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藏药镰形棘豆总黄酮对SMMC-7721肝癌细胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白表达的影响

中国药学杂志 2013年第24期48卷 2113-2116页

作者：杨光明燕珂顾青李俊松潘扬蔡宝昌南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023 南京中医药大学药用菌与中药生物技术研究所南京210023

目的研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法镰形棘豆总黄酮不同剂量作用于SMMC-7721细胞后,Annexin V-FITC/PI双染法检测SMMC-7721细胞的凋亡;蛋白质印迹法检测对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的... 详细信息

目的研究藏药镰形棘豆对SMMC-7721人肝癌细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法镰形棘豆总黄酮不同剂量作用于SMMC-7721细胞后,Annexin V-FITC/PI双染法检测SMMC-7721细胞的凋亡;蛋白质印迹法检测对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果镰形棘豆总黄酮作用SMMC-7721细胞后可观察到凋亡细胞的比例明显升高;Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达与对照组相比虽有所降低,但Bcl-2/Bax比值显著减小。结论镰形棘豆总黄酮可明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其分子机制可能与下调Bcl-2基因表达和降低Bcl-2/Bax的比值有关。

关键词：镰形棘豆 SMMC-7721 凋亡蛋白表达抗肿瘤

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马钱子碱血药浓度测定方法的优化与应用

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中国中药杂志 2013年第7期38卷 1075-1078页

作者：王冬月陈军蔡宝昌南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心国家中医药管理局中药炮制标准重点研究实验室江苏南京210046 南京海昌中药集团江苏南京210061

借助考察萃取溶剂、萃取次数、萃取剂体积对马钱子碱提取回收率的影响,马钱子碱血药浓度的HPLC测定方法得到了优化。筛选得到最优的血浆处理方法,即用氨水碱化后,用4mL的萃取剂正己烷-二氯甲烷-异丙醇65:30:5萃取2次。将马钱子碱血药浓... 详细信息

借助考察萃取溶剂、萃取次数、萃取剂体积对马钱子碱提取回收率的影响,马钱子碱血药浓度的HPLC测定方法得到了优化。筛选得到最优的血浆处理方法,即用氨水碱化后,用4mL的萃取剂正己烷-二氯甲烷-异丙醇65:30:5萃取2次。将马钱子碱血药浓度的测定方法应用于药动学研究,比较了静脉注射5mg·kg-1与经皮给药40mg·kg-1马钱子碱溶液后的药动学性质,结果得到马钱子碱静脉注射和经皮给药后的药动学均符合二室模型,经皮给药后的绝对生物利用度为18.72%。可见优化后的血药浓度分析方法可以满足马钱子碱药动学研究的需要。

关键词：马钱子碱 HPLC 药动学

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半夏毒针晶的致炎效应与巨噬细胞的相关性研究

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中国中药杂志 2013年第7期38卷 1041-1045页

作者：赵腾斐张倩张雯吴皓郁红礼王慧珠南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210046 南京中医药大学国家科技部规范化中药药理实验室江苏南京210046

目的:研究半夏毒针晶刺激性毒性产生的机制。方法:采用小鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以培养上清液中TNF-α,IL-1β和IL-6为指标,研究半夏毒针晶致炎的量-毒,时-毒曲线;采用扫描电镜法观察经半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态学的改变;... 详细信息

目的:研究半夏毒针晶刺激性毒性产生的机制。方法:采用小鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以培养上清液中TNF-α,IL-1β和IL-6为指标,研究半夏毒针晶致炎的量-毒,时-毒曲线;采用扫描电镜法观察经半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态学的改变;使用巨噬细胞-中性粒细胞共培养迁移模型,考察半夏毒针晶刺激巨噬细胞对中性粒细胞迁移的影响。结果:半夏毒针晶刺激巨噬细胞,可引起TNF-α,IL-1β和IL-6含量显著升高,且具有剂量和时间依赖性;扫描电镜显示,半夏毒针晶可被巨噬细胞吞噬,细胞膜表面皱褶明显,伪足数量增多,细胞膜完整性下降,并能显著诱导中性粒细胞迁移。结论:巨噬细胞在毒针晶的致炎过程中起关键的介导作用。半夏毒针晶的毒性机制是毒针晶刺入组织,激活组织中的驻留巨噬细胞,引起吞噬、促炎细胞因子释放、中性粒细胞大量迁移,最终导致强烈的急性炎症反应。

关键词：半夏毒针晶巨噬细胞炎症因子扫描电镜中性粒细胞趋化

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盐制对补骨脂中主要化学成分的影响

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中成药 2013年第11期35卷 2470-2474页

作者：颜翠萍吴育翁泽斌陈志鹏蔡宝昌李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的建立HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔酮和补骨脂酚等13种... 详细信息

目的建立HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔酮和补骨脂酚等13种化学成分的方法,比较补骨脂盐制前后主要化学成分量的变化。方法按照《中国药典》规定的盐制法对来源不同的10批补骨脂生品进行炮制,采用HPLC法测定补骨脂中13种指标性成分,在此基础上,对补骨脂主要成分进行归类,分析了补骨脂盐制前后各类成分的变化规律。结果补骨脂盐制后香豆素成分含有量变化不大,而黄酮类成分和补骨脂酚的量略有上升。结论补骨脂的盐制机制还需结合药效学试验进行深入研究。

关键词：补骨脂香豆素黄酮单萜酚 HPLC 盐制

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马钱子生物碱类成分经口给药后在大鼠体内的药动学研究

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中草药 2013年第8期44卷 1008-1012页

作者：屈艳格陈军王冬月蔡宝昌南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029 国家中医药管理局中药炮制标准重点研究实验室江苏南京210029 南京海昌中药集团江苏南京210061

目的比较马钱子生物碱类成分(马钱子碱、马钱子总生物碱和马钱子优化总生物碱)ig给药后在大鼠体内的药动学过程。方法大鼠ig给药后取血,以石杉碱甲为内标,HPLC法测定大鼠血浆样品中马钱子碱,DAS 1.0程序拟合房室模型并计算药动学参数。... 详细信息

目的比较马钱子生物碱类成分(马钱子碱、马钱子总生物碱和马钱子优化总生物碱)ig给药后在大鼠体内的药动学过程。方法大鼠ig给药后取血,以石杉碱甲为内标,HPLC法测定大鼠血浆样品中马钱子碱,DAS 1.0程序拟合房室模型并计算药动学参数。结果马钱子生物碱类成分ig给药后马钱子碱的药动学行为均符合二室模型;与马钱子碱单体给药相比,马钱子总生物碱与马钱子优化总生物碱能显著增加马钱子碱的体内吸收,其他药动学参数无显著差异。结论 ig给以马钱子生物碱类成分后,马钱子其他生物碱类成分对马钱子碱有吸收促进作用。

关键词：马钱子马钱子碱马钱子总生物碱马钱子优化总生物碱药动学

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藤黄炮制品对大鼠肠道组织病理学研究

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中国实验方剂学杂志 2013年第5期19卷 279-282页

作者：窦娟文红梅郁红礼柴川吴皓卞慧敏南京中医药大学药学院南京210029 江苏省中药炮制重点实验室南京210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210029

目的:观察藤黄各制剂单次大剂量ig给药后大鼠消化系统病变情况,并比较藤黄炮制前后对大鼠肠上皮细胞株IEC-6毒性差异,探讨藤黄炮制减毒机制。方法:单次ig给予藤黄生品(200 ***-1)、清水制藤黄(200 ***-1)和藤黄酸(50 ***-1),观察给药后... 详细信息

目的:观察藤黄各制剂单次大剂量ig给药后大鼠消化系统病变情况,并比较藤黄炮制前后对大鼠肠上皮细胞株IEC-6毒性差异,探讨藤黄炮制减毒机制。方法:单次ig给予藤黄生品(200 ***-1)、清水制藤黄(200 ***-1)和藤黄酸(50 ***-1),观察给药后大鼠的活动情况,于24 h后处死并采集大鼠心、肝、肾、食管、胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠等主要脏器,观察大鼠口服给药后消化系统病变情况。以大鼠肠上皮细胞株IEC-6为研究对象,采用MTT法检测藤黄炮制前后对IEC-6细胞增殖的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态。结果:病理切片结果显示,给药后大鼠的肝脏、肾脏、心脏、胃和食道均未见明显的毒性反应;但十二指肠、空肠有轻度至重度的毒性作用,表现为肠绒毛水肿。3种藤黄制剂均会引起给药大鼠肠道的毒性作用,生品藤黄所致的十二指肠和空肠水肿程度最严重,其次是清水制藤黄和藤黄酸。细胞的毒性结果显示,与空白组相比,藤黄生品及炮制品均可明显降低IEC-6细胞的活性(P<0.01)与形态,且呈一定的剂量相关性;与藤黄生品组相比,藤黄3种炮制品组对IEC-6细胞的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势均显著性降低。结论:藤黄单次大剂量ig给药后大鼠的病理变化及IEC-6细胞的毒性作用结果表明,藤黄经炮制后毒性显著降低。

关键词：藤黄炮制肠黏膜上皮细胞株IEC-6 病理变化减毒

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藤黄不同炮制品对小鼠腹腔炎症的影响

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中国药房 2013年第35期24卷 3268-3271页

作者：窦娟文红梅郁红礼宫乐刘新吴皓南京中医药大学药学院南京210029 江苏省中药炮制重点实验室南京210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210029

目的:研究藤黄不同炮制品对小鼠腹腔炎症的影响。方法:小鼠腹腔分别给予藤黄及其炮制品,观察不同剂量(5、10、15、20、25、30 mg/kg)、不同时间(1、2、3、4 h)下,藤黄生品、藤黄高压蒸制品、藤黄豆腐制品、藤黄清水制品对小鼠腹腔渗出... 详细信息

目的:研究藤黄不同炮制品对小鼠腹腔炎症的影响。方法:小鼠腹腔分别给予藤黄及其炮制品,观察不同剂量(5、10、15、20、25、30 mg/kg)、不同时间(1、2、3、4 h)下,藤黄生品、藤黄高压蒸制品、藤黄豆腐制品、藤黄清水制品对小鼠腹腔渗出液中蛋白含量和炎症介质前列腺素(PG)E2含量的影响。结果:藤黄生品及各炮制品均能导致小鼠腹腔的炎症反应,当藤黄生品给药剂量为25 mg/kg、给药3 h时,其所致炎症反应最强;藤黄经炮制后,其致炎作用有所下降,致炎作用顺序为:藤黄生品>藤黄豆腐制品>藤黄清水制品>藤黄高压蒸制品。结论:藤黄具有致炎作用,但经炮制能降低藤黄的致炎作用。

关键词：藤黄炮制致炎作用毒性

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藏药镰形棘豆总生物碱提取纯化的研究

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西北药学杂志 2013年第6期28卷 551-555页

作者：詹珺雁燕珂杨光明王栋蔡宝昌连云港市第一人民医院连云港222002 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023

目的研究藏药镰形棘豆总生物碱的提取纯化的最佳工艺。方法选择物料比、乙醇体积分数、醋酸体积分数和提取温度作为实验的考察因素,以酸性染料比色法测定吸光度为指标,采用正交实验优选镰形棘豆总生物碱的提取纯化最佳工艺。结果最优工... 详细信息

目的研究藏药镰形棘豆总生物碱的提取纯化的最佳工艺。方法选择物料比、乙醇体积分数、醋酸体积分数和提取温度作为实验的考察因素,以酸性染料比色法测定吸光度为指标,采用正交实验优选镰形棘豆总生物碱的提取纯化最佳工艺。结果最优工艺条件为以5mL·L-1醋酸的体积分数40%乙醇溶液为溶剂,物料比为1∶20,60℃超声提取2次,经732型阳离子交换树脂进行吸附,再以10mL·L-1 NH3·H2O的体积分数60%乙醇溶液超声提取树脂中的生物碱。结论优选的工艺稳定可行,能较好地提取镰形棘豆中的总生物碱,为今后从镰形棘豆中获得总生物碱提供了科学依据。

关键词：镰形棘豆总生物碱提取纯化

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半夏醇制减毒新方法研究(Ⅰ)——新方法及新工艺研究探讨

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中国中药杂志 2012年第6期37卷 790-795页

作者：陶文婷郁红礼吴皓朱法根邱韵萦赵腾斐南京中医药大学药学院江苏南京210029 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029

目的:探索半夏醇制减毒新方法和最佳工艺参数。方法:以乙醇润制半夏减毒,采用正交试验设计考察乙醇量、润制时间、乙醇浓度、润制温度4个影响因素,以总游离有机酸含量为化学指标,以大鼠腹腔渗出液中PGE2含量为毒理指标,综合评分,以家兔... 详细信息

目的:探索半夏醇制减毒新方法和最佳工艺参数。方法:以乙醇润制半夏减毒,采用正交试验设计考察乙醇量、润制时间、乙醇浓度、润制温度4个影响因素,以总游离有机酸含量为化学指标,以大鼠腹腔渗出液中PGE2含量为毒理指标,综合评分,以家兔眼结膜刺激性试验得分作为减毒的直观验证,优选半夏醇制减毒的最佳工艺,并以药效验证考察醇制工艺的合理性。结果:半夏最佳醇制工艺为生半夏在60℃,用0.5倍量的75%乙醇润制4 d,干燥后即得。半夏醇制后保留了半夏的镇咳、祛痰、抗炎作用。结论:该方法简单、可行,可作为半夏减毒存效新方法的研究方向。

关键词：半夏醇制减毒存效正交试验

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半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性研究

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中国中药杂志 2012年第7期37卷 1007-1011页

作者：朱法根郁红礼吴皓史闰均陶文婷邱韵萦南京中医药大学药学院江苏南京210029 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029

目的:研究半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏产生毒性的机制。方法:采用大鼠腹腔炎症模型,以腹腔渗出液中PGE2含量为指标,研究半夏凝集素致炎作用的量-毒、时-毒曲线;采用家兔眼结膜刺激模型,以眼结膜的病理切片观察半... 详细信息

目的:研究半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏产生毒性的机制。方法:采用大鼠腹腔炎症模型,以腹腔渗出液中PGE2含量为指标,研究半夏凝集素致炎作用的量-毒、时-毒曲线;采用家兔眼结膜刺激模型,以眼结膜的病理切片观察半夏凝集素与半夏毒针晶刺激性的相关性。结果:半夏凝集素可引起大鼠腹腔渗出液中PGE2、蛋白含量显著提高,呈剂量依赖性;半夏凝集素可显著加重半夏毒针晶对家兔眼结膜的刺激性,且随着半夏凝集浓度的升高,刺激性显著增强,但单给药半夏凝集素对家兔眼结膜无刺激性。结论:半夏凝集素蛋白具强烈的致炎作用。半夏产生强烈炎症刺激的机制是半夏刺入机体,凝集素蛋白随针晶进入机体组织,诱导炎症反应发生而产生刺激性。

关键词：半夏半夏毒针晶半夏凝集素蛋白致炎作用毒性机制

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