检索结果-内蒙古大学图书馆

河北医科大学学报 2010年第1期31卷 13-15页

作者：董秀杰李淑琴阎雪武宇洲祖秀光都军河北医科大学第二医院心内科河北石家庄050000 河北省枣强县人民医院内科河北枣强053100 河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017

目的观察银杏叶提取物对健康绝经后女性冠状动脉血流的影响。方法 60例冠状动脉造影正常的健康绝经后女性分为银杏叶提取物注射液治疗组和对照组(各30例),2组均于用药前、后采用经胸超声心动图检测冠状动脉左前降支血流的变化。结果银... 详细信息

目的观察银杏叶提取物对健康绝经后女性冠状动脉血流的影响。方法 60例冠状动脉造影正常的健康绝经后女性分为银杏叶提取物注射液治疗组和对照组(各30例),2组均于用药前、后采用经胸超声心动图检测冠状动脉左前降支血流的变化。结果银杏叶提取物注射液显著增加健康绝经后女性冠状动脉左前降支收缩期峰值流速、舒张期峰值流速和舒张期时间速度积分;而对照组冠状动脉左前降支血流无明显变化,治疗组优于对照组(P<0.01)。结论银杏叶提取物注射液可增加健康绝经后女性冠状动脉血流。

关键词：银杏叶冠状血管绝经后期

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热应激小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的抗肿瘤免疫机制

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复旦学报（医学版） 2009年第6期36卷 681-686,691页

作者：孙迪杨麟沈宜汪少华向自武重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以E... 详细信息

目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。

关键词： Exosomes 小鼠肝癌细胞(H22) HS-Exo 肿瘤免疫

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Rho/ROCK信号通路参与晚期糖基化终产物诱导的人皮肤微血管内皮细胞骨架结构改变

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生理学报 2009年第2期61卷 132-138页

作者：王吉萍郭晓华王陵军李强陈波吴炜黄绪亮黄巧冰南方医科大学基础医学院病理生理教研室广东省医学休克微循环重点实验室

本文旨在探讨Rho信号转导通路在晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的人皮肤微血管内皮细胞(human dermal microvascular endothelial cells,HMVECs)形态及功能改变中的作用及机制。体外培养HMVECs细胞株,分别以不同浓度的AGEs修饰的人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)处理不同时间,并设立对照组进行比较。用免疫荧光染色法、激光共聚焦显微镜观察细胞骨架肌动蛋白F-actin的结构及分布;用Rho激酶(Rho kinase,ROCK)抑制剂Y-27632或H-1152预处理细胞30min后,与前者进行对比,同时用免疫印迹法检测Rho、ROCK及其磷酸化水平的变化;用FITC荧光标记蛋白漏出法测定单层内皮细胞的通透系数(apparent permeability coefficient,Pa)值。结果显示,AGEs-HSA以剂量和时间依赖的方式引起HMVECs细胞骨架蛋白F-actin结构和分布的改变,未经修饰的HSA无此作用;ROCK特异性抑制剂Y-27632和H-1152均可抑制AGEs对细胞骨架的影响。AGEs-HSA引起Rho、ROCK磷酸化水平的增加(P<0.05),但对总蛋白没有明显影响。与对照组相比,AGEs-HSA使内皮细胞的通透性升高(P<0.01),Y-27632和H-1152均能抑制这种改变(P<0.01)。以上结果提示,Rho信号通路在AGEs介导的HMVECs形态和功能改变中发挥了重要作用。

关键词： Rho信号通路晚期糖基化终产物人皮肤微血管内皮细胞细胞骨架肌动蛋白

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甲醛炎性痛诱导大鼠海马神经元凋亡

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中国应用生理学杂志 2009年第2期25卷 190-194页

作者：胡玉燕李清君李文斌郭莉华褚赛纯河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017

目的:观察甲醛炎性痛是否可诱导大鼠海马神经元凋亡。方法:采用行为学方法观察大鼠自发痛反应,流式细胞术检测海马神经元凋亡率,免疫组织化学法检测海马神经元p53蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,大鼠足底皮下注射甲醛后海马神经元... 详细信息

目的:观察甲醛炎性痛是否可诱导大鼠海马神经元凋亡。方法:采用行为学方法观察大鼠自发痛反应,流式细胞术检测海马神经元凋亡率,免疫组织化学法检测海马神经元p53蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,大鼠足底皮下注射甲醛后海马神经元凋亡率显著增高,海马各区p53蛋白表达明显增加,二者均于注射甲醛后3 d达高峰;足底两次注射甲醛和一次注射甲醛组比较,大鼠自发痛反应增强,并且海马神经元凋亡率进一步增加。结论:甲醛炎性痛可诱导大鼠海马神经元凋亡,这种改变具有一定的时程特征;海马神经元凋亡率与疼痛强度有关;p53蛋白的表达增加可能参与了伤害性信息传入对神经元凋亡的诱导。

关键词：甲醛炎性痛海马神经元凋亡 p53

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pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体的构建及在大鼠心肌细胞的表达

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首都医科大学学报 2009年第2期30卷 195-198页

作者：马立权曾翔俊王红霞油红捷芦玲巧张立克郑少鹏首都医科大学基础医学院病理生理教研室

目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.... 详细信息

目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体。转染大鼠心肌细胞,用RT-PCR的方法鉴定其在大鼠心肌细胞的表达。结果得到CYP2J3基因全长序列和真核表达载体pcDNA3.1(+)-CYP2J3。RT-PCR结果显示,转染pcDNA3.1(+)-CYP2J3后的大鼠心肌细胞CYP2J3基因有稳定表达。结论克隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体构建及在大鼠心肌细胞的表达均获成功,为进一步研究CYP2J3基因在细胞中的功能奠定了基础。

关键词： CYP2J3 载体构建心肌细胞转染

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TCS对Eca-109的增殖抑制作用及其机制初探

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天津医药 2009年第3期37卷 173-176,I0001页

作者：陈玉龙段红汤为学邓华瑜重庆医科大学基础医学院病理生理教研室 400016

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)对食管癌Eca-109细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测TCS对Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRN... 详细信息

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)对食管癌Eca-109细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用MTT法检测TCS对Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化;Western blot检测Survivin、Caspase-3与C-myc蛋白表达变化;TRAP-PCR银染法定性测定细胞的端粒酶活性。结果:TCS对Eca-109细胞增殖有抑制作用且具有剂量-时间效应;TCS明显诱导细胞凋亡,药物组凋亡率高于对照组(P<0.05),并且药物组的S期细胞明显高于对照组(P<0.05);TCS可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达,下调C-myc蛋白表达、使端粒酶活性降低。结论:TCS能够抑制Eca-109细胞增殖。其机制可能为TCS影响了细胞周期和抑制了Survivin表达。

关键词：癌天花粉食管肿瘤细胞凋亡细胞周期微管相关蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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三氧化二砷诱导小鼠肝癌细胞H_(22)外泌exosome及相关机制研究

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第三军医大学学报 2009年第3期31卷 216-219页

作者：向自武沈宜汪少华范维珂陈黎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNAR... 详细信息

目的探讨三氧化二砷在小鼠肝癌细胞H22外泌exosome中的影响。方法MTT法筛选三氧化二砷的合适药物浓度;密度梯度离心和超速离心法提纯exosome,Bradford法对exosome总蛋白进行定量分析;Western blot检测影响小囊泡vesicle分泌的复合体SNARE的重要组成及调节蛋白Syntaxin的表达;结合钙荧光探针Fura-2、荧光倒置定量显微镜测定细胞内游离钙的相对浓度。结果维持小鼠肝癌细胞H2290%存活48h的药物浓度为1.25μmmol/L;药物作用前后,细胞数为5×104ml-1的H22细胞常规培养48h所得细胞悬液200ml,经密度梯度离心和超速离心所得exosome的总蛋白浓度分别为(0.85±0.13)、(0.96±0.10)mg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);三氧化二砷作用前后,H22细胞均有Syntaxin蛋白表达,三氧化二砷处理后,其表达明显增加(P<0.05)。结论SNARE复合体假说也适用于小鼠肝癌细胞H22的exosome外泌过程,三氧化二砷在exosome的外泌过程中有一定的促进作用。

关键词：三氧化二砷 exosome 胞吐作用 SNARE假说 Syntaxin

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以精品课程建设为契机,推动病理生理学教学改革

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中国病理生理杂志 2009年第11期25卷 2250-2251页

作者：张丽莙张利军叶静刘欣天津医科大学基础医学院病理生理学教研室天津300070

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α-ZAL、GST和17β E_2对去势食饵性大鼠HHCY所致血管内皮损伤的保护作用

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中国药理学通报 2009年第7期25卷 891-894页

作者：洪霓段金虹张彦东吴云清甄攀攀蒋东桥戴顺龄王雯中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 首都医科大学病理生理学教研室北京100069

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵... 详细信息

目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);④OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);⑤OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);⑥OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2)。α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25ml,共12wk。双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果血浆HCY含量(μmol.L-1):Sham与Con组比较明显升高,P<0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P<0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。血浆ET-1(ng.L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P<0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P<0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化。病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润。结论α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似。

关键词： α-玉米赤霉醇染料木素 17β雌二醇高同型半胱氨酸血症内皮素

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P38MAPK信号转导通路在大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中的作用

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中国中药杂志 2009年第11期34卷 1439-1443页

作者：廖洋陈建斌汤为学葛群芳卢前微杨泽松重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理教研室重庆400016

目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理... 详细信息

目的:探讨大蒜素诱导THP-1细胞凋亡中P38MAPK及Fas基因表达的变化。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对THP-1细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡率的变化;免疫细胞化学法观察大蒜素处理后细胞内磷酸化P38MAPK(P-p38MAPK)表达及分布变化;Western blot检测大蒜素处理前后细胞内P-p38MAPK和Fas蛋白表达量的变化。结果:MTT显示大蒜素能抑制THP-1细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性。其72h中效浓度(IC50)为12.8 mg.L-1。Annexin V-FITC/PI检测凋亡率随大蒜素浓度增加而增加。免疫细胞化学法检测药物处理后P-p38MAPK表达增加,主要分布于细胞核与细胞浆,而阴性对照组仅弱表达。Western blot结果分析P-p38MAPK,Fas蛋白表达量随大蒜素浓度的增加而增加,呈剂量依赖性。其阴性组、72 h的1/2 IC50组、IC50组P-p38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为0.2598±0.0132,0.3612±0.008 3,0.5056±0.0055;Fas蛋白表达水平分别为0.287 4±0.0089,0.426 8±0.0079和0.597 1±0.0109,差别均有显著性意义(P<0.01)。结论:大蒜素可诱导THP-1细胞凋亡,其诱导凋亡机制可能是通过激活P-p38MAPK/Fas途径实现。

关键词：大蒜素 THP-1细胞细胞凋亡磷酸化P38MAP K 信号转导

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