检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2010年第7期20卷 67-71页

作者：黄馨石桂英陈显达鞠振宇中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SY... 详细信息

目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SYBR Green荧光定量PCR方法验证其准确性。结果流式荧光原位杂交法测定G3小鼠细胞端粒相对长度与C57BJ/6野生型小鼠相比为0.5345,荧光定量PCR测定端粒相对长度为0.5717,结果基本一致。结论流式细胞术与原位杂交方法结合起来检测细胞端粒的平均长度可靠易行,对单个核细胞端粒平均长度的检测有较高的实用性。

关键词：流式荧光原位杂交法端粒 PNA探针

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两种HSV-1及猴B病毒相关抗体测定方法的比较

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中国比较医学杂志 2010年第3期20卷 57-60,87页

作者：乔红伟佟巍蒋虹丛喆王卫魏强中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成... 详细信息

目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数,算出病毒悬液中每毫升所含蚀斑单位,即滴定出HSV-1的TC ID50。同时,用免疫荧光方法（IFA）对猴和人疱疹阳性血清进行滴定,得到其血清的效价。其次,用滴定出的病毒液分别与两种阳性血清体外中和后,接种到单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数。最后,计算出其蚀斑减少率。结果用1%甲基纤维素作覆盖层的蚀斑数量平均为10-5PFU,能形成115-116个/mL蚀斑,形状呈黍米大小的规则圆形,其蚀斑边缘清晰。IFA滴定的人HSV-1阳性血清与猴BV阳性血清的中和抗体均为1∶80。人HSV-1和猴BV两种阳性血清的空斑减少率均为100%。结论确定了利用1%甲基纤维素做为覆盖层可得到清晰可靠的蚀斑,由此方法检测到用人HSV-1可以代替猴B病毒,筛查猴B病毒抗体。且为将来进行药物筛选和中和实验中利用病毒空斑法建立方便、可靠的方法。

关键词：猕猴疱疹病毒1型人单纯疱疹病毒Ⅰ型空斑减少免疫荧光

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一种改进的非人灵长类神经功能缺损评价方法

一种改进的非人灵长类神经功能缺损评价方法

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第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）

作者：朱华卢珊冯铭李秦刘颖代小伟安沂华赵春华王任直秦川中国医学科学院&北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院基础医学研究所中国医学科学院北京协和医院中国医学科学院实验动物研究所motac合作实验室北京神经外科研究所

目的对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察,使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法成年食蟹猴12只,用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型,造模后1周将动物随机分为对照组、干细胞... 详细信息

目的对文献中的量表进行修改和细化后用于实验猴的神经功能动态量化观察,使其更适于灵长类脑卒中神经功能缺损的评价。方法成年食蟹猴12只,用自体股动脉抗凝血脑内立体注射的方法建立脑出血模型,造模后1周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组,分别在出血灶周围注射生理盐水、脊髓间充质干细胞5×10～6/只和1×10～6/只,造模6h,1d,3d,1w后及干细胞注射后1d,3d,1w,2 w,3w,4w在每天的固定时间使用文献中的表格和/或改进的表格进行评分,比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢神经功能缺损情况评价造模和干细胞治疗效果。结果造模手术前,所有动物的行为表现均正常,神经功能评分为0。造模手术后6小时,用修改前后的表格评分均为31分左右。但从术后3天开始出现评分上的差异。用修改后的表格对动物的神经功能进行评分结果显示干细胞注射后1周开始到动物被安乐时,剂量组与对照组之间的神经功能评分出现显著性差异(p<0.05)。高、低剂量组间未见显著性差异。结论改进后的表格更客观、定量更准确,可信度增高、可实施性增强,具有良好的临床相似性和可操作性。为建立标准化神经功能功能评价量表进行了有益尝试。

关键词：脑出血神经功能评分食蟹猴干细胞

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上肢精准测试系统在干细胞治疗食蟹猴脑缺血研究中的应用

上肢精准测试系统在干细胞治疗食蟹猴脑缺血研究中的应用

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第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）

作者：朱华刘颖李秦卢珊冯铭肖冲安沂华赵春华王任直秦川中国医学科学院&北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院实验动物研究所motac合作实验室中国医学科学院基础医学研究所中国医学科学院北京协和医院北京神经外科研究所

目的使用上肢精细测试系统对脊髓间充质干细胞治疗脑缺血的疗效进行行为学分析评价。方法成年食蟹猴18只,手术前2个月用上肢精准测试系统对动物进行训练并采集本底数据。采用光化学法制作局部脑缺血模型,造模后4周将动物随机分为对照组... 详细信息

目的使用上肢精细测试系统对脊髓间充质干细胞治疗脑缺血的疗效进行行为学分析评价。方法成年食蟹猴18只,手术前2个月用上肢精准测试系统对动物进行训练并采集本底数据。采用光化学法制作局部脑缺血模型,造模后4周将动物随机分为对照组、干细胞治疗高剂量组和低剂量组,分别在缺血灶周围注射生理盐水、脊髓间充质干细胞5×10/只和1×10/只,造模后1d、3d、1w、2w、3w、4w及干细胞注射后1d、3 d、1w、2w、3w、4w、5w、6w、8w采集行为学实验数据。比较造模前后和干细胞注射前后动物受损伤侧上肢抓取水果块的时间,结合神经功能评分评价造模和干细胞治疗效果。结果 18只动物手术后均出现与梗死部位对应的行为学症状。在术后采集数据的各个时间点损伤侧上肢行为学数据与手术前均存在极显著性差异(p<0.01)。神经功能评分术后24h最高,随后出现渐进性恢复。干细胞治疗后3d到治疗后第8周,模型组动物与高、低剂量组动物间精准上肢运动测试结果均存在显著性差异(p<0.05)神经功能评分在治疗2周后出现显著性差异(p<0.05)。高、低剂量组间未见显著性差异。结论上肢精准测试系统能客观准确的反应动物神经功能,在非人灵长类脑卒中动物模型建立和药效学评价方面有广泛应用前景

关键词：干细胞光化学法行为学非人灵长类

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绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化指标的研究

绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化指标的研究

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第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）

作者：贺晓玉何君徐艳峰秦超高虹中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标,为该品种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据。方法定期测定不同年龄段(4-6周龄,6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄)241只绿色荧光蛋白转基因(GFP)... 详细信息

目的测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标,为该品种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据。方法定期测定不同年龄段(4-6周龄,6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄)241只绿色荧光蛋白转基因(GFP)小鼠和对照组C57BL/6J小鼠的体重和摄食量,对上述两种动物定期取血,测定血生化及血液学指标,对动物进行大体解剖,计算主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺,性腺)的脏器系数并进行组织病理学检测。结果 1.体重和摄食量:4-5周龄的GFP小鼠,其体重和摄食量明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01);6-11周龄的GFP小鼠与对照组相比,没有统计学差异。2.血常规测定:6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其红细胞计数(RBC)明显低于对照组,6-8周龄的GFP小鼠,其血红蛋白(HGB)明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其白细胞计数(WBC)明显高于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。3.血生化测定:6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其尿酸(UA)值明显高于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其总蛋白(TP),白蛋白(ALB)明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。其它检测指标如肌酸激酶(CK),天冬氨酸转氨酶(AST),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等,GFP小鼠与对照组比较没有统计学差异。4.脏器系数:6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其胸腺的脏器系数明显低于对照组,差异具有极显著性(P<0.01);9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其肝脏脏器系数明显高于对照组,差异具有极显著性,(P<0.01)。5.病理检测:6-8周龄有部分GFP小鼠胸腺发育不良,其它受检脏器和其它年龄段动物未见明显病理改变。结论 1.绿色荧光蛋白转基因小鼠与对照组C57BL/6J小鼠在体重(4周龄)、摄食量(4-5周龄)、血常规(红细胞计数RBC、白细胞计数WBC、血红蛋白HGB)、血生化(尿酸UA、总蛋白TP、白蛋白ALB)、脏器系数(胸腺,肝脏)等指标上存在明显差异,但是其值均在在正常范围内。2.绿色荧光蛋白转基因小鼠在6-8周龄有部分小鼠胸腺发育不良。

关键词：绿色荧光蛋白转基因小鼠血液学血生化组织病理

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跑台运动在动物实验研究中的应用

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中国比较医学杂志 2010年第6期20卷 75-81页

作者：姚璐张缨张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京体育大学运动人体科学学院北京100084

跑台在实验动物研究中的应用越来越多,主要集中在建立运动模型以及探究运动对生理和病理的作用,以促进运动训练的科学化、竞技体育成绩的提高、运动疗法在疾病康复中合理有效的应用等,同时也是研究运动与代谢,运动与心脑血管病等的研究... 详细信息

跑台在实验动物研究中的应用越来越多,主要集中在建立运动模型以及探究运动对生理和病理的作用,以促进运动训练的科学化、竞技体育成绩的提高、运动疗法在疾病康复中合理有效的应用等,同时也是研究运动与代谢,运动与心脑血管病等的研究工具。本文对动物跑台的基本构造、使用方法和研究进展进行了分析和总结,为利用跑台进行研究提供一定的参考。

关键词：跑台运动模型心血管代谢骨

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中和抗体对促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A暴露水平的影响

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中国药理学通报 2009年第4期25卷 477-481页

作者：易辉孙云霞朱平彭霞顾静良刘存刚左从林中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 北京昭衍新药研究中心北京100176 中国人民解放军军事医学科学院11所吉林长春130062

目的研究恒河猴注射促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(GP38)后体内中和抗体的产生及其对药物暴露水平的影响。方法恒河猴24只随机分成4组(即对照组、低、中、高剂量组),每组6只,♀♂各半,分别给予生理盐水、50、100、300μ***-1GP38... 详细信息

目的研究恒河猴注射促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(GP38)后体内中和抗体的产生及其对药物暴露水平的影响。方法恒河猴24只随机分成4组(即对照组、低、中、高剂量组),每组6只,♀♂各半,分别给予生理盐水、50、100、300μ***-1GP38;采用ELISA法测定GP38及抗体滴度,中和抗体的测定采用IC50法间接测定。结果恒河猴给药2 wk后产生抗体,具有中和GP38活性的作用;GP38首次静脉注射50、100、300μ***-1时,毒代动力学参数Cmax分别为(866±88)、(1466±113)、(5436±733)μg.L-1,AUC0-t分别为(322±33)、(587±93)、(2201±307)μg.h.L-1,MRT分别为(0.27±0.02)、(0.31±0.02)、(0.40±0.08)h;相同剂量反复给药,第7次(d 14)给药后的毒代动力学参数Cmax分别为(352±136)、(589±372)、(1013±642)μg.L-1,AUC0-t分别为(139±55、322±222)、(962±743)μg.h.L-1,MRT分别为(0.26±0.03)、(0.39±0.08)、(0.68±0.45)h;试验动物毒性反应在给药1～3 wk较严重,之后毒性反应逐渐减弱。结论恒河猴反复静脉注射GP38,能够产生中和抗体,降低药物的体内暴露水平。

关键词：促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A 中和抗体暴露水平

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阿尔茨海默病中mir-34a作用机制的探讨

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中国比较医学杂志 2009年第10期19卷 5-10页

作者：王晓映刘鹏朱华徐艳峰马春梅代小伟刘颖秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的探讨mir-34a在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time RT-PCR对芯片结果进行验证;采用western blot的方法检测APPswe/PSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中bcl2... 详细信息

目的探讨mir-34a在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time RT-PCR对芯片结果进行验证;采用western blot的方法检测APPswe/PSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中bcl2蛋白的表达情况;通过构建mir-34a稳定转染细胞系和mir-34aknockdown研究mir-34a与bcl2之间的关系;通过构建bcl23’UTR-荧光素酶报告载体,验证bcl23’UTR序列中包含mir-34a的结合位点。结果mir-34a在模型小鼠中表达水平明显升高,并且其表达水平与bcl2蛋白水平呈负相关;通过体外实验,我们发现mir-34a过表达可以明显降低bcl2蛋白水平,反之,当我们抑制mir-34a的表达以后则可以增加bcl2蛋白水平;荧光素酶报告载体实验表明bcl23’UTR序列中包含mir-34a的结合位点。结论bcl2可能是mir-34a重要的功能靶点,mir-34a的过表达可能通过下调bcl2的蛋白水平,从而参与AD的发生。

关键词： microRNA mir-34a 阿尔茨海默病 bcl2 APPswe/PSΔE9小鼠

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纳米TiO_2影响细胞生长活性的尺寸效应

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毒理学杂志 2009年第6期23卷 442-445页

作者：孟金萍孙淑华张以河王艳蓉杨旭吕凤柱刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国地质大学材料科学与工程学院(北京)

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、... 详细信息

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、不同浓度纳米TiO2暴露不同组织来源的体外培养细胞,使用MTT方法检测细胞生长活性,计算细胞半致死量,并运用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果10 nm以上的TiO2粒子暴露能显著抑制肺来源(HPF)和神经来源的细胞(U251)生长活性,对皮肤(ESF)和膀胱组织(HB)来源细胞生长活性抑制较弱;5 nmTiO2颗粒对细胞生长活性基本无抑制作用,相反,还观察到对HPF、ESF、HB细胞有增强细胞生长的情况。结论在本试验条件下,纳米TiO2对细胞生长活性的影响有尺寸效应,纳米TiO2暴露所导致的生物学效应有细胞间差异,其对HPF、U251细胞影响较明显,对ESF、HB影响较弱。

关键词：纳米TiO2 生长活性噻唑蓝法

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小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用

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中国比较医学杂志 2009年第12期19卷 5-9页

作者：谢军芳佟巍侯丽波乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的制备小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）标准血清，建立ELISA检测方法，实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血... 详细信息

目的制备小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）标准血清，建立ELISA检测方法，实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定；TMEV感染BHK-21细胞，制备EHSA抗原，确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度，建立TMEVEHSA检测方法，进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清，以IFA、IEA测定血清效价分别为1：640和1：320，与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应；建立了ELISA检测方法，确立了各种试剂的最佳工作浓度，其中酶结合物最佳工作浓度为1：10000，抗原为2.5μg／mL，阳性参考血清为1：200；EHSA检测灵敏度为1：3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67％和5.7％，板间为4.39％和7.61％。稳定性实验相对偏差均小于20％。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清；建立的ELISA方法重复性、稳定性好，敏感性和特异性强，可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。

关键词：小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV) 标准血清 ELISA

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