检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2015年第4期25卷 78-83页

作者：孔琪夏霞宇秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索... 详细信息

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果本文建立了实验动物品系数据库,已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据,实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源,为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。

关键词：实验动物品系数据库小鼠资源

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流感病毒聚合酶酸性亚基转基因小鼠的制备与初步鉴定

流感病毒聚合酶酸性亚基转基因小鼠的制备与初步鉴定

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：谢英国娇李冰刘超河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所中国人民解放军军事兽医研究所动物病毒学研究室中国人民解放军军事兽医研究所动物病毒学研究室吉林农业大学动物科学技术学院河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部

目的本实验旨在构建禽流感病毒聚合酶酸性亚基(PA)转基因小鼠,以期获得转基因小鼠模型,为流感病毒致病机理研究和抗流感药物开发提供新思路.方法甲型H1N1流感病毒野毒株A/Changchun/01/2009(H1N1)为军事兽医研究所动物病毒学与特种疫... 详细信息

目的本实验旨在构建禽流感病毒聚合酶酸性亚基(PA)转基因小鼠,以期获得转基因小鼠模型,为流感病毒致病机理研究和抗流感药物开发提供新思路.方法甲型H1N1流感病毒野毒株A/Changchun/01/2009(H1N1)为军事兽医研究所动物病毒学与特种疫病学实验室分离、保存,经RNA抽提逆转后从中扩增出甲型流感病毒H1N1PA基因的CDS基因全长序列.通过定向克隆的方法将其连接到pIRES2-GFP载体上,酶切鉴定并测序.为提高目的基因表达效率再将重组质粒中的CMV启动子替换为UBC启动子,命名为pUBC-IRES-PA.转染至293T细胞,通过GFP表达情况检测其在细胞内的表达效率.Qiagen@EndoFree Plasmid Maxi Kit制备质粒,线性化后用SephadexG-50进行凝胶层析纯化,纯化产物用0.1×TE缓冲液稀释至终浓度5ng/μl.水平显微注射法将其导入140枚C57BL/6×B6D2F1受精卵原核.将注射后存活的约110枚受精卵移植入3只当日见栓的假孕KM雌鼠输卵管中.仔鼠出生10天后,提取尾尖组织DNA,PCR扩增鉴定仔鼠基因型.结果构建的真核重组表达质粒pUBC-IRES-PA转染293T细胞后,可检测到PA的转录和表达.共产生14只子代小鼠,鼠尾PCR检测获得转基因阳性首建鼠1只,可以稳定遗传并建系.结论本实验成功构建了pUBC-IRES-PA真核表达载体,初步获得了稳定整合PA基因的转基因小鼠,进一步进行基因表达情况与病理学方法检测后有望建立小鼠流感病毒PA蛋白转基因模型,促进流感发病机理研究和药物开发.

关键词：流感病毒转基因小鼠

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恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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中国比较医学杂志 2015年第7期25卷 20-24页

作者：董志会王卫丛喆熊圣文骆杨陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,c SNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴BST-2的c SNP位点;通过蛋白质结构分... 详细信息

目的筛查恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,c SNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴BST-2的c SNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行分析;比较不同基因型猴体内SHIVSF162 p 3复制水平的差异。结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C c SNP位点可影响BST-2蛋白二级结构。在SHIVSF162 p 3感染平台期,参考基因型猴(DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(P<0.05),其他基因型猴之间无显著差异。结论 c SNP(G41A)可能影响BST-2的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息。

关键词： BST-2 cSNP 蛋白质结构恒河猴

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PD-1：PD-L1/PD-L2通路在结核感染中的免疫作用

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中国比较医学杂志 2015年第7期25卷 74-76页

作者：占玲俊唐军秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

PD-1:PD-L1/PD-L2通路在肿瘤和某些感染性疾病中发挥免疫抑制作用,而在结核病中的免疫作用尚不明确。结核菌感染后,免疫细胞上PD-1:PD-L1/PD-L2通路高表达,体外实验显示:用该通路的抗体阻断后保护性T细胞增强,而体内免疫作用不明确。PD-... 详细信息

PD-1:PD-L1/PD-L2通路在肿瘤和某些感染性疾病中发挥免疫抑制作用,而在结核病中的免疫作用尚不明确。结核菌感染后,免疫细胞上PD-1:PD-L1/PD-L2通路高表达,体外实验显示:用该通路的抗体阻断后保护性T细胞增强,而体内免疫作用不明确。PD-1与配体PD-L1结合后可能发挥免疫抑制作用,其中PD-L1表达受Th1细胞因子调控;PD-1与配体PD-L2结合后可能发挥免疫保护作用,其中PD-L2表达受Th2型细胞因子调控。利用Cas9-CRISPR基因敲除方法分别敲除特定免疫细胞上PD-1、PD-L1和PD-L2,可研究PD-1、PD-L1和PD-L2在结核感染中免疫作用及机制,为结核病的防控提供理论依据。

关键词： PD-1: PD-L1 /PD-L2 通路结核感染免疫作用

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SAMHD1限制HIV/SIV病毒复制功能研究的最新进展

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中国比较医学杂志 2015年第10期25卷 71-74页

作者：彭灵娟丛喆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感... 详细信息

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感染、复制、包装、传播等整个生命过程中都发挥着一定的作用。目前这一天然抗病毒蛋白分子已经成为HIV研究领域的新热点,本文将就SAMHD1抗HIV病毒研究的最新进展做一综述。

关键词： SAMHD1 HIV-1 Vpx

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使用CYP2E1基因修饰小鼠验证药物心脏毒性的初步探索

使用CYP2E1基因修饰小鼠验证药物心脏毒性的初步探索

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：裴彦宇孙井江赵显莉贺银丽魏若尧高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心

【目的】研究具有潜在心脏毒性的药物西布曲明(Sibutramine)对心脏特异性CYP2E1(细胞色素P450 2E1,Cytochrome P2E1)基因修饰小鼠(心脏特异性CYP2E1转基因小鼠,α-MHC CYP2E1 transgenic mice,Tg(+)和心脏特异性CYP2E1基因沉默小鼠,α-MHC CYP2E1 silence mice,sTg(+))心脏的影响,探索使用心脏特异性CYP2El基因修饰小鼠来验证药物的毒性作用,Tg(+)型小鼠是否在评价药物的心脏毒性中具有更高的敏感性。【方法】8周龄雄性Tg(+)型小鼠、sTg(+)型小鼠、野生型C57BL/6小鼠(WT),各50只,分别随机分成5组,每组10只,溶媒对照组(灌胃给予纯净饮用水)及4个实验组(分别灌胃给予50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、300mg/kg西布曲明)。给药过程中进行一般症状观察以及存活率的测定;给药15d后取血并解剖取心脏,测定各组实验小鼠血生化指标(心脏毒性指标(乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)))、脏器系数等,并进行病理组织学检查,免疫组织化学方法观察心脏组织缝隙蛋白43(Connexin 43,CX43)的表达情况。【结果】1、从心脏损伤血生化指标结果来看,在给药剂量50mg/kg和100mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著高于WT型小鼠(p<0.05或p<0.01);在给药剂量50mg/kg、100mg/kg和150mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著高于sTg(+)型小鼠(p<0.05或p<0.01);而在给药剂量300mg/kg时,Tg(+)型小鼠均显著低于WT和sTg(+)型小鼠(p<0.05或p<0.01),且sTg(+)型小鼠减小的程度最小。2、病理组织学结果显示,Tg(+)和WT型小鼠各个给药组均表现出心脏损伤的迹象。3、免疫组织化学染色显示,随着给药剂量的加大,Tg(+)、sTg(+)和WT型三种小鼠CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量均逐渐下降,且染色颜色逐渐变浅;而CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量下降程度和染色颜色变浅程度由高到低分别为,Tg(+)型小鼠,其次是WT型小鼠,sTg(+)型小鼠。【结论】Tg(+)型小鼠在评价药物潜在心脏毒性试验中比WT型小鼠具有更高的敏感性,而sTg(+)型小鼠则是一个很好的心脏毒性保护模型。

关键词：细胞色素P450 2E1 基因修饰西布曲明药物毒性

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中国实验动物环境丰富化发展现状

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中国比较医学杂志 2015年第8期25卷 79-82页

作者：孔琪赵永坤中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 军事医学科学院军事兽医研究所长春130122

随着中国经济的迅速发展,中国的科学技术与产业已经成为国际上第二大科技实体。实验动物在生命科学、生物医药、人口健康、食品安全等诸多领域都有广泛的应用。这些领域的发展也促进了实验动物行业的快速发展。中国实验动物学会在推动... 详细信息

随着中国经济的迅速发展,中国的科学技术与产业已经成为国际上第二大科技实体。实验动物在生命科学、生物医药、人口健康、食品安全等诸多领域都有广泛的应用。这些领域的发展也促进了实验动物行业的快速发展。中国实验动物学会在推动实验动物科学技术与产业发展,提升实验动物福利伦理水平方面发挥了重要作用。3R理念和环境丰富化的重要性逐渐被行业内同行所接受。本文通过介绍实验动物丰富化的进展情况,探讨了在中国推动实验动物环境丰富化发展的可行方法。

关键词：实验动物环境丰富化动物福利优化

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美国实验动物品种资源现状分析

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中国实验动物学报 2015年第5期23卷 539-542页

作者：孔琪夏霞宇赵永坤中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 军事医学科学院军事兽医研究所长春130122

实验动物是生命科学和生物医药创新研究等重要的支撑条件。随着生命科学和生物医药产业的快速发展,实验动物、动物模型资源数量和种类都快速增加。据统计,世界各地共培育着200多种共计26 000多个品系的实验动物,其中有2607个品系为常规... 详细信息

实验动物是生命科学和生物医药创新研究等重要的支撑条件。随着生命科学和生物医药产业的快速发展,实验动物、动物模型资源数量和种类都快速增加。据统计,世界各地共培育着200多种共计26 000多个品系的实验动物,其中有2607个品系为常规实验动物。美国是世界上实验动物资源大国,拥有最全的实验动物品系品种资源和保藏机构。本文首次对美国实验动物资源进行了系统分析归类,以便为我国实验动物资源发展提供借鉴。

关键词：实验动物动物模型品种资源

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HIV/SIV入侵血脑屏障的分子机制探讨

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中国比较医学杂志 2015年第11期25卷 81-85页

作者：黄丹丛喆徐珮金光高锡强魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

HIV/SIV侵入中枢神经系统(CNS),造成严重的神经病理学改变,引发艾滋病相关的神经认知性障碍(HAND)。尽管有效地使用了高效抗逆转录病毒疗法,HAND在慢性感染者中的发病率仍然很高。通常认为,HIV/SIV在感染早期即可通过感染脑毛细血管内... 详细信息

HIV/SIV侵入中枢神经系统(CNS),造成严重的神经病理学改变,引发艾滋病相关的神经认知性障碍(HAND)。尽管有效地使用了高效抗逆转录病毒疗法,HAND在慢性感染者中的发病率仍然很高。通常认为,HIV/SIV在感染早期即可通过感染脑毛细血管内皮细胞或破坏内皮细胞间的紧密连接穿透血脑屏障进入CNS,但其机制尚不明确。目前有几种比较公认的假说,包括病毒直接入侵假说、单核/巨噬细胞入侵假说、T细胞诱导假说和液相入胞假说。本文将就HIV/SIV入侵血脑屏障的分子机制作一综述。

关键词： BMECs 血脑屏障趋化因子受体

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大鼠羊膜细胞体外培养及其干细胞标记物的表达

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中国比较医学杂志 2015年第4期25卷 61-65,I0006-I0008页

作者：曲春辉张玲武杰巨荣凯朱华黄澜徐艳峰白琳秦川北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的分离并鉴定大鼠羊膜细胞,探索羊膜细胞分化潜能,为干细胞移植治疗探寻新的细胞来源。方法机械分离羊膜组织并采用0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化,应用高糖-DMEM培养基(添加10μg/L人表皮生长因子)培养,采用流式细胞术检测间充质干细胞... 详细信息

目的分离并鉴定大鼠羊膜细胞,探索羊膜细胞分化潜能,为干细胞移植治疗探寻新的细胞来源。方法机械分离羊膜组织并采用0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化,应用高糖-DMEM培养基(添加10μg/L人表皮生长因子)培养,采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标志物,通过细胞免疫荧光染色检测神经干细胞表面标记物。结果大鼠羊膜组织可分离并培养,细胞呈梭型,贴壁生长,短期内可以稳定增殖。细胞表达干细胞表面标记物八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor,Oct-4)和性别决定区Y框蛋白(sex determining region Y box 2,Sox-2),间充质干细胞表面标志物vimentin,胚胎干细胞标记物阶段特异性胚胎表面标记物(stage specific embryonic antigen-4,SSEA-4),并表达神经干细胞表面标志物nestin,可表达脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)。结论大鼠羊膜细胞可表达间充质干细胞和神经干细胞标记物,并有神经营养因子表达,为大鼠羊膜细胞的研究和应用提供实验依据。

关键词：羊膜细胞体外培养间充质干细胞标志物神经干细胞标志物神经生长因子大鼠

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