检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2022年第6期42卷 927-932页

作者：路亚岚周澧韩云林王克维秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的探索冈田酸(OA)诱导神经元微管蛋白相关蛋白(Tau)异常磷酸化对人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)损伤的影响。方法将OA按照不同浓度(20和40 nmol/L)和/或时间(0、12、24、48和72 h)处理SH-SY5Y细胞;光学显微镜下观察细胞形态学;透射电... 详细信息

目的探索冈田酸(OA)诱导神经元微管蛋白相关蛋白(Tau)异常磷酸化对人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)损伤的影响。方法将OA按照不同浓度(20和40 nmol/L)和/或时间(0、12、24、48和72 h)处理SH-SY5Y细胞;光学显微镜下观察细胞形态学;透射电子显微镜观察细胞超微结构;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测p-Tau和caspase3蛋白的表达;RT-qPCR检测细胞凋亡抑制家族蛋白(IAPs)的mRNA表达。结果与对照组相比,OA显著增加SH-SY5Y细胞Tau蛋白磷酸化(P<0.001),促进细胞损伤凋亡(P<0.001),损伤线粒体结构,同时也可显著上调IAPs表达(P<0.05)。结论OA诱导的SH-SY5Y细胞的Tau蛋白异常磷酸化可导致细胞损伤凋亡,抑制内源凋亡通路或上调IAPs可能作为阿尔茨海默病(AD)防治的重要靶标。

关键词：阿尔茨海默病冈田酸神经元微管蛋白相关蛋白神经原纤维缠结

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IVC换笼标准操作程序与小鼠病毒病原的传播风险

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中国比较医学杂志 2020年第10期30卷 107-109页

作者：佟巍郭智刘子洋潘思丹高虹向志光中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的研究独立通风笼具换笼标准操作程序与实验动物负压屏障设施内使用IVC(individual ventilated cage,IVC)设备饲养小鼠的病毒感染风险。方法选择小鼠易感的小鼠肝炎病毒(MHV)A59株感染6周龄BALB/c雄性小鼠,按照IVC换笼标准操作程序进... 详细信息

目的研究独立通风笼具换笼标准操作程序与实验动物负压屏障设施内使用IVC(individual ventilated cage,IVC)设备饲养小鼠的病毒感染风险。方法选择小鼠易感的小鼠肝炎病毒(MHV)A59株感染6周龄BALB/c雄性小鼠,按照IVC换笼标准操作程序进行换笼操作;使用IFA和ELISA血清学方法以及针对MHV的核酸检测方法测定同一笼架具相邻笼盒、同一IVC系统不同笼架具的不同位置、以及IVC系统外负压屏障设施内哨兵动物的MHV感染情况。结果接种病毒小鼠在感染6 d后出现临床症状,粪便中可检出MHV病原;动物感染3周后可检出MHV抗体阳性;其他监测组在5周实验终点均无MHV阳性检出。结论IVC换笼标准操作程序可指导IVC换笼操作,用以控制病毒类病原对小鼠的感染风险。

关键词： IVC 换笼标准操作程序 MHV 小鼠

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麦哲伦企鹅曲霉菌病的组织病理学观察和病原分离鉴定

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中国兽医学报 2021年第10期41卷 2003-2008,2014页

作者：宋志琦孙艳明苏磊屈亚锦赵文杰韩云林秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 北京海洋馆北京100081

对病死的麦哲伦企鹅进行剖检、大体病变检查、组织病理学检验以及病原的分离与鉴定,为企鹅的临床诊断和饲养管理提供数据支持。采集死亡麦哲伦企鹅的各脏器,应用石蜡切片及HE染色、六胺银染色和PAS染色,结合组织切片扫描系统,对各脏器... 详细信息

对病死的麦哲伦企鹅进行剖检、大体病变检查、组织病理学检验以及病原的分离与鉴定,为企鹅的临床诊断和饲养管理提供数据支持。采集死亡麦哲伦企鹅的各脏器,应用石蜡切片及HE染色、六胺银染色和PAS染色,结合组织切片扫描系统,对各脏器进行组织病理学观察并进一步对病料进行病原分离和鉴定。通过大体病变观察,可见企鹅胸腔内部沿着气管两侧、肺脏和气囊周围散布大量浅黄色粟粒至杏核大小结节;肺脏呈现散在的大小不一的典型特异性肉芽肿结构,病变累及消化系统等其他脏器。肉芽肿结节中心为坏死区域,经六胺银染色和PAS染色,可在坏死区域分别观察到深褐色和紫红色的真菌菌丝样结构。从企鹅肺部病灶共分离12株真菌,对分离菌株的ITS序列进行测序并进行BLAST比对鉴定,基于ITS序列构建系统发育树,结合形态学特征,将这些菌株分别鉴定为6个种,其中烟曲霉菌分离频率最高,占分离菌株的33%;经高通量测序,获得270个操作分类单元,其中烟曲霉菌的相对丰度为91%,因此可进一步确定该病灶主要由曲霉菌引起。

关键词：麦哲伦企鹅曲霉菌病组织病理学分离鉴定

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国家级病原微生物菌(毒)种保藏中心的建设初探

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中国比较医学杂志 2020年第9期30卷 80-84页

作者：刘梅轩林凯丽张丽芳佟巍高虹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

病原微生物菌(毒)种作为国家重要的战略资源,已成为国际生物安全秩序调整期世界发达经济体大国博弈与共存的重要筹码,而我国早期建设的保藏机构已无法满足当前形势需求。中国医学科学院医学实验动物研究所在国家卫生健康委员会的统一规... 详细信息

病原微生物菌(毒)种作为国家重要的战略资源,已成为国际生物安全秩序调整期世界发达经济体大国博弈与共存的重要筹码,而我国早期建设的保藏机构已无法满足当前形势需求。中国医学科学院医学实验动物研究所在国家卫生健康委员会的统一规划下建立了一家国家级菌(毒)种保藏中心,为我国微生物资源的管理及开发利用提供了有力保障。本文将从硬件设施、管理制度、人员队伍等方面阐述国家级菌(毒)种保藏中心的建设规划及建设实施过程,为我国规范化、信息化的菌(毒)种保藏机构的建设提供参考。

关键词：病原微生物菌(毒)种保藏中心

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基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建立及应用

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中国比较医学杂志 2021年第9期31卷 90-97页

作者：卢天宇高虹杨博超于佳楠徐亚新王若琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用Taq Man探针双重dd PCR方法,分别以甘油醛-3-... 详细信息

目的利用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用Taq Man探针双重dd PCR方法,分别以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)为内参基因,确定对PERV拷贝数检测反应最适合退火温度和反应循环数。另外,通过对浓度梯度稀释的标准品质粒和猪细胞基因组进行检测,以确定最适模板浓度。采用dd PCR和q PCR两种方法测定来自猪源细胞系和巴马小型猪组织中PERV的拷贝数,比较两种检测方法的稳定性。结果基于dd PCR技术检测PERV拷贝数的最适退火温度为59.9℃,最佳反应循环数为50;模板基因组的最适浓度在1.25~7.5 ng;检测同一样品来源基因组中PERV的拷贝数的变异系数在0.44%~8.29%。结论本研究建立了基于dd PCR技术的PERV拷贝数的检测方法并系统的探索了最佳实验条件,与传统的q PCR相比,该方法具有更高的准确性和可重复性,为异种移植研究中供体动物基因组PERV拷贝数的测定提供了灵敏的方法和可靠依据。

关键词：微滴式数字PCR 猪内源逆转录病毒拷贝数绝对定量

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基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建立及应用

基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建...

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：卢天宇高虹杨博超于佳楠徐亚新王若琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFR... 详细信息

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFRC为内参基因,确定对PERV拷贝数检测反应最适合退火温度和反应循环数。另外,通过对浓度梯度稀释的标准品质粒和猪细胞基因组进行检测,以确定最适模板浓度。采用ddPCR和qPCR两种方法测定来自猪源细胞系和巴马小型猪组织中PERV的拷贝数,比较两种检测方法的稳定性。结果基于ddPCR技术检测PERV拷贝数的最适退火温度为59.9℃,最佳反应循环数为50;模板基因组的最适浓度在1.25-7.5ng;检测同一样品来源基因组中PERV的拷贝数的变异系数在0.44%至8.29%之间。结论本研究建立了基于ddPCR技术的PERV拷贝数的检测方法并系统的探索了最佳实验条件,与传统的qPCR相比,该方法具有更高的准确性和可重复性,为异种移植研究中供体动物基因组PERV拷贝数的测定提供了灵敏的方法和可靠依据。

关键词：微滴式数字PCR 猪内源逆转录病毒拷贝数绝对定量

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醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐诱导动脉瘤发生发展的作用及潜在机制

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中国比较医学杂志 2021年第1期31卷 27-34页

作者：吴献贤刘星张娜李雨涵杜星辰杨志伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 宁夏医科大学银川750004

目的探讨醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐在不同时间点对腹主动脉瘤的诱导作用,及潜在分子机制。方法将10月龄C57BL/6J小鼠分为两组:高盐组(HS),DOCA加高盐组(DOCA+HS)。两组小鼠在接受不同的处理一周,两周,三周时分别超声并取材,观察腹主... 详细信息

目的探讨醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐在不同时间点对腹主动脉瘤的诱导作用,及潜在分子机制。方法将10月龄C57BL/6J小鼠分为两组:高盐组(HS),DOCA加高盐组(DOCA+HS)。两组小鼠在接受不同的处理一周,两周,三周时分别超声并取材,观察腹主动脉的扩张情况和动脉瘤的形成情况;HE染色,Masson染色和弹力纤维染色检测腹主动脉病理状态、胶原沉积和弹力纤维断裂情况;免疫组织化学法检测平滑肌细胞降解,腹主动脉炎症细胞浸润;RT-PCR检测炎症因子、抗炎因子的表达;转录组测序(RNA-Sequence)分析比较两组小鼠处理三周时动脉组织差异性表达基因及差异表达基因富集的信号通路。结果与单纯高盐饮水组相比,DOCA加高盐处理一周无法诱导小鼠腹主动脉瘤的形成,处理两周能显著诱导动脉瘤的发生,动脉瘤发生率为44%,处理三周时动脉瘤发生率为65%;DOCA加高盐处理两周和三周后,腹主动脉处胶原沉积增多,出现弹力纤维断裂,平滑肌细胞降解;炎症细胞浸润明显增多,浸润的炎症细胞以巨噬细胞和T细胞为主;炎症因子表达明显增加,抗炎因子表达下降;进一步的转录组测序结果表明两组小鼠在处理三周后差异表达的基因主要富集在免疫系统和代谢通路中,并且发现介导白细胞粘附的关键分子PSGL-1在DOCA加高盐处理三周后表达明显升高。结论 DOCA加高盐处理两周即可诱导小鼠腹主动脉瘤的发生,PSGL-1及其介导的炎症反应可能在其中发挥着重要作用。

关键词：动脉瘤醋酸脱氧皮质酮高盐炎症反应

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干细胞治疗2型糖尿病及其并发症的研究进展

干细胞治疗2型糖尿病及其并发症的研究进展

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：李欣悦李倩石桂英黄艺滢雷雪裴白琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京师范大学生命科学学院

2型糖尿病是我国高发的慢性疾病,发生机制为机体对胰岛素抵抗伴随胰岛β细胞功能缺陷引起的胰岛素相对缺乏。2型糖尿病为进展性疾病,随自然病程发展对外源性血糖控制的依赖增大、导致多组织器官病变,引起多种继发性并发症发生。传统治... 详细信息

2型糖尿病是我国高发的慢性疾病,发生机制为机体对胰岛素抵抗伴随胰岛β细胞功能缺陷引起的胰岛素相对缺乏。2型糖尿病为进展性疾病,随自然病程发展对外源性血糖控制的依赖增大、导致多组织器官病变,引起多种继发性并发症发生。传统治疗对药物依赖性大,且口服药物和外源性胰岛素只能暂时维持血糖或暂时改善胰岛素敏感性,无法根本治愈。随着干细胞研究的深入,干细胞的自我更新和定向分化潜能为修复受损组织恢复胰岛功能进而治疗糖尿病开辟了新思路。本文从不同类型干细胞治疗2型糖尿病的方法、优缺点及研究进展进行综述,希望对研究糖尿病和糖尿病并发症致病机理、应用干细胞移植技术恢复胰岛素独立性以及建立干细胞安全性和有效性的评价提供一定参考。

关键词： 2型糖尿病细胞移植干细胞治疗

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小鼠肺间充质干细胞的分离、培养和鉴定

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中国比较医学杂志 2021年第8期31卷 16-20页

作者：石桂英黄艺滢雷雪裴路亚岚白琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立稳定的小鼠肺间充质干细胞分离、培养、鉴定技术,利用小鼠肺间充质干细胞研究肺组织修复和再生机制。方法无菌分离小鼠肺,采用胶原酶消化和组织贴壁法分离培养肺间充质干细胞,观察细胞形态和生长特性,流式分析细胞表面标记,进... 详细信息

目的建立稳定的小鼠肺间充质干细胞分离、培养、鉴定技术,利用小鼠肺间充质干细胞研究肺组织修复和再生机制。方法无菌分离小鼠肺,采用胶原酶消化和组织贴壁法分离培养肺间充质干细胞,观察细胞形态和生长特性,流式分析细胞表面标记,进行体外成脂、成骨诱导分化。结果两种方法都成功分离培养了肺间充质干细胞,流式分析显示Sca-1、CD90、CD29、CDCD44均为高表达,CD31、CD45均为低表达。体外诱导后,肺间充质干细胞可以分化成脂肪细胞和成骨细胞。结论本研究利用两种方法分离培养小鼠肺间充质干细胞,两种分离方法获得的细胞均具有间充质干细胞类似的表面标记物,具有成脂、成骨分化能力。

关键词：肺间充质干细胞流式分析诱导分化

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评价血流作为实验性突触核蛋白病的传播途径

评价血流作为实验性突触核蛋白病的传播途径

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：余煊 PERSILLET Marine 张玲张钰孙秀萍李祥磊高苒 BREGER Ludivine S. DOVERO Sandra PORRAS Gregory DEHAY Benjamin BEZARD Erwan 秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心波尔多大学法国国家科学研究中心神经退行性疾病研究所

目的在帕金森病中,有假说称突触核蛋白病可以通过迷走神经,从肠神经系统扩散到中枢神经系统。然而,最近在非人类灵长类动物实验中收集的证据挑战了这一假说。那么血液流动作为病理性α-syn远距离传播途径的假设是否能成立,突触核蛋白病... 详细信息

目的在帕金森病中,有假说称突触核蛋白病可以通过迷走神经,从肠神经系统扩散到中枢神经系统。然而,最近在非人类灵长类动物实验中收集的证据挑战了这一假说。那么血液流动作为病理性α-syn远距离传播途径的假设是否能成立,突触核蛋白病的个体间传播是否可能通过血液接触发生。方法在这项研究中,我们使用联体共生的方法连接野生型和GFP转基因C57BL/6J小鼠的循环系统,其中一只共生小鼠黑质内立体定向注射患者来源的α-syn聚集体。在立体定位注射和异种共生手术四个月后安乐死采集血液,测定α-syn水平。小鼠大脑处理后评估黑质纹状体变性和α-syn病理情况。结果共生小鼠能够有效的分享他们的血液循环。接受α-syn聚集体注射的小鼠表现出多巴胺神经元的丢失和黑质S129磷酸化的α-syn免疫反应性增加,但它们的联体共生的血液共享伙伴并没有显示出任何S129磷酸化α-syn水平改变。结论我们的研究表明,在患者来源的α-syn聚集物注射小鼠模型中,在选定的4个月的时间框架内,帕金森病是不能通过血流"传播"的。

关键词：路易小体 α-突触核蛋白联体共生病理学动物模型

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