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中国比较医学杂志 2017年第9期27卷 76-79页

作者：向志光佟巍谷有刚李欣悦秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的生物安全实验室的感染性动物实验大部分经空气传播的致病因子可利用安全隔离装置有效控制,啮齿类动物饲养笼具作为一种常用设备对其要求仍不明确。本研究将测试本实验室(负压屏障设施)模拟感染动物实验在使用开放和密闭2种啮齿类动... 详细信息

目的生物安全实验室的感染性动物实验大部分经空气传播的致病因子可利用安全隔离装置有效控制,啮齿类动物饲养笼具作为一种常用设备对其要求仍不明确。本研究将测试本实验室(负压屏障设施)模拟感染动物实验在使用开放和密闭2种啮齿类动物笼具的病原暴露风险,并评价本设施的硬件条件和管理措施对于风险控制的水平。方法使用具有卡那霉素抗性的大肠杆菌(Kan^+,***,DH5α)作为指示微生物,测试开放笼盒饲养、密闭笼盒(与外界无压力梯度)饲养、生物安全柜动物换笼等操作的暴露风险,并对负压设施内外的指示微生物进行监测。结果动物在负压屏障设施中使用开放笼具饲养存在病原暴露风险,负压屏障设施一定程度上可以控制病原的播散;动物在无压力梯度的密闭笼盒的饲养环节未能检测到指示菌;密闭笼盒使用生物安全柜设备进行换笼操作可有效控制病原暴露风险。结论在负压屏障设施内使用密闭笼盒,在笼盒与外界无压力梯度的情况下亦可保障生物安全风险的有效控制。

关键词：负压屏障设施动物实验感染风险密闭笼盒

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REST在朊病毒疾病模型中神经保护作用机制的研究

REST在朊病毒疾病模型中神经保护作用机制的研究

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：宋志琦于品赵文杰屈亚锦徐艳峰杨威秦川赵德明中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心中国农业大学动物医学院河北省畜牧兽医研究所

传染性海绵状脑病(TSEs)又称朊病毒疾病,是一组致死性神经退行性疾病,引起的脑部病理性损伤主要包括:脑组织空泡变性、神经突触损伤、神经纤维退行性病变、神经元死亡等。至今尚无有效的临床治疗方案。抑制元件沉默性转录因子/神经元限... 详细信息

传染性海绵状脑病(TSEs)又称朊病毒疾病,是一组致死性神经退行性疾病,引起的脑部病理性损伤主要包括:脑组织空泡变性、神经突触损伤、神经纤维退行性病变、神经元死亡等。至今尚无有效的临床治疗方案。抑制元件沉默性转录因子/神经元限制性沉默因子(REST/NRSF),作为重要的转录调节因子,在神经生长发育、分化和保持神经特异性等方面具有核心调控作用。最新报道指出正常衰老的脑组织需要高表达的胞核REST作为神经保护因子来抵抗神经系统退行性病变。而REST与朊病毒疾病的关系尚无报道。

关键词： LRP 朊病毒疾病神经保护作用

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野生型p53诱导的磷酸酶1基因缺失对小鼠心功能的影响

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中国循环杂志 2017年第8期32卷 792-796页

作者：刘可美刘臣周鹏刘娟谭宇李健楠张连峰张宏冰颜红兵北京协和医学院中国医学科学院国家心血管病中心阜外医院北京市100037 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分别检测两组小鼠的心功能和心重/体重比,应用苏木精伊红(HE... 详细信息

目的:探讨敲除野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)基因对小鼠心功能的影响及心脏组织中基因和蛋白表达水平的变化。方法:随机选取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分别检测两组小鼠的心功能和心重/体重比,应用苏木精伊红(HE)染色观察小鼠心肌组织的病理形态,应用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌组织中心房利钠肽(ANP)、B型利钠肽(BNP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的基因表达水平,并应用蛋白免疫印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白包括B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(c-Caspase3)的表达水平。结果:与WT组小鼠相比,Wip1-KO组小鼠心肌组织中Wip1 mRNA表达明显降低(P<0.05),左心室射血分数和左心室缩短分数降低(P<0.05),左心室收缩末期内径增大(P<0.05)。虽然Wip1-KO组小鼠与WT小鼠的心脏重量没有差异,但Wip1-KO组小鼠体重较WT组小鼠减轻(P<0.05),心重/体重比增加(P<0.05)。HE染色显示Wip1-KO组小鼠的心肌形态与WT组小鼠之间没有明显差异。心肌组织中ANP、BNP、MCP-1和α-SMA基因表达水平在两组小鼠之间差异无统计学意义(P>0.05)。Wip1-KO组小鼠心肌组织中凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2和c-Caspase3表达水平与WT组小鼠之间没有明显差异(P>0.05)。结论:敲除Wip1基因可以损害小鼠心功能,但相关的机制还有待进一步阐明。

关键词：小鼠,基因敲除心脏功能试验细胞凋亡

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MK-801对小鼠学习记忆能力的影响

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阿尔茨海默病及相关病杂志 2018年第1期1卷 53-59页

作者：李祥磊张玲秦川孙秀萍北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室

目的:研究地卓西平(dizocilpine,MK-801)对小鼠学习记忆能力的影响。方法:将20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为MK-801组(n=10)和对照组(n=10),两组分别注射MK-801(0.1mg/kg)和等容量生理盐水30 min后,进行Morris水迷宫、Barnes迷宫和条件恐惧行为学实验,检测MK-801对小鼠学习记忆的影响。结果:Morris水迷宫实验定位航行期,MK-801组潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。MK-801组第二天至第四天游行距离长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);探索期MK-801组穿台次数和在平台象限停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。Barnes迷宫实验学习阶段MK-801组小鼠寻找目标洞的潜伏期长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。测试阶段MK-801组进入目标区频次和停留时间少于对照组,潜伏期长于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.05);条件恐惧实验训练期MK-801组小鼠僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);线索性条件恐惧实验中MK-801组僵直时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:MK-801可损伤小鼠空间参考记忆和条件性恐惧记忆。

关键词： MK-801 空间参考记忆条件性恐惧记忆小鼠行为学实验

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灵芝制剂治疗APP/PS-1阿尔茨海默病转基因小鼠模型的病理学改变

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中国医学科学院学报 2017年第4期39卷 552-561页

作者：秦川吴善球陈保生吴小闲屈焜耀刘军民张桂芳徐艳峰舒顺利孙丽华李彦红朱华黃澜马春梅徐玉环韩云林卢耀增中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 美善堂生物科技(深圳)有限公司深圳518000 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系北京100005 广州中医药大学中药学院广州510006

目的探讨灵芝制剂对APP/PS-1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的病理学改变。方法选用4月龄APP/PS-1转基因小鼠,分为AD模型组、灵芝高剂量[2250 mg/(kg·d)]组和灵芝中剂量[750 mg/(kg·d)]组,阳性对照组用盐酸多奈哌齐药物[2 mg/(kg... 详细信息

目的探讨灵芝制剂对APP/PS-1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的病理学改变。方法选用4月龄APP/PS-1转基因小鼠,分为AD模型组、灵芝高剂量[2250 mg/(kg·d)]组和灵芝中剂量[750 mg/(kg·d)]组,阳性对照组用盐酸多奈哌齐药物[2 mg/(kg·d)],正常组选用C57BL/6J野生鼠。动物给药4个月后解剖观察组织病理,应用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学、特殊染色及电子显微镜超微结构观察并比较各组组织病理形态及结构差异。结果病理形态学改变:灵芝制剂组小鼠脑内老年斑降解、减少或消失;神经元纤维缠结减少或消失;淀粉样蛋白血管病明显减少;海马和齿状核的幼稚神经细胞数量比AD模型组显著增多(海马:F=1.738,P=0.016;齿状核:F=1.924,P=0.026);灵芝制剂高、中剂量组小鼠小脑浦肯野细胞较模型组丢失少(F=9.46,P=0.007;F=9.46,P=0.010);灵芝制剂组DCX免疫组织化学染色阳性显示小脑神经干细胞出现早而且数量多。电镜观察灵芝制剂组小鼠海马神经细胞较AD模型小鼠完整,核膜完好,胞质内的线粒体、内质网、高尔基体、微管结构、突触完整。小胶质细胞无异常。灵芝制剂治疗组小鼠在整个实验中未见到细胞和组织学的毒性表现。结论灵芝制剂可使AD小鼠脑内老年斑和神经元纤维缠结降解、减少或消失及淀粉样蛋白血管病变减少。

关键词：灵芝制剂阿尔茨海默病老年斑神经元纤维缠结神经干细胞

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肌萎缩侧索硬化症相关基因突变与疾病动物模型

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中国比较医学杂志 2017年第10期27卷 89-95页

作者：张丽张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

肌萎缩侧索硬化症是一种累进性神经退行疾病,以上、下运动神经元选择性退化和凋亡为特征,引发瘫痪、最终导致死亡。大量引发ALS的基因突变被鉴定出,包括FUS/TLS、EPHA4、SS18 L1、ATXN2和C9ORF72等基因,这些基因突变的发现拓宽了RNA调... 详细信息

肌萎缩侧索硬化症是一种累进性神经退行疾病,以上、下运动神经元选择性退化和凋亡为特征,引发瘫痪、最终导致死亡。大量引发ALS的基因突变被鉴定出,包括FUS/TLS、EPHA4、SS18 L1、ATXN2和C9ORF72等基因,这些基因突变的发现拓宽了RNA调节参与ALS病理生成的理解。本文对家族性ALS相关的基因突变及现有的ALS啮齿类动物模型进行总结概括。

关键词：肌萎缩侧索硬化症基因突变动物模型

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灵芝制剂对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学、生物化学和自身免疫指标的影响

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中国医学科学院学报 2017年第3期39卷 330-335页

目的评估灵芝制剂对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠行为学、生物化学和自身免疫指标的影响。方法将44只4月龄APP/PS-1双转基因AD小鼠随机分为AD模型组、安理申组、灵芝中剂量组和灵芝高剂量组4组,每组11只,以10只4月龄C57BL/6小... 详细信息

目的评估灵芝制剂对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠行为学、生物化学和自身免疫指标的影响。方法将44只4月龄APP/PS-1双转基因AD小鼠随机分为AD模型组、安理申组、灵芝中剂量组和灵芝高剂量组4组,每组11只,以10只4月龄C57BL/6小鼠为对照组。水迷宫实验观测小鼠的行为学变化情况,Western blot法检测脑组织蛋白表达水平,间接免疫荧光法检测自身免疫指标。结果定位航行实验结果显示,从第2天起,对照组、灵芝高剂量组和中剂量组寻找平台时间呈现逐渐缩短趋势,AD模型组寻找平台时间呈现逐渐增加趋势;第5天,对照组(t=5.607,P=0.000)和灵芝高剂量组(t=2.750,P=0.010)寻找平台时间较模型组明显缩短。空间探索实验结果显示,AD模型组小鼠穿越目标平台所在象限的次数(t=2.452,P=0.025)和在目标象限内滞留时间(t=2.530,P=0.020)明显少于对照组小鼠,穿越目标平台次数较灵芝组高剂量组(t=2.317,P=0.030)和灵芝中剂量组明显减少(t=2.443,P=0.030),且目标象限停留时间较灵芝高剂量组明显减少(t=2.770,P=0.020);灵芝高剂量组小鼠穿越目标平台所在象限的次数(t=2.493,P=0.022)和在目标象限内滞留时间(t=2.683,P=0.015)明显多于安理申组小鼠。Western blot检测结果显示,灵芝高、中剂量组小鼠脑组织中Apo A1表达水平显著高于AD模型组(P<0.01,P<0.05);灵芝高剂量组Aβ-40表达水平显著低于AD模型组(P均<0.05);灵芝高剂量组小鼠脑组织中的Sty1、Apo E、ABCA1水平显著高于模型组(P<0.01,P<0.05)。安理申组(t=30.945,P=0.000)、灵芝中剂量组(t=25.639,P=0.000)和灵芝高剂量组(t=4.689,P=0.001)的血浆Ig G水平明显高于对照组。结论灵芝制剂可能改善AD小鼠行为学障碍,促进Apo A1、Apo E和Syt1的表达,抑制Aβ-40蛋白的表达,改善小鼠的自身免疫功能。

关键词：灵芝制剂阿尔茨海默疾病模型生化因子免疫化学

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吗啡镇痛个体差异的遗传药理学进展

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中国比较医学杂志 2017年第10期27卷 107-112页

作者：杨银孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

吗啡是广泛使用的一种阿片类镇痛药,不同个体间对吗啡镇痛的敏感性有较大差异,长期使用吗啡会导致镇痛效果降低而产生耐受,耐受的易感性在个体间也有较大差异,这些都给吗啡在临床的优化应用带来很多困扰。遗传因素通过控制蛋白质编码从... 详细信息

吗啡是广泛使用的一种阿片类镇痛药,不同个体间对吗啡镇痛的敏感性有较大差异,长期使用吗啡会导致镇痛效果降低而产生耐受,耐受的易感性在个体间也有较大差异,这些都给吗啡在临床的优化应用带来很多困扰。遗传因素通过控制蛋白质编码从药代动力学和药效动力学两方面影响个体对吗啡镇痛的反应。P-糖蛋白编码基因ABCB1的多样性影响吗啡的转运和分布,编码UDP-葡糖醛酸转移酶的基因UGT2B7的多样性则控制吗啡代谢转化。吗啡的主要作用靶点μ阿片受体的编码基因OPRM1和儿茶酚-O-甲基转移酶的编码基因COMT的多样性引起的下游信号通路反应性差异影响吗啡镇痛药效学。未来对吗啡镇痛个体差异的遗传学研究需要使用遗传多样性更复杂的个体,采用更系统全面的分析方法从更广的范围筛选关键基因。阐明遗传多样性与个体间对吗啡镇痛反应差异的关系,将有助于理解吗啡镇痛的遗传药理学调控机制,为临床吗啡镇痛使用实现个人化、精确化甚至联合基因治疗改善吗啡镇痛提供依据。

关键词：吗啡镇痛个体差异遗传药理学药代动力学药效动力学

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二型糖尿病模型小鼠与健康小鼠骨髓细胞表型差异分析

二型糖尿病模型小鼠与健康小鼠骨髓细胞表型差异分析

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第十四届中国实验动物科学年会

作者：党女李程程管博文卢延华刘率男申竹芳孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所

目的:分析db/db小鼠以及KKAy小鼠两种二型糖尿病模型与健康对照小鼠的骨髓造血及免疫系统功能的差异。方法:选用db/db小鼠,同窝健康对照db/m小鼠,KKAy小鼠以及健康对照C57小鼠,取骨髓细胞悬液,测定骨髓淋巴细胞分型以及骨髓造血细胞分... 详细信息

目的:分析db/db小鼠以及KKAy小鼠两种二型糖尿病模型与健康对照小鼠的骨髓造血及免疫系统功能的差异。方法:选用db/db小鼠,同窝健康对照db/m小鼠,KKAy小鼠以及健康对照C57小鼠,取骨髓细胞悬液,测定骨髓淋巴细胞分型以及骨髓造血细胞分型。结果:与健康对照db/m小鼠相比,db/db小鼠的造血祖细胞(HPC,Lin-scal-1-ckit+);B淋巴细胞(B220+)的比例低于db/m小鼠,而造血干细胞(HSC,Lin-scal+1-ckit+)以及红系细胞(Ter119+)的比例却明显高于db/m小鼠(P<0.05),长期造血干细胞(LT-HSC,CD34-Lin-scal+1-ckit+)、髓系来源抑制性细胞(MDSC,CD11b+Gr-1+)的比例略高于db/m小鼠;与健康对照C57小鼠相比,KKAy小鼠的HPC、B淋巴细胞的比例低于db/m小鼠,而MDSC的比例却明显高于C57小鼠(P<0.05),HSC、LT-HSC以及红系细胞的比例高于C57小鼠。结论:与健康对照小鼠相比,二型糖尿病模型db/db小鼠和KKAy小鼠的造血免疫系统存在差异,两种小鼠的HPC、HSC、LT-HSC、B细胞、红系细胞以及MDSC的改变具有一致性,为进一步研究代谢异常对造血免疫系统功能的维持及应激反应性的影响提供了初步的数据。

关键词： db/db 小鼠 KKAy 小鼠造血免疫系统

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异质性胞核核糖核蛋白K与肿瘤研究的最新进展

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中国比较医学杂志 2017年第11期27卷 100-105页

作者：黄昊杨星九李梦媛朱瑞敏高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫计委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

近几十年来,癌基因和抑癌基因一直是肿瘤生物学中的一个重要分类,然而对于一些基因却很难将其归类。异质性胞核核糖核蛋白K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,HNRNPK)是一个核酸结合蛋白,参与了基因表达调控、信号转导等很多... 详细信息

近几十年来,癌基因和抑癌基因一直是肿瘤生物学中的一个重要分类,然而对于一些基因却很难将其归类。异质性胞核核糖核蛋白K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,HNRNPK)是一个核酸结合蛋白,参与了基因表达调控、信号转导等很多细胞进程。近些年发现HNRNPK在多种肿瘤中过表达,且其过表达与患者的预后呈负相关,提示其可能在这些肿瘤中发挥癌基因的功能。然而,在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的研究报道中发现HNRNPK可能扮演抑癌基因的角色。因此,本文对HNRNPK在肿瘤发生发展中的分子功能及作用机制的最新进展进行综述。

关键词：异质性胞核核糖核蛋白K 肿瘤分子功能

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