检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2020年第9期36卷 1024-1032页

作者：李博马元武中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

造血干细胞对血液系统稳态维持发挥着至关重要的作用,它通过自我更新以维持自身不被耗竭,同时通过定向分化,补充各类功能血液细胞。当造血干细胞自我更新和定向分化出现问题,就会产生一系列造血系统疾病,例如髓系白血病、淋系白血病和... 详细信息

造血干细胞对血液系统稳态维持发挥着至关重要的作用,它通过自我更新以维持自身不被耗竭,同时通过定向分化,补充各类功能血液细胞。当造血干细胞自我更新和定向分化出现问题,就会产生一系列造血系统疾病,例如髓系白血病、淋系白血病和骨髓增生性疾病等。关于造血干细胞的衰老和疾病变迁的调控机制一直是研究的热点。作为异质性细胞群,造血干细胞命运受到细胞内调控因子、细胞外生长因子、细胞外基质蛋白等多种因素调控,这是一个高度复杂且精确的调控过程。单细胞测序技术的发展,可以在单细胞水平从基因组、转录组、表观遗传组和蛋白质组等方面了解造血干细胞的命运调控网络。利用基因编辑技术可以建立多种基因修饰动物模型,不仅可以用于基因功能研究,也可以用于评价造血干细胞的安全性。此外,基因修饰动物模型结合单细胞测序技术,还能对造血干细胞实现命运示踪和调控分析。单细胞测序和基因编辑等新技术的应用,极大地推动了造血干细胞相关研究的进展。本文将从这些新技术在造血干细胞研究领域中的应用和存在的问题进行阐述,方便大家了解这些技术的优缺点,以便在以后的应用中提供帮助。

关键词：造血干细胞单细胞测序基因编辑

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干细胞与转化医学研究进展浅析

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中国实验动物学报 2016年第4期24卷 439-440,I0001,I0002页

作者：高舒平曲春辉周瑞秦川中国医学科学院医学实验动物研究所干细胞与临床转化实验室北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

干细胞与医学转化是近阶段比较热门的学科。由于干细胞的多种分化潜能和高度的自我更新能力,已经成为修复生命有机体功能细胞的种子细胞,而且在再生医学和组织工程中愈发引起人们的广泛重视。干细胞在临床转换应用的实验研究结果给许多... 详细信息

干细胞与医学转化是近阶段比较热门的学科。由于干细胞的多种分化潜能和高度的自我更新能力,已经成为修复生命有机体功能细胞的种子细胞,而且在再生医学和组织工程中愈发引起人们的广泛重视。干细胞在临床转换应用的实验研究结果给许多种疾病带来了希望,它克服了临床常规治疗的局限性。目前,干细胞的临床研究处于一个快速的发展阶段,世界各国均高度重视。我国政府对干细胞研究也高度重视,加大了科研的投入,加强了规范化管理,制定了相关政策。如果在干细胞治疗的领域采用转化医学的模式,将科研与临床密切的联系结合,重视在大型实验动物如猪、犬、猴的人类疾病的动物模型的干细胞治疗应用研究,将会促进干细胞临床转化的速度。

关键词：干细胞转化医学细胞治疗动物模型

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亚致死剂量γ-射线全身照射对小鼠造血免疫功能远期影响

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中国比较医学杂志 2019年第11期29卷 50-57,64页

作者：管博文卢延华苏路路李程程荆学双董银萍王月英李德冠孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院/北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192

目的观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p1... 详细信息

目的观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p16表达水平。结果照射后6个月外周血白细胞、红细胞计数仍然明显低于对照组。血小板与对照组无明显差异。外周血细胞分类结果显示照射组小鼠中性粒细胞比例升高、淋巴细胞比例下降,呈现细胞分化偏移现象。与对照组相比,6 Gy照射后6个月,胸腺系数明显降低(P<0. 05)。脾系数无差异。外周血流式分析,结果显示4 Gy、6 Gy照射后,B淋巴细胞、NK细胞仍然低于对照组,提示受照后6个月未完全恢复。受照组CD4比例高于对照组。CD8、单核细胞与对照组未见差异。脾免疫细胞进行流式分析,结果显示4 Gy和6 Gy照射后6个月,B220对于对照组均有明显下降,均具极显著性差异(P<0. 01)。相比于对照组,6 Gy组脾T细胞p16表达有升高的趋势,但无显著性差异。结论亚致死剂量照射后6个月各项检测基本恢复,但是外周血分类中性粒持续升高,胸腺系数及外周血、脾B淋巴细胞比例仍低于对照组。提示可能有远期损伤。本项实验数据为中高剂量照射后造血免疫功能长期损伤研究提供了基础数据。

关键词：亚致死剂量照射远期外周血细胞计数免疫脏器免疫分型小鼠

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细胞衰老与2型糖尿病的相关性研究进展

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生命科学 2019年第6期31卷 589-595页

作者：党女孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

2型糖尿病是目前公认的与衰老相关的重大疾病之一,发病年龄多在50岁以上。细胞衰老是指细胞应激致细胞产生不可逆的永久性细胞周期停滞的状态,是机体衰老的基础。细胞衰老与2型糖尿病的关系相当复杂,衰老的胰岛β细胞在组织内累积引起... 详细信息

2型糖尿病是目前公认的与衰老相关的重大疾病之一,发病年龄多在50岁以上。细胞衰老是指细胞应激致细胞产生不可逆的永久性细胞周期停滞的状态,是机体衰老的基础。细胞衰老与2型糖尿病的关系相当复杂,衰老的胰岛β细胞在组织内累积引起β细胞功能障碍、脂肪细胞衰老导致脂质代谢障碍等等,衰老的细胞还可间接通过衰老相关分泌表型使个体处于慢性低水平炎症状态,引起2型糖尿病及其并发症;反过来,糖尿病的高血糖、炎症微环境及脂毒性等能够促使细胞衰老并进一步累积。细胞衰老可能既是2型糖尿病发生的原因,又是其发展的结果。靶向细胞衰老的疗法可能为2型糖尿病提供新的治疗策略,现就细胞衰老在2型糖尿病的发生发展中的作用研究进展做一简要综述。

关键词： 2型糖尿病细胞衰老衰老相关分泌表型

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阿魏酸拮抗大气PM2.5对大鼠肺的损伤作用

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食品科学 2017年第1期38卷 244-251页

作者：周艳丽劳文艳阮研硕毕婷婷陈世杰赵晓红北京联合大学功能食品科学技术研究院北京100191 北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室北京100191 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

探讨阿魏酸干预北京市大气PM2.5对大鼠肺的损伤作用,为预防和控制PM2.5造成的健康危害提供基础数据。通过建立空白对照组、不同剂量PM2.5(1.5、6.0、24.0 mg/kg)染毒组及相应阿魏酸保护组,取肺组织进行苏木精-伊红染色观察组织形态学变... 详细信息

探讨阿魏酸干预北京市大气PM2.5对大鼠肺的损伤作用,为预防和控制PM2.5造成的健康危害提供基础数据。通过建立空白对照组、不同剂量PM2.5(1.5、6.0、24.0 mg/kg)染毒组及相应阿魏酸保护组,取肺组织进行苏木精-伊红染色观察组织形态学变化;收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行炎性细胞计数,并测定乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活力;测定血液上清液丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHd G)含量;测定肺组织匀浆上清液免疫球蛋白E(immunoglobulin E,Ig E)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-8、核转录因子-κB(nuclear factorkappa B,NF-κB)含量及Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)-4含量。结果显示,PM2.5染毒能够造成大鼠肺组织不同程度病理性改变;BALF中炎性细胞密度增加,且具有剂量依赖关系,6.0 mg/kg PM2.5中剂量组,损伤作用最明显;阿魏酸剂量为38.8 mg/kg时可以抑制这种改变。剂量为38.8 mg/kg的阿魏酸可以抑制PM2.5染毒引起的血清中MDA含量升高、SOD活力降低和8-OHd G含量升高。PM2.5染毒后,Ig E、TNF-α、IL-4和TLR-4含量增加,阿魏酸预处理可以抑制其增加。因此,PM2.5对大鼠肺部造成明显的氧化损伤和炎性损伤,阿魏酸能够减轻该损伤作用,可能是通过抑制Toll样受体通路减轻PM2.5诱导的炎症反应。

关键词：阿魏酸 PM2.5 大鼠肺损伤拮抗作用

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REST/NRSF对皮质酮应激模型小鼠抑郁与焦虑样行为影响

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中国实验动物学报 2021年第6期29卷 707-714页

作者：余煊李祥磊孙秀萍秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家人类疾病动物模型资源库卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的研究REST在皮质酮模型小鼠中的表达情况及REST表达上调时对小鼠抑郁与焦虑行为影响,探索其在小鼠抑郁模型中的作用。方法重复皮下注射皮质酮建立小鼠慢性应激模型,利用AAV病毒载体过表达小鼠脑内REST,行为学检测小鼠抑郁与焦虑表型... 详细信息

目的研究REST在皮质酮模型小鼠中的表达情况及REST表达上调时对小鼠抑郁与焦虑行为影响,探索其在小鼠抑郁模型中的作用。方法重复皮下注射皮质酮建立小鼠慢性应激模型,利用AAV病毒载体过表达小鼠脑内REST,行为学检测小鼠抑郁与焦虑表型变化,并用实时荧光定量PCR探索REST对相关基因的影响。结果重复皮下注射皮质酮4周能够显著降低小鼠体重(P<0.01),诱导小鼠抑郁样行为。海马区过表达REST影响模型小鼠在抑郁和焦虑行为学测试中的表现,缓解抑郁样表型,降低模型小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间;诱导焦虑症状,进入旷场中央区的次数减少,对高架十字迷宫封闭臂的探索次数和停留时间增加;同时能够调节Bndf、Nt3、Ngf、Fgf2的RNA转录水平。结论REST在皮质酮应激抑郁模型中起着双向调控作用,并不是单一缓解抑郁行为,其机制可能与其参与调节表达的多种基因及信号通路综合作用相关。

关键词：抑郁症动物模型行为学测试腺相关病毒转录调控因子

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APP／PS双转基因阿尔茨海默病小鼠模型的老年斑及行为学动态分析

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中国比较医学杂志 2008年第9期18卷 8-12,I0001,I0002页

作者：宗园媛王晓映王海林刘亚莉黄澜马春梅张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的研究APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠模型老年斑形成和行为改变的动态过程。方法将转APPswe突变基因小鼠与转PSΔE9基因突变小鼠杂交,PCR鉴定APPswe/PSΔE9双突变转基因小鼠的基因表型,筛选阳性小鼠建立APPswe/PSΔE9双转基因C57BL... 详细信息

目的研究APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠模型老年斑形成和行为改变的动态过程。方法将转APPswe突变基因小鼠与转PSΔE9基因突变小鼠杂交,PCR鉴定APPswe/PSΔE9双突变转基因小鼠的基因表型,筛选阳性小鼠建立APPswe/PSΔE9双转基因C57BL/6J小鼠模型。抗Aβ免疫组化、改良Bieschowsky银染法、Thioflavin-S荧光分别动态检测3、4、5、6、9、12月龄APPswe/PSΔE9双转基因小鼠大脑病理改变。荷兰Noldus公司Ethovision XT监测分析软件动态观察3、6、9月龄的APPswe/PSΔE9双转基因小鼠Morris水迷宫行为学改变。利用SPSS16.0软件统计分析。结果建立了人APPswe/PSΔE9双转基因阿尔茨海默病小鼠模型。3月龄APP/PS1双转基因小鼠大脑组织抗Aβ1-17免疫组织化学、改良Bieschowsky银染法、Thioflavin-S荧光未检测到有明显老年斑形成。4.5月龄APPswe/PSΔE9双转基因小鼠大脑组织上述三种方法均可检测到老年斑。9、12月龄双转基因小鼠老年斑数量体积明显增加,出现与阿尔茨海默病患者较相似的老年斑改变。Morris水迷宫试验发现3、6、9月龄APPswe/PSΔE9双转基因小鼠行为学结果与同月龄野生型小鼠有差异,说明与同月龄野生型小鼠相比出现记忆学习能力缺陷(P<0.05)。结论成功建立了人APPswe/PSΔE9双转基因小鼠阿尔茨海默病模型,为阿尔茨海默病发病机制研究和药物研发提供了有价值的动物模型。

关键词： APPswe/PSAE9 双转基因阿尔茨海默病 Morris水迷宫老年斑

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Mir-106b对阿尔茨海默病昼夜节律调控的初步研究

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 19-23,87页

作者：王海林刘嘉琳宗园媛张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨mir-106b在阿尔茨海默病发病中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-106b表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中构建mir-106b稳定转染的稳转细胞... 详细信息

目的探讨mir-106b在阿尔茨海默病发病中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-106b表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中构建mir-106b稳定转染的稳转细胞系。用Targetsan、Pictar、miRanda等靶基因预测软件,对mir-106b的靶基因进行预测,根据靶基因的功能选择可能与AD发病相关的靶基因,并用Western blot对所选择的靶基因在稳转细胞中的表达进行验证。用双荧光素酶报告检测系统检测mir-106b与其靶基因的结合位点。结果芯片结果显示,与野生型小鼠相比,6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中mir-106b的表达下降,经real-time PCR验证,mir-106b的表达在APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中的表达较野生型小鼠升高,差别具有统计学意义(P=0.03)。mir-106b稳转细胞系较对照mir-106b的表达升高2～5倍。神经PAS结构域蛋白2(neuronal PAS domain protein2,NPAS2)在mir-106b稳转细胞中的表达明显下降。双荧光素酶报告实验证实:与对照相比,带有NPAS2的3'UTR的荧光素酶报告载体与mir-106b表达载体共转染,海肾荧光素酶/萤火虫荧光素酶的相对活性降低;荧光素酶报告载体的NPAS2-3'UTR突变后与mir-106b表达载体共转染,海肾荧光素酶/萤火虫荧光素酶的相对活性升高。结论mir-106b可能通过调节机体生物钟基因NPAS2的表达,影响阿尔茨海默病人的生活节律,参与阿尔茨海默病的发生。

关键词：阿尔茨海默病 microRNA 转基因小鼠 microRNA芯片神经PAS结构域蛋白2

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PPARα转基因对小鼠的生理、生化等影响研究

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中国比较医学杂志 2013年第5期23卷 5-11,F0002页

作者：尉明晓陈威高洁孙继超赵显莉高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的通过与正常C57BL/6小鼠作对照,在不同月龄分析PPARα转基因小鼠生理、生化等数据,比较其差异性,观察PPARα基因对小鼠的生理、生化是否会产生影响。丰富转基因小鼠数据库内容,为该模型实际应用于临床前药物评价提供理论依据。方法... 详细信息

目的通过与正常C57BL/6小鼠作对照,在不同月龄分析PPARα转基因小鼠生理、生化等数据,比较其差异性,观察PPARα基因对小鼠的生理、生化是否会产生影响。丰富转基因小鼠数据库内容,为该模型实际应用于临床前药物评价提供理论依据。方法实验分为4组,分别为PPARα雄性组、PPARα雌性组、C57BL/6雄性组和C57BL/6雌性组,9只/组。在动物10周龄、14周龄、18周龄、22周龄、34周龄分别检测血常规、血生化指标,在动物26周龄时观察其心、肝、肾脏器病变情况,并观察动物的一般生长情况。结果 PPARα转基因小鼠与C57BL/6小鼠比较①体重:6周龄到23周龄的PPARα转基因小鼠体重与C57BL/6小鼠体重比较差异无显著性(P>0.05)。②血常规:10周龄PPARα雌性转基因小鼠红细胞计数(RBC)、嗜碱性粒细胞百分比(BAS%)、淋巴细胞百分比(LYM%)明显高于C57BL/6雌性小鼠,差异有显著性(P<0.01)。14周龄PPARα雄性转基因小鼠白细胞计数(WBC)、淋巴细胞百分比(LYM%)明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性(P<0.05)。③血生化:10周龄PPARα雄性小鼠血尿素氮(BUN)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性(P<0.05)。14周龄PPARα雄性小鼠天冬门氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)明显低于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性(P<0.05)。④组织病理:26周龄PPARα转基因小鼠与C57BL/6小鼠比较,心脏无明显的改变,但肝细胞出现透明病变,肾小管上皮细胞出现脂肪变性。结论系统收集了PPARα转基因小鼠的体重、血常规、血生化、病理等背景资料,成功分析了其与野生型C57BL/6小鼠之间的差异,为该模型的应用提供参考数据。

关键词： PPARα转基因小鼠血常规血生化指标动物模型

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小鼠诺如病毒间接免疫荧光检测方法的建立

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中国比较医学杂志 2014年第6期24卷 58-62,F0004页

作者：田胜男佟巍张丽芳常慧李雨函苏静芬刘先菊向志光刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的建立小鼠诺如病毒（MNV）的间接免疫荧光试验（IFA）的检测方法。方法将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36 h收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清。收集... 详细信息

目的建立小鼠诺如病毒（MNV）的间接免疫荧光试验（IFA）的检测方法。方法将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36 h收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清。收集人工感染后不同时间点的血清样品,以1：10的稀释度使用IFA法测定感染血清MNV抗体滴度。选取80份送检小鼠血清样品,以IFA和ELISA方法测定,差异样品使用Western blot方法进行验证。结果 MNV-1感染RAW264.7细胞（36~48）h,细胞感染率为60%,以36 h感染细胞状态为佳;IFA法测定感染小鼠血清,小鼠感染1周后抗体水平逐渐提高,在4周时抗体滴度达到最高值,之后维持稳定,采集感染4周的动物血清做IFA方法的阳性质控品;80份血清中,IFA法测定阳性27份,阴性53份,ELISA法测定阳性32份,阴性48份;Western blot方法对差异样品验证,其中阳性3份,阴性2份,IFA法和ELISA法检测符合率分别为96.0%和97.5%。结论 IFA方法检测小鼠诺如病毒基本可以反应小鼠的感染情况,偶有假阴性的出现,可以选择IFA方法和ELISA方法作为初筛,差异样品用Western blot方法验证。

关键词：间接免疫荧光法小鼠诺如病毒

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