检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2009年第7期40卷 1054-1058页

作者：张建民吴斌赵战勤卢顺何华向敏李利娅张福涛陈焕春华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华南农业大学兽医学院广州510642

本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗... 详细信息

本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗原包被浓度为0.32μ***-1,待检血清最佳稀释度为1∶2,酶标单抗工作浓度为1∶3200,血清抑制率大于40%为阳性。应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对60份血清进行猪水肿毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为33.8%,细胞毒性中和试验检出率为30.9%,两者符合率达88.2%。试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便。本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪水肿病疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有较高的应用价值。

关键词：猪水肿毒素单克隆抗体单抗竞争ELISA 抗体检测

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细菌附属敏感性的研究进展

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畜牧与兽医 2022年第3期54卷 135-139页

作者：叶欣晴黄颖然胡建月于洋华南农业大学兽医学院/国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广东广州510642

多重耐药细菌的广泛传播已严重威胁公众健康。在细菌的耐药性进化过程中,“附属敏感性(collateral sensitivity,CS)”的出现,即细菌对一种抗生素的耐药性增加时对另一种抗生素的敏感性增加的现象,为对抗多重耐药细菌感染带来一种可能的... 详细信息

多重耐药细菌的广泛传播已严重威胁公众健康。在细菌的耐药性进化过程中,“附属敏感性(collateral sensitivity,CS)”的出现,即细菌对一种抗生素的耐药性增加时对另一种抗生素的敏感性增加的现象,为对抗多重耐药细菌感染带来一种可能的选择,从而为细菌耐药性防控提供新的思路。深入研究细菌的附属敏感性有助于我们科学地选择用药组合,降低多重耐药细菌感染治疗的失败率,为保障公共卫生健康提供启示。为了更好地把握细菌附属敏感性的发展全局,本文对细菌附属敏感性的发展历史、研究内容、意义与相关的研究方法进行综述,并提出了目前研究的不足与对未来研究的展望。

关键词：细菌附属敏感性耐药性

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广东省养禽场肠球菌耐药性及毒力因子流行分布特征

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畜牧兽医学报 2021年第9期52卷 2650-2659页

作者：章婧蔡萍贺奕卓陈伟涛黄宇晨蒋红霞华南农业大学兽医学院国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广东省兽药研制与安全评价重点实验室广州510642

旨在调查和分析广东省养禽场肠球菌的亚型屎肠球菌和粪肠球菌耐药性及其毒力因子流行分布特征,为控制禽源肠球菌耐药性传播、保障公共卫生安全提供理论依据。作者于2018年从广东省4个养禽场采集肠道样品493份,进行屎肠球菌和粪肠球菌的... 详细信息

旨在调查和分析广东省养禽场肠球菌的亚型屎肠球菌和粪肠球菌耐药性及其毒力因子流行分布特征,为控制禽源肠球菌耐药性传播、保障公共卫生安全提供理论依据。作者于2018年从广东省4个养禽场采集肠道样品493份,进行屎肠球菌和粪肠球菌的分离鉴定;采用琼脂二倍稀释法测定肠球菌的最小抑菌浓度(MIC);PCR方法检测肠球菌的耐药基因和毒力基因。结果显示:1)共分离到125株肠球菌,其中粪肠球菌84株(鸡源66株,鸭源18株);屎肠球菌41株,均来自鸡肠道样本。2)菌株对四环素、多西环素、红霉素几乎全部耐药,对氟苯尼考和氯霉素的耐药率高达89.60%和74.40%。屎肠球菌耐药率普遍高于粪肠球菌,而粪肠球菌对环丙沙星和利奈唑胺的耐药率高于屎肠球菌;鸭源粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率(94%)显著高于鸡源粪肠球菌(39.4%),屎肠球菌对利奈唑胺均敏感。从鸡分离的1株粪肠球菌对万古霉素耐药。3)耐药基因在屎肠球菌中的检出率高于粪肠球菌,鸭源分离株检出率高于鸡源。耐药基因tetL、fexA、ermB最为流行,检出率均高于90%。其次是optrA基因,检出率为73.60%,poxtA和fexB的检出率均低于20%。在3株鸭源粪肠球菌中检测出cfr基因。4)已检测的毒力基因中efaA的携带率最高,为63.04%(58/92),其他依次为gelE(54.35%,50/92)、ace(47.83%,44/92)、asa1(44.57%,41/92)。对环丙沙星及高浓度氨基糖苷类耐药的菌株及携带cfr基因的菌株,大多携带agg、asal、gelE或ace。本研究显示养殖场禽源肠球菌耐药严重,鸭源肠球菌对利奈唑胺耐药率高,耐药基因和毒力基因流行且多样,且检测出人医临床重要抗生素耐药基因,应加强对养禽场肠球菌耐药性监测。

关键词：粪肠球菌屎肠球菌耐药基因毒力基因

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鸡β干扰素的原核表达及抗病毒活性检测

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中国动物传染病学报 2016年第4期24卷 59-63页

作者：吴斯宇黄健妮崔进冯赛祥欧阳国文向程威郭旸廖明焦培荣华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室广州510642

根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡β干扰素基因序列进行密码子优化与人工合成,构建原核表达质粒pET-28b-ChIFN-β,重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,产物主要以包涵体形式存在。包涵体进行变性、复性... 详细信息

根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡β干扰素基因序列进行密码子优化与人工合成,构建原核表达质粒pET-28b-ChIFN-β,重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,产物主要以包涵体形式存在。包涵体进行变性、复性和镍柱亲和纯化后,SDS-PAGE、Western blot分析表明pET-28b-ChIFN-β表达正确,并且表达量较高。重组鸡β干扰素蛋白在DF-1细胞上能明显抑制水疱性口炎病毒繁殖,抗病毒活性达2.73×10-6UI/mg。本研究结果为鸡β干扰素在临床防治禽类病毒性疾病的探索奠定了基础。

关键词：鸡β干扰素原核表达抗病毒活性

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抗菌药物在水禽养殖中的合理应用

抗菌药物在水禽养殖中的合理应用

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第八届(2019)中国水禽发展大会暨第二届鸭饲料营养与养殖技术研讨会

作者：曾振灵华南农业大学兽医学院国家兽药残留基准实验室(SCAU)

＜正＞～～

关键词：抗菌药物鸡源大肠杆菌氟苯尼考林可霉素泰妙菌素泰乐菌素合理应用水禽养殖

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TLC-生物自显影检测26种植物中的抗细菌和抗氧化活性物质

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植物保护 2018年第6期44卷 66-72页

作者：单体江张伟豪王松白日娜翁道玥林希乐孙坚华南农业大学林学与风景园林学院广东省森林植物种质创新与利用重点实验室广州510642 华南农业大学兽医学院国家兽医微生物耐药性风险评估实验室广州510642

我国华南地区植物资源丰富,为快速筛选和检测具有抗菌和抗氧化活性的植物资源,本研究采用甲醇冷浸提取法制备植物提取物,并采用TLC-生物自显影法快速检测其抗细菌和抗氧化活性。活性测定的结果表明,豺皮樟和桂木的抗细菌活性最强,对所... 详细信息

我国华南地区植物资源丰富,为快速筛选和检测具有抗菌和抗氧化活性的植物资源,本研究采用甲醇冷浸提取法制备植物提取物,并采用TLC-生物自显影法快速检测其抗细菌和抗氧化活性。活性测定的结果表明,豺皮樟和桂木的抗细菌活性最强,对所有供试细菌均表现出抑制活性,且抑菌斑的最大直径均大于10 mm。红果仔、锡叶藤和山油柑也对所有供试细菌表现出抑制活性,但其活性弱于豺皮樟和桂木。粪箕笃、海金沙和小蜡未表现出任何抗细菌活性,其他供试植物对部分供试细菌表现出抑制活性。白花酸藤子、海南杜英、黄牛木、山油柑和基及树表现出较好的抗氧化活性,抗氧化斑的R_f值范围为0.0～1.0,说明具有较多的活性化合物。TLC-生物自显影法能够快速、有效地筛选和检测具有抗细菌和抗氧化活性的植物提取物,本研究结果为植物资源的开发和利用提供重要的理论依据。

关键词： TLC-生物自显影法抗细菌活性抗氧化活性

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抗生素在养禽业中的合理应用

抗生素在养禽业中的合理应用

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第八届（2017）中国蛋鸡行业发展大会

作者：曾振灵华南农业大学兽医学院国家兽药残留基准实验室(SCAU)

＜正＞～～

关键词：养禽业抗菌药物合理应用四环素类抗生素

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CRISPR/Cas系统对金黄色葡萄球菌耐药及毒力基因的影响

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华南农业大学学报 2023年第2期44卷 179-186页

作者：谢龙飞肖丹瑜常依张旭财李小申熊文广广东省兽药研制与安全评价重点实验室/国家兽药安全评价(环境评估)实验室/国家兽医微生物耐药性风险评估实验室/华南农业大学兽医学院/岭南现代农业科学与技术广东省实验室广东广州510642

【目的】了解金黄色葡萄球菌(以下简称“金葡菌”)Staphylococcus aureus中成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的分布情况,分析其对抗生素耐药基因和毒力基因水平转移的... 详细信息

【目的】了解金黄色葡萄球菌(以下简称“金葡菌”)Staphylococcus aureus中成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的分布情况,分析其对抗生素耐药基因和毒力基因水平转移的影响。【方法】从公共数据库获取组装完整的金葡菌基因组575个,利用生物信息学方法,统计CRISPR结构的携带情况,菌株多位点序列分型(Multi-locus sequence typing,MLST)型别分布和菌株耐药基因、毒力基因的分布情况;对CRISPR结构阳性(CRISPR+)和CRISPR结构阴性(CRISPR-)的金葡菌耐药基因和毒力基因携带数目进行差异显著性分析。同时对实验室60株金葡菌二代测序数据进行分析,验证公共数据库分析结果。对实验室60株金葡菌中原噬菌体、接合质粒的携带情况进行统计,讨论CRISPR结构对菌株原噬菌体和接合质粒的影响。【结果】基因组组装完整的575株金葡菌中,有62株携带CRISPR结构(CRISPR+),513株不携带CRISPR结构(CRISPR-);CRISPR+金葡球菌携带耐药基因、毒力基因的数目显著小于CRISPR-金葡菌。实验室60株金葡菌中,有14株为CRISPR+,46株为CRISPR-;CRISPR+金葡菌携带更少的耐药基因和毒力基因,与公共数据库分析结果一致。对原噬菌体和接合质粒的分析结果显示,CRISPR-菌株携带更多的原噬菌体序列,与CRISPR+菌株之间差异显著(P<0.05);接合质粒方面,CRISPR-和CRISPR+菌株无显著性差异。【结论】CRISPR结构可能限制了金葡菌中耐药基因和毒力基因的水平转移,CRISPR-菌株更容易受到噬菌体和可移动质粒的干扰。本研究为进一步研究金葡菌耐药基因和毒力基因的传播提供了参考。

关键词：金黄色葡萄球菌 CRISPR/Cas系统耐药基因毒力基因

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STM2503调控鼠伤寒沙门菌的生物被膜形成和压力适应性

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中国农业科学 2024年第16期57卷 3294-3304页

作者：王南威李莉莉陈凯风周洲平潘鹏关晋徐成刚廖明张建民华南农业大学兽医学院/人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室/农业农村部人兽共患病重点实验室/农业农村部兽用疫苗创制重点实验室/广东省动物源性人兽共患病重点实验室

【目的】通过揭示c-di-GMP通路基因STM2503调控鼠伤寒沙门菌生物被膜形成，进而影响其环境应激能力的机制，以期挖掘调控鼠伤寒沙门菌压力适应性的关键因子，为防控策略的制定提供理论依据。【方法】以λ-Red同源重组方法构建STM2503缺... 详细信息

【目的】通过揭示c-di-GMP通路基因STM2503调控鼠伤寒沙门菌生物被膜形成，进而影响其环境应激能力的机制，以期挖掘调控鼠伤寒沙门菌压力适应性的关键因子，为防控策略的制定提供理论依据。【方法】以λ-Red同源重组方法构建STM2503缺失株，并利用质粒PBAD表达STM2503来构建相应的基因回补株。然后通过检测不同STM2503表达水平菌株中信号分子c-di-GMP的含量揭示STM2503对菌株胞内c-di-GMP水平的影响。接下来，利用细菌运动性检测、结晶紫染色等试验检测了STM2503对菌株运动性和生物被膜形成能力的影响，并利用实时荧光定量PCR从基因层面揭示其对菌株运动性和生物被膜形成的调控机制。最后，通过抗生素处理、氧化应激、消毒剂应激等试验探究了STM2503对鼠伤寒沙门菌压力适应性的影响。【结果】与野生株（WT269）相比，STM2503的缺失使菌株胞内c-di-GMP含量升高了37.51%(P<0.001)，且不影响菌株的正常生长。另外，STM2503的缺失提高了菌株各胞外基质合成基因的表达水平，使缺失株胞外多糖、胞外DNA和胞外蛋白质含量分别增加了10.30%(P<0.01)、33.59%(P<0.001)和27.60%(P<0.01)，最终使菌株的生物被膜形成能力显著增强了1.63倍（P<0.01）。并且，269ΔSTM2503通过降低鞭毛合成相关基因fliA与flhC的表达使其在6 h的运动直径较野生株相比下降了17.22%(P<0.01)。这些变化最终导致269ΔSTM2503菌株对头孢噻肟、头孢吡肟、阿莫西林等β-内酰胺类抗生素的敏感性降低1—3倍，且在氧胁迫和SDS消毒剂胁迫下表现出了更强的适应能力。【结论】STM2503参与信号分子c-di-GMP的降解，并通过抑制胞外基质的合成降低鼠伤寒沙门菌的生物被膜形成能力，通过上调鞭毛合成基因的表达增强菌株的运动性，进而降低菌株的耐药性和环境压力适应能力，本研究为鼠伤寒沙门菌关键防控靶点的挖掘提供了理论基础。

关键词：鼠伤寒沙门菌 c-di-GMP STM2503 生物被膜运动性

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对我国兽药残留监控及动物性食品安全的思考

对我国兽药残留监控及动物性食品安全的思考

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第三届全国(三亚)农产品食品安全检测技术论坛暨首届动物源性食品安全检测技术研讨会

作者：陈杖榴曾振灵华南农业大学兽医学院国家兽药残留基准实验室广州 510642

早在20世纪90年代，我国政府即高度关注动物性食品中药物残留问题，1991年国务院办公厅发布了“关于加强农药、兽药管理的通知”，开始制订出口动物源食品中农药、兽药残留限量标准和检测方法。十多年来，各部门和兽药科研所积极开展农... 详细信息

早在20世纪90年代，我国政府即高度关注动物性食品中药物残留问题，1991年国务院办公厅发布了“关于加强农药、兽药管理的通知”，开始制订出口动物源食品中农药、兽药残留限量标准和检测方法。十多年来，各部门和兽药科研所积极开展农药、兽药残留检测技术研究工作和残留监控工作，相互配合，取得初步成效。本文主要介绍了我国兽药残留监控的现状，然后讨论了加强我国兽药残留监控、保证动物性食品安全的对策。

关键词：兽药残留动物性食品安全残留监控检测方法

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