检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2009年第12期19卷 1-4,I0001,I0002页

作者：李加美朱华刘颖李秦徐艳峰黄澜马春梅冯铭卢姗安沂华赵春华王任直秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医院北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京100005 北京武警总医院北京100039

目的探讨食蟹猴脑缺血模型在人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stemcells,hBMSCs)移植后IL-10的表达及其对脑缺血损伤的保护作用。方法食蟹猴8只,在脑定位仪定位下,应用光化学法构建食蟹猴脑缺血模型,并将其... 详细信息

目的探讨食蟹猴脑缺血模型在人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stemcells,hBMSCs)移植后IL-10的表达及其对脑缺血损伤的保护作用。方法食蟹猴8只,在脑定位仪定位下,应用光化学法构建食蟹猴脑缺血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型组,分别在脑缺血部位附近注射高、低密度的hBMSCs和生理盐水。手术后,通过影像学、神经功能评分及组织病理学观察对hBMSC的治疗效果进行评价。并应用原位细胞凋亡检测的方法观察脑缺血周围神经细胞的凋亡情况。应用免疫组织化学、RT-PCR以及real-time PCR法检测检测脑损伤周围IL-10的表达水平。结果与模型组相比,hBMSC治疗组损伤部位周围细胞凋亡明显减少,免疫组织化学显示IL-10阳性细胞的数量及染色强度均较模型组明显升高,IL-10在mRNA水平表达也明显升高。结论hBMSCs对食蟹猴脑缺血模型具有修复作用,其治疗机制可能与促进炎症抑制因子IL-10的表达有关。

关键词：人骨髓间充质干细胞脑缺血食蟹猴 IL-10

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多巴胺D5受体对心脏结构和功能的影响

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中华高血压杂志 2009年第5期17卷 421-425页

作者：杨志伟张艳荣董伟曾春雨张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 第三军医大学大坪医院野战外科研究所心内科心血管病研究室重庆400042

背景多巴胺通过D5受体对于机体的血压具有重要的调节作用。转人D5突变基因D5F173L小鼠的收缩压、舒张压和平均动脉血压均明显高于转人D5突变基因D5S390G及正常人D5基因(hD5WT)小鼠。目的应用超声心动仪观测人多巴胺D5受体突变基因F173 L... 详细信息

背景多巴胺通过D5受体对于机体的血压具有重要的调节作用。转人D5突变基因D5F173L小鼠的收缩压、舒张压和平均动脉血压均明显高于转人D5突变基因D5S390G及正常人D5基因(hD5WT)小鼠。目的应用超声心动仪观测人多巴胺D5受体突变基因F173 L(D5F173L),S390G(D5S390G)及正常人D5基因(hD5WT)的转基因小鼠心脏结构和功能的变化,探讨该基因对心脏疾病发病机制的影响。方法利用稳定传代的D5F173L,D5S390G及hD5WT基因转基因小鼠,通过超声心动仪观察各组转基因小鼠及阴性对照小鼠舒张期及收缩期左心室结构及功能的变化。结果超声心动仪结果显示自4～5月龄始,D5F173L转基因小鼠的舒张期与收缩期左心室容积与左心室内径均明显小于多巴胺hD5WT转基因小鼠及阴性对照小鼠(n=6,P<0.05),其舒张期与收缩期左心室前后壁厚度及左心室质量则明显高于多巴胺hD5WT转基因小鼠及阴性对照小鼠(n=6,P<0.05)。而D5S390G小鼠舒张期与收缩期左心室内体积、左心室内径、左心室前后壁厚度与多巴胺hD5WT转基因小鼠及阴性对照小鼠比较无显著差异。结论多巴胺D5转基因小鼠在血压升高的同时伴有心脏结构与功能的变化,提示多巴胺D5在心脏结构与功能形成过程中具有重要的调节作用。

关键词：多巴胺D5受体转基因动物原发性高血压心脏

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NGI重组DNA疫苗对转基因AD小鼠的治疗作用

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 13-16页

作者：高伟张玲玲徐艳峰马春梅黄澜刘亚莉朱华秦川肖志成中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 新加坡国立大学医学部解剖学系新加坡119074

目的研究NGI对转基因阿尔茨海默病小鼠的治疗作用。方法构建包含小鼠OMgp细胞外8LRP重复序列,人Tenascin-R的EGF-L结构域,以及人Nogo-A的氨基端和66个氨基酸细胞外域的重组质粒,肌肉注射AD小鼠,空载体组和空白对照组为对照组。水迷宫检... 详细信息

目的研究NGI对转基因阿尔茨海默病小鼠的治疗作用。方法构建包含小鼠OMgp细胞外8LRP重复序列,人Tenascin-R的EGF-L结构域,以及人Nogo-A的氨基端和66个氨基酸细胞外域的重组质粒,肌肉注射AD小鼠,空载体组和空白对照组为对照组。水迷宫检测小鼠行为学差别,免疫组化检测其病理差别。结果4.5月龄AD小鼠经过水迷宫隐蔽平台实验,2d后疫苗组小鼠潜伏期比对照组缩短30%(P<0.05)。探索实验显示3月龄疫苗组比空载体组和空白对照组小鼠穿越目标象限的次数分别增加48%和44%(P<0.05)。结论NGI重组DNA疫苗能够提高转基因AD小鼠的学习与记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病轴突生长抑制因子郎飞氏结

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三聚氰胺及三聚氰酸导致大鼠肾损伤的实验研究

三聚氰胺及三聚氰酸导致大鼠肾损伤的实验研究

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中国毒理学会第五次全国学术大会

作者：高虹马耀文何君代小伟董伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类比较医学重点实验室

目的观察不同剂量的三聚氰胺和三聚氰酸的混合物,连续28天给予幼年Wistar大鼠后,肾脏损伤及修复的情况。方法20日龄的清洁级Wistar大鼠48只,分为6组,分别给予不同剂量的三聚氰胺:三聚氰酸的混合物,300mg/kg:75 mg/kg,300mg/kg:150 mg/kg... 详细信息

目的观察不同剂量的三聚氰胺和三聚氰酸的混合物,连续28天给予幼年Wistar大鼠后,肾脏损伤及修复的情况。方法20日龄的清洁级Wistar大鼠48只,分为6组,分别给予不同剂量的三聚氰胺:三聚氰酸的混合物,300mg/kg:75 mg/kg,300mg/kg:150 mg/kg,,300mg/kg:300 mg/kg,, 400mg/kg:400 mg/kg,,500mg/kg:500 mg/kg及溶剂对照组,

关键词：三聚氰胺三聚氰酸大鼠结晶体

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系统表达HB-EGF转基因小鼠的建立

系统表达HB-EGF转基因小鼠的建立

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：张伟冯娟陈炜张小娟袁树民廉虹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立系统表达肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF与组织纤维化的关系。方法RT-PCR法克隆小鼠HB-EGF基因,将其插入Chickenβ-actin启动子下游,构建Chickenβ-actin-HB-EGF表达载体,利用... 详细信息

目的建立系统表达肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF与组织纤维化的关系。方法RT-PCR法克隆小鼠HB-EGF基因,将其插入Chickenβ-actin启动子下游,构建Chickenβ-actin-HB-EGF表达载体,利用显微注射的技术把表达载体注射到受精卵的雄原核中,建立HB-EGF转基因小鼠。利用特异引物PCR的方法鉴定转基因的基因型,采用Westem blotting方法鉴定HB-EGF基因在全身组织的表达。分别取HB-EGF转基因鼠与同窝阴性小鼠的肝、肾、肺及膀胱组织进行Massion染色。结果建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,Western blotting发现其HB-EGF在肝、肺、肾及膀胱的表达与同窝阴性对照小鼠相比明显增加。Massion染色结果表明转基因鼠肝、肺、肾及膀胱组织纤维化程度明显高于同窝阴性对照小鼠。结论成功建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,HB-EGF的过度表可显著加重组织纤维化程度。

关键词：肝素结合性表皮生长因子转基因小鼠纤维化

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神经皮肤黑变病中黑色素的来源初探

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中国比较医学杂志 2009年第5期19卷 20-22,I0007,I0008页

作者：陈云新 Erwan Bezard 李加美朱华徐艳峰代小伟黄澜刘亚莉马春梅贾春实肖冲刘颖邓巍李秦秦川中国医学科学院&北京协和医学院比较医学中心病理室北京100021 法国Bordeaux第二大学法国国家科学研究院Bordeaux33076 中国医学科学院&北京协和医学院实验动物研究所motac实验室北京100021

目的探讨食蟹猴神经皮肤黑变病(NCM)中黑色素的来源。方法收集北京协和医学院比较医学中心病理室食蟹猴神经皮肤黑变病的病理学标本一例,复习其病理切片并辅助免疫组化及电镜技术对黑色素的来源做进一步探讨。结果皮肤病理检查显示真皮... 详细信息

目的探讨食蟹猴神经皮肤黑变病(NCM)中黑色素的来源。方法收集北京协和医学院比较医学中心病理室食蟹猴神经皮肤黑变病的病理学标本一例,复习其病理切片并辅助免疫组化及电镜技术对黑色素的来源做进一步探讨。结果皮肤病理检查显示真皮内黑色素主要由黑色素细胞产生,黑色素细胞CD31免疫组化染色阴性。脑膜的组织病理学显示脑膜下黑色素主要由黑色素细胞产生,黑色素细胞CD31免疫组化染色阴性。脑实质的组织病理学显示其黑色素由黑色素细胞和血管内皮细胞产生,CD31免疫组化染色显示含有黑色素的血管内皮细胞呈阳性着色。电镜检查结果同样显示血管内皮细胞内可见黑色素小体沉积。结论我们在世界上首次揭示了食蟹猴NCM大脑中血管内皮细胞可产生黑色素,这给内皮细胞增加了一项新的功能。

关键词：神经皮肤黑变病血管内皮细胞黑色素

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24-脱氢胆固醇还原酶基因转基因小鼠血生化指标分析

24-脱氢胆固醇还原酶基因转基因小鼠血生化指标分析

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：全雄志董伟曹兴水张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴... 详细信息

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴定Dhcr24转基因小鼠的基因型,RT-PCR和Western Blot检测基因表达水平,血生化检测仪检测转基因小鼠血生化指标的改变。结果建立了2个不同表达水平的Dhcr24转基因小鼠品系,转入的Dhcr24基因在肝和脾组织中的表达高于内源的Dhcr24。血生化检测证实:乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)和血肌酐(SCr)较野生型小鼠明显降低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和碱性磷酸酶(ALP)较野生型小鼠明显增加,并且Dhcr24转基因雌鼠的体重比野生型小鼠明显降低,均有显著差异。但Dhcr24转基因雄鼠各项指标与野生型小鼠相比没有显著差异。结论成功建立了全身表达Dhcr24转基因小鼠,并证实Dhcr24基因对雌性小鼠的体重和血生化指标,包括LDH,TP,Alb,SCr,HDL-c and ALP具有明显的影响。

关键词： 24-脱氢胆固醇还原酶转基因小鼠血生化指标

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SW1990和Capan-2红色荧光标记胰腺癌移植肿瘤模型的建立和比较

SW1990和Capan-2红色荧光标记胰腺癌移植肿瘤模型的建立和比较

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：李小颖苏卫张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立稳定表达红色荧光蛋白基因的人胰腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长及抗肿瘤药物的药效评价建立一种新的肿瘤动物模型。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-RFP-NEO转染人胰腺癌细胞SW1990和Capan-2,经梯度浓度G41... 详细信息

目的建立稳定表达红色荧光蛋白基因的人胰腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长及抗肿瘤药物的药效评价建立一种新的肿瘤动物模型。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-RFP-NEO转染人胰腺癌细胞SW1990和Capan-2,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达红色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×10～6个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达RFP的两种不同的人胰腺癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长动态过程,并且SW1990肿瘤细胞的生长速度较Capan-2细胞快。结论用红色荧光蛋白标记的人胰腺癌细胞建立的裸鼠肿瘤模型为胰腺癌的研究和相关药物筛选提供了可进行荧光影像活体、动态分析的动物模型。

关键词：人胰腺癌细胞红色荧光蛋白活体荧光成像系统

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人宫颈癌细胞HeLa移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的比较

人宫颈癌细胞HeLa移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的比较

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：李小颖马春梅张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的人宫颈癌细胞系,建立移植瘤模型并比较移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的优缺点。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-GFP-NEO转染人宫颈癌细胞Hela,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿... 详细信息

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的人宫颈癌细胞系,建立移植瘤模型并比较移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的优缺点。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-GFP-NEO转染人宫颈癌细胞Hela,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×10～6个发光细胞使其成瘤,利用活体荧光成像系统和游标卡尺观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP的人宫颈癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤。活体荧光成像观察发现,1至3周随着肿瘤体积逐渐增大,平均荧光光子数逐渐增加;4周时随着肿瘤出现明显坏死,平均荧光光子数呈现下降趋势,而游标卡尺测量结果显示肿瘤在4至5周仍然不断的增大。结论绿色荧光蛋白能够在人宫颈癌细胞Hela中长期稳定表达,用绿色荧光蛋白标记的人宫颈癌细胞Hela建立的裸鼠肿瘤模型可以为人宫颈癌研究提供理想的实验材料,应用小动物活体成像系统能够客观定量评价活的肿瘤细胞在动物体内的生长情况,而不是肿瘤体积的变化。

关键词：人宫颈癌细胞裸小鼠活体荧光成像系统,游标卡尺

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实验动物病原菌的一体化蛋白芯片检测方法

实验动物病原菌的一体化蛋白芯片检测方法

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：林树柱张丽芳刘星马春梅高凯刘先菊李万波张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的制备实验动物小鼠需检测病原菌的多组特异性抗原,并制作成蛋白芯片,为建立一体化的实验动物病原微生物检测方法提供基础。方法通过western blot方法选择病原菌的特异性抗原,并利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶回收的方法制备选定的抗原,利用... 详细信息

目的制备实验动物小鼠需检测病原菌的多组特异性抗原,并制作成蛋白芯片,为建立一体化的实验动物病原微生物检测方法提供基础。方法通过western blot方法选择病原菌的特异性抗原,并利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶回收的方法制备选定的抗原,利用芯片点样仪将回收的抗原按照预先设定的矩阵点在氨基化处理过的玻片上,制备蛋白芯片,芯片先与小鼠阳性血清杂交,再与辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG杂交,DAB显色,通过扫描及软件分析,获得检测结果。结果通过对比western blot结果,伤寒沙门氏菌、嗜肺巴氏杆菌、假结核耶尔森菌和念珠状链杆菌每种病原菌选定了五组特异性较好的抗原,凝胶回收制备了选定的所有抗原,制作了蛋白芯片,分别与免疫伤寒沙门氏菌、嗜肺巴氏杆菌、假结核耶尔森菌和念珠状链杆的小鼠阳性血清杂交后,扫描结果显示,芯片上对应抗原均显示了很强的阳性信号,并具有良好的特异性。结论制备了可以同时检测几种细菌的蛋白芯片,为建立一体化的实验动物病原微生物检测方法提供了基础。

关键词：实验动物病原菌抗原蛋白芯片一体化检测

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