检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2002年第4期33卷 362-365页

作者：任涛廖明罗开健曹伟胜辛朝安华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点防治实验室广州510640

对海南省和广西省的几个发生呼吸罗音、鸡群全群发病、死亡率不高的疑是鸡传染性支气管炎病 (IB)的鸡群 ,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到了 4株IBV分离株 (HaN 1/95、HaN 2 /95、GX 1/98、GX 2 /98) ,并对分离病毒进行了病毒的致病... 详细信息

对海南省和广西省的几个发生呼吸罗音、鸡群全群发病、死亡率不高的疑是鸡传染性支气管炎病 (IB)的鸡群 ,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到了 4株IBV分离株 (HaN 1/95、HaN 2 /95、GX 1/98、GX 2 /98) ,并对分离病毒进行了病毒的致病性、病理组织切片、鸡胚矮小化、对NDV的干扰、电镜特征等生物特性鉴定及IBV基因组特异性 3’末端非编码区的一段保守序列的RT PCR和巢氏PCR鉴定。结果表明 4株IBV分离株 ,均能产生呼吸困难、罗音等临床症状 ;病理组织切片 ,气管、肾脏等组织表现为上皮细胞受损、固有层充血、出血和淋巴细胞的浸润及组织坏死 ;对NDV B1株有明显的干扰作用 ;其各自的传代物都有明显的致鸡胚矮小化作用 ;在透射电镜下观察到典型的冠状病毒粒子 ,多数近似为圆形 ,直径 75～ 2 0 0nm ,有囊膜 ,表面有一圈杆状纤突排列成花冠状 ,符合IBV的典型特征 ;基因组 3’末端UTR的RT PCR和巢氏PCR鉴定 ,4个分离株分别都扩增到 2 93bp和 172bp的特异目的片段 ,通过测序比较毒株间的核苷酸序列同源性在 99%以上 ,与GeneBank中IBVH5 2等标准株的 3’末端UTR的核苷酸序列高度同源。以上结果表明 4株分离病毒都是IBV ,为下一步的IBV分子流行病学的研究打下了基础。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定中国地方流行株

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新城疫3组基因亚单位疫苗的免疫原性试验

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中国兽医学报 2003年第1期23卷 22-24页

作者：秦智锋贺东生刘福安华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点开放实验室广东广州510642

将 3个融合表达重组菌 p GHN/ DE3、p GF/ DE3和 p GF/ ***复苏后进行酶切鉴定 ,确认无误后均经 1m mol/L 的 IPTG诱导 ,然后分组 3次免疫鸡。试验鸡血清经血球凝集抑制试验 (HI)和微量细胞中和试验 (SN)来检测 HI抗体和 SN抗体。结果表... 详细信息

将 3个融合表达重组菌 p GHN/ DE3、p GF/ DE3和 p GF/ ***复苏后进行酶切鉴定 ,确认无误后均经 1m mol/L 的 IPTG诱导 ,然后分组 3次免疫鸡。试验鸡血清经血球凝集抑制试验 (HI)和微量细胞中和试验 (SN)来检测 HI抗体和 SN抗体。结果表明 :重组菌 p GHN/ DE3所生产的亚单位苗免疫鸡后 ,可激发较高的 HI抗体 ,但激发的中和抗体较弱。与系 NDV常规疫苗相比 ,3个重组大肠杆菌基因工程苗所诱发的中和抗体效价较弱。对各组中起关键作用的中和抗体进行方差分析表明 ,3个基因工程菌所诱发的中和抗体与常规疫苗免疫组和基础免疫对照相比 ,差异显著。因此 ,尽管 3种基因工程苗产生了中和抗体 ,但中和抗体效价上升缓慢 ,HI抗体效价上升较快。

关键词：新城疫基因亚单位疫苗免疫原性试验

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含LacZ报告基因的传染性喉气管炎病毒TK基因转移载体质粒的构建

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畜牧兽医学报 1999年第3期30卷 262-266页

作者：吴红专刘福安华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病防治重点开放实验室

在传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆、鉴定的基础上［１］，进一步构建转移载体质粒，为ＩＬＴＶＴＫ基因缺失毒株的构建作准备，先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶｇａｌ线性化，再经ＥｃｏＲＩ不完全酶切，分离含ＳＶ４０... 详细信息

在传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆、鉴定的基础上［１］，进一步构建转移载体质粒，为ＩＬＴＶＴＫ基因缺失毒株的构建作准备，先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶｇａｌ线性化，再经ＥｃｏＲＩ不完全酶切，分离含ＳＶ４０立即早期启动子和增强子的４２Ｋｂ的ＬａｃＺ报告基因片段，并用Ｋｌｅｎｏｗ大片段补平，将克隆ＴＫ基因的载体ｐＴＫ用ＳｎａＢＩ处理，后用Ｔ４ＤＮＡ连接酶将以上两个片段平端连接成重组质粒，转化ＪＭ１０９，在Ｘｇａｌ、ＩＰＴＧ、Ａｍｐ、ＬＢ平板上筛选蓝色菌落，经琼脂糖凝胶电泳筛选到１２个阳性重组子，命名为ｐＰＴＫ，用ｐｓｔＩ和ＨｉｎｄＩＩ单酶切都得到了分子量为８１３Ｋｂ的质粒，进一步用狄高辛标记ＬａｃＺ基因片段作探针对ｐＰＴＫ进行打点杂交，结果均成阳性，证明了ＬａｃＺ基因已插入了ｐＴＫ，脂质体转染法也得到了蓝斑病毒，结果表明我们已成功构建了转移载体质粒ｐＰＴＫ。

关键词：传染性喉气管炎病毒 TK基因转移载体质粒 ILTV

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华南地区三株新城疫地方强毒株的序列测定及其系统发育分析

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畜牧兽医学报 2003年第1期34卷 67-71页

作者：秦智锋贺东生吴红专娄华杨德威刘福安深圳出入境检验检疫局动植食中心动检室深圳518000 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点开放实验室广州510642

用设计的特异性引物,通过一步法RT-PCR扩增出5个毒株的897bp片段,对其中的3株病毒cDNA分析表明:各毒株的半胱胺酸位点和个数及糖基化位点基本没有改变。各毒株在抗原决定簇氨基酸位点HN基因346～353处的碱基突变甚多,且氨基酸也出现了... 详细信息

用设计的特异性引物,通过一步法RT-PCR扩增出5个毒株的897bp片段,对其中的3株病毒cDNA分析表明:各毒株的半胱胺酸位点和个数及糖基化位点基本没有改变。各毒株在抗原决定簇氨基酸位点HN基因346～353处的碱基突变甚多,且氨基酸也出现了部分的突变。针对HN基因897bp片段构建了相应的系统发育树,系统发育分析表明:中国(华南)地区NDV各毒株与欧美国家的Ⅱ至Ⅴ基因群明显分离,遗传规律较远;NDV WS1和NDV HY与台湾省NDV各毒株归属为一组,与中国毒株的遗传距离较近,均属新近出现的基因型Ⅶ型,NDⅦ型在远东和西欧(Ⅶb)和及中东和南非(Ⅶa)广泛存在,可能形成了ND的第4次大流行。这些一方面说明NDV的变异可能已突破种源屏障,在鸡与鹅之间进行相互传播;另一方面说明中国古老的NDV毒株仍然持续存在,并逐渐向强毒株突变,与其他新出现的基因型毒株"共循环"。

关键词：华南地区新城疫地方强毒株新城疫病毒 HN基因 RT-PCR 系统发育测序

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犬基因疫苗与犬抗生素抗性

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广东畜牧兽医科技 2001年第1期26卷 31-32页

作者：杨德威刘福安中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心广东广州510275 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点实验室

2 0 0 0年 1 0～ 1 2月 ,华南地区某犬场一部份曾经接受犬基因疫苗免疫的犬群 ,虽然含有对犬病毒病的抗体 ,但在细菌病发病时对氨苄青霉素及新霉素产生抗性反应 ,对此现象作了研究和分析。

关键词：犬基因疫苗抗生素病毒病抗性反应第三代基因疫苗

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犬病毒病ELISA检测方法浅析

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广东畜牧兽医科技 2000年第3期25卷 33-34页

作者：杨德威刘福安中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心广东广州510275 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点实验室

报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性... 详细信息

报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性、细菌学及寄生虫实验犬的回归实验证明这是不同种类犬寄生虫或耐抗性的细菌所致的出血性肠炎。

关键词：犬细小病毒犬病毒病 ELISA检测弱毒疫苗诊断

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广东省新城疫病毒地方强毒株的分离鉴定

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动物医学进展 2002年第1期23卷 67-69页

作者：秦智锋贺东生刘福安深圳出入境检验检疫局广州深圳518000 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点开放实验室广东广州510642

从广东省各地方分离１０余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定。将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种９～１１日龄的鸡胚。鸡胚接种后３６～４２　ｈ死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（Ｈ... 详细信息

从广东省各地方分离１０余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定。将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种９～１１日龄的鸡胚。鸡胚接种后３６～４２　ｈ死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（ＨＡ）为１∶２９～１∶２１５，并能被ＮＤ阳性血清特异性抑制，却不能被ＡＩＶ　Ｈ５亚型血清所抑制。用自己设计的特异性检测引物，对五个毒株进行了ＰＣＲ鉴定，可扩增出特异性的目的条带。再结合临床症状和剖检病变，可初步判定为新城疫病毒。为以后进行广东省新城疫病毒分子流行病学研究打下了基础。

关键词：新城疫病毒 PCR 分离鉴定广东地方株毒强株

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