检索结果-内蒙古大学图书馆

基因组学与应用生物学 2021年第3期40卷 1324-1330页

作者：王源刘章心怡苏静慧王密斯张荣花熊亚南王梅梅甄永占章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000 中南大学湘雅医学院长沙410013

miR-199a-5p是miRNAs家族的一员。为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)经脂质体转染LX-2细胞... 详细信息

miR-199a-5p是miRNAs家族的一员。为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)经脂质体转染LX-2细胞。采用CCK-8法和Transwell分别检测细胞增殖和迁移能力;集落形成实验检测LX-2细胞的集落形成能力;实时荧光定量PCR技术检测细胞中转染miR-199a-5p后纤维化相关基因α-SMA和CollagenⅠ的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中α-SMA表达水平。结果表明miR-199a-5p可以促进LX-2细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.01)和集落形成(P<0.01);而ASO-199a-5p-5p组细胞增殖(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)和集落形成能力(P<0.01)受到抑制。RTqPCR结果显示miR-199a-5p在受TGF-β1刺激后的LX-2细胞中的miRNA表达水平高于未受刺激组的(P<0.05),转染miR-199a组细胞中α-SMA的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达水平升高。以上结论表明miR-199a-5p过表达能促进肝星状细胞活化、增殖。

关键词： miR-199a-5p 肝星状细胞细胞增殖迁移

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大鼠肝纤维化相关microRNA及其候选靶基因的筛选

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基因组学与应用生物学 2021年第3期40卷 1383-1390页

作者：侯晓丽苏静慧刘章心怡张荣花王一同刘雨潭张海东章广玲华北理工大学临床医学院唐山063000 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000 中南大学湘雅医学院长沙410013 华北理工大学冀唐学院唐山063000

microRNAs(miRNAs)是一类功能性非编码RNA,在多种生物过程中具有重要作用。然而,miRNA的表达模式、调控网络以及参与肝纤维化的miRNA仍有待阐明。为了探讨与肝纤维化相关的miRNA及其靶基因的功能,为临床肝纤维化治疗提供理论依据,本研... 详细信息

microRNAs(miRNAs)是一类功能性非编码RNA,在多种生物过程中具有重要作用。然而,miRNA的表达模式、调控网络以及参与肝纤维化的miRNA仍有待阐明。为了探讨与肝纤维化相关的miRNA及其靶基因的功能,为临床肝纤维化治疗提供理论依据,本研究前期已采用胆管结扎法(BDL)建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型。从大鼠肝脏中提取总RNA,应用基因芯片技术对胆汁淤积性肝纤维化肝组织中miRNA和mRNA表达谱进行综合分析;结合生物信息方法分析在胆汁淤积性肝纤维化中差异表达miRNA可能的靶基因;实时荧光定量PCR技术检测TGF-β1处理人肝星状细胞LX-2细胞中miR-29a-3p、miR-194-5p和miR-22-3p相对表达水平。结果表明,与正常肝组织相比,纤维化肝组织中有48个差异表达miRNA(FC>2,P<0.05),其中36个上调,12个下调;筛选出18个预测靶基因参与与纤维化相关的生物过程;TGF-β1处理LX-2细胞中miR-29a-3p、miR-194-5p和miR-22-3p相对表达水平显著下调(P<0.05)。本研究筛选的差异表达miRNAs通过调节靶基因的表达在肝纤维化中可能发挥重要作用,将为miRNA在肝纤维化中的作用提供新的见解。

关键词：胆汁淤积肝纤维化 miRNA mRNA

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基于BLI技术的脂多糖转运蛋白LptA/LptC相互作用检测方法的建立

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生物工程学报 2021年第9期37卷 3300-3309页

作者：代晓伟朱小红司书毅李妍袁丽杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063210 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所国家新药(微生物)筛选实验室北京100050

革兰阴性菌脂多糖转运蛋白(Lipopolysaccharide transport,Lpt)LptA和LptC通过稳定的相互作用对脂多糖装配起到重要作用,它们相互作用的阻断会导致脂多糖层缺损和菌体死亡,因此具备成为抗菌药物筛选靶标的可行性。文中应用生物膜干涉(Bi... 详细信息

革兰阴性菌脂多糖转运蛋白(Lipopolysaccharide transport,Lpt)LptA和LptC通过稳定的相互作用对脂多糖装配起到重要作用,它们相互作用的阻断会导致脂多糖层缺损和菌体死亡,因此具备成为抗菌药物筛选靶标的可行性。文中应用生物膜干涉(Biolayer interferometry,BLI)技术对LptA/LptC相互作用进行检测,为建立体外的LptA/LptC蛋白相互作用阻断剂筛选方法奠定基础。首先在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行大肠杆菌LptA全长、LptA去信号肽和LptC蛋白的表达;纯化的蛋白使用生物素标记后结合到预先稀释液封闭的超级链霉亲和素(Super streptavidin,SSA)生物传感器,然后再检测与未标记蛋白之间的结合信号,同时做无蛋白的稀释液对照;使用同样的方法检测生物素化蛋白与小分子的结合以及相互作用的阻断;空白对照采用未结合生物素化蛋白的传感器,检测上述系列稀释样品。响应信号采用稳态分析(Steady state analysis)方式拟合,计算样品平衡常数(KD)值。本研究成功获得高纯度的LptA和LptC蛋白,并且检测到结合传感器的LptC蛋白与LptA全长蛋白和LptA去信号肽蛋白均具有良好的结合活性,KD值分别为2.9e–7±7.9e–8、6.0e–7±2.8e–8;结合传感器的LptA去信号肽蛋白与LptC蛋白具有良好的结合活性,KD值为9.6e–7±7.2e–9;所有结合曲线呈现出明显的快结合-快解离形态。小分子化合物IMB-881能够与LptA结合来阻断LptA/LptC之间的相互作用,与LptC之间无结合活性。文中首次建立了基于BLI技术的LptA/LptC相互作用检测方法,并且证实该方法能够用于小分子阻断剂阻断活性的评价,为后续的LptA/LptC蛋白相互作用阻断剂筛选奠定了基础。

关键词：生物膜干涉脂多糖脂多糖转运蛋白 LptA LptC LptA/LptC相互作用

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鳖甲煎丸对胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡和EMT的干预作用

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河北大学学报(自然科学版) 2025年第1期45卷 70-81页

作者：熊亚南李以恒张荣花章广玲刘志勇华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063210 华北理工大学附属医院河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063000

为探讨鳖甲煎丸(biejiajian pill,BJJP)对胰腺癌细胞增殖、凋亡和上皮-间充质转化(EMT)的干预作用.采用CCK-8、集落形成、Western blot、TUNEL划痕、Transwell和免疫荧光等实验方法检测BJJP含药血清对人正常胰腺导管上皮细胞HPNE活力的... 详细信息

为探讨鳖甲煎丸(biejiajian pill,BJJP)对胰腺癌细胞增殖、凋亡和上皮-间充质转化(EMT)的干预作用.采用CCK-8、集落形成、Western blot、TUNEL划痕、Transwell和免疫荧光等实验方法检测BJJP含药血清对人正常胰腺导管上皮细胞HPNE活力的影响,对胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡、迁移、侵袭、EMT以及PI3K/AKT通路蛋白表达的影响.结果显示:BJJP含药血清对HPNE细胞的活力无明显影响,具有抑制PANC-1细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT进程的能力,促进了PANC-1细胞凋亡,抑制了PI3K/AKT通路,综上,鳖甲煎丸能抑制胰腺癌PANC-1细胞的恶性生物学行为,其机制可能与调节PI3K/AKT通路有关.

关键词：鳖甲煎丸胰腺癌增殖凋亡上皮-间充质转化

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维生素D调节多囊卵巢综合征大鼠的炎症状态

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承德医学院学报 2022年第2期39卷 95-102页

作者：马思琪孙婷曲银娥苏兴宁艳春韩宝生华北理工大学临床医学院河北唐山063210 华北理工大学基础医学院唐山市妇幼保健院生殖遗传科河北省慢性疾病基础医学重点实验室

目的探讨维生素D对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠炎症状态的影响。方法24只3周龄雌性SD大鼠随机分为对照组、PCOS组、VD治疗组(PCOS+VD),每组8只。后2组每日灌胃1mg/kg来曲唑,高脂饲料喂养,对照组灌胃同体积0.5%羧甲纤维素钠,普通颗粒饲料... 详细信息

目的探讨维生素D对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠炎症状态的影响。方法24只3周龄雌性SD大鼠随机分为对照组、PCOS组、VD治疗组(PCOS+VD),每组8只。后2组每日灌胃1mg/kg来曲唑,高脂饲料喂养,对照组灌胃同体积0.5%羧甲纤维素钠,普通颗粒饲料喂养。连续28d后,PCOS+VD组每日灌胃200IU/kg VD,对照组和PCOS组灌胃同体积玉米油,普通颗粒饲料喂养。给药21d后取血及卵巢。ELISA测定血清25-(OH)D、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-(TNF-α)、c反应蛋白(CRP)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),western blot检测卵巢组织IL-6、IL-17、TNF-α、CRP蛋白,HE染色观察卵巢组织形态学变化。结果PCOS组血清25-(OH)D较对照组降低(P<0.05),血清T、LH、FPG、FIN水平均升高(P<0.05),血清及卵巢组织IL-6、IL-17、TNF-α、CRP含量均升高(P<0.05),动情周期紊乱,卵巢呈多囊样改变。PCOS+VD组血清25-(OH)D升高,T、LH、IL-6、IL-17、TNF-α、CRP、FPG、FIN均降低,除血清TNF-α外,差异均有统计学意义,动情周期紊乱得到改善,颗粒细胞层数增多,排列整齐,囊状卵泡数量减少。结论VD降低PCOS大鼠炎症因子含量,改善炎症状态。

关键词：多囊卵巢综合征维生素D 炎症因子

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刺五加苷B抗肿瘤作用方式研究进展

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华北理工大学学报（医学版） 2022年第1期24卷 80-84页

作者：孙尚凡陈静华北理工大学基础医学院(河北省慢性疾病基础医学重点实验室) 河北唐山063210 华北理工大学生命科学学院

癌症是一种慢性疾病,其死亡率和发病率在中国乃至世界范围内均呈现上升的趋势。2018年全球新发癌症病例1810万,死亡960万。中国每年新增约360万例癌症病例,死亡人数高达220万人。癌症是现阶段人类死亡的主要原因,对世界各国人民生活水... 详细信息

癌症是一种慢性疾病,其死亡率和发病率在中国乃至世界范围内均呈现上升的趋势。2018年全球新发癌症病例1810万,死亡960万。中国每年新增约360万例癌症病例,死亡人数高达220万人。癌症是现阶段人类死亡的主要原因,对世界各国人民生活水平和质量的提高构成严重威胁[1]。本文在参阅国内外大量文献的基础上,阐述了刺五加苷B抗肿瘤的作用方式。1 刺五加及刺五加苷B概述刺五加(五加科)属于五加科人参科,但在植物学上与真正的人参不同。

关键词：刺五加苷B 肿瘤抗血管生成免疫调节

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基于PRV-copGFP的伪狂犬病毒快速中和抗体效价检测方法的建立

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病毒学报 2025年第3期 825-834页

作者：李晨雨马琦王冰丹王菲冯霞张晓光李红霞马晶郝彦哲李淑英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室华北理工大学公共卫生学院

本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术，将桡足纲绿色荧光蛋白（copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP）基因表达盒... 详细信息

本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术，将桡足纲绿色荧光蛋白（copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP）基因表达盒精确嵌入PRV基因组的UL40/41区域，经过多轮筛选与纯化，成功构建了重组病毒PRV-copGFP。生长特性对比实验表明，PRV-copGFP与野生型PRV-Bartha之间无显著差异（P>0.05）。借助CTL-ImmunoSpot?S6仪器计数表达copGFP的细胞数目，确定了最佳观测时间和最佳病毒滴度。该方法可精确计算中和抗体效价，并通过传统噬斑减少中和试验（Plaque reduction neutralization test, PRNT）进行验证。与传统方法相比，本检测方法将检测窗口缩短至10h，且通量显著提升。本方法在快速评估PRV中和抗体效价方面具有显著优势，可为PRV疫苗研发、疾病防控及相关研究提供有力的技术支持。

关键词：伪狂犬病病毒(PRV) 中和抗体效价桡足纲绿色荧光蛋白(copGFP) 重组病毒快速检测

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2023年3～6月虞城急性呼吸道感染病例的病原体调查

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中华实验和临床病毒学杂志 2025年第2期39卷 189-194页

作者：文琦杨华荣罗琴陈泽石强强杜海军高晨梅国勇韩俊宋芹芹李淑英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山河南省虞城县疾病预防控制中心商丘中国疾控预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京

目的分析2023年3～6月河南省商丘市虞城县急性呼吸道感染(ARI)病例的病原谱构成及流行特征。方法收集的1 153份ARI患者的咽拭子使用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法进行18种常见呼吸道病原体检测, 并分析病原谱特征。结果虞城地区... 详细信息

目的分析2023年3～6月河南省商丘市虞城县急性呼吸道感染(ARI)病例的病原谱构成及流行特征。方法收集的1 153份ARI患者的咽拭子使用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法进行18种常见呼吸道病原体检测, 并分析病原谱特征。结果虞城地区2023年3～6月共收集1 153份ARI患者的咽拭子, 其中门诊患者171例、住院患者982例。共检出常见呼吸道病原体阳性样本(检出至少一种病原体)244份, 呼吸道病原体总检出率为21.16%, 检出率前三位依次为:人博卡病毒(HBoV)、肠道病毒(EV)、人副流感病毒(HPIV)。在采样时间方面, 病原体主要检出月份为5月, 检出率为42.3%(60/142), 检出呼吸道病原体主要为HBoV、EV、HPIV。在年龄组方面, 检出率最高为<1岁组, 检出率为25.1%(49/195), 检出呼吸道病原体主要为HBoV、呼吸道合胞病毒(RSV)、HPIV。呼吸道病原体阳性患者主要临床表现为发热和咳嗽, 临床诊断主要为下呼吸道感染, 均为住院患者。结论河南虞城地区2023年3～6月ARI患者高发的呼吸道病原体主要为HBoV、EV、HPIV。5月份为流行高峰, 主要感染5岁以下儿童。

关键词：急性呼吸道感染呼吸道病原体流行病学

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MCU及复合物与人类相关疾病的研究进展

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天津医科大学学报 2022年第4期28卷 448-451页

作者：赵杨王培杨颖(综述) 习瑾昆贺永贵(审校) 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063000 华北理工大学公共卫生学院唐山063000 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000

线粒体的Ca^(2+)调节对生物能量学和细胞信号传递极为重要。大量研究表明,线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)是位于线粒体内膜上的蛋白质,参与线粒体的Ca^(2+)摄入过程。在某些病理条件下,MCU功能障碍会导致细胞功能紊乱,线粒体功能受损,... 详细信息

线粒体的Ca^(2+)调节对生物能量学和细胞信号传递极为重要。大量研究表明,线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)是位于线粒体内膜上的蛋白质,参与线粒体的Ca^(2+)摄入过程。在某些病理条件下,MCU功能障碍会导致细胞功能紊乱,线粒体功能受损,进而引起细胞凋亡。而MCU复合物是一个四聚体通道,促进Ca^(2+)由线粒体内膜向基质顺电化学梯度转运。MCU摄入Ca^(2+)的过程也需要MCU复合物中其它调节蛋白协同作用。MCU及其复合物在多种临床疾病如癌症、心脏相关疾病、神经性疾病中发挥关键作用。

关键词： Ca^(2+) MCU MCU复合物癌症心肌疾病神经性疾病

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应用iTRAQ-MRM-R语言策略筛选膀胱尿路上皮癌尿液差异蛋白

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第三军医大学学报 2021年第10期43卷 982-988页

作者：王琳瑶李常颖李建民李宏杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063210 天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室天津300211

目的构建膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)尿液差异蛋白数据集,筛选核心差异蛋白并初步验证。方法于2015年1月至2016年11月在天津医科大学第二医院泌尿外科住院病房,采集膀胱上皮癌患者术前尿液标本78例,其中男性55人... 详细信息

目的构建膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)尿液差异蛋白数据集,筛选核心差异蛋白并初步验证。方法于2015年1月至2016年11月在天津医科大学第二医院泌尿外科住院病房,采集膀胱上皮癌患者术前尿液标本78例,其中男性55人,女性23人,年龄(68.9±6.6)岁。同时收集51例健康志愿者尿液标本用于对照组分析,其中男性34人,女性17人,年龄(60.6±11.0)岁。采用同位素相对标记和绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)对BUC组混合尿液样本4例和对照组混合尿液样本2例,共6例尿液混合标本进行比较蛋白质组学研究,找出两组间的尿液差异蛋白,选取差异倍数前20的差异蛋白进行质谱多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)技术验证;应用R语言cluster profiler包等进行差异蛋白的京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析、应用R语言的***包等进行基因本体(Gene ontology,GO)分析,初步选取有意义的差异蛋白,构建BUC尿液差异蛋白数据集。应用R语言绘制蛋白间相互作用(protein protein interaction,PPI)图,筛选核心差异蛋白。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)验证核心差异蛋白在尿液中的差异存在。结果通过分析得到101个BUC尿液差异蛋白,其中37个蛋白表达上调,64个蛋白表达下调。MRM检测到10个差异蛋白;KEGG分析显示差异蛋白显著富集在其他聚糖降解,补体和凝血级联这两个代谢通路,包含11个差异蛋白;GO分析显示差异蛋白主要参与细胞黏附分子结合、羧酸结合、有机酸结合、糖胺聚糖结合、肽链内切酶激活等生物过程,涉及54个差异蛋白;三者共同构成BUC尿液差异蛋白数据集,包括69个蛋白。通过蛋白互作分析筛选出APOE和APOA4为核心差异蛋白。ELISA结果显示:BUC组和对照组的APOE平均浓度分别为0.55和0.30 pg/mL。BUC组和对照组的APOA4平均浓度分别为3.33和7.01 ng/mL。与对照组相比,BUC组尿液中APOE和APOA4浓度均增高,差异有统计显著性(P<0.05)。结论应用iTRAQ-MRM-R语言策略可以辅助构建BUC尿液差异蛋白数据集,并进一步筛选出核心差异蛋白,为BUC的诊断及治疗提供新的靶点。

关键词： iTRAQ MRM R语言 KEGG富集分析 GO富集分析蛋白质相互作用

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