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2018—2022年我国H5亚型禽流感的流行特点及防控

中国家禽 2024年第1期46卷 90-96页

作者：尤博文陈禧悦廖明代曼曼华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广东广州510642

H5亚型高致病性禽流感在我国频繁发生,对我国养禽业造成严重危害,同时亦对我国公共卫生带来了巨大挑战。近年来,随着H5亚型禽流感病毒的不断进化,其在我国的流行情况也发生了一定变化。文章对2018年1月—2022年11月我国暴发的H5亚型禽... 详细信息

H5亚型高致病性禽流感在我国频繁发生,对我国养禽业造成严重危害,同时亦对我国公共卫生带来了巨大挑战。近年来,随着H5亚型禽流感病毒的不断进化,其在我国的流行情况也发生了一定变化。文章对2018年1月—2022年11月我国暴发的H5亚型禽流感相关公共数据进行分析,并结合血清学和病原学的监测数据,阐述了H5亚型禽流感病毒传播与进化过程、流行情况和特点,以期为我国H5亚型禽流感的防控提供理论依据。

关键词： H5亚型禽流感流行特点防控

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细菌耐药性的系统性防控：从新机制到新策略

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生物技术通报 2022年第9期38卷 1-3页

作者：孙坚刘雅红华南农业大学兽医学院国家兽医微生物耐药性风险评估实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室

抗菌药在防治人和动物疾病、促进养殖业持续健康发展中起着举足轻重的作用，然而随着其在临床治疗与农业生产中的广泛使用甚至滥用，细菌耐药性问题日益突出。2015年6月，联合国粮食及农业组织（FAO）继世界动物卫生组织（OIE）与世界... 详细信息

抗菌药在防治人和动物疾病、促进养殖业持续健康发展中起着举足轻重的作用，然而随着其在临床治疗与农业生产中的广泛使用甚至滥用，细菌耐药性问题日益突出。2015年6月，联合国粮食及农业组织（FAO）继世界动物卫生组织（OIE）与世界卫生组织（WHO）之后，通过了一项关于抗微生物药物耐药性的决议，意味着抗击细菌耐药性已经成为全球性的共识。

关键词：细菌耐药性系统性防控新机制

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异丙氧苯胍联合黏菌素对肺炎克雷伯菌体外协同抗菌作用

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畜牧兽医学报 2024年第12期55卷 5792-5801页

作者：吴素娟林昌成万鹏李杰陆毅兴胡健欣彭险峰曾振灵华南农业大学兽医学院广州510642 广东省兽药研制与安全评价重点实验室广州510642 国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广州510642 广东英赛特生物技术有限公司广州510000

旨在研究异丙氧苯胍与黏菌素的协同抗菌能力及初步联合作用机制,评估异丙氧苯胍是否能作为一种有效的黏菌素增效剂,增强黏菌素抗菌效果,以期为临床上多重耐药肺炎克雷伯菌感染提供有效治疗的理论依据。本研究通过异丙氧苯胍与黏菌素对... 详细信息

旨在研究异丙氧苯胍与黏菌素的协同抗菌能力及初步联合作用机制,评估异丙氧苯胍是否能作为一种有效的黏菌素增效剂,增强黏菌素抗菌效果,以期为临床上多重耐药肺炎克雷伯菌感染提供有效治疗的理论依据。本研究通过异丙氧苯胍与黏菌素对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度、棋盘试验、时间杀菌曲线、耐药性诱导和荧光染料试验对协同抗菌及初步联合机制进行研究。结果显示:异丙氧苯胍单用对肺炎克雷伯菌没有抗菌活性,但与黏菌素联用可对肺炎克雷伯菌产生协同作用,与阿莫西林联用时具有相加作用。时间杀菌曲线表明,两药联合使用时,异丙氧苯胍可增强肺炎克雷伯菌对黏菌素的敏感性,细菌数量与黏菌素单药作用相比下降>2 lg(CFU·mL^(-1)),具有协同作用。在长期诱导耐药性试验中,较黏菌素单药组、联合用药组中黏菌素更不易诱导产生耐药性。协同作用机制试验结果表明,黏菌素与异丙氧苯胍联合使用时,可以破坏细胞质膜通透性,影响细胞膜电势,消散质子动力势能,使细胞膜难以发挥正常功能。本研究发现异丙氧苯胍与低浓度黏菌素联用对肺炎克雷伯菌具有良好协同抗菌活性,增强黏菌素的抗菌作用。综上表明,异丙氧苯胍可以恢复多重耐药肺炎克雷伯菌对黏菌素的敏感性,可作为治疗肺炎克雷伯菌感染的潜在治疗方案。

关键词：肺炎克雷伯菌 mcr 异丙氧苯胍黏菌素协同抗菌活性

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广东省某屠宰场猪源肠球菌的分离鉴定及耐药性和毒力基因分析

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中国畜牧兽医 2023年第11期50卷 4714-4723页

作者：张永祥胡健欣陆毅兴胡悦莹卢嘉璇辛琳曾振灵曾东平华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室广州510642 国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广州510642

【目的】了解猪源性肠球菌分离株的耐药情况及毒力因子携带情况,为肠球菌的耐药监测提供数据支持并为制定合理的治疗方案提供科学依据。【方法】本研究对广州市某大型屠宰场屠宰环节156份猪小肠样品进行肠球菌的分离培养、革兰染色、PC... 详细信息

【目的】了解猪源性肠球菌分离株的耐药情况及毒力因子携带情况,为肠球菌的耐药监测提供数据支持并为制定合理的治疗方案提供科学依据。【方法】本研究对广州市某大型屠宰场屠宰环节156份猪小肠样品进行肠球菌的分离培养、革兰染色、PCR鉴定,采用琼脂扩散法对菌株进行14种抗菌药物和2种消毒剂的最小抑菌浓度(MIC)测定,利用PCR技术检测耐药基因、毒力基因和消毒剂抗性基因的携带情况。【结果】本研究分离到84株肠球菌(分离率为53.85%),包括44株粪肠球菌和40株屎肠球菌;分离培养可见菌落边缘光滑整齐、圆形或卵圆形排列、菌落周围培养基呈现黑色的菌落;疑似菌落革兰染色后呈圆形的革兰阳性球菌,单个或成堆排列在一起。对疑似菌落DNA进行PCR扩增,其中粪肠球菌引物扩增出大小约941 bp的条带,16S rRNA引物扩增出大小约1500 bp的条带。药敏试验结果显示,44株粪肠球菌对克林霉素、多西环素、头孢噻呋、庆大霉素、红霉素、苯扎氯铵和氟苯尼考的耐药率较高,分别为97.7%、90.9%、88.6%、88.6%、81.8%、81.8%和77.3%;40株屎肠球菌对克林霉素、头孢噻呋、多西环素、庆大霉素、氟苯尼考和红霉素的耐药率分别为90.0%、90.0%、85.0%、77.5%、72.5%和67.5%。毒力基因与消毒剂抗性基因检测结果显示,粪肠球菌efa、gelE、fsrC毒力基因的检出率较高,分别为95.5%、84.1%和84.1%;emeA、gsp 65消毒剂抗性基因的检出率较高,分别为95.5%和90.9%。屎肠球菌仅检测到fsrB毒力基因,检出率为2.5%,无消毒剂抗性基因的检出。【结论】本研究分离的猪源肠球菌对大部分抗菌药物具有较高的耐药率,部分菌株还对利奈唑胺产生耐药,亟需加强对猪源肠球菌的流行病学监测。

关键词：肠球菌耐药性毒力基因抗菌药物消毒剂抗性基因

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紫外线与杀菌增效剂联合应用的研究进展

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中国兽医杂志 2023年第10期59卷 105-109页

作者：何慧灵黄海梅严楚江析昕崔泽华任昊廖晓萍刘雅红孙坚岭南现代农业科学与技术广东省实验室广东广州510006 华南农业大学兽医学院国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广东广州510642 华南农业大学兽医学院广东广州510642 广州市白云区畜牧兽医站广东广州510550

紫外线能够有效杀灭细菌、真菌和病毒等多种病原微生物,具有高效快捷、设备简单、易于操作和无二次污染等优势。然而,紫外线杀菌过程受到多种因素的影响,使得其杀菌效果不理想。因此,将紫外线联合杀菌增效剂以增强杀菌效果,成为当前紫... 详细信息

紫外线能够有效杀灭细菌、真菌和病毒等多种病原微生物,具有高效快捷、设备简单、易于操作和无二次污染等优势。然而,紫外线杀菌过程受到多种因素的影响,使得其杀菌效果不理想。因此,将紫外线联合杀菌增效剂以增强杀菌效果,成为当前紫外线杀菌的研究方向之一。本文从紫外线的杀菌局限性作为出发点,分析了辐射剂量、照射强度、照射时间、紫外灯型和损伤DNA修复等因素对紫外杀菌效果的影响;对植物精油、有机酸和消毒剂等杀菌增效剂进行了归纳,阐述了紫外线与杀菌增效剂联合作用时可发挥的氧化应激、细胞膜损伤、抑制DNA修复和干扰嘌呤代谢等多种作用机制,总结了紫外线与杀菌增效剂联合在工业环保、医疗卫生和食品安全等领域的应用,并对紫外线与杀菌增效剂的杀菌组合前景进行展望,以期为紫外线杀菌及其增效剂的研究和应用提供理论参考和实践指导。

关键词：紫外线增效剂机制应用

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氟苯尼考联合铜环境胁迫对土壤固氮菌成膜能力及相关基因表达的研究

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华南农业大学学报 2023年第3期44卷 402-409页

作者：梁仪周童白玲王美孙永学华南农业大学兽医学院/国家兽药安全评价(环境评估)实验室/广东省兽药研制与安全评价重点实验室广东广州510642 怀化职业技术学院湖南怀化418400 浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江杭州311300

[目的]研究氟苯尼考和铜(Cu)残留对土壤固氮菌的生态毒性效应,为评价兽药的环境风险提供依据。[方法]对从花生根际土壤中分离出的一株优势固氮菌RpEC2071进行氟苯尼考和铜胁迫处理,试验设置空白组(0μg/mL)、氟苯尼考添加组(40μg/mL)... 详细信息

[目的]研究氟苯尼考和铜(Cu)残留对土壤固氮菌的生态毒性效应,为评价兽药的环境风险提供依据。[方法]对从花生根际土壤中分离出的一株优势固氮菌RpEC2071进行氟苯尼考和铜胁迫处理,试验设置空白组(0μg/mL)、氟苯尼考添加组(40μg/mL)、Cu添加组(200μg/mL)和混合组(氟苯尼考40μg/mL+Cu 200μg/mL),并于给药后采样。采用苯酚硫酸法和96孔法研究氟苯尼考和Cu单独或联合处理对固氮菌胞外多糖产生及生物膜形成能力的影响。采用RT-qPCR测定分析固氮菌生物膜及固氮相关基因的mRNA表达水平。[结果]氟苯尼考和Cu单独胁迫会促进生物膜的形成,二者生物膜形成能力约为空白组的2倍;混合胁迫会抑制生物膜的形成,空白组生物膜形成能力是其3.1倍。胞外多糖分泌结果与生物膜形成能力测定结果基本一致。生物膜相关基因与氮代谢调控基因呈显著正相关,氟苯尼考和Cu的添加改变了fli Q、nif H和nnr R等基因的表达水平,且二者联合处理后会对其表达分别产生协同或拮抗作用。[结论]氟苯尼考与Cu的单独或联合胁迫影响固氮菌RpEC2071中生物膜相关基因表达,进而对其生物膜形成能力产生影响。预示了以氟苯尼考和Cu为例的兽药及重金属残留胁迫会对土壤固氮菌产生潜在的生态毒性效应,从而破坏土壤中固氮生态系统。

关键词：氟苯尼考铜固氮菌胞外多糖生物膜生态毒性

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基于功能宏基因组学挖掘抗生素耐药基因研究进展

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生物技术通报 2022年第9期38卷 17-27页

作者：鲁兆祥王夕冉连新磊廖晓萍刘雅红孙坚华南农业大学兽医学院广州510000 国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广州510000 岭南现代农业科学与技术广东省实验室广州510000

随着各类抗生素被广泛用于治疗细菌感染以及抗生素在临床上的大量使用,驱动了各类抗生素耐药基因的不断进化,导致了耐药问题日趋严重。耐药基因与耐药细菌的广泛传播与普遍流行严重威胁公共卫生体系并引起了巨大的经济损失。值得注意的... 详细信息

随着各类抗生素被广泛用于治疗细菌感染以及抗生素在临床上的大量使用,驱动了各类抗生素耐药基因的不断进化,导致了耐药问题日趋严重。耐药基因与耐药细菌的广泛传播与普遍流行严重威胁公共卫生体系并引起了巨大的经济损失。值得注意的是,抗生素的广泛施用不仅造成了动物体内耐药细菌的产生,还提高了对环境中微生物的选择压力,间接推动了耐药基因的发展与进化,使环境微生物成为耐药基因新的储库。因此对耐药细菌的广泛监测与新型耐药基因的提前发掘具有重要的临床意义与研究价值。但是传统的耐药性调查手段过度依赖对耐药细菌的培养,难以全面的展现固定生态位中微生物耐药性的全貌。而功能宏基因组学技术利用其表型筛选和高通量测序相结合的优势,不依赖于对携带目标基因的特定细菌的培养,因此在发掘新型功能基因方面有着巨大的优势。本文综述了功能宏基因组在抗生素耐药方面的研究进展,讨论了功能宏基因组学方法在检测新型基因研究中的意义及存在的问题,为后续深入开展对抗生素耐药机制的探究提供了坚实的理论基础。

关键词：功能宏基因组学环境微生物新型耐药基因抗生素

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基于反向遗传技术构建表达绿色荧光蛋白的新城疫重组病毒

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中国动物传染病学报 2025年

作者：邱斯薇侯岳池张萍刘昌海任金莲陈礼斌任涛华南农业大学兽医学院农业农村部兽用疫苗创制重点实验室人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室中国农业科学院上海兽医研究所

本研究利用反向遗传技术构建了一种表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的新城疫病毒（NDV）Herts/33重组病毒。将EGFP基因插入Herts/33株的P基因和M基因之间，成功拯救了重组病毒rHerts/33-EGFP，并通过血凝效价（HA）和荧光显微镜观察验... 详细信息

本研究利用反向遗传技术构建了一种表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的新城疫病毒（NDV）Herts/33重组病毒。将EGFP基因插入Herts/33株的P基因和M基因之间，成功拯救了重组病毒rHerts/33-EGFP，并通过血凝效价（HA）和荧光显微镜观察验证其感染性。重组病毒的GFP基因整合通过PCR和测序确认，且在不同感染复数（MOI）下，GFP表达水平与感染剂量呈正相关。生物学特性测定表明，rHerts/33-EGFP的病毒滴度、致病性和生长动力学特征与亲本病毒Herts/33相似，表明其生物学特性未发生显著改变。本研究构建的rHerts/33-EGFP为研究强毒性NDV的致病机制提供了一种创新性的研究工具，具有重要的科学意义和应用价值。

关键词：新城疫病毒反向遗传技术基因重组病毒绿色荧光蛋白

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动物源金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力与分子分型关系研究

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中国农业科学 2022年第3期55卷 602-612页

作者：唐子云胡健欣陈进陆毅兴孔伶俐刁露张发福熊文广曾振灵华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室/岭南现代农业科学与技术广东省实验室/国家兽医微生物耐药性风险评估实验室

【目的】调查产生生物被膜的金黄色葡萄球菌流行病学特征，探究生物被膜形成能力与分子型之间的相关性，为治疗动物金黄色葡萄球菌感染提供理论依据。【方法】以广东省兽药研制与安全评价重点实验室保存的98株金黄色葡萄球菌为研究对象... 详细信息

【目的】调查产生生物被膜的金黄色葡萄球菌流行病学特征，探究生物被膜形成能力与分子型之间的相关性，为治疗动物金黄色葡萄球菌感染提供理论依据。【方法】以广东省兽药研制与安全评价重点实验室保存的98株金黄色葡萄球菌为研究对象，用结晶紫半定量法测定所有菌株生物被膜形成能力，将产膜菌株进行22种常见抗菌药的最小抑菌浓度测定，通过金黄色葡萄球菌常见3种（spa、MLST和PFGE）分型方式进行分子分型，并分析产膜能力与分子型之间的相关性，最后通过全基因组测序技术分析生物被膜产生菌株中耐药基因和毒力基因携带状况。【结果】结晶紫半定量结果显示，98株金黄色葡萄球菌中能产生生物被膜的菌株共计23株，占23.47%。包括牛乳源22株（占比25.29%,22/87），其中14株（占比60.87%,14/22）来自浙江奶牛养殖场，8株（占比39.13%,8/22）来自福建奶牛养殖场，以及猪源1株（占比9.10%,1/11），来自广东屠宰场，说明牛乳源金黄色葡萄球菌产膜潜力高于猪源；将产膜能力划分为强、中、弱3个等级，23株产膜菌株中，其中强产膜菌株2株（占比8.70%,2/23），中产膜菌株9株（占比39.13%,9/23），以及弱产膜菌株12株（占比52.17%,12/23）。药敏试验显示，牛乳源产膜菌株对所有受试抗菌药物敏感，而猪源产膜菌株对青霉素、阿莫西林、头孢噻呋、头孢西丁、恩诺沙星、环丙沙星、克林霉素、多西环素、红霉素、氟苯尼考、复方新诺明、泰妙菌素、替米考星13种抗菌药均表现出耐药；spa分型结果显示，98株金黄色葡萄球菌共获得8种spa型，产膜的23株金黄色葡萄球菌占其中3种：1株t2922型来自广东猪源，14株t2119来自浙江牛乳源，8株t189来自福建牛乳源；MLST分型结果显示，98株菌共分为9种ST型，其中6种ST型不具有产生生物被膜的能力，分别为ST398、ST522、ST705、ST1651、ST479和ST151，仅3种ST型的菌株具有生物被膜产生能力，分别为ST9、ST7和ST188。结果表明，强产膜菌株分子型主要为ST7-t2119，中产膜菌株主要为ST7-t2119和ST188-t189，弱产膜菌株为ST9-t2922、ST7-t2119和ST188-t189；同时结合PCA分析不同ST型组间差异性发现，弱产膜菌株的ST型能与中强产膜菌株很好的区分开来，只有特定ST型的金黄色葡萄球菌才具有产生生物被膜的能力。23株产膜菌株PFGE分型全部成功，结果显示，广东、福建、浙江三省产膜菌株共分为3种PFGE型，且PFGE型存在地域分布特征，同一地区的分离株可能存在克隆传播，但克隆株之间生物被膜产生能力有明显差异；全基因组测序结果显示，产膜菌株中耐药基因和毒力基因根据分子型不同携带情况呈现多样性。【结论】不同来源的金黄色葡萄球菌有不同程度产生生物被膜的潜力，且均携带多种不同的产膜基因，牛乳源金黄色葡萄球菌产膜潜力远远高于猪源；菌株能否产膜与ST型存在强相关性，特定的ST型如ST9、ST7和ST188更容易产生生物被膜。

关键词：金黄色葡萄球菌生物被膜耐药性分子分型毒力基因

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滑液囊支原体检测方法研究进展

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中国家禽 2023年第10期45卷 90-96页

作者：赵艳利严常燕蒋红霞郑煦灿华南农业大学兽医学院国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广东广州510642 佛山市南海种禽有限公司广东佛山528225

滑液囊支原体感染可引起鸡的滑膜炎、腱鞘炎、气囊炎、蛋壳尖端异常等,给家禽养殖造成严重的经济损失。随着免疫学和分子生物学技术的发展,相应的检测方法也在不断完善。文章从滑液囊支原体的分离鉴定、血清学和分子生物学方面对该病的... 详细信息

滑液囊支原体感染可引起鸡的滑膜炎、腱鞘炎、气囊炎、蛋壳尖端异常等,给家禽养殖造成严重的经济损失。随着免疫学和分子生物学技术的发展,相应的检测方法也在不断完善。文章从滑液囊支原体的分离鉴定、血清学和分子生物学方面对该病的检测方法进行综述,对各种方法的优缺点进行分析,为鸡滑液囊支原体感染的检测提供参考。

关键词：滑液囊支原体鸡分离培养血清学检测分子生物学检测

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