检索结果-内蒙古大学图书馆

Nonomuraea candida HMC10^(T)中新结构套索肽noncaromin生物合成基因簇的克隆及异源表达

微生物学报 2022年第12期62卷 4927-4942页

作者：韩舒婷马婧贤盛勇王珩瑜邢利罗晓霞白林泉邓子新康前进上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 上海交通大学代谢与发育国际联合合作实验室上海200240 塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300

【目的】本研究旨在通过定向克隆菌株Nonomuraea candida HMC10^(T)中一个新的Ⅱ型套索肽类生物合成基因簇,通过在放线菌底盘宿主中的异源表达,获得新结构套索肽noncaromin,并完成其抑菌活性分析。【方法】通过anti SMASH软件分析菌株**... 详细信息

【目的】本研究旨在通过定向克隆菌株Nonomuraea candida HMC10^(T)中一个新的Ⅱ型套索肽类生物合成基因簇,通过在放线菌底盘宿主中的异源表达,获得新结构套索肽noncaromin,并完成其抑菌活性分析。【方法】通过anti SMASH软件分析菌株*** HMC10^(T)全基因组序列,确定新的Ⅱ型套索肽noncaromin的生物合成基因簇(biosynthetic gene cluster of noncaromin,nonc-BGC)。然后,利用ExoCET重组技术(exonuclease combined with RecET recombination)获得完整的nonc-BGC,得到重组质粒pJQK652,并通过λ-Red重组技术改造得到整合型质粒pJQK653。采用接合转移方法,将该质粒分别导入白色链霉菌、2株变铅青链霉菌、2株天蓝色链霉菌和红色糖多孢菌宿主中进行异源表达,再通过发酵和分离纯化获得目标套索肽noncaromin。最后,利用QTOF-ESI-MS^(2)完成套索肽noncaromin的结构鉴定,并通过抗菌活性检测确定该化合物的生物活性。【结果】本研究利用ExoCET技术成功获得了完整的nonc-BGC,在6种放线菌宿主中成功异源表达,完成了noncaromin的结构鉴定,确定了其具有微弱的抗枯草芽孢杆菌活性。【结论】本研究在克隆得到新结构套索肽nonc-BGC的基础上,实现了该基因簇在6个放线菌底盘宿主中的成功表达,获得了1个具有微弱抑制枯草芽孢杆菌活性的新结构Ⅱ型套索肽noncaromin。本研究结果为发掘菌株*** HMC10~T及其他放线菌中的新结构化合物提供了借鉴。

关键词：念珠状野野村氏菌套索肽异源表达结构鉴定活性检测

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6株大型真菌发酵提取物的抑菌及细胞毒活性研究

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中国民族民间医药 2014年第9期23卷 17-19,21页

作者：陈玉婵吕华明谭国慧李浩华李赛妮章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 大理学院农学与生物科学学院云南大理671003

目的:对6株广东大型真菌红汁乳菇(Lactarius hatsudake)G027、鸟巢菌(Cyathus sp.)G026、革耳菌(Panus sp.)G028、光亮小红孔菌(Pycnoporellus fulgens)G033、菌核斗菇(Lentinus tuber-regium)G025和有柄灵芝(Ganoderma gibbosum)G036的发酵提取物进行抑菌和细胞毒活性研究。方法:分别采用滤纸片扩散法和SRB法对这6株大型真菌的发酵提取物进行抑菌和细胞毒活性研究。结果:菌株G027、G028、G026和G033对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌活性,其抑菌圈直径分别为25.00、18.23、14.96和14.30mm;6株大型真菌对神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460和人肝癌细胞HepG-2均有不同程度的抑制作用,其中菌株G027的活性最为显著,对这4种肿瘤细胞株的IC50值分别为2.84、6.44、11.88和2.96μg/mL。结论:6株大型真菌具有抑菌和(或)细胞毒活性,值得进一步深入研究。

关键词：大型真菌发酵提取物抑菌细胞毒

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转录介导的扩增技术与real-time RT-PCR在人类免疫缺陷病毒检测中的应用

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中南大学学报（医学版） 2017年第7期42卷 776-782页

作者：吴大先陶淑慧刘水平周杰斌谭德明侯周华中南大学湘雅医院感染病科病毒性肝炎湖南省重点实验室长沙410008 传染病诊治国家重点实验室感染病诊治协同创新中心杭州310003 中南大学基础医学院微生物学系长沙410013

目的:利用转录介导的扩增技术(transcription mediated amplification,TMA)扩增HIV RNA,探讨TMA技术扩增HIV RNA的敏感性及其与实时荧光定量反转录聚合酶链反应的比较。方法:利用Taq Man探针、特异性引物、鼠白血病反转录酶、T7-RNA聚... 详细信息

目的:利用转录介导的扩增技术(transcription mediated amplification,TMA)扩增HIV RNA,探讨TMA技术扩增HIV RNA的敏感性及其与实时荧光定量反转录聚合酶链反应的比较。方法:利用Taq Man探针、特异性引物、鼠白血病反转录酶、T7-RNA聚合酶及PCR底物等建立TMA扩增体系。通过扩增一组10倍梯度稀释的HIV RNA转录标准品,评价TMA体系的灵敏性。收集60例HIV感染患者的血浆,同时采用TMA试剂与Cobas Amplicor HIV-1 Monitor 1.5版试剂进行检测,比较两种方法的阳性检出率,并利用线性回归和Bland-Altman法分析两种技术的相关性和一致性。结果:成功建立了TMA扩增体系,这种技术可以检测低至10 copies/m L的HIV转录标准品。60份HIV感染者血浆样本中,TMA及Cobas均检测到阳性46份,均阴性12份,TMA检测阴性而Cobas检测阳性样本2份,检测一致率为96.7%。两种技术阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。对其中46份TMA检测和Cobas检测均有定量结果的血浆进行线性回归分析,两种技术有非常好的相关性(r=0.997,P<0.001)。Bland-Altman分析显示两种检测方法定量Lg差值平均值为0.02,44份(95.7%)样本在95%的一致性界限内。结论:TMA技术具有高灵敏性潜能。TMA与real-time RT-PCR检测血浆中HIV RNA具有非常好的相关性与一致性。

关键词：转录介导的扩增技术人类免疫缺陷病毒实时荧光定量反转录聚合酶链反应线性回归

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梨腐烂病致病力的室内快速测定方法研究

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果树学报 2013年第2期30卷 317-322,F0003页

作者：张美鑫翟立峰周玉霞陈晓忍贾娜娜洪霓王国平华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

【目的】为了研究建立我国梨腐烂病致病力室内快速、稳定的测定方法,【方法】以‘丰水梨’的离体枝条、叶片、嫩梢和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种梨腐烂病的强致病力菌株F-AH-3a,在25℃下保湿培养后观测各处理的发病程度,并... 详细信息

【目的】为了研究建立我国梨腐烂病致病力室内快速、稳定的测定方法,【方法】以‘丰水梨’的离体枝条、叶片、嫩梢和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种梨腐烂病的强致病力菌株F-AH-3a,在25℃下保湿培养后观测各处理的发病程度,并在‘丰水梨’和‘康德梨’上用梨腐烂病致病力已知的菌株对测定方法进行验证。【结果】叶片伤口接种,叶正面的病斑较背面的大,经6针与1和3针刺伤处理产生的病斑大小之间存在显著性差异;嫩梢和果实伤口接种,不同处理产生的病斑大小之间无显著性差异;枝条伤口接种3d后,经打孔、环割、烫打及10针刺伤处理的枝条发病率均为100%,而经3针刺伤、烫伤和芽痕处理的分别为55%、40%和15%。前4种处理病斑的长度显著大于后3种处理。在‘丰水梨’和‘康德梨’品种上,用5个梨腐烂病致病力已知菌株对测定方法进行验证的结果表明,各菌株通过枝条打孔接种后产生的病斑,在其长度之间的差异与菌株致病力已知的强弱相吻合。【结论】采用枝条打孔接种法的测定效果显著、稳定,且操作简单,可用于梨腐烂病菌致病力的室内快速测定。

关键词：梨腐烂病致病力室内测定枝条打孔接种

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生物合成长链二元酸新产业的崛起

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生物加工过程 2007年第4期5卷 1-4页

作者：陈远童中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室北京100080

长链二元酸是一类用途极其广泛的重要精细化工产品。综述了长链二元酸的用途、来源,国内外研究概况以及产业化现状。说明生物合成长链二元酸是中国正在崛起的新产业。

关键词：长链二元酸生物合成正烷烃

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CRISPR/Cas13a系统在大肠杆菌RNA编辑过程中的逃逸现象

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微生物学报 2024年第8期64卷 2998-3013页

作者：张悦许杰王珩瑜盛勇欧一新王斌张蓓康前进张丽青岛大学青岛医学院基础医学院山东青岛266071 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 上海交通大学代谢与发育国际联合合作实验室上海200240

【目的】在大肠杆菌(Escherichia coli)MG1655-ΔrecA和Escherichia coli DH10B中构建CRISPR/LshCas13a质粒干扰系统,通过靶向非必需基因lacZ和必需基因polA,分别分析RNA编辑实验中的逃逸现象。【方法】选取来自沙氏纤毛菌(Leptotrichia shahii)中的Cas13a蛋白编码基因LshCas13a,构建可诱导的CRISPR/LshCas13a的RNA编辑系统相关质粒,选取MG1655-ΔrecA和DH10B为研究对象。通过Crisporo算法,设计靶向lacZ和polA的CRISPR RNA(crRNA)序列,考察利用LshCas13a质粒干扰实验靶向lacZ和polA的逃逸现象。再通过对逃逸菌落的数量和序列分析评估LshCas13a系统的逃逸现象,结合PCR和Sanger测序技术探究LshCas13a系统的逃逸事件。选取通过插入序列(insertion sequence,IS)转座破坏LshCas13a系统的LshCas13a基因的逃逸菌落,通过监测OD_(600)进一步考察菌株的生长情况。【结果】利用LshCas13a系统靶向MG1655-ΔrecA和DH10B中的lacZ和polA,发现靶向lacZ时,MG1655-ΔrecA通过LshCas13a基因点突变和IS转座突变方式逃逸;靶向polA时,MG1655-ΔrecA和DH10B通过点突变LshCas13a基因、IS转座和突变crRNA的直接重复(direct repeat,DR)序列等方式逃逸。LshCas13a编码基因的突变促进了菌株生长的恢复。【结论】本研究利用LshCas13a质粒干扰系统研究了***宿主RNA编辑中的多样化逃逸现象,包括了染色体编码的IS介导的LshCas13a转座突变、LshCas13a点突变、crRNA的DR序列突变或重组等情况。本研究为进一步优化CRISPR/LshCas13a基因编辑系统奠定了基础。

关键词：大肠杆菌 CRISPR/LshCas13a 质粒干扰系统逃逸现象插入序列

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粘细菌子实体生物学活性的研究

粘细菌子实体生物学活性的研究

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山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会

作者：刘新利李越中胡玮扈锡涛夏志杰山东大学生命学院微生物技术国家重点实验室山东大学生命学院微生物技术国家重点实验室山东大学生命学院微生物技术国家重点实验室山东大学生命学院微生物技术国家重点实验室山东大学生命学院微生物技术国家重点实验室

目的探索粘细菌中纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)子实体作为药用菌材料的可行性和药用前景。方法分析纤维堆囊菌子实体的性质,子实体提取物的体外抑菌活性,体外肿瘤细胞抑制活性和动物体内毒性及抑瘤活性。结果粘细菌的子实体代谢物... 详细信息

目的探索粘细菌中纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)子实体作为药用菌材料的可行性和药用前景。方法分析纤维堆囊菌子实体的性质,子实体提取物的体外抑菌活性,体外肿瘤细胞抑制活性和动物体内毒性及抑瘤活性。结果粘细菌的子实体代谢物组成稳定,子实体的提取物对于真菌有显著而广泛的抑制活性,并且对革蓝氏阳性细菌也有一定的抑制作用,对于肿瘤细胞如肝癌Be17402株系具有很强的体外杀伤活性,子实体提取物灌胃对小鼠无毒性反应,并能够明显抑制移植瘤S180的生长。结论粘细菌子实体具有作为药用资源的潜力。

关键词：粘细菌纤维堆囊菌 :子实体药用菌

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云南西部地区家畜动物感染巴贝虫的分子流行病学调查

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中国人兽共患病学报 2017年第12期33卷 1125-1130页

作者：黄涛华高子厚蒋宝贵赵文红苏超贾娜张青江佳富杜春红云南省地方病防治所大理671000 大理大学公共卫生学院大理671000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解云南省西部地区家畜动物感染巴贝虫的状况,为制定防治措施提供依据。方法在云南省西部地区12个县(市)采集家畜动物抗凝血液1 073份(牛血274份、羊血395份、犬血354份,马血33份,驴血17份)。提取基因组DNA,运用PCR检测巴贝虫18SrR... 详细信息

目的了解云南省西部地区家畜动物感染巴贝虫的状况,为制定防治措施提供依据。方法在云南省西部地区12个县(市)采集家畜动物抗凝血液1 073份(牛血274份、羊血395份、犬血354份,马血33份,驴血17份)。提取基因组DNA,运用PCR检测巴贝虫18SrRNA 1 600bp长片段,通过基因序列比对及系统进化分析进行巴贝虫定种。结果共检出巴贝虫阳性样本50份,分属5种巴贝虫,总阳性率4.66%。其中牛血中检出11份阳性(4.01%),4份为牛巴贝虫(***),7份为双芽巴贝虫(***)。羊血中检出38份阳性(9.62%),37份为奥氏巴贝虫样寄生虫(***-like parasites),1份为狍巴贝虫样寄生虫(***-like parasites);犬血中检出阳性1份(0.28%),为韦氏巴贝虫(***)。马和驴未检出阳性。结论云南省西部部分县市的家畜动物存在多种巴贝虫感染,给当地畜牧业的发展和人类的健康造成一定的危害,需加强防范,当地人群感染情况值得进一步调查。

关键词：云南省家畜动物巴贝虫调查

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黄褐裸盖伞驯化栽培及子实体形态多态性研究

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安徽农业科学 2007年第7期35卷 1937-1938页

作者：何培新孙新城王丽娟唐新庆张长铠郑州轻工业学院食品与生物工程学院河南郑州450002 山东大学微生物技术国家重点实验室山东济南250100

用8种培养基进行了黄褐裸盖伞子实体培养研究,同时观察了人工培养子实体的形态多态性。结果表明,黄褐裸盖伞在多种天然和半合成培养基上都可良好生长和结实,其中土豆系列培养基非常适合黄褐裸盖伞菌丝体生长和结实;人工培养出现4种不同... 详细信息

用8种培养基进行了黄褐裸盖伞子实体培养研究,同时观察了人工培养子实体的形态多态性。结果表明,黄褐裸盖伞在多种天然和半合成培养基上都可良好生长和结实,其中土豆系列培养基非常适合黄褐裸盖伞菌丝体生长和结实;人工培养出现4种不同形态的子实体:正常子实体、小型子实体、花椰菜状子实体和无分化子实体。

关键词：黄褐裸盖伞人工培养子实体形态多态性

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细菌钠离子输出系统的类型及其可能机制

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微生物学报 2007年第6期47卷 1110-1114页

作者：杨礼富赵百锁杨苏声中国热带农业科学院橡胶研究所农业部热带作物栽培生理学重点开放实验室儋州571737 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点联合实验室北京100084 中国农业大学生物学院微生物与免疫学系农业部农业微生物资源与应用重点实验室北京100094

在高盐条件下,绝大多数微生物通过拒盐策略适应其生存环境,其中,钠离子输出系统在维持细胞正常的盐浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演十分重要的角色。细菌的钠离子输出系统包括初级钠泵和次级钠泵两种类型,前者所介导的钠离子输出与呼... 详细信息

在高盐条件下,绝大多数微生物通过拒盐策略适应其生存环境,其中,钠离子输出系统在维持细胞正常的盐浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演十分重要的角色。细菌的钠离子输出系统包括初级钠泵和次级钠泵两种类型,前者所介导的钠离子输出与呼吸相偶联,后者又分为单亚基和多亚基两种类型。到目前为止,有关初级钠泵和次级钠泵转运钠离子的分子机制还停留在推测阶段。对细菌Na+输出系统的类型和Na+外排的可能机制进行综述,并对有待深入研究的问题进行探讨。

关键词：细菌钠离子输出初级钠泵次级钠泵

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