检索结果-内蒙古大学图书馆

1株发光杆菌Photorhabdus asymbiotica的次级代谢产物研究

中国抗生素杂志 2022年第7期47卷 677-681页

作者：卢宇闫璧滢陈渝川朱小红李妍司书毅陈明华袁丽杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063210 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050

目的研究1株发光杆菌Photorhabdus asymbiotica抗革兰阴性菌的活性次级代谢产物。方法以抗革兰阴性菌活性为导向,采用大孔吸附树脂、MCI柱色谱,以及反相高效液相色谱等多种分离纯化技术,利用HR-ESIMS和NMR等波谱学方法,分离Photorhabdus... 详细信息

目的研究1株发光杆菌Photorhabdus asymbiotica抗革兰阴性菌的活性次级代谢产物。方法以抗革兰阴性菌活性为导向,采用大孔吸附树脂、MCI柱色谱,以及反相高效液相色谱等多种分离纯化技术,利用HR-ESIMS和NMR等波谱学方法,分离Photorhabdus asymbiotica发酵液中的化合物并鉴定其结构。结果从菌株Photorhabdus asymbiotica中获得3个次级代谢产物,并鉴定为darobactin(1)、环(L-色氨酸-L-脯氨酸)(2)和环(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(3)。其中化合物1对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌均具有显著的抗菌活性。结论化合物1为发光杆菌Photorhabdus asymbiotica中主要的抗革兰阴性菌活性化学成分。

关键词：发光杆菌 Darobactin 肽类抗革兰阴性菌活性

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肝特异性敲除Yes相关蛋白基因可通过抗氧化作用改善小鼠的肝纤维化

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中国临床药理学杂志 2021年第17期37卷 2316-2319页

作者：陈雅静郝鹏代玉娇宋宏宇李一达高明明李爽薛丽会齐亚娟华北理工大学药学院华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室

目的探讨肝特异性敲除Yes相关蛋白（YAP）基因对CCl4诱发的肝纤维化的改善作用机制。方法按照体重将肝特异性敲除YAP基因小鼠随机分为4组:正常-1组、模型-1组、正常-2组和模型-2组,每组10只。模型组小鼠腹腔注射20%四氯化碳制备肝纤维... 详细信息

目的探讨肝特异性敲除Yes相关蛋白（YAP）基因对CCl4诱发的肝纤维化的改善作用机制。方法按照体重将肝特异性敲除YAP基因小鼠随机分为4组:正常-1组、模型-1组、正常-2组和模型-2组,每组10只。模型组小鼠腹腔注射20%四氯化碳制备肝纤维化模型;正常组小鼠注射等量生理盐水。6周后取材。用试剂盒法检测小鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量,用逆转录-聚合酶链和蛋白质印迹法分别检测小鼠肝中YAP以及纤维化因子的基因或蛋白表达水平。结果正常-1组、模型-1组、正常-2组和模型-2组的SOD含量分别为（13.01±3.35）,（7.36±1.76）,（20.67±2.37）和（17.80±2.17）U·mg-1;MDA含量分别为（0.04±0.01）,（0.10±0.01）,（0.07±0.02）和（0.04±0.01）U·mg-1;Collagen fiber1蛋白相对表达分别为1.24±0.52,3.41±0.56,1.19±0.42和1.17±0.52;α-SMA蛋白的相对表达分别为1.30±0.55,3.99±0.49,0.75±0.05和1.12±0.53。模型-1组与正常-1组相比,小鼠肝SOD的蛋白含量明显下降,而MDA、Collagen fiber1和α-SMA的蛋白含量明显增加;模型-2组与模型-1组比较,小鼠肝中SOD的蛋白含量明显上升,而MDA、Collagen fiber1和α-SMA的蛋白表达明显减少。组间比较,上述指标的差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论肝特异性敲除YAP基因可通过抗氧化作用改善CCl4诱发的肝纤维化。

关键词：肝纤维化 Yes相关蛋白超氧化物歧化酶丙二醛四氯化碳

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刺五加苷B影响EMT进程抑制肺癌细胞迁移和侵袭的机制研究

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中医药信息 2023年第12期40卷 29-34页

作者：曹雪婷陈静华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063210 华北理工大学生命科学学院河北唐山063210

目的:探讨刺五加苷B对人肺癌A549和H460细胞迁移侵袭的影响。方法:采用不同浓度的刺五加苷B(0、5、15、20、25、30、35、40、45 mmol/L)作用肺癌细胞A549和H460,同时设置对照组和空白组,筛选出最佳作用浓度。用最佳药物浓度刺五加苷B作... 详细信息

目的:探讨刺五加苷B对人肺癌A549和H460细胞迁移侵袭的影响。方法:采用不同浓度的刺五加苷B(0、5、15、20、25、30、35、40、45 mmol/L)作用肺癌细胞A549和H460,同时设置对照组和空白组,筛选出最佳作用浓度。用最佳药物浓度刺五加苷B作用肺癌细胞进行细胞划痕实验、Transwell迁移侵袭实验,观察细胞划痕面积变化和穿过Transwell小室的细胞数量,探究刺五加苷B对肺癌细胞A549和H460迁移和侵袭的影响。应用Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、Slug、Snail表达情况,探究刺五加苷B对肺癌A549和H460细胞上皮间质转化的作用。结果:刺五加苷B明显抑制肺癌A549和H460细胞划痕面积减少,穿过Transwell小室和基质胶的细胞数量减少。与对照组相比刺五加苷B明显上调上皮标志E-cadherin蛋白表达,并发现EMT转录因子Slug和Snail表达水平显著降低。结论:刺五加苷B能明显抑制肺癌A549和H460细胞生长、并通过影响EMT进程抑制细胞迁移侵袭。

关键词：刺五加苷B 肺癌 EMT 迁移侵袭

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MiR-199a-5p对肝星状细胞活化增殖的影响

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基因组学与应用生物学 2021年第3期40卷 1324-1330页

作者：王源刘章心怡苏静慧王密斯张荣花熊亚南王梅梅甄永占章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000 中南大学湘雅医学院长沙410013

miR-199a-5p是miRNAs家族的一员。为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)经脂质体转染LX-2细胞... 详细信息

miR-199a-5p是miRNAs家族的一员。为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)经脂质体转染LX-2细胞。采用CCK-8法和Transwell分别检测细胞增殖和迁移能力;集落形成实验检测LX-2细胞的集落形成能力;实时荧光定量PCR技术检测细胞中转染miR-199a-5p后纤维化相关基因α-SMA和CollagenⅠ的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中α-SMA表达水平。结果表明miR-199a-5p可以促进LX-2细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.01)和集落形成(P<0.01);而ASO-199a-5p-5p组细胞增殖(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)和集落形成能力(P<0.01)受到抑制。RTqPCR结果显示miR-199a-5p在受TGF-β1刺激后的LX-2细胞中的miRNA表达水平高于未受刺激组的(P<0.05),转染miR-199a组细胞中α-SMA的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达水平升高。以上结论表明miR-199a-5p过表达能促进肝星状细胞活化、增殖。

关键词： miR-199a-5p 肝星状细胞细胞增殖迁移

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MiR-1-3p通过CAAP1抑制肝癌细胞HepG2的生物学行为

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基因组学与应用生物学 2021年第9期40卷 3344-3350页

作者：侯晓丽卢鸿健苏静慧王一同刘雨潭王梅梅张荣花章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000 华北理工大学公共卫生学院唐山063000 华北理工大学临床医学院唐山063000

为探讨miR-1-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的细胞生物学行为的影响,本研究通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-1-3p在肝癌细胞和正常肝细胞中的表达水平;miR-1-3p过表达载体、miR-1-3p inhibitor分别转染HepG2细胞,RT-qPCR实验检测转染后miR-1-3p表达水平;通过CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术、Western blot实验、划痕实验和Transwell实验研究miR-1-3p对HepG2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响;利用生物信息学技术预测miR-1-3p的靶基因,并通过双荧光素报告实验对miR-1-3p的靶基因进行验证;RT-qPCR和Western blot实验检测miR-1-3p对CAAP1 mRNA及蛋白的表达影响。结果显示miR-1-3p在HepG2细胞系中的表达明显低于正常肝细胞LO2(P<0.05),体外细胞学实验结果显示,过表达miR-1-3p能够显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进凋亡,而下调miR-1-3p的表达则作用相反,双荧光素报告实验表明miR-1-3p过表达显著抑制野生型荧光素酶活性,RT-qPCR和Western blot结果显示miR-1-3p过表达显著抑制CAAP1表达,进而抑制其蛋白表达。本研究初步表明,miR-1-3p可能通过调控其靶基因CAAP1抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移,miR-1-3p可能是一种新的治疗肝癌的小分子靶点。

关键词： miR-1-3p 肝癌细胞增殖凋亡侵袭

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大鼠肝纤维化相关microRNA及其候选靶基因的筛选

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基因组学与应用生物学 2021年第3期40卷 1383-1390页

作者：侯晓丽苏静慧刘章心怡张荣花王一同刘雨潭张海东章广玲华北理工大学临床医学院唐山063000 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000 中南大学湘雅医学院长沙410013 华北理工大学冀唐学院唐山063000

microRNAs(miRNAs)是一类功能性非编码RNA,在多种生物过程中具有重要作用。然而,miRNA的表达模式、调控网络以及参与肝纤维化的miRNA仍有待阐明。为了探讨与肝纤维化相关的miRNA及其靶基因的功能,为临床肝纤维化治疗提供理论依据,本研... 详细信息

microRNAs(miRNAs)是一类功能性非编码RNA,在多种生物过程中具有重要作用。然而,miRNA的表达模式、调控网络以及参与肝纤维化的miRNA仍有待阐明。为了探讨与肝纤维化相关的miRNA及其靶基因的功能,为临床肝纤维化治疗提供理论依据,本研究前期已采用胆管结扎法(BDL)建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型。从大鼠肝脏中提取总RNA,应用基因芯片技术对胆汁淤积性肝纤维化肝组织中miRNA和mRNA表达谱进行综合分析;结合生物信息方法分析在胆汁淤积性肝纤维化中差异表达miRNA可能的靶基因;实时荧光定量PCR技术检测TGF-β1处理人肝星状细胞LX-2细胞中miR-29a-3p、miR-194-5p和miR-22-3p相对表达水平。结果表明,与正常肝组织相比,纤维化肝组织中有48个差异表达miRNA(FC>2,P<0.05),其中36个上调,12个下调;筛选出18个预测靶基因参与与纤维化相关的生物过程;TGF-β1处理LX-2细胞中miR-29a-3p、miR-194-5p和miR-22-3p相对表达水平显著下调(P<0.05)。本研究筛选的差异表达miRNAs通过调节靶基因的表达在肝纤维化中可能发挥重要作用,将为miRNA在肝纤维化中的作用提供新的见解。

关键词：胆汁淤积肝纤维化 miRNA mRNA

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基于BLI技术的脂多糖转运蛋白LptA/LptC相互作用检测方法的建立

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生物工程学报 2021年第9期37卷 3300-3309页

作者：代晓伟朱小红司书毅李妍袁丽杰华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063210 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所国家新药(微生物)筛选实验室北京100050

革兰阴性菌脂多糖转运蛋白(Lipopolysaccharide transport,Lpt)LptA和LptC通过稳定的相互作用对脂多糖装配起到重要作用,它们相互作用的阻断会导致脂多糖层缺损和菌体死亡,因此具备成为抗菌药物筛选靶标的可行性。文中应用生物膜干涉(Bi... 详细信息

革兰阴性菌脂多糖转运蛋白(Lipopolysaccharide transport,Lpt)LptA和LptC通过稳定的相互作用对脂多糖装配起到重要作用,它们相互作用的阻断会导致脂多糖层缺损和菌体死亡,因此具备成为抗菌药物筛选靶标的可行性。文中应用生物膜干涉(Biolayer interferometry,BLI)技术对LptA/LptC相互作用进行检测,为建立体外的LptA/LptC蛋白相互作用阻断剂筛选方法奠定基础。首先在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行大肠杆菌LptA全长、LptA去信号肽和LptC蛋白的表达;纯化的蛋白使用生物素标记后结合到预先稀释液封闭的超级链霉亲和素(Super streptavidin,SSA)生物传感器,然后再检测与未标记蛋白之间的结合信号,同时做无蛋白的稀释液对照;使用同样的方法检测生物素化蛋白与小分子的结合以及相互作用的阻断;空白对照采用未结合生物素化蛋白的传感器,检测上述系列稀释样品。响应信号采用稳态分析(Steady state analysis)方式拟合,计算样品平衡常数(KD)值。本研究成功获得高纯度的LptA和LptC蛋白,并且检测到结合传感器的LptC蛋白与LptA全长蛋白和LptA去信号肽蛋白均具有良好的结合活性,KD值分别为2.9e–7±7.9e–8、6.0e–7±2.8e–8;结合传感器的LptA去信号肽蛋白与LptC蛋白具有良好的结合活性,KD值为9.6e–7±7.2e–9;所有结合曲线呈现出明显的快结合-快解离形态。小分子化合物IMB-881能够与LptA结合来阻断LptA/LptC之间的相互作用,与LptC之间无结合活性。文中首次建立了基于BLI技术的LptA/LptC相互作用检测方法,并且证实该方法能够用于小分子阻断剂阻断活性的评价,为后续的LptA/LptC蛋白相互作用阻断剂筛选奠定了基础。

关键词：生物膜干涉脂多糖脂多糖转运蛋白 LptA LptC LptA/LptC相互作用

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Ac-SDKP对炎性因子MRP-14(S100A9)的调节在硅肺大鼠纤维化病变中的作用

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西安交通大学学报（医学版） 2020年第1期41卷 69-73页

作者：邓海静王瑾侯晓丽高学敏杨方华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过抑制炎性因子髓系相关蛋白14(myeloid-related protein14,MRP-14)以及胶原蛋白的表达,从而阻抑硅肺大鼠纤维化病变中硅结节的形成和胶原蛋白的沉积。方法采用一次性支... 详细信息

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否通过抑制炎性因子髓系相关蛋白14(myeloid-related protein14,MRP-14)以及胶原蛋白的表达,从而阻抑硅肺大鼠纤维化病变中硅结节的形成和胶原蛋白的沉积。方法采用一次性支气管灌注二氧化硅(SiO 2)粉尘的方法制备大鼠硅肺动物模型,60只SPF级健康成年大鼠随机分为对照4周组、对照8周组、硅肺模型4周组、硅肺模型8周组、Ac-SDKP预防治疗组和Ac-SDKP抗纤维化治疗组,每组10只。免疫组织化学技术检测MRP-14蛋白在硅肺模型组织内的定位表达;Western blot法检测MRP-14以及胶原蛋白在硅肺模型组织内的表达。结果与相应的对照组相比,硅肺模型组大鼠硅肺纤维化区域MRP-14和胶原蛋白的表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。与硅肺模型8周组相比,给予Ac-SDKP干预后MRP-14和胶原蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Ac-SDKP可通过抑制炎性因子MRP-14的表达而发挥其抗硅肺纤维化的作用。

关键词： N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP) 髓系相关蛋白14 胶原蛋白硅结节硅肺纤维化

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西藏沙棘根瘤及根际土壤放线菌分离及抗菌活性研究

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生物技术通报 2021年第11期37卷 225-236页

作者：罗亚军孙红敏何宁袁丽杰解云英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063210 中国医学科学院药物合成生物学重点实验室中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050

探索西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤样品中放线菌的多样性及抗菌活性,为天然产物药物研发提供新的微生物资源。采用稀释涂布法对10份样品中可培养放线菌进行分离,后经菌株16S rRNA序列测序,以邻接法(neighbor-joining method,N... 详细信息

探索西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤样品中放线菌的多样性及抗菌活性,为天然产物药物研发提供新的微生物资源。采用稀释涂布法对10份样品中可培养放线菌进行分离,后经菌株16S rRNA序列测序,以邻接法(neighbor-joining method,N-J)构建系统发育树分析放线菌种属多样性;利用微孔板法对代表性菌株进行发酵培养及抗菌活性评价;进一步利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)考察活性菌株代谢产物情况。从10份样品中分离到112株放线菌,分属于7个目12科23个属,优势菌属为链霉菌属(Streptomyces);抗菌活性结果表明有17株放线菌至少对一种检定菌有抗菌活性,阳性抑菌率为36.9%。有16株放线菌对临床常见的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)有较强抑制活性,其中13株放线菌对MRSA抑制率超过阳性对照药万古霉素;另外有7株放线菌对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)有抑制活性,其中Streptomyces ***19-363对CRAB抑菌作用最强,抑制率为91.3%,UPLC-MS分析显示,具有广谱抗菌活性的菌株在不同培养基中产生了较为丰富的次级代谢产物。西藏林芝与山南地区沙棘根瘤及其根际土壤中可培养放线菌资源丰富多样,同时具有较好的抗菌活性且代谢产物丰富。

关键词：沙棘根瘤根际土壤放线菌抗菌活性

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miR-1-3p抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移并诱导其凋亡

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重庆医学 2021年第21期50卷 3622-3628页

作者：刘雨潭孔艺璇王一同苏静慧卢鸿健王梅梅熊亚南章广玲河北省慢性疾病重点实验室/唐山市慢性病临床基础研究重点实验室/华北理工大学基础医学院河北唐山063000 华北理工大学临床医学院河北唐山063000 河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063000

目的探讨在肝癌细胞SMMC-7721中微小RNA(miR)-1-3p的表达变化对其增殖、迁移和凋亡的影响及miR-1-3p的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1-3p和CAAP1的相对表达量;SMMC-7721细胞按miR-1-3p过表达载体(miR-1... 详细信息

目的探讨在肝癌细胞SMMC-7721中微小RNA(miR)-1-3p的表达变化对其增殖、迁移和凋亡的影响及miR-1-3p的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1-3p和CAAP1的相对表达量;SMMC-7721细胞按miR-1-3p过表达载体(miR-1-3p组)、pcDNA3组、miR-1-3p inhibitor组和NC inhibitor组(对照组)分别转染,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8实验检测细胞增殖能力,克隆形成实验观察并比较组间克隆形成率,流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡及CAAP1蛋白表达,划痕和Transwell实验观察SMMC-7721迁移和侵袭。利用miRDB、TargetScan、miRanda数据库预测miR-1-3p靶基因,双荧光素酶报告验证miR-1-3和CAAP1靶向性。结果miR-1-3p在SMMC-7721细胞中的表达明显低于正常肝细胞LO2,差异有统计学意义(P<0.05);miR-1-3p上调,SMMC-7721增殖、迁移和侵袭能力显著下降,凋亡显著增强,而下调miR-1-3p的表达则作用相反;miR-1-3p和CAAP1具有靶向性;miR-1-3p过表达明显抑制CAAP1表达。结论miR-1-3p上调可能通过与CAAP1的3′-UTR结合抑制SMMC-7721细胞增殖、侵袭、迁移。

关键词：肝肿瘤肝癌细胞增殖迁移凋亡 miR-1-3p

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