检索结果-内蒙古大学图书馆

Rho/ROCK信号通路参与晚期糖基化终产物诱导的人皮肤微血管内皮细胞骨架结构改变

生理学报 2009年第2期61卷 132-138页

作者：王吉萍郭晓华王陵军李强陈波吴炜黄绪亮黄巧冰南方医科大学基础医学院病理生理教研室广东省医学休克微循环重点实验室广州510515

本文旨在探讨Rho信号转导通路在晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的人皮肤微血管内皮细胞(human dermal microvascular endothelial cells,HMVECs)形态及功能改变中的作用及机制。体外培养HMVECs细胞株,分别以不同浓度的AGEs修饰的人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)处理不同时间,并设立对照组进行比较。用免疫荧光染色法、激光共聚焦显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的结构及分布;用Rho激酶(Rho kinase,ROCK)抑制剂Y-27632或H-1152预处理细胞30min后,与前者进行对比,同时用免疫印迹法检测Rho、ROCK及其磷酸化水平的变化;用FITC荧光标记蛋白漏出法测定单层内皮细胞的通透系数(apparent permeability coefficient,Pa)值。结果显示,AGEs-HSA以剂量和时间依赖的方式引起HMVECs细胞骨架蛋白F-actin结构和分布的改变,未经修饰的HSA无此作用;ROCK特异性抑制剂Y-27632和H-1152均可抑制AGEs对细胞骨架的影响。AGEs-HSA引起Rho、ROCK磷酸化水平的增加(P<0.05),但对总蛋白没有明显影响。与对照组相比,AGEs-HSA使内皮细胞的通透性升高(P<0.01),Y-27632和H-1152均能抑制这种改变(P<0.01)。以上结果提示,Rho信号通路在AGEs介导的HMVECs形态和功能改变中发挥了重要作用。

关键词： Rho信号通路晚期糖基化终产物人皮肤微血管内皮细胞细胞骨架肌动蛋白

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小鼠受精卵早期发育过程中PKA在M/G1期进程中的作用

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细胞生物学杂志 2003年第3期25卷 174-178页

作者：王亚杰刘莹陈菲于爱鸣宗志红于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室中国医科大学基础医学院病理生理教研室沈阳110001

为研究小鼠体内1-细胞期受精卵蛋白激酶A(PKA)对M/G1期进程的影响,应用热稳定性抑制剂PKI显微注射入1-细胞期受精卵内,观察M期促进因子(MPF)及PKA活性变化以及MPF调节亚基Cyclin B含量情况。发现PKI显微注射后PKA活性低,而MPF活性在hCG... 详细信息

为研究小鼠体内1-细胞期受精卵蛋白激酶A(PKA)对M/G1期进程的影响,应用热稳定性抑制剂PKI显微注射入1-细胞期受精卵内,观察M期促进因子(MPF)及PKA活性变化以及MPF调节亚基Cyclin B含量情况。发现PKI显微注射后PKA活性低,而MPF活性在hCG后27.5 h即达高峰,较对照组提前30分钟。PKI达一定浓度则MPF活性不下降,出现M/G1阻滞;与此同时Western blotting法显示PKI注射后Cyclin B含量在M末期相当于M中期水平。结果表明,PKI显微注射抑制PKA活性后MPF活性呈高峰值,高浓度PKI显微注射可引起M/G1阻滞,其机制与PKI干扰了Cyclin B降解有关。

关键词：小鼠受精卵早期发育 PKA M/G1期蛋白激酶A M期促进因子 MPF

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实验动物呼吸力学指标的测定

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同济医科大学学报 1995年第2期24卷 91-93页

作者：李会革王迪浔武汉同济医科大学基础医学院病理生理学教研室

实验测定了整体家兔和在位灌流大鼠肺的呼吸力学参数。８只家兔结果（ｘ±ｓ）：潮气量１３．７５±２．７８ｍｌ，每分通气量５４７．９４±３９．４２ｍｌ／ｍｉｎ，动态肺顺应性３６．６７±９．２７ｍｌ／ｋＰａ，... 详细信息

实验测定了整体家兔和在位灌流大鼠肺的呼吸力学参数。８只家兔结果（ｘ±ｓ）：潮气量１３．７５±２．７８ｍｌ，每分通气量５４７．９４±３９．４２ｍｌ／ｍｉｎ，动态肺顺应性３６．６７±９．２７ｍｌ／ｋＰａ，肺阻力６．５２±１．４５Ｐａ·ｓ／ｍｌ。１８例在位灌流大鼠肺的相应结果为：２．１２±０．４０ｍｌ，１２７．２８±２４．１３ｍｌ／ｍｉｎ，４．４６±１．０４ｍｌ／ｋＰａ和１３．１１±５．４７Ｐａ·ｓ／ｍｌ。并在肺标本上测定了气道对乙酰胆碱的反应性。

关键词：呼吸力学实验动物

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SATB1高表达通过促进上皮-间充质转化而介导鼻咽癌细胞侵袭和转移

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中国病理生理杂志 2018年第9期34卷 1578-1585页

作者：贾亚楠王可可王思思廖晓敏封慕茵袁建玲邵钟铭揭伟申志华广东医科大学基础医学院病理生理教研室广东湛江524023 广东医科大学基础医学院病理学系广东湛江524023

目的:探讨鼻咽癌(NPC)中特殊富含AT序列结合蛋白1(SATB1)的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:免疫组化检测76例临床NPC及61例对照鼻咽黏膜慢性炎症(NPI)组织样本中SATB1、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,... 详细信息

目的:探讨鼻咽癌(NPC)中特殊富含AT序列结合蛋白1(SATB1)的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:免疫组化检测76例临床NPC及61例对照鼻咽黏膜慢性炎症(NPI)组织样本中SATB1、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,并分析NPC中SATB1与患者临床参数、E-cadherin和vimentin表达的相关性。体外培养不同分化状态的NPC细胞系CNE1、CNE2Z及C666-1,筛选出SATB1高表达细胞系,采用小干扰RNA(siRNA)沉默SATB1表达后,分析上皮-间充质转化(EMT)相关分子的表达及细胞侵袭能力的改变。结果:临床鼻咽组织中SATB1表达定位于胞质和胞核,NPC组中SATB1阳性表达率显著高于对照NPI组(P<0.01);E-cadherin在NPI黏膜上皮中呈膜阳性表达,NPC中膜表达水平下降,但出现胞质阳性。NPI中E-cadherin膜阳性率为100%,显著高于NPC的32.89%(P<0.01)。Vimentin呈胞质阳性,NPI上皮细胞中均阴性,但NPC中阳性率为51.32%(P<0.01)。NPC中SATB1高表达与患者性别、年龄及N分期无关,但与T分期和M分期均呈正相关(P<0.05);SATB1高表达与vimentin呈正相关(r=0.358,P=0.009)。NPC细胞系中SATB1表达与细胞分化水平呈负相关。采用siRNA敲减C666-1细胞中SATB1表达后,E-cadherin表达上升,vimentin表达下降,且细胞侵袭能力下降。结论:SATB1高表达通过促进EMT而介导NPC临床进展。

关键词：鼻咽癌特殊富含AT序列结合蛋白1 上皮-间充质转化侵袭转移

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大鼠缺氧性肺、脑血管反应中钾通道的作用

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同济医科大学学报 1996年第2期25卷 87-91页

作者：刘杰王迪浔武汉同济医科大学基础医学院病理生理学教研室

通过实验研究不同类型的Ｋ￣＋通道阻滞剂４－氨基吡啶（４－ＡＰ）、优降糖和ＡＴＰ敏感Ｋ￣＋通道开放剂ＷＡＹ－１２０４９１对大鼠在体缺氧性肺、脑血管反应的影响，以探讨Ｋ￣＋通道在其中的作用。结果，４－ＡＰ能明显增强缺氧性... 详细信息

通过实验研究不同类型的Ｋ￣＋通道阻滞剂４－氨基吡啶（４－ＡＰ）、优降糖和ＡＴＰ敏感Ｋ￣＋通道开放剂ＷＡＹ－１２０４９１对大鼠在体缺氧性肺、脑血管反应的影响，以探讨Ｋ￣＋通道在其中的作用。结果，４－ＡＰ能明显增强缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ），减弱缺氧性脑血管扩张反应（ＨＣＶＤ）；ＷＡＹ－１２０４９１能减弱ＨＰＶ，对ＨＣＶＤ无作用；优降糖对ＨＰＶ及ＨＣＶＤ均无影响。提示，４－ＡＰ敏感的钾通道开放参与ＨＰＶ和ＨＣＶＤ，可能调节ＨＰＶ，而介导ＨＣＶＤ；ＡＴＰ敏感Ｋ￣＋通道的阻滞可能介导ＨＰＶ。

关键词：缺氧症钾通道肺血管脑循环病理过程生理

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白花丹素对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2018年第6期44卷 1223-1229页

作者：朱德强陈学军锦州医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨白花丹素(PLB)对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法:体外培养肝癌HepG2细胞,建立索拉菲尼耐药细胞模型HepG2R,MTT法鉴定耐药倍数和筛选药物作用浓度及时间,依据其结果选择索拉菲尼和PLB作用浓... 详细信息

目的:探讨白花丹素(PLB)对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法:体外培养肝癌HepG2细胞,建立索拉菲尼耐药细胞模型HepG2R,MTT法鉴定耐药倍数和筛选药物作用浓度及时间,依据其结果选择索拉菲尼和PLB作用浓度分别为5μmol·L^(-1)和2μmol·L^(-1),各组药物作用时间为48h。将HepG2R细胞随机分为对照组、索拉菲尼(5μmol·L^(-1))组、PLB (2μmol·L^(-1))组和索拉菲尼(5μmol·L^(-1))联合PLB (2μmol·L^(-1))组(联合组)。MTT法检测各组细胞活力,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,Hoechst 33342实验和细胞流式术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平,计算Bax/Bcl-2比值。采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞中ROS水平。结果:随着索拉菲尼浓度的升高,HepG2和HepG2R细胞活力逐渐降低,耐药细胞HepG2R对索拉菲尼的半数抑制浓度(IC50)值是HepG2的4.5倍(P<0.05)。随着PLB浓度升高和作用时间延长,耐药细胞对索拉菲尼敏感性升高。与对照组、索拉菲尼组和PLB组比较,联合组耐药细胞克隆形成率降低(P<0.05或P<0.01)。Hoechst33342实验,对照组细胞核淡染,索拉菲尼组和PLB组细胞核少部分浓染、明亮;联合组细胞核大部分浓染,细胞核染色质固缩、明亮。流式细胞术和Western blotting法检测,与对照组、索拉菲尼组和PLB组比较,联合组细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01),细胞中cleaved Caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05或P<0.01)。联合组细胞中ROS水平明显高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。结论:PLB能改善肝癌对索拉菲尼的耐药情况,其机制可能与升高耐药细胞中ROS水平有关。

关键词：白花丹素肝肿瘤索拉菲尼 HepG2细胞细胞增殖细胞凋亡

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基于CRISPR/Cas9技术构建SETD2基因敲除鼻咽癌细胞株并分析其增殖特性

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中国病理生理杂志 2018年第12期34卷 2172-2179页

作者：王思思廖晓敏邵钟铭袁建玲封慕茵哈艳平李汝佳申志华揭伟广东医科大学基础医学院病理学系广东湛江524023 广东医科大学基础医学院病理生理教研室广东湛江524023

目的:基于CRISPR/Cas9技术构建SETD2基因敲除鼻咽癌(NPC)细胞株,并对该细胞株的增殖特性进行分析。方法:采用RT-PCR及Western blot检测永生化鼻咽黏膜细胞系NP-69及不同分化NPC细胞系CNE1、CNE2Z和C666-1中SETD2的表达情况,筛选出SETD2... 详细信息

目的:基于CRISPR/Cas9技术构建SETD2基因敲除鼻咽癌(NPC)细胞株,并对该细胞株的增殖特性进行分析。方法:采用RT-PCR及Western blot检测永生化鼻咽黏膜细胞系NP-69及不同分化NPC细胞系CNE1、CNE2Z和C666-1中SETD2的表达情况,筛选出SETD2高表达细胞系CNE1。应用CRISPR/Cas9技术敲除CNE1细胞中的SETD2基因,筛选SETD2稳定敲除细胞株。采用CCK-8和平板集落形成实验分析SETD2基因敲除前后CNE1细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期的分布,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。结果:与NP-69细胞相比,随着细胞分化程度的降低,SETD2在CNE1、CNE2Z和C666-1细胞中的表达逐渐下降(P <0. 01)。基于CRISPR/Cas9方法成功地从15个转染了小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)的CNE1细胞单克隆中筛选出2个SETD2稳定敲除的细胞株CNE1-SETD2-KO-#5和#9。CCK-8及平板集落形成实验结果证实,相对于CNE1-WT细胞,CNE1-SETD2-KO-#5和#9细胞的增殖能力增强(P <0. 05);流式细胞术分析表明,CNE1-SETD2-KO-#5和#9细胞G1期减少而G2/M和S期均增加(P <0. 05); Western blot证实,SETD2敲除后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素D1(cyclin D1)、cyclin B1、cyclin A2、cyclin E1、细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)和CDK4表达增加,p21表达减少(P <0. 05)。结论:基于CRISPR/Ca9技术成功构建SETD2基因敲除NPC细胞株。NPC细胞中SETD2表达与细胞分化程度有关; SETD2表达缺失通过上调cyclin D1、cyclin B1、cyclin A2、cyclin E1、CDK2和CDK4并下调p21表达而促进细胞增殖。

关键词：鼻咽癌 SETD2基因 CRISPR/Cas9技术基因组编辑细胞增殖

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哈萨克族舌运动类型及其相互关系

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解剖学报 2022年第6期53卷 802-807页

作者：黄婷李欣兰蕙温有锋锦州医科大学基础医学院生物人类学研究所辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁锦州121001

目的对新疆哈萨克族舌运动类型进行研究,探讨各项舌运动类型间相互关系,为人类群体遗传学研究积累资料。方法对新疆塔城地区405例(男为178例,女为227例)哈萨克族人进行舌运动类型的调查,利用卡方检验、u检验和聚类分析探讨哈萨克族舌... 详细信息

目的对新疆哈萨克族舌运动类型进行研究,探讨各项舌运动类型间相互关系,为人类群体遗传学研究积累资料。方法对新疆塔城地区405例(男为178例,女为227例)哈萨克族人进行舌运动类型的调查,利用卡方检验、u检验和聚类分析探讨哈萨克族舌运动特点以及同其他民族舌运动联系。采用广义多因素降维法(GMDR)分析和Logistics回归分析法分析各项舌运动之间的相关性。结果新疆哈萨克族卷舌、叠舌、翻舌、尖舌出现率分别为73.08%、41.97%、18.02%、66.91%,4项舌运动性别间出现率无差异。与我国其他民族的舌运动类型相比,卷舌、尖舌出现率属于中等水平,叠舌出现率较高,翻舌出现率较低。聚类分析结果显示,新疆哈萨克族的舌运动类型与辽宁锦州汉族最为接近。GMDR分析结果显示,4种舌运动中,卷舌与叠舌,叠舌与卷舌和尖舌,翻舌与尖舌、卷舌和叠舌,以及尖舌与叠舌之间存在交互作用。Logistics回归分析结果显示,卷舌与叠舌、尖舌与叠舌、叠舌与尖舌和卷舌存在相关性。结论新疆哈萨克族4项舌运动类型与国内族群舌运动相比,叠舌运动能力较强,翻舌运动能力较弱,卷舌和尖舌运动能力一般,其中卷舌与叠舌、尖舌与叠舌、叠舌与尖舌和卷舌存在相关性。

关键词：新疆哈萨克族舌运动类型性别差异聚类分析成人

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过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除小鼠脾细胞的氧化应激

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中国组织工程研究 2013年第7期17卷 1243-1250页

作者：和静韦思宇刘凤勇叶静沈炳玲姚小梅天津医科大学基础医学院病理生理教研室天津市300070

背景:脑缺血再灌注早期,由于脾脏中有大量炎症因子浸润引发氧化应激损伤,导致脑缺血再灌注后脾细胞出现大量凋亡。目的:观察外源性过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除小鼠脾细胞活力的影响及N-乙酰-L-半胱氨酸对过氧化氢诱导的脾细胞氧化应... 详细信息

背景:脑缺血再灌注早期,由于脾脏中有大量炎症因子浸润引发氧化应激损伤,导致脑缺血再灌注后脾细胞出现大量凋亡。目的:观察外源性过氧化氢对金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除小鼠脾细胞活力的影响及N-乙酰-L-半胱氨酸对过氧化氢诱导的脾细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:制备金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除小鼠脾细胞悬液,分别用不同浓度(0.1,0.2,0.5,1,2mmol/L)过氧化氢处理2h后,MTT比色法检测细胞活力。根据MTT结果选择不同浓度过氧化氢(0.5,1mmol/L)诱导脾细胞凋亡,实验分为6组:对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸组、0.5mmol/L过氧化氢组、1mmol/L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+0.5mmol/L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+1mmol/L过氧化氢组,2h后MTT比色法检测细胞活力,酶标仪法检测乳酸脱氢酶活力及紫外分光光度仪检测线粒体通透性转换孔的开放情况。结果与结论:随过氧化氢浓度增加脾细胞活力呈明显下降趋势(P<0.01),且0.2,0.5,1,2mmol/L过氧化氢组脾细胞活力下降幅度最大。与对照组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸组脾细胞活力明显提高(P<0.01),且乳酸脱氢酶活力降低(P<0.01),线粒体通透性转换孔开放减少(P<0.01);分别于0.5,1mmol/L过氧化氢组相比,N-乙酰-L-半胱氨酸+0.5mmol/L过氧化氢组、N-乙酰-L-半胱氨酸+1mmol/L过氧化氢组脾细胞活力也明显提高(P<0.01),乳酸脱氢酶活力降低(P<0.01),线粒体通透性转换孔开放减少(P<0.01)。结果表明,金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除小鼠随着过氧化氢浓度的升高,脾细胞活力逐渐下降,呈浓度依赖性,尤其对0.2,0.5,1,2mmol/L过氧化氢刺激最为敏感。N-乙酰-L-半胱氨酸使乳酸脱氢酶释放和线粒体通透性转换孔的开放减少,脾细胞活力增强,以此减轻过氧化氢诱导的金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ敲除鼠脾细胞的氧化应激损伤。

关键词：组织构建组织构建细胞学实验金属硫蛋白金属硫蛋白Ⅰ/Ⅰ基因敲除小鼠脾凋亡 N-乙酰-L-半胱氨酸过氧化氢氧化应激线粒体通透性转换孔脑缺血再灌注乳酸脱氢酶国家自然科学基金

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TCS对Eca-109的增殖抑制作用及其机制初探

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天津医药 2009年第3期37卷 173-176,I0001页

作者：陈玉龙段红汤为学邓华瑜重庆医科大学基础医学院病理生理教研室 400016

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)对食管癌Eca-109细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测TCS对Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRN... 详细信息

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)对食管癌Eca-109细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测TCS对Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化;Western blot检测Survivin、Caspase-3与C-myc蛋白表达变化;TRAP-PCR银染法定性测定细胞的端粒酶活性。结果:TCS对Eca-109细胞增殖有抑制作用且具有剂量-时间效应;TCS明显诱导细胞凋亡,药物组凋亡率高于对照组(P<0.05),并且药物组的S期细胞明显高于对照组(P<0.05);TCS可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达,下调C-myc蛋白表达、使端粒酶活性降低。结论:TCS能够抑制Eca-109细胞增殖。其机制可能为TCS影响了细胞周期和抑制了Survivin表达。

关键词：癌天花粉食管肿瘤细胞凋亡细胞周期微管相关蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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