检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学科学院院刊 2010年第5期34卷 412-414,418页

作者：黄馨石桂英陈显达鞠振宇中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的构建在小鼠造血干细胞中高效表达的shRNA重组慢病毒载体并研究其在小鼠造血系统中的长期稳定表达。方法将p-CMV和重组并鉴定正确的p-SFFV慢病毒载体与辅助病毒载体PAX2和PMD2G混合后,采用磷酸钙方法共转染293T包装细胞,获得具有感... 详细信息

目的构建在小鼠造血干细胞中高效表达的shRNA重组慢病毒载体并研究其在小鼠造血系统中的长期稳定表达。方法将p-CMV和重组并鉴定正确的p-SFFV慢病毒载体与辅助病毒载体PAX2和PMD2G混合后,采用磷酸钙方法共转染293T包装细胞,获得具有感染能力的成熟慢病毒感染经流式细胞仪分选并体外培养的小鼠骨髓造血干细胞,分析其表达效率后,选取感染效率较高的p-SFFV慢病毒载体感染小鼠骨髓造血干细胞,并通过骨髓移植技术输入放射线照射后的小鼠体内。在移植后4周和9周分别获取小鼠外周血样本,移植后16周获取小鼠骨髓样本,分析供体细胞在小鼠体内的表达。结果成功重组了p-SFFV慢病毒载体并在小鼠骨髓造血干细胞中高效表达(感染效率72.4%);骨髓移植实验表明,携带外源性shRNA的慢病毒载体可在小鼠造血系统内长期稳定表达(感染效率92%)。结论shRNA重组慢病毒载体在小鼠造血系统中可长期稳定表达。

关键词：造血干细胞慢病毒感染骨髓移植 RNA干扰

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铅暴露U251细胞对MAPK信号通路的影响

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毒理学杂志 2010年第5期24卷 347-352页

作者：孟金萍杨旭王艳蓉孙淑华刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的从毒理基因组学角度探讨铅的神经毒性作用机制。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于浓度为400μg/ml乙酸铅8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,利用信息学技术对MAPK... 详细信息

目的从毒理基因组学角度探讨铅的神经毒性作用机制。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于浓度为400μg/ml乙酸铅8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,利用信息学技术对MAPK信号通路进行分析。结果与对照相比,有2840条基因表达发生改变,其中49条差异基因参与MAPK信号通路。结论在本试验条件下,乙酸铅暴露U251细胞后,MAPK信号通路中的重要基因表达发生了显著变化,主要影响P38途径和JNK途径。

关键词：乙酸铅 MAPK通路基因芯片神经毒性生物信息学

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体外铅染毒对人膀胱细胞基因表达谱的影响

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环境与健康杂志 2010年第7期27卷 573-577,F0003页

作者：孟金萍王艳蓉孙淑华杨旭刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的研究体外培养的人胚胎膀胱组织来源细胞(humanbladder,HB)在铅暴露不同时间和浓度下的基因表达差异,以探讨铅毒性的作用机制。方法分别使用100、200μg/ml乙酸铅溶液暴露体外培养的HB细胞(浓度为2×103个/ml)8、24h,设置空白对... 详细信息

目的研究体外培养的人胚胎膀胱组织来源细胞(humanbladder,HB)在铅暴露不同时间和浓度下的基因表达差异,以探讨铅毒性的作用机制。方法分别使用100、200μg/ml乙酸铅溶液暴露体外培养的HB细胞(浓度为2×103个/ml)8、24h,设置空白对照,提取RNA,进行cDNA基因表达谱芯片实验。芯片扫描结果经归一化处理,设定Ratio值<0.5或≥2为表达有差异基因。结果铅暴露HB细胞导致差异表达的基因共有2406个,其中,在铅暴露不同时间(8、24h)、不同浓度(100、200μg/ml)皆上调的有45个基因,皆下调的有40个基因。结论基因表达因铅暴露的时间和浓度变化而发生改变;差异表达基因的功能与信号传导、细胞代谢密切相关,也与疾病发生发展相关;可以通过分析基因表达谱改变,探悉铅暴露导致机体损伤的原因和致病机制。

关键词：毒性基因组学 HB细胞铅 cDNA芯片聚类分析

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豚鼠过敏抗体的分离纯化及在PCA试验中作用规律的初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第2期30卷 169-174页

作者：董娜陈磊徐苗邓海清苏城秦川王国治中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 山东大学公共卫生学院中国药品生物制品检定所菌苗室北京100050

目的建立豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,对致敏血清中过敏抗体（IgE、IgG）进行初步分离纯化,并探讨过敏抗体的作用特点.方法以卵白蛋白（OVA）和Al（OH）3作为免疫原制备豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,ELISA法检测抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀、Protei... 详细信息

目的建立豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,对致敏血清中过敏抗体（IgE、IgG）进行初步分离纯化,并探讨过敏抗体的作用特点.方法以卵白蛋白（OVA）和Al（OH）3作为免疫原制备豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,ELISA法检测抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀、Protein A柱亲和层析的方法对致敏血清中IgE、IgG抗体进行初步分离纯化,以豚鼠连续被动皮肤过敏试验分别观察两种抗体在致敏后不同时间激发时引起皮肤蓝斑的变化情况.结果模型组和对照组血清中IgE抗体含量分别为719.3750ng/ml、2.5250 ng/ml,IgG抗体吸光度（A）值分别为0.9921、0.0174,模型组两种抗体含量均比对照组显著升高（P〈0.05）.豚鼠9 d连续被动皮肤过敏试验中,IgE抗体在5 d PCA时产生的蓝斑直径达到最大,之后持续存在;IgG抗体在2 d PCA时产生蓝斑直径最大,之后迅速下降.结论成功将致敏血清中两种过敏抗体进行了初步分离纯化,IgE和IgG抗体均参与了豚鼠Ⅰ型过敏反应,IgG抗体较IgE抗体可能作用更为迅速、短暂,有可能成为疫苗Ⅰ型过敏反应毒理学评价的另一主要指标.

关键词：豚鼠 Ⅰ型过敏反应被动皮肤过敏试验 IgE IgG

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Mir-106b对阿尔茨海默病昼夜节律调控的初步研究

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 19-23,87页

作者：王海林刘嘉琳宗园媛张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨mir-106b在阿尔茨海默病发病中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-106b表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中构建mir-106b稳定转染的稳转细胞... 详细信息

目的探讨mir-106b在阿尔茨海默病发病中的作用。方法取6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR对芯片检测结果进行验证;构建mir-106b表达载体,将其转染至SH-SY5Y细胞中构建mir-106b稳定转染的稳转细胞系。用Targetsan、Pictar、miRanda等靶基因预测软件,对mir-106b的靶基因进行预测,根据靶基因的功能选择可能与AD发病相关的靶基因,并用Western blot对所选择的靶基因在稳转细胞中的表达进行验证。用双荧光素酶报告检测系统检测mir-106b与其靶基因的结合位点。结果芯片结果显示,与野生型小鼠相比,6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中mir-106b的表达下降,经real-time PCR验证,mir-106b的表达在APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中的表达较野生型小鼠升高,差别具有统计学意义(P=0.03)。mir-106b稳转细胞系较对照mir-106b的表达升高2～5倍。神经PAS结构域蛋白2(neuronal PAS domain protein2,NPAS2)在mir-106b稳转细胞中的表达明显下降。双荧光素酶报告实验证实:与对照相比,带有NPAS2的3'UTR的荧光素酶报告载体与mir-106b表达载体共转染,海肾荧光素酶/萤火虫荧光素酶的相对活性降低;荧光素酶报告载体的NPAS2-3'UTR突变后与mir-106b表达载体共转染,海肾荧光素酶/萤火虫荧光素酶的相对活性升高。结论mir-106b可能通过调节机体生物钟基因NPAS2的表达,影响阿尔茨海默病人的生活节律,参与阿尔茨海默病的发生。

关键词：阿尔茨海默病 microRNA 转基因小鼠 microRNA芯片神经PAS结构域蛋白2

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小檗碱对2型糖尿病ICR小鼠模型的治疗作用

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 23-27,I0006,I0007页

作者：张玲玲黄澜徐艳峰李加美肖冲刘颖秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的比较小檗碱及小檗碱与添加剂对2型糖尿病ICR小鼠模型的降糖、降脂效果。方法100只三周龄雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、小檗碱组、小檗碱加低剂量添加剂组、小檗碱加高剂量添加剂组及二甲双胍组,以高糖高脂加尿链佐菌素诱导小... 详细信息

目的比较小檗碱及小檗碱与添加剂对2型糖尿病ICR小鼠模型的降糖、降脂效果。方法100只三周龄雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、小檗碱组、小檗碱加低剂量添加剂组、小檗碱加高剂量添加剂组及二甲双胍组,以高糖高脂加尿链佐菌素诱导小鼠2型糖尿病模型,并分别以小檗碱、小檗碱加低剂量添加剂、小檗碱加高剂量每天灌胃干预治疗6周。检测血糖、血清血脂、肾功指标的变化情况;给药前后做糖耐量胰岛素耐量实验。每周量小鼠体重,动态观察小鼠体重变化。代谢笼中测量小鼠饮食水量变化。结果模型组血糖较普食组显著上升(P<0.01),且维持较好;血脂指标CHO、HDL-c、LDL-c均较普食组升高(P<0.05);其他各检测生化指标差异不显著。小檗碱组空腹血糖较模型组总体下降趋势明显且维持较好(P<0.01);血脂较模型组有降低;糖耐量胰岛素耐量较模型组有改善。二甲双胍组血糖较模型组有下降趋势,血脂较模型组无显著差别。小檗碱加低剂量添加剂组较模型组血糖血脂无显著差别。小檗碱加高剂量添加剂组血糖较模型有下降趋势,血脂较模型组有下降趋势,其他各项生化指标均无差别。结论小檗碱降糖效果优于二甲双胍,小檗碱加低剂量添加剂,小檗碱加高添加剂。

关键词：小檗碱 2型糖尿病模型

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脑组织特异表达S100B转基因小鼠的建立

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 24-27页

作者：刘嘉琳王海林全雄志黄澜马春梅张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的S100B在多种神经损伤性疾病中高表达,高浓度的S100B蛋白对中枢神经系统具有毒性作用。建立脑组织特异表达S100B转基因小鼠,用于研究该基因在帕金森病(Parkinson's disease,PD)发病中的作用。方法ELISA法检测S100B蛋白在α-synuc... 详细信息

目的S100B在多种神经损伤性疾病中高表达,高浓度的S100B蛋白对中枢神经系统具有毒性作用。建立脑组织特异表达S100B转基因小鼠,用于研究该基因在帕金森病(Parkinson's disease,PD)发病中的作用。方法ELISA法检测S100B蛋白在α-synuclein A53T转基因小鼠脑组织中的表达情况。构建PDGF-hS100B表达载体,显微注射法建立S100B转基因小鼠。PCR鉴定转基因鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。Rota-rod实验检测S100B转基因鼠的运动协调能力。结果S100B在9月龄和12月龄α-synucleinA53T转基因小鼠脑组织中的表达高于野生型小鼠。建立了2个品系的脑组织特异表达S100B转基因小鼠。与野生型小鼠相比S100B转基因小鼠表现出明显的进行性运动协调能力障碍。结论S100B转基因小鼠的建立为研究该基因在PD中的作用提供了工具。

关键词： α-synuclein A53T S100B 小鼠,转基因脑

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埃博拉出血热动物模型研究进展

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中国比较医学杂志 2010年第9期20卷 67-71页

作者：许黎黎秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

埃博拉出血热是由埃博拉病毒引起的一种急性出血性传染病,具有极高的传染性,致死率高达50%～88%,目前对埃博拉出血热的预防还极为困难,暂无有效的抗病毒药物和疫苗。构建埃博拉出血热的动物模型,对于病毒致病机理的了解和深入研究,以及... 详细信息

埃博拉出血热是由埃博拉病毒引起的一种急性出血性传染病,具有极高的传染性,致死率高达50%～88%,目前对埃博拉出血热的预防还极为困难,暂无有效的抗病毒药物和疫苗。构建埃博拉出血热的动物模型,对于病毒致病机理的了解和深入研究,以及治疗药物及疫苗的研发具有至关重要的作用。

关键词：埃博拉出血热埃博拉病毒模型,动物

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A(H1N1)疫苗免疫的血清中和抗体的交叉免疫反应分析

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中国比较医学杂志 2010年第9期20卷 3-6页

作者：占玲俊鲍琳琳蒋虹丛哲金光邓巍许黎黎孙惠惠朱华张连峰秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的分析接种A(H1N1)疫苗人群血清的中和抗体对2009年A(H1N1)的抗病毒作用和相关病毒的交叉免疫保护作用。方法利用MDCK细胞的细胞病变检测接种A(H1N1)疫苗的人血清和未免疫的对照血清对甲型流感病毒A/Brisbane/10/2007(H3N2),A/Brisban... 详细信息

目的分析接种A(H1N1)疫苗人群血清的中和抗体对2009年A(H1N1)的抗病毒作用和相关病毒的交叉免疫保护作用。方法利用MDCK细胞的细胞病变检测接种A(H1N1)疫苗的人血清和未免疫的对照血清对甲型流感病毒A/Brisbane/10/2007(H3N2),A/Brisbane/59/2007(H1N1),A/California/07/2009(H1N1)和A/Shenzhen/406H/2006(H5N1)等病毒的中和作用。结果通过细胞病变观察,证实接种A(H1N1)疫苗的人血清稀释度为1∶40时,30份免疫血清可以中和H3N2(Brisbane),H1N1(Brisbane)和H1N1(CA7)而不产生细胞病变,中和保护率分别均为100%,而相同稀释度的未免疫对照血清的中和保护率分别为100%,100%,40%;而当稀释度为1∶400时,30份免疫血清分别有13,20和21例未出现细胞病变,中和保护率分别为43%,67%,70%,10份对照血清的中和保护率分别为80%,70%,0%。两种稀释度的免疫血清和未免疫对照血清均不能中和H5N1引起细胞病变,中和保护率均为0%。结论接种2009年A(H1N1)疫苗可以诱导能中和CA7 H1N1的抗体产生,但该中和抗体对H3N2(Brisbane),H1N1(Brisbane),H5N1(SZ)高致病禽流感病毒等甲型流感病毒无交叉保护作用。

关键词：流感中和抗体细胞病变疫苗

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流感病毒的分子生物学研究进展

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 74-79页

作者：张伟王承宇杨松涛高玉伟夏咸柱中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062

流感病毒是分节段的负链RNA病毒,由RNA依赖的RNA聚合酶起始病毒的复制。流感病毒的特殊基因组结构和病毒蛋白的功能使其极易发生抗原转换和抗原漂移,这使得病毒能够逃避多种宿主的长效中和性免疫反应。本文从病毒结构、基因组及其编码... 详细信息

流感病毒是分节段的负链RNA病毒,由RNA依赖的RNA聚合酶起始病毒的复制。流感病毒的特殊基因组结构和病毒蛋白的功能使其极易发生抗原转换和抗原漂移,这使得病毒能够逃避多种宿主的长效中和性免疫反应。本文从病毒结构、基因组及其编码蛋白质、病毒复制过程和病毒的易感宿主等几方面论述了流感病毒的分子生物学研究进展。

关键词：流感病毒 RNA病毒抗原转换抗原漂移

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