS组和KO-TS组小鼠用止血带造成双后肢缺血2 h再灌注4 h后处死。WT组和KO组不进行套扎与再灌注,其余操作同模型组。应用离体血管张力测定仪测定主动脉收缩反应性,光学显微镜结合透射电子显微镜评价血管形态学变化,蛋白免疫印迹法检测AT1、MAS、ACE和ACE2蛋白的表达。采用酶联免疫吸附法检测血清中血管紧张素(angiotensin,Ang) Ⅱ和Ang-(1-7)含量。结果:与WT相比,WT-TS组小鼠主动脉对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)反应性降低,损伤明显;ACE蛋白表达水平升高(P<0.01),ACE2蛋白表达水平降低(P<0.05);AT1蛋白表达水平降低,MAS蛋白表达水平升高,ATI/MAS比值降低(P<0.01);血清Ang Ⅱ生成增多,Ang-(1-7)水平降低,Ang Ⅱ/Ang-(1-7)比值升高(P<0.05)。与WT组相比,KO组小鼠主动脉在NE低浓度(<10^(-7)mol/L)时的收缩反应性升高,在NE高浓度(>10^(-7)mol/L)时的收缩反应性反而下降,但血管损伤不明显;主动脉AT1、MAS和ACE蛋白表达均增高(P<0.05),AT1/MAS比值降低;血清Ang Ⅱ水平升高(P<0.05),Ang-(1-7)水平无明显变化。与KO和WT-TS组小鼠相比,KO-TS组小鼠主动脉收缩曲线明显右移,对NE的反应性明显下降(P<0.05);血管损伤程度轻度增加(P<0.01);主动脉AT1和ACE表达水平轻度升高(P<0.05),但MAS表达水平显著升高(P<0.01);血清Ang Ⅱ和Ang-(1-7)水平分别升高和降低,因此Ang Ⅱ/Ang-(1-7)比值增大(P<0.01)。结论:TS后ACE2基因敲除小鼠体内缺失的ACE2蛋白可引起主动脉更严重的收缩低反应性,其机制可能与肾素-血管紧张素系统失衡程度增加有关。

关键词：血管紧张素转换酶2 止血带休克血管低反应性基因敲除

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肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP诱导肌动蛋白细胞骨架重塑促进上皮-间质转化的机制

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中华劳动卫生职业病杂志 2023年第11期41卷 801-807页

作者：耿菲蔡玉浩赵莹魏中秋徐洪杨方华北理工大学公共卫生学院医学实验技术系河北省器官纤维化重点实验室唐山063000 华北理工大学基础医学院病理学系河北省慢性疾病重点实验室唐山063000

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白(osteoclast stimulatory transmembrane protein,OC-STAMP)对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月,将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组(NC组)、 Ocstamp过表达组(over- ... 详细信息

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白(osteoclast stimulatory transmembrane protein,OC-STAMP)对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月,将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组(NC组)、 Ocstamp过表达组(over- Ocstamp组)、法舒地尔(Fasudil)干预组(over- Ocstamp+Fasudil组)、沉默对照组(si-NC组)、 Ocstamp沉默组(si- Ocstamp组)。采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法、免疫细胞化学染色法检测OC-STAMP、上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、间质标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ras基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)、Rho GDP解离抑制因子α(Rho GDP dissociation inhibitor α,Rho GDIα)、Rho相关蛋白激酶(Rho-associated protein kinase,ROCK)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶(phosphate myosin phosphatase,p-MYPT)蛋白表达,采用鬼笔环肽法检测细胞骨架肌动蛋白(filamentous actin,f-actin)的变化。采用 t检验比较两组间各蛋白的相对表达量。结果:Western blotting及免疫细胞化学染色法结果显示,与NC组比较,over- Ocstamp组E-cad蛋白表达下调,α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达增加,F-actin表达增强,差异均有统计学意义( P<0.05);与si-NC组比较,si- Ocstamp组E-cad和α-SMA蛋白表达差异均无统计学意义( P>0.05);与over- Ocstamp组比较,over- Ocstamp+Fasudil组E-cad蛋白表达上调,α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达下降,F-actin表达减弱,差异均有统计学意义( P<0.05)。结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP,可能通过激活Rho GDIα/RhoA/ROCK信号通路,诱导肌动蛋白细胞骨架重塑,进而促进上皮-间质转化。

关键词：肌动蛋白上皮细胞-间充质细胞转换破骨细胞刺激性转膜蛋白矽肺

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二甲双胍通过激活SIRT1/p53信号通路对骨关节炎大鼠关节软骨发挥保护作用

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实用医学杂志 2024年第23期40卷 3306-3316页

作者：贾祥徐田杰樊佳欣郭小玲刘凯楠张辉王永生王茜华北理工大学基础医学院河北唐山063210 河北省慢性疾病基础医学重点实验室河北唐山063210 邢台医学院基础医学部河北邢台054000 唐山市第二医院关节一科河北唐山063000

目的探究二甲双胍对骨关节炎大鼠软骨保护作用机制。方法取30只雄性SD大鼠,随机分为3组(10只/组)。建立大鼠膝骨关节炎模型,二甲双胍组大鼠接受灌胃治疗[200 mg/(kg·d)],空白组和模型组大鼠给予生理盐水作为对照。4周后,采用形态... 详细信息

目的探究二甲双胍对骨关节炎大鼠软骨保护作用机制。方法取30只雄性SD大鼠,随机分为3组(10只/组)。建立大鼠膝骨关节炎模型,二甲双胍组大鼠接受灌胃治疗[200 mg/(kg·d)],空白组和模型组大鼠给予生理盐水作为对照。4周后,采用形态学染色方法观察关节软骨形态,通过免疫组化染色、免疫荧光染色及Western blot检测SIRT1/p53信号通路因子、炎症及凋亡相关因子的表达。结果二甲双胍组大鼠较模型组软骨结构损伤明显减轻,软骨层面趋于平整,软骨细胞数目增多,蛋白多糖含量增加。免疫组化染色、免疫荧光染色和Western blot检测发现,二甲双胍组大鼠软骨组织中SOX9、Aggrecan、Bcl-2、SIRT1蛋白表达较模型组显著升高,而IL-6、TNF-α、BAX、Caspase-9、p53蛋白表达明显降低。TUNEL染色结果显示,与模型组比较,二甲双胍组大鼠软骨细胞凋亡数量明显减少。结论二甲双胍可通过SIRT1/p53信号通路的激活减少骨关节炎SD模型大鼠软骨细胞凋亡,抑制软骨细胞外基质降解,进而保护关节软骨。

关键词：骨关节炎关节软骨凋亡炎症二甲双胍 SIRT1/p53信号通路

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百合乌药蒲公英汤对肝纤维化的改善作用及机制研究

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食品安全质量检测学报 2023年第5期14卷 300-307页

作者：刘恒旭王寰王瑞冯欣怡贾晓冬郝思钰盛奕菲岳志伟齐亚娟华北理工大学药学院唐山063210 华北理工大学基础医学院唐山063210 唐山市新药基础研究重点实验室唐山063210 河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063210

目的评价百合乌药蒲公英汤(decotion of Baihe Wuyao Pugongying,DBWP)对肝纤维化(liver fibrosis,LF)的保护作用,并揭示其相关机制。方法通过四氯化碳诱导6~8周龄雄性昆明种小鼠LF模型并随机分为5组,给予6周不同剂量DBWP进行体内实... 详细信息

目的评价百合乌药蒲公英汤(decotion of Baihe Wuyao Pugongying,DBWP)对肝纤维化(liver fibrosis,LF)的保护作用,并揭示其相关机制。方法通过四氯化碳诱导6~8周龄雄性昆明种小鼠LF模型并随机分为5组,给予6周不同剂量DBWP进行体内实验验证。检测肝功能指标、肝脏病理形态和纤维化沉积;Western-blot检测胶原纤维因子及细胞外基质(extracellular matrixs,ECMs)降解酶表达,反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,PT-PCR)检测炎症相关因子表达。结果与模型组相比较,DBWP可明显改善肝功能,降低小鼠血清谷丙转氨酶(alanine amino transferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate amino transferase,AST)水平。HE染色和Masson染色表明,DBWP可改善小鼠肝脏病理形态和纤维化沉积,同时,肝脏中Collagen 1和Collagen 3表达明显降低,纤维化明显改善。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)/金属蛋白酶抑制因子1(metalloproteinase 1,TIMP1)比值明显升高,肝脏对细胞外基质降解能力进一步加强。炎症相关因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达明显降低。结论 DBWP通过抗炎、促进细胞外基质降解改善肝纤维化。

关键词：百合乌药蒲公英肝纤维化炎症细胞外基质

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