检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2008年第10期39卷 1415-1420页

作者：戴建威章倩倩王妍刘松财张永亮广州医学院生化教研室广州510182 吉林大学畜牧兽医学院长春130062 中山大学生物工程中心真核分子生物学实验室广州510275 延边大学农学院动物医学系龙井133400 华南农业大学动物科学学院广州510642

将HBsAg与Somatostatin（SS）融合基因克隆到真核表达载体pIRESlneo—CMV，构建了pIRESlneo—HBsAg／SSM。应用脂质体介导转染CHO细胞，96h提取细胞总RNA，RT-PCR鉴定融合基因表达；并收集细胞上清，ELISA法测定上清中HBsAg表达情况，... 详细信息

将HBsAg与Somatostatin（SS）融合基因克隆到真核表达载体pIRESlneo—CMV，构建了pIRESlneo—HBsAg／SSM。应用脂质体介导转染CHO细胞，96h提取细胞总RNA，RT-PCR鉴定融合基因表达；并收集细胞上清，ELISA法测定上清中HBsAg表达情况，结果为阳性。大量提取pIRESlneo—HBsAg／SSM质粒，用Poly D，L—lactide co—glycolicacid（PLGA）微球包裹，注射Vc獭兔后肢胫前肌，以注射生理盐水獭兔为对照。动物常规饲养45d，观察日增重并测定血清中IGF-Ⅰ、SS含量以及抗HBsAg抗体水平。结果显示注射后15～30d，质粒注射组日增重较对照组高106．8％（P〈0．01）；30d时，血清中IGF-Ⅰ浓度质粒组比对照组高29．2％（P〈0．05）；检测整个过程中血清中SS含量，发现注射后30d时明显低于对照组，且出现整个试验过程的最低值；质粒注射组血清中抗HBsAg抗体水平在注射后30d时出现峰值，这与SS含量出现最低值相吻合。本试验结果表明HBsAg与SS融合基因免疫獭兔，可以促进动物生长。

关键词：生长抑素核酸免疫乙肝表面抗原 PLGA 免疫中和

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胸腺素α_1对鸡生长性能及免疫器官发育的影响

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佛山科学技术学院学报（自然科学版） 2003年第2期21卷 70-73页

作者：计慧琴孙圣兰朱晓彤江青艳傅伟龙王丙云佛山科学技术学院动物医学系广东佛山528231 华南农业大学动物科学学院生理教研室广东广州510642

通过对照试验在 4日龄和 7日龄时 ,低剂量组、中剂量组和高剂量组每只鸡分别肌注 0 .0 1 5 mg·kg- 1 ,0 .0 3 mg· kg- 1 和 0 .0 6mg· kg- 1 体重剂量的胸腺素α1 ( Tα1 ) ,对照组注射等量的生理盐水。试验期为 5 6d,观... 详细信息

通过对照试验在 4日龄和 7日龄时 ,低剂量组、中剂量组和高剂量组每只鸡分别肌注 0 .0 1 5 mg·kg- 1 ,0 .0 3 mg· kg- 1 和 0 .0 6mg· kg- 1 体重剂量的胸腺素α1 ( Tα1 ) ,对照组注射等量的生理盐水。试验期为 5 6d,观察 Tα1 对鸡体重、饲料转化率、法氏囊指数、胸腺指数、和脾脏指数的影响。结果表明 :在 3 5 ,42和 5 6日龄时 ,低剂量组鸡的体重显著高于其他各组 ( P<0 .0 5 ) ,而在 1 4和 2 1日龄时各组平均体重差异不显著 ( P>0 .0 5 )。在整个试验期间 ,低剂量组的饲料报酬均高于其他三组 ;低剂量组的法氏囊指数均高于其他三组 ,并在 1 4日龄时与对照组和中剂量组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ,而在 3 5日龄与对照组和高剂量组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ;低剂量组的胸腺指数也高于其他三组 ,1 4日龄时与对照组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ,而与中剂量组和高剂量组差异不显著( P>0 .0 5 ) ,但在 3 5和 5 6日龄时差异显著 ( P <0 .0 5 ) ;低剂量组的脾脏指数高于其他三组 ,且在 3 5和 5 6日龄差异显著 ( P <0 .0 5 )。

关键词：胸腺素α1(Tα1) 墟岗黄母鸡生长性能免疫器官发育

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广东省新城疫病毒地方强毒株的分离鉴定

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动物医学进展 2002年第1期23卷 67-69页

作者：秦智锋贺东生刘福安深圳出入境检验检疫局广州深圳518000 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点开放实验室广东广州510642

从广东省各地方分离１０余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定。将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种９～１１日龄的鸡胚。鸡胚接种后３６～４２　ｈ死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（Ｈ... 详细信息

从广东省各地方分离１０余株地方强毒株，对其中的五株地方强毒株进行了分离鉴定。将各毒株病肝研磨离心后取上清，绒毛尿囊腔接种９～１１日龄的鸡胚。鸡胚接种后３６～４２　ｈ死亡，鸡胚全身出血，含病毒的尿囊液红血球凝集效价（ＨＡ）为１∶２９～１∶２１５，并能被ＮＤ阳性血清特异性抑制，却不能被ＡＩＶ　Ｈ５亚型血清所抑制。用自己设计的特异性检测引物，对五个毒株进行了ＰＣＲ鉴定，可扩增出特异性的目的条带。再结合临床症状和剖检病变，可初步判定为新城疫病毒。为以后进行广东省新城疫病毒分子流行病学研究打下了基础。

关键词：新城疫病毒 PCR 分离鉴定广东地方株毒强株

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SARS病毒N蛋白真核表达质粒的构建及其诱导的体液免疫应答

SARS病毒N蛋白真核表达质粒的构建及其诱导的体液免疫应答

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全国新出现传染病学术研讨会

作者：林绮萍吴少庭翁亚彪袁仕善高世同秦莉雷明军潘晖榕张仁利黄达娜温见翔深圳市疾病预防控制中心分子生物室华南农业大学动物医学系深圳市疾病预防控制中心分子生物室华南农业大学动物医学系华南农业大学动物医学系华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华南农业大学动物医学系华南农业大学动物医学系广东医学院微生物学教研室

目的:构建SARS病毒核衣壳蛋白(N)的真核表达质粒,并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答。方法:采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-N重组质粒;大量制备该重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免... 详细信息

目的:构建SARS病毒核衣壳蛋白(N)的真核表达质粒,并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答。方法:采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-N重组质粒;大量制备该重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠三次,间接

关键词：体液免疫应答真核表达质粒

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犬基因疫苗与犬抗生素抗性

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广东畜牧兽医科技 2001年第1期26卷 31-32页

作者：杨德威刘福安中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心广东广州510275 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点实验室

2 0 0 0年 1 0～ 1 2月 ,华南地区某犬场一部份曾经接受犬基因疫苗免疫的犬群 ,虽然含有对犬病毒病的抗体 ,但在细菌病发病时对氨苄青霉素及新霉素产生抗性反应 ,对此现象作了研究和分析。

关键词：犬基因疫苗抗生素病毒病抗性反应第三代基因疫苗

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犬病毒病ELISA检测方法浅析

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广东畜牧兽医科技 2000年第3期25卷 33-34页

作者：杨德威刘福安中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心广东广州510275 华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点实验室

报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性... 详细信息

报道了 1 999年 9月至今的 2 6宗经不同途径作犬细小病毒弱毒疫苗 2次免疫后仍然发生致死的出血性肠炎 ,而不同的犬主将各自的犬饲料交到所属地区的动物医院作犬细小病毒ELISA检测时 ,出现细小病毒的阳性反应。经分子病毒学的理化特性、细菌学及寄生虫实验犬的回归实验证明这是不同种类犬寄生虫或耐抗性的细菌所致的出血性肠炎。

关键词：犬细小病毒犬病毒病 ELISA检测弱毒疫苗诊断

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弓形虫RH株膜表面抗原2全长基因的高效表达与抗原性分析

弓形虫RH株膜表面抗原2全长基因的高效表达与抗原性分析

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全国人畜共患病学术研讨会

作者：雷明军吴少庭戴五星潘晖榕林绮萍温见翔黄达娜高世同张仁利华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系深圳市疾病预防控制中心分子生物室华南农业大学动物医学系广东医学院微生物学教研室

目的构建原核重组表达质粒p ET23a2SAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性。方法 PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD182T载体,转化大肠埃希菌DH5α。测序后亚克隆至表达质粒载体p ET... 详细信息

目的构建原核重组表达质粒p ET23a2SAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性。方法 PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD182T载体,转化大肠埃希菌DH5α。测序后亚克隆至表达质粒载体p ET23a,构建重组表达质粒p ET23a2SAG2,转化大肠埃希菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切分析鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异丙基2β2D2硫代半乳糖苷诱导表达。十二烷基硫酸钠2聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS2PAGE)与免疫印迹分析表达产物。结果 PCR扩增出约500 bp的SAG2编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变;所构建的pET23a2SAG2重组表达质粒阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致;含有p ET23a2SAG2重组质粒的大肠埃希菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS2PAGE显示表达产物约Mr 19 000;免疫印迹结果表明表达产物具有良好的抗原性。结论成功构建了p ET23a2SAG2表达质粒,实现了全长成熟SAG2蛋白在大肠埃希菌中的高效表达;表达产物具有良好的抗原性。

关键词：弓形虫属表面抗原基因表达蛋白质印迹法

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弓形虫RH株SAG2基因片段的克隆、表达、纯化与鉴定

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中国人兽共患病学报 2004年第Z1期21卷 92-93页

作者：雷明军吴少庭戴五星潘晖榕林绮萍温见翔黄达娜高世同张仁利华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030 深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳518020 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030 华南农业大学动物医学系广州510089 广东医学院微生物学教研室湛江524023 深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳518020 深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳518020 深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳518020

　　克隆弓形虫RH株膜表面抗原2(SAG2)编码基因,构建原核重组表达质粒PET23a-SAG2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达及纯化SAG2蛋白.PCR扩增503bp的SAG2编码基因目的片段,胶回收纯化,插入克隆载体pMD-18T载体并转化大肠杆菌DH5α.限制... 详细信息

　　克隆弓形虫RH株膜表面抗原2(SAG2)编码基因,构建原核重组表达质粒PET23a-SAG2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达及纯化SAG2蛋白.PCR扩增503bp的SAG2编码基因目的片段,胶回收纯化,插入克隆载体pMD-18T载体并转化大肠杆菌DH5α.限制性酶切分析及测序鉴定后以限制性内切酶BamHⅠ和SalⅠ双酶切pMD-18T-SAG2质粒与表达质粒载体Pet23a的BamHⅠ和SalⅠ多克隆位点,构建重组体Pet23a-SAG2,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,以限制性酶切分析鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3)以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达.表达产物经金属鏊合层析纯化.用SDS-PAGE与免疫印迹分析表达与纯化产物.PCR扩增出约503bp的SAG2编码基因目的片段,与预期片段大小相符;所构建的PET23a-SAG2重组体阳性克隆经双酶切与测序鉴定,与预期结果一致.SDS-PAGE与免疫印迹显示,表达产物约18kD.成功构建PET23a-SAG2表达质粒,诱导表达并纯化出了弓形虫RH株SAG2蛋白,并以免疫印迹鉴定.……

关键词：弓形虫基因片段阳性克隆转化大肠杆菌限制性酶切分析免疫印迹鉴定重组表达质粒编码基因纯化产物诱导表达测序鉴定构建重组体质粒载体限制性内切酶双酶切膜表面抗原扩增克隆载体蛋白

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弓形虫RH株膜表面抗原2全长基因的高效表达与抗原性分析

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中国人兽共患病学报 2004年第z1期21卷 91-页

作者：雷明军吴少庭戴五星潘晖榕林绮萍温见翔黄达娜高世同张仁利华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030 深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳518020 华南农业大学动物医学系广州510089 广东医学院微生物学教研室湛江524023

　　构建原核重组表达质粒pET23a-SAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性.PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD18-T载体,转化大肠埃希菌DH5α.测序后亚克隆至表达质粒载体pET23a,构建... 详细信息

　　构建原核重组表达质粒pET23a-SAG2,并在大肠埃希菌中实现高效表达,以及检测表达产物的抗原性.PCR扩增SAG2编码基因目的片段,琼脂糖凝胶电泳回收纯化,克隆至pMD18-T载体,转化大肠埃希菌DH5α.测序后亚克隆至表达质粒载体pET23a,构建重组表达质粒pET23a-SAG2,转化大肠埃希菌DH5α.筛选阳性克隆,经限制性酶切分析鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹分析表达产物.PCR扩增出约500bp的SAG2编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变;所构建的pET23a-SAG2重组表达质粒阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致;含有pET 23a-SAG2重组质粒的大肠埃希菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物约Mr 19 000;免疫印迹结果表明表达产物具有良好的抗原性.成功构建了pET 23a-SAG2表达质粒,实现了全长成熟SAG2蛋白在大肠埃希菌中的高效表达;表达产物具有良好的抗原性.……

关键词：弓形虫膜表面抗原全长基因高效表达大肠埃希菌重组表达质粒抗原性聚丙烯酰胺凝胶电泳阳性克隆免疫印迹构建编码基因限制性酶切分析十二烷基硫酸钠琼脂糖凝胶电泳转化酶切鉴定重组质粒质粒载体诱导表达

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结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在Vero E6细胞中的表达

结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在Vero E6细胞中的表达

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全国新出现传染病学术研讨会

作者：温见翔吴少庭陈群秦莉林绮萍袁仕善张仁利高世同黄达娜广东医学院微生物学教研室深圳市疾病预防控制中心分子生物室广东医学院微生物学教研室华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系华南农业大学动物医学系深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳市疾病预防控制中心分子生物室深圳市疾病预防控制中心分子生物室

目的:构建结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的真核表达质粒,并研究其在Vero E6细胞中的表达情况。方法:采用PCR方法自结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增esat-6基因片段,定向亚克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-esat-6重组质粒;利用脂质体介导的... 详细信息

目的:构建结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的真核表达质粒,并研究其在Vero E6细胞中的表达情况。方法:采用PCR方法自结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增esat-6基因片段,定向亚克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-esat-6重组质粒;利用脂质体介导的转染技术,将其导入Vero E6细胞,RT-PCR法检测mRNA表达情况,Western-blot法鉴定表达产物。结果:从结核分枝杆菌

关键词： Vero E6 结核分枝杆菌 ESAT-6

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